FARMACIA Y BIOQUIMICA

Curso:
BIOQUIMICA

Tema:

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Profesor(A):
..
Alumna:

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Turno:
MAANA
IV CICLO

2015

INFORME DE LA PRCTICA N 3
SISTEMA INMUNITARIO
I.

MARCO TERICO
Sistema inmunitario: Es el conjunto de clulas y sustancias que produce el
organismo humano y que
nos protegen contra las enfermedades. Los
microorganismos bacterianos contienen en su superficie determinantes
antignicos que son reconocidos por anticuerpos especficos.
La inmunidad celular es aquella en la que intervienen clulas como Linfocito T y
macrfagos, un ejemplo de ello es la hipersensibilidad retardada que puede ser
provocada por la inoculacin intradrmica de antgeno. Ejemplo: respuesta a la
tuberculina (ppd).

COMPETENCIAS
Enumera las clulas y las sustancias que participan en el sistema inmunolgico
realizando la prueba de PPD, valorando su estudio en la prevencin de
enfermedades.
MATERIALES Y EQUIPO

Lminas coloreadas con Gram (flora mixta).

Microscopios.
Aceite de cedro.
Papel lente.
Alcohol isoproplico.
Suero fisiolgico, alcohol yodado y algodn.
Guantes, Gorros y Mascarillas.
Isopos

PROCEDIMIENTO
1. Realizar la extensin de la muestra.

2. Secar la muestra a temperatura ambiente o al calor.

3. Cubrir la muestra con la solucin fenicada de violeta de, por un tiempo de
1 a 2 minutos, aproximadamente.
4. Lavar con agua a chorro.
5. Cubrir con lugol y dejarlo actuar de 1 a 2 minutos.
6. Lavar con agua a chorro.
7. Decolorar con alcohol acetona hasta que ya no se desprenda ms
colorante de la lmina. Por un tiempo aproximado de 10 segundos
8. Lavar con agua a chorro suave.
9. Contrastar con safranina de 40 a 60 segundos.
10. Lavar, secar y observar a inmersin.
11. Secar con flameo suave sobre fuego del mechero de bunsen.
12. Agregar una gota de inmersin sobre la muestra y colocarlo al microscopio
para observar los tipos de clulas.

RESULTADOS
- Bacterias color violeta: Gram positivos.
-

Bacterias color rosado: Gram negativos.

Los grmenes Gram positivos son aquellos en los cuales se ha formado el

complejo Cristal Violeta Yodo (CVI). Y, no son decolorados por el alcohol
acetona, manteniendo por lo tanto la coloracin violeta.
Los grmenes Gram positivos son aquellos en los cuales no se forma
complejo Cristal Violeta Yodo (CVI). Y, son decolorados por el alcohol
acetona, y al quedar sin coloracin estn aptos para ser teidos por la
safranina.
En trminos generales, en microbiologa clnica, son Gram positivos todos
los cocos a excepcin de la neiserias, y son Gram negativos todos los
bacilos a excepcin de los esporulados, los micobacterias y los
corinebacterias.

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloracin,

se debe a que la membrana externa de las Gram negativas
es soluble en solventes orgnicos, como por ejemplo la mezcla
de alcohol/acetona. La capa de pptido glicano que posee es
demasiado delgada como para poder retener el complejo de
cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto
este complejo se escapa, perdindose la coloracin azulviolcea. Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer
una pared celular ms resistente y con mayor proporcin de
pptido glicanos, no son susceptibles a la accin del solvente
orgnico, sino que este acta deshidratando los poros
cerrndolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo
cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin azul-violcea.

CUESTIONARIO
1. Para qu sirve la reaccin de PPD?
1. Todas las bacterias tienen el mismo metabolismo?

PRCTICA DE LABORATORIO:
Tincin y observacin de clulas bucales.

1. Materiales y reactivos.
Los materiales que utilizamos fueron:

- Microscopio
- Cristalizador.
- Mechero de alcohol.
- Vidrio de reloj.
- Pinzas.
- Agua.
- Portaobjetos.
- Cubreobjetos.
- Palillo.
Los reactivos que utilizamos fueron:
- Clulas muertas.
- Azul de metileno.
2. Experiencia.
Vamos a intentar ver en el microscopio clulas de la
mucosa bucal. A continuacin os explicaremos los
pasos que seguimos para llevar a cabo esta practica:

1. Con el extremo de un palillo vamos a rasparnos

suavemente la parte interior de nuestro carrillo.

2. Despus depositaremos estas clulas en un

portaobjetos ya mojado, y lo calentaremos un poco
hasta que el agua se evapore.

3. Colocaremos el portaobjetos en un soporte de

tincin (cristalizador) y echaremos un par de gotas de
azul de metileno. Seguidamente lo lavaremos con
cuidado hasta que quede totalmente transparente.

4. Sin dejar que se seque colocaremos un

cubreobjetos encima y ya podremos observar nuestras
clulas bucales en el miscroscopio.

3. Resultado:
Finalmente conseguimos ver las clulas muertas del
interior de nuestro carrillo y distinguimos todas sus
partes, por lo que se puede decir que esta prctica de
laboratorio tuvo un resultado satisfactorio.
4. Conclusiones:
- Las clulas epiteliales vivas deberan haber estado
unidas, pero como se encontraban muertas estaban
desprendidas.
- Cuando las clulas de la piel mueren, se caen y
desaparecen sin enterarnos ni dejar rastro, y muchas
veces forman el polvo que nosostros limpiamos.
- El ncleo se observa de un color azul debido al tinte
azul de metileno.
- Hemos utilizado este tinte para poder observar
mejor algunas estructuras importantes de la clulas
como es el ncleo.
- Si las clulas tienen un ncleo definido son llamadas
eucariotas.
- La diferencia entre una bacteria y cualquier otra
clula eucariota, es que la bacteria es procariota y no
tiene un ncleo definido.
Realizado por Nahia Eza Arruti.

Clulas bucales a microscpio.