Avances en Ciencias Veterinarias, Vol. 10, No.

1 (1995)
Introduccin
La mastitis subclnica es, sin duda, el principal factor de prdidas de produccin lechera, que se traduce
en menor rentabilidad para el productor. En Chile, a pesar de no existir estadsticas exactas, se han
estimado las prdidas por menor produccin en 150-200 millones de litros y 1.746.183 kg de materia
grasa por ao (Moraga, 1988). Las mastitis clnicas de curso agudo se presentan en un 3 a 5% del total;
en cambio, las mastitis subclnicas fluctan entre 60% a 70% (Zurita, 1982). A diferencia de la mastitis
clnica de fcil diagnstico en la mayora de los casos (Blood y col., 1988), la mastitis subclnica requiere
mtodos indirectos, siendo el ms difundido en nuestro pas el California Mastitis Test (CMT) (Pedraza,
1988). Numerosos son los estudios que han determinado la relacin entre el CMT y el recuento objetivo
de clulas somticas (Gallo, 1977), siendo el ms preciso la microscopa fluorescente (Pedraza, 1988) y
conocido como Fossomatic.
En relacin a la etiologa de las mastitis subclnicas grados 2 y 3, segn la prueba CMT y clnicas
diagnosticadas en nuestro pas, el microorganismo ms frecuentemente aislado es Staphylococcus
aureus seguido por Streptococcus agalactiae (Gallo, 1977; Pedraza y col., 1986), existiendo otros que se
aslan ocasionalmente. Sin embargo, existe una serie de otros factores que hacen de esta enfermedad un
cuadro clnico muy complejo (Hardy, 1987; Agero, 1988).
El control de la mastitis subclnica se realiza en la actualidad mediante la terapia de secado, utilizando
ungentos intramamarios con antibiticos de accin prolongada que disminuyen la incidencia de las
mastitis subclnicas postparto (Blood y col., 1988). Sin embargo, esta terapia no asegura una cura
bacteriolgica efectiva, resultando muchas veces en fracasos teraputicos. Como la aplicacin de
antibiticos de larga accin por va intramamaria resulta en una contaminacin muy larga de la leche y por
ende su posible rechazo en las plantas procesadoras, lo cual ha conducido a que se traten las mastitis
subclnicas que alcanzan un grado de 3, segn la prueba CMT, que corresponde al estado ms cercano
de mastitis clnica.
Algunos autores (Zurita, 1982; Mwakipesile y col., 1983) han comunicado experiencias en las cuales
tratan por va sistmica con antibiticos de accin selectiva, como penicilina G procana, en vacas en
lactancia con mastitis grados 2 y 3 segn la prueba de CMT, obteniendo resultados de un 56 y 48,9% de
recuperacin de los cuartos afectados por S. aureus penicilino-sensibles, con una menor tasa de
reinfeccin. Owens y col. (1988), compararon la eficacia de dos regmenes de terapia para mastitis
subclnica bovina, con una infusin intramamaria de amoxicilina versus la misma infusin asociada a la
administracin intramuscular de penicilina G procana, obteniendo resultados de cura bacteriolgica de
51,4% de los cuartos tratados, comparado con un 25% obtenido para los cuartos tratados slo por va
intramamaria. Sin embargo, por su escaso nmero, estos estudios y sus resultados no permiten
generalizaciones.
En consideracin a los puntos antes mencionados y a la escasa informacin sobre terapia parenteral en
nuestro medio, se estudia la eventual eficacia de la terapia sistmica con penicilina G sdica y
trimetoprim-sulfadiazina en vacas en lactancia, en un intento de evitar, por una parte, la prolongada
persistencia del antibitico en leche y por otra, ejercer efectos bactericidas de rpida accin, mediante
una corta vida media de eliminacin en un marco de seguridad local y general que caracterizan a estos
antimicrobianos (Ziv y Storper, 1985; Bevill, 1987; Huber, 1987).

Financiado por proyecto DTI Universidad de Chile. A 3518-9312.

Materiales y mtodos
Animales de experimentacin
El presente estudio se realiz con 40 vacas elegidas al azar de la Estacin Experimental La Platina (INIA)
Regin Metropolitana y que presentaban en uno de sus cuartos cuentas de clulas somticas
equivalentes a una reaccin 43 de la prueba CMT. Otras 10 vacas se eligieron de igual forma,
presentando cuentas equivalentes a 0 o trazas.

Tratamientos
Los 10 animales sanos, permanecieron como grupo control sano (Grupo A). Las 40 vacas con mastitis
subclnica grado 3 se subdividieron en cuatro grupos de 10. Los tratamientos fueron los siguientes: grupo
B, sin tratamiento (control mastitis); grupo C, trata miento con penicilina G sdica por va intramuscular en
una dosis de 15.000 U1/kg cada 12 horas durante un da; grupo D, tratamiento con penicilina G sdica por
va intramuscular en una dosis de 15.000 Ul/kg cada 12 horas durante dos das consecutivos y grupo E,
con trimetoprim-sulfadiazina por va intramuscular en una dosis de 15 mg/kg como dosis nica.
Se obtuvieron dos muestras de leche de cada animal: una correspondiente al cuarto con CMT 3 y la otra
de la glndula completa (cuatro cuartos). Las muestras se obtuvieron en los siguientes tiempos: N 1: 3
4 das antes del tratamiento y las restantes postratamiento en cada semana hasta la octava inclusive.
Anlisis de las muestras
Se realiz en todas las muestras obtenidas una cuenta de las clulas somticas mediante un equipo
Fossomatic 90 en la Estacin Experimental La Platina (INIA).
Las bacterias fueron aisladas e identificadas segn tcnicas estndares (National Mastitis Council, 1981),
antes y despus del tratamiento, mediante el mtodo de diseminacin e incubando a 37 C por 24 a 48
horas.
Se realizaron antibiogramas slo con las bacterias aisladas e identificadas de las muestras obtenidas
antes del tratamiento con sensidiscos utilizando la tcnica de Kirby-Bauer (National Committee for Clinical
Laboratory Standards, 1989). Se ensayaron los antibiticos anteriormente mencionados y la interpretacin
se realiz de acuerdo al halo de inhibicin obtenido despus de 18 horas de incubacin.
Evaluacin de los tratamientos
Se realiz una evaluacin clnica postratamiento (da 4 postratamiento) que consider un examen de la
ubre y un examen macroscpico de la leche de todas las muestras de los animales.
La recuperacin de los animales tratados se midi despus de la primera semana postratamiento
utilizando dos criterios: recuperacin medida por Fossomatic, en la cual la muestra deba tener un
recuento de clulas somticas correspondientes al grado 1 del CMT y recuperacin bacteriolgica, que
consider al animal como recuperado si la muestra de leche obtenida del cuarto afectado fue negativa a la
bacteria causante de la enfermedad, postratamiento.
Anlisis estadsticos
Para establecer diferencias entre la eficacia de los distintos tratamientos se utiliz un Anlisis de Varianza
y Prueba de Schefee.
Resultados
En el cuadro 1 se aprecia el nmero de cepas aisladas de muestras de leche provenientes de 40 cuartos
afectados con mastitis subclnica grado 3. Se observa un alto promedio de cepas de Staphylococcus
aureus alcanzando un 97,5% en la semana previa al tratamiento, porcentaje que se mantuvo en la 1a y 4a
semana postratamiento, disminuyendo a 82,5% en la 8a semana postratamiento.
CUADRO 1 CEPAS BACTERIANAS AISLADAS DE CUARTOS MASTTICOS EN LAS SEMANAS PRE Y
POSTRATAMIENTO

Grupos de
tratamiento

Semana previa Semanas posteriores al tratamiento

al tratamiento
1a semana 4a semana
8 semana

Control
mastitis

S. aureus
E. Coli

S.
9 1 aureus
E. Coli

S.
9 1 aureus
E. coli

S. Aureus
9 1 Escaso
desarrollo

8
2

Sulfadiazinatrirnetoprim

S. aureus

S.
10 aureus

S.
10 aureus

Penicilina 2
inyecciones

S. aureus

S.
10 aureus

10

Penicilina 4
inyecciones

S. aureus

S.
10 aureus

S.
10 aureus

S. aureus Bacilo
9 gram positivo 8
2
-

S. aureus
Animales no
muestreados

8
2

S. aureus
10 Desarrollo
9
Polimicrobiano 1

En el cuadro 2 se aprecian los porcentajes de sensibilidad y de resistencia de las 39 cepas de S. aureus

aisladas de cuartos con mastitis subclnica grado 3 frente a los antibiticos utilizados en el ensayo.
CUADRO 2 SENSIBILIDAD ANTIMICROBIANA DE 39 CEPAS DE S. AUREUS

Sensible

Antibitico

Sensibilidad Resistente
Intermedia

Sulfadiazina
Trimetoprim

39

100

Penicilina G
Sdica

33

85

10

La mxima sensibilidad corresponde a la asociacin trimetoprim-sulfadiazina con un 100%; para penicilina

G sdica se observ un 85% de sensibilidad, una baja proporcin de cepas resistentes y de sensibilidad
intermedia. Cabe destacar que slo se logr aislar una cepa de Escherichia coli, presentndose como
sensible frente a trimetoprim-sulfadiazina y resistente a penicilina G sdica.
Se compararon los valores de las cuentas de clulas somticas de leche obtenidas de las muestras de
leche en la semana previa y posterior a los tratamientos, con los valores del grupo Control Mastitis,
mediante un Anlisis de Varianza (Caballero, 1985). No se apreciaron diferencias entre los diversos
tratamientos (p > 0,05).
Mediante la Prueba de Schefee se obtuvieron los siguientes resultados para la primera semana
postratamiento:

Clasificacin de
Schefee
A1
A2

Tratamiento

Penicilina 2
administraciones
Control mastitis

Trimetoprim-Sulfadiazina

A3

Penicilina 4 inyecciones

A4

Control sano

Esto significa que no existen diferencias estadsticamente significativas (p > 0,05) entre los diferentes
tratamientos y el grupo Control Mastitis; sin embargo, el grupo Control Sano present diferencia con los
restantes grupos; el grupo de tratamiento que present el mayor grado de semejanza al grupo Control
Sano fue el de penicilina G sdica con cuatro administraciones.Al analizar los tratamientos por separado
se observ que trimetoprim-sulfadiazina, en la primera semana postratamiento un 10% de los animales
present recuperacin, medida por Fossomatic (Cuadros 3 y 4), no hubo recuperacin bacteriolgica en
ninguna de las muestras. El tratamiento de penicilina G sdica con dos administraciones present una
recuperacin de 30% (Cuadros 3 y 4), pero sin cura bacteriolgica. Para el tratamiento de penicilina G
sdica de cuatro aplicaciones consecutivas, se observaron similares resultados, correspondientes a un
60% de recuperacin sin cura bacteriolgica. Esto concuerda con los resultados de la Prueba de Schefee,
que ubica a este grupo en el lugar ms prximo al grupo Control Sano.
CUADRO 3 DISTRIBUCIN DE ANIMALES POR GRADO DE CMT Y TRATAMIENTO POR CUARTOS
MASTTICOS EN LA 1aSEMANA POSTRATAMIENTO

Tratamientos

Grado de
CMT

Trimetoprim- Penicilina
Sulfadiazina

Penicilina 4

Sano

Trazas

CMT1

CMT2

CMT3

Mastitis
clnica

CUADRO 4 RECUPERACIN DE ANIMALES MEDIDA POR DISMINUCIN EN EL CONTEO DE

CLULAS SOMTICAS EN CUARTOS MASTTICOS

Tratamientos
Recuperacin

TrimetoprimPenicilina
Penicilina
Sulfadiazina
4

10

30

60

El anlisis de la leche de la glndula completa permiti observar que no existen diferencias

estadsticamente significativas (p > 0,05) entre los valores de clulas somticas para la semana previa y
los posteriores a los tratamientos comparados con el grupo Control Mastitis. La Prueba de Schefee
present los siguientes valores:

Clasificacin de Schefee

Tratamiento
Control mastitis

A1

Trimetroprim-Sulfadiazina

A2

Penicilina (2 inyecciones)

A3

Penicilina (4 inyecciones)

A4

Control sano

De esto se desprende que no hubo diferencias (p > 0,05) entre los distintos tratamientos y el grupo
Control Mastitis; sin embargo, s entre stos y el grupo Control Sano y el grupo Penicilina con 4
aplicaciones fue el ms semejante al Control Sano.
Los porcentajes de recuperacin para cada uno de los tratamientos comparados entre s y sus valores se
muestran en los cuadros 5 y 6.
CUADRO 5 DISTRIBUCIN DE ANIMALES POR GRADO DE CMT Y TRATAMIENTO POR GLNDULA
MAMARIA EN LA 1a SEMANA POSTRATAMIENTO

Tratamientos
Grado de
CMT
Sano

Trazas

CMT 1

CMT 2

CMT 3

Trimetoprim- Penicilina
Sulfadiazina

Penicilina 4

Mastitis
clnica

CUADRO 6 RECUPERACIN DE ANIMALES MEDIDA POR DISMINUCIN EN EL CONTEO DE

CLULAS SOMTICAS EN GLNDULA MAMARIA

Tratamientos
Recuperacin Trimetoprim- Penicilina Penicilina
Sulfadiazina
4
N

50

50

50

Discusin
Los resultados permitieron confirmar la predominancia de las cepas de Staphylococcus aureus en los
cuartos afectados por mastitis subclnica grado 3, situacin coincidente con trabajos nacionales y
extranjeros (Gallo, 1977; Ziv, 1980; Mwakipesile y col., 1983; Pedraza y col., 1986; Zurita, 1988; Pinilla,
1990; Sandholm y col., 1990; Bezama, 1991; Prescott y Baggot, 1991). Al respecto, es importante
destacar la elevada sensibilidad in vitro de estas cepas a penicilina G sdica y a la asociacin
trimetoprimsulfadiazina. En este ltimo caso el efecto era esperado por su mayor estabilidad frente a
betalactamasas que liberan los estafilococos, pero no as en el caso de penicilina que es inactivada por
estas enzimas (Prescott y Baggot, 1991), hecho que puede ser atribuido a la presencia de cepas no
productoras de betalactamasas. Esta situacin puede ser posible dado que un trabajo anterior slo fue
posible detectar un 20% de cepas de Staphylococcus aureus betalactamasa positiva en muestras de
leche obtenidas de vacas con mastitis de predios de la Regin Metropolitana (San Martn y col., 1992); lo
cual sugiere la necesidad de conocer este aspecto a nivel nacional, pues las diferencias geogrficas
pueden tener relevancia, tal cual ha sido planteado por Prescott y Baggot (1991).
Los resultados in vitro, en consecuencia, pueden justificar la eleccin de ambos antibiticos para la
terapia sistmica de la mastitis subclnica, adems, por su rpida cintica en glndula mamaria, que
disminuye el tiempo de presencia de residuos en la leche y por las propiedades farmacolgicas
consistentes en sus acciones bactericidas y un amplio margen de seguridad y sistmica (Ziv y Storper,
1985; Goodman y col., 1988; Prescott y Baggot, 1991).
El anlisis de los efectos sistmicos de ambos antibiticos en relacin a la disminucin de clulas
somticas en animales tratados permiti establecer, en el caso de penicilina G sdica, la reduccin de
clulas somticas en un 30 y 60% con el uso de dos y cuatro dosis, respectivamente, an cuando no se
constat la recuperacin bacteriolgica completa del cuarto, considerando este estado como la ausencia
de bacterias en la leche, situacin que hasta ahora es difcil de obtener, de acuerdo con comunicaciones
de autores extranjeros (Breau y Oliver, 1986; Owens y Watts, 1987; Sandholm y col., 1990). Sin embargo,
el uso de cuatro dosis puede ser considerada una alternativa importante en el caso de rebaos con alto
porcentaje de cuartos con mastitis subclnica grado 3 y los que presentan el riesgo de evolucin hacia la
mastitis clnica. Desde luego, la factibilidad de una terapia en este sentido debe compatibilizar el costo
involucrado en este procedimiento con su eventual beneficio. Ziv y Storper (1985) obtuvieron valores
similares a los descritos en este trabajo utilizando penicilina G procana en dosis mayores en una y dos
aplicaciones con intervalos de 24 horas, pero, a nuestro juicio, la condicin de antibitico de depsito
presume la presencia de residuos en leche por mayor tiempo, con el consiguiente aumento de las
prdidas econmicas, hechos que requieren de mayor estudio.
Respecto a los efectos de trimetoprim-sulfadiazina, la recuperacin estimada por la disminucin de
clulas somticas corresponde a 10%, lo cual se puede explicar por su menor potencia sobre Gram
positivos en relacin a penicilina G sdica, en nuestro caso cepas de estafilococos, que aparentemente
no producen betalactamasas y, adems, a la ausencia de Gram negativos en la casi totalidad de las
muestras. Sin embargo, la falta de informacin a nuestro alcance sobre estudios de biodisponibilidad a
nivel de glndula mamaria induce a pensar que la dosis y la va intramuscular pueden ser inadecuadas

para alcanzar concentraciones inhibitorias antibacterianas en leche y que slo estudios cinticos pueden
aclarar este punto.
En consecuencia, y dada la condicin de preliminar de este trabajo, es posible sugerir por ahora el uso de
penicilina G sdica en terapia de mastitis subclnica grado 3 durante la lactancia, considerando posibles
beneficios de los antibiticos ensayados, aun cuando se debe considerar el uso de otros, tradicionales o
nuevos, con posibilidades potenciales de uso en esta importante patologa.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen la excelente colaboracin de la Dra. Consuelo Borie, Unidad de Microbiologa,
Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias, Universidad de Chile y a Laboratorio Chile S.A., por la
donacin de penicilina G sdica y de trimetoprim-sulfadiazina (Salfen M.R.).
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