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Rpublique Algrienne Dmocratie Populaire

Ministre de lenseignement suprieur et de la recherche scientifique


Universit des Sciences et de la Technologie dOran Mohamed Boudiaf

Dpartement de : Biotechnologie
3me anne LMD Biotechnologie

Rapport de stage
Thme
Analyses microbiologiques & physico chimiques de
leau de la wilaya dOran

Stage effectu au niveau de lentreprise SEOR


ALGRIENNE DES EAUX
(ADE)
Prsent par :
MECHERI MEJDA

Anne universitaire 2012/2013

Liste des abrviations


ADE

: Algrienne des eaux.

EPIC

: Entreprise publique caractre industriel et commercial.


2

Mg

: Milligramme.

: Degr Celsius.

Ge

: Germe.

s/cm

: Siemens par centimtre.

Cond

: Conductivit

: Temprature.

Turb

: Turbidit.

TDS

: Taux des Sels Dessous.

DO

: Oxygne dessous.

CT

: Coliformes totaux.

CF

: Coliformes fcaux.

SP

: Streptocoques fcaux.

EDTA

: Ethyle diamine ttra actique.

: Heure.

: Litre.

: Mtre.

MO

: Matire oxydable.

: Pourcentage.

Pt

: Platine.

DPD

: Dimthyle-N, N-paraphmylne-diamine

Prface

Le mardi 30 Avril 2013, nous avons t respectivement emmens avec nos camarades au
niveau de lentreprise SEOR avec notre professeur et charg de cours de microbiologie
alimentaire Mr CHEBBA ; nous avons effectu un stage et, nous nous sommes intresss aux
analyses microbiologiques et physico-chimiques de leau destines la consommation humaine.
Ce stage nous a permis dapprofondir nos connaissances dans le domaine des traitements des
eaux. Nous avons eu le privilge denrichir nos connaissances scientifiques.

Introduction

Introduction
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Leau constitue un aliment essentiel puisque indispensable la vie. Leau potable ordinaire est
une eau possdant des qualits physico-chimiques, microbiologiques qui la rendent apte la
consommation humaine.
Aujourdhui, la qualit de leau nous concerne tous. Cette dernire est prioritaire pour la
sant, cest pourquoi il est ncessaire de stocker leau et de la contrler.
Notre travail porte sur ltude de leau de la wilaya de Tissemsilt. Cette eau est destine la
consommation humaine.
Nous allons donc dterminer les paramtres physicochimiques et microbiologiques de cette
retenue deau et quantifier sa pollution en faisant une tude comparative avec les normes deau
potable.

Chapitre I

Prsentation Gnrale de lAlgrienne des Eaux

I.1.Prsentation de lalgrienne des eaux :


I.1.1.Dfinition de lalgrienne des eaux :
Lalgrienne des eaux nomme ADE est une EPIC (entreprise publique caractre industriel et
commercial), elle a t cre par dcret excutif N 01-101 du 21 avril 2001.
Elle est charge dassurer sur lensemble du territoire national la mise en uvre de la politique de leau
potable ainsi que la prise en charge des activits de gestion des oprations de production, de transport, de
traitement, de stockage, dadduction, et de distribution deau.
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Elle est structure sous forme dagences rgionales qui sont leurs tours structures dunits oprationnelles.
Lensemble de ces structures sa tte une direction gnrale, lunit de Tissemsilt faisant partie de lagence
rgionale de la wilaya de Chlef.
Le rle de laboratoire est le contrle de la qualit des eaux destines la consommation au niveau de wilaya
de Tissemsilt.

ALGRIENNE DES E AUX


( ADE)

Figure N01 : Logo de lentreprise

I.1.2. Les sources de lADE :


Deux types de sources sont grs par cette unit :

Les eaux de surface (barrage DERDER et barrage KODIATEL ROSFA).


Les eaux sous terrains (fourrage de RECHIGA).

I.2.Laboratoire de LADE :
I.2.1.Organisation de laboratoire :
I.2.1.1. Personnel :

Agent de scurit.
Chef de service.
Trois chimistes pour les analyses physico-chimiques.
Deux biologistes pour les analyses biologiques.

I.2.1.2. Machine et quipement :


Le laboratoire de lADE contient deux sales, une sale pour les analyses physico-chimiques, et lautre pour les
analyses bactriologiques. Ils existent dans ces sales le matriel suivant :

Chapitre I

Prsentation Gnrale de lAlgrienne des Eaux

a) Laboratoire bactriologique :
-Incubateur
-Hotte bactriologique
-Rfrigrateur
-Rampe de filtration
-Autoclave

Figure N 02 : Rampe de filtration


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-Milieu de culture
-Pompe vide
-Bec benzne
-Bain marie
b) Laboratoire physico-chimique :

-Etuve universelle
-Distillateur
-Dessiccateur
-Hotte chimique

Figure N03 : Spectrophotomtre

-Plaque chauffante
-Agitateur chauffant.
-Agitateur non chauffant.
-Conductimtre.

Figure N 04 : Conductimtre
Bain-marie
-pH-mtre
-Turbidimtre
-Balance analytique.
-Spectrophotomtre.

Figure N5 : pH mtre
.

Chapitre I

Prsentation Gnrale de lAlgrienne des

I.2.2.Activit de laboratoire :
Le rle de laboratoire est le contrle de la qualit des eaux destines la consommation au niveau de wilaya
de Tissemsilt. Parmi les analyses qui peuvent tre effectues dans ce laboratoire sont :
I.2.2.1. Degr chloro-mtrique :
Le chimiste de laboratoire contrle chaque semaine le degr chloro-mtrique deau de javel qui doit tre
comprise entre 45 et 48.
Mode opratoire :
1ere tape : Dilution deau de javel 50 ml
7

1ml leau de javel.


49 ml deau distille.
2eme tape :

100 ml deau distille.


10 ml deau de javel dilue.
5 ml dacide sulfurique+ 1 g de KI (potassium iod)
Titre thiosulfate de sodium jusqu la couleur jaune clair.
Ajouter 2 ou 3 ml damidon jusqu la couleur transparent.
Lire le volume de thiosulfate utilis.
Thiosulfate 0.112 50

b. Analyses de leau :
Les travailleurs de laboratoire devisent les analyses selon des paramtres, le tableau 01 reprsente les
diffrentes analyses de leau. (voir lannexe)
Eau analyse :
Leau est tout dabord pompe dans une nappe souterraine ou une ressource superficielle (fleuves, rivires,
lacs), puis diffrentes tapes plus ou moins complexes sont assures dans lusine. Le traitement de leau se
fait pour la rendre potable avant son stockage dans des rservoirs (chteaux deau). Une dose de chlore lui est
enfin ajoute, afin dassurer sa distribution. Enfin elle atteint en toute sret nos robinets.
De nombreux de contrles sont effectus tout au long de la chane de production deau potable : au point de
captage, la station de traitement, aux niveaux des rseaux de distribution.
Tout au long du parcours de leau jusquau compteur, lentreprise de service de leau contrlent la qualit des
eaux quelles distribuent et vrifient quelles rpondent bien aux critres lgaux.
Ces contrles sont mis en place selon des procdures techniques trs rigoureuses et des outils de contrle
(notamment les laboratoires danalyses) trs labors.

Chapitre II

Partie Exprimentale : Analyses effectues

Mthodes danalyses :
Au cours de notre stage, nous avons pu faire deux types de prlvements. Le premier est un prlvement
bactriologique, qui se fait laide de pistolet de flambage dans des flacons striles. Le second prlvement est
physico-chimique, il se fait dans des flacons de polythylne.
1. Le prlvement :
Eau de robinet :

Flamber le bout de robinet avec une source de flamme.


Laisser couler leau de robinet pendant quelques minutes.
Dboucher les deux flacons striles sous leau coule pour viter la contamination.
Remplir ces flacons et les reboucher.
Noter les rfrences sur les flacons.
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Eau de rservoir :

Plonger les deux flacons striles au profonde du rservoir.


Dboucher ces flacons et les faire remplir.
Reboucher les flacons avant.

II.1.Paramtres bactriologiques :
On distingue deux types principaux dindicateurs :
Les indicateurs de contamination fcale permettant dapprcier avec plus ou moins de sret ou de
prcocit, le risque dune contamination par des matires fcales pouvant vhiculer des microorganismes
pathognes.
Les indicateurs defficacit de traitement permettent dvaluer la qualit dun
traitement de dsinfection de leau vis--vis des microorganismes pathognes.
Au cours de notre stage, nous avons fait deux types de prlvements. Le premier est
un prlvement bactriologique, qui se fait laide de pistolet de flambage dans des
flacons striles. Le second prlvement est physico-chimique, il se fait dans des
flacons de polythylne.
En gnral, les mmes germes sont utiliss dans lune des situations et qui sont :
1)-les coliformes totaux.
2)-les coliformes fcaux (thermorsistants).
3)-les streptocoques fcaux.

Chapitre II

Partie Exprimentale : Analyses effectues

II.1.1.Recherche des coliformes totaux :


a. Dfinition :
Parmi les entrobactries, les bactries coliformes, vivants notamment dans lintestin des animaux.
(BOURGEOIS ET LEVEAU, 1980). Ces bactries ont les proprits suivantes :
Ce sont des bacilles Gram, non sporules, oxydase aro-anarobies ou anarobies facultatifs.
Il fermente le lactose avec production dacide et gaz en 48 h T de 35 37C.
(DELRRAS ,2007).
b. Mode opratoire :
-Technique sur membrane filtrante :
Tout dabord on doit allumer la rampe de filtration en appuyant sur le bouton qui commence produire une
aire qui sert isoler lintrieur de la rampe de lextrieur en vitant toute contamination probable.

En appuyant sur le bouton UV, la hotte bactriologique commence produire des rayons ultraviolets qui
servent striliser lappareil.
Il faut attendre 15 mn avant de commencer la filtration de leau.
Leau quon veut analyser doit tre filtre sur une membrane en ester de cellulose de porosit bien dfinie
(0,45m) capable de retenir les bactries.
Flamber la face suprieure de lappareil.
Poser les membranes filtrants entre lentonnoir et la pince ; le cot poreux au dessous.
Installer le dispositif dassemblage.
Agiter bien le flacon deau analyser et le verser dans le rservoir jusqu' son remplissage.
Ouvrer le robinet du support entirement afin de laisser leau scouler sous laction daspiration

deau.

Aprs laspiration de toute la quantit deau, fermer les robinets puis enlever les dispositifs dassemblage et
avec une pince flambe prlever les membranes saisies par leur extrmit.
Transporter chaque membrane de filtration soigneusement sur un milieu de culture solide tergitol.
Incubation 37C et la lecture se fait aprs 24h.
II.1.2 Recherche de coliformes fcaux :
Cette opration est suivie de lopration de recherches les coliformes totaux, si le nombre de germes est plus
de 10 points (colonies de bactries).

Chapitre II

Partie Exprimentale : Analyses effectues

Mode opratoire :
Avec la mme mthode (la membrane filtrante) faire le test des coliformes fcaux sauf le degr dincubation
est de 44C.
Rsultats : le dnombrement des colonies se fait aprs lincubation.
II.1. 3 Recherche des streptocoques fcaux :
a. Dfinition :
Les streptocoques fcaux sont des streptocoques des matires fcales, ils appartiennent essentiellement au
genre streptocoques possdant le mme antigne, comme Streptococcies bovis, suis quins, sont aussi des
htes normaux de lintestin que lon ne pourra distinguer des Enterococus que par la culture en milieu hyper
sal (65 g.dm-).
b. Mode opratoire
On filtre la mme quantit deau selon la mme technologie aprs filtration les membranes sont dposes sur
le milieu slanetz puis incubes 37C pendant 48 h.
c. Paramtres physico-chimiques :
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Temprature :
Il est important de connatre la temprature de leau avec une bonne prcision. En effet, celle-ci joue un rle
dans la solubilit des sels et surtout des gaz.
Pour mesurer la temprature, on utilise le thermomtre. Les mesures sont obtenues directement en degr
Celsius. (Rodier et all, 2005).
Mesure de pH et DO :
Le pH dune eau reprsente son acidit ou son alcalinit.
- pH = 7 une eau est dite neutre.
- pH > 7 une eau est dite basique.
- De la diffusion de lO2 en surface.
- De laration du mouvement de leau.
Principe :
Le pH et DO sont mesurs laide de multimtre. Dans cet appareil existe deux lectrodes une lectrode
pour pH et lautre pour le DO.
Une lectrode en verre est immerge dans la solution, le pH ou DO doit tre dtermin en calculant la
diffrence des potentiels entre les lectrodes. Le pH de la solution est dpond de la concentration en protons
(H).

Chapitre II

Partie Exprimentale : Analyses effectues

Mode opratoire :
-Allumer lappareil.
-Rincer llectrode en eau distille.
-Immerger llectrode qui doit tre bien rince dans la solution mesurer.
-Appuyer le bouton de fonction du pH et relever la valeur du pH.
-Appuyer le bouton de fonction du DO et relever la valeur du DO.
-Rincer llectrode en eau distille.
Conductivit
Dfinition :
La conductivit lectrique dune eau est la conductance dune colonne deau comprise entre deux lectrodes
mtalliques de 1cm de surface et spare lune de lautre de 1cm .Elle est linverse de la rsistivit lectrique.
Lunit de la conductivit est le siemens par mtre (s /m) et 1s/m=10 S /cm=10 ms/m
Principe :
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Rincer plusieurs fois llectrode, dabord avec leau distille puis en les plongeant dans un rcipient
contenant de leau examiner, en prenant soin de llectrode de platine qui doit tre compltement immerg.

Taux des sels dissous (TDS) :

Dfinition :
Le TDS est utilis comme un indicateur du contenu total en composs minraux prsents dans les eaux
dalimentation. Les substances minrales dissoutes incluent :
-Le dioxyde de carbone, qui se dissout dans leau en donnant de lacide carbonique, acide faible.
-Les sels de sodium.
-Les composes ferreux et ferriques provenant de minraux, et du fer rouill des canalisations.
-Les phosphates provenant de dtergents.
-Les nitrates provenant des engrais.
Mode opratoire :
Le mode opratoire reste le mme sauf que la solution dtalonnage est une solution 491 mg /l de sels
dissous.

Chapitre II

Partie Exprimentale : Analyses effectues

La turbidit dune eau est due la prsence des matires en suspension finement divises comme : Argile,
sable, matires organiques. La turbidit peut tre value par certain nombre de mthodes qui sont pratiques
suivant les ncessits, sur le terrain ou au laboratoire.
Salinit :
Est la quantit du sel NaCl dans leau, elle est donne par mg/l.
Mode opratoire :
Rincer llectrode plusieurs fois dans leau distille pour essayer, puis on la plonge dans un rcipient contenant
de leau analyser avec agitation faible, afin que la concentration ionique entre les lectrodes soit identique
celle du liquide ambiant, introduire alors le thermomtre aussi prs que possible de la cellule, la temprature de
liquide ne devra en aucun cas varier pendant la mesure.
Rsultats
Analyses quotidiennes :
Le tableau suivant reprsente les rsultats de 02 prlvements quotidiens. Rsultats des analyses de l'chantillon
H1 (Hpital de Tissemsilt) et l'chantillon H2 (Cit 68 long route de lhpital) prlevs le 01/ 04/2010.

H1

H2

Les normes
algriennes
12

pH
Cond
Turb
DO
T
TDS
CT
CF
SP

us /cm
NTU
mg/l
C
mg/
ge/100ml
ge /100ml
ge/100ml

7.2
1084
0,9
6,4
15,9
398
00
00
00

7.5
1084
0,9
6,5
15,9
423
00
00
00

6.5 8.5
2800
5
/
/
/
10
00
00

.Tableau 01: Rsultats des analyses de deux chantillons de leau (H1) et (H2)

Conclusion

Conclusion
Notre travail consiste faire des analyses physico-chimiques et bactriologiques de leau de
consommation de la ville de Tissemsilt. Ces analyses sont effectues au niveau de laboratoire de
lADE, elles comportent la recherche des indicateurs de pollution.
Nous pourrons conclure que ces mthodes danalyses permettent le suivit et le control continu
de la qualit des eaux destines la consommation. Les observations aprs analyse rpondent
aux normes de leau potable.
Nous constatons que leau de consommation de la ville de Tissemsilt est conforme aux normes
physico-chimiques et bactriologiques.

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Annexe
La composition chimique des milieux de cultures :
Milieu TGEA :
La glose TGEA est destine la dtermination du nombre total de germes arobies dans leau
les produits laitiers et autres.
Formule en g /l deau distille
Peptone de casine ..5
Extrait de viande 3
Extrait de levure .1
Glucose .1
Agar18
PH=7+/-0.2
Paramtres physicochimiques
pH
Conductivit
us/cm
Chlore rsiduel
mg/l
Turbidit
NTU
Oxygne dessous
mg/l
Temprature
C
Rsidu sec a 105
mg/l
MES 105

Minralisation globale
Calcium
mg/l
Magnsium
mg/l
Sodium
mg/l
Potassium
mg/l
Sulfate
mg/l
Chlorure
mg/l
Bicarbonate
mg/l
Duret totale TH
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mg/l
Silice SiO2
mg/l
TDS
mg/l
Paramtres de pollution
Ammonium NH4+
mg/l
Nitrites NO2mg/l
Nitrites NO3mg/l
Ortho phosphates PO4mg/l
Mat. Oxydable
mg/l
Analyses fines
Cyanure CNmg/l
DCO
mg/l
Plomb Pb+2
mg/l
Nichel Ni
mg/l
Cadmium Cd
mg/l
Cobalt Co
mg/l
Chrome Cr
mg/l
Chrome Cr
mg/l
Cuivres Cu
mg/l

mg/l
Duret totale TH et TAC
mg/l
Titre acide complet TAC en f
mg/l
Paramtres indsirables
Fer total
mg/l
Fer Fe ()
mg/l
Fer Fe ()
mg/l
Manganese Mn+2
mg/l
Aluminum Al+3
mg/l
Paramtres bactriologiques
Germe totaux 37C
ge/ml
Coliformes totaux
ge/100ml
Coliformes fcaux
ge/100ml
Streptocoques fcaux
ge/100ml
Clostridium sulf-red
ge/20ml
Vibrio cholerae
ge/5ml

Tableau 02 : Diffrents paramtres de l'analyse de leau

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Lgende :
CMA : Concentration Maximale Admissible (Normes Algriennes provisoires).
E.B : Eau brute lentre de la station des dunes.
E.T : Eau traite la sortie de la station des dunes.
E.INC : Eau incrustante
Interprtation des rsultats :
Leau traite la sortie de la station de dessalement des dunes prsente une bonne
qualit physico-chimique relative aux substances analyses.
Leau traite analyse prsente une bonne qualit bactriologique.

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