Determinaci

n de
creatinina
Practica No. 5

INTEGRANTES:
Ortiz Pineda Marcos
Ramirez Prez Luis Alfredo
Guerrero Pedraza Mara Jos

OBJETIVO
Determinar a travs de la espectrofotometra la concentracin de creatinina en
plasma.
Conocer las reacciones cinticas en las pruebas de laboratorio.

ANTECEDENTES
CREATININA
La creatinina es el producto de degradacin de la creatina. La creatina es un
derivado de aminocidos, el cuerpo la fabrica bsicamente en el hgado, los
riones y el pncreas, y tambin puede obtenerse a travs de una dieta rica en
carne o pescado (podemos encontrar unos 5 gr., de creatina por cada kilo de
carne).

Se

acumula

bsicamente

en

los

msculos

esquelticos

(aproximadamente un 98 %) en forma de creatina libre unida a una molcula

de fosfato (PCr o fosfocreatina). La PCr sirve como fuente inmediata de energa
para la contraccin muscular para lo que se degrada produciendo creatinina.
Esta es llevada a la sangre a travs riones los cuales la filtran del cuerpo en la
orina (puede tambin ser medida en la orina).
DETERMINACIN DE CREATININA
El mejor parmetro bioqumico sanguneo de la funcin renal es la creatinina.
En principio, cuanto mayor es el descenso de la funcin renal, tanto ms
elevado es el valor de la creatinina srica.
Los aminocidos glicina, arginina y metionina forman en el hgado la creatina,
que por fosforilacin da la fosfocreatina, que circula por la sangre hacia el
msculo y cerebro, y solamente en cantidades trazas se elimina por la orina. La
fosfocreatina acumulada en el msculo es un depsito de energa y con la
prdida del fsforo se convierte en creatina, la cual por deshidratacin pasa a
creatinina. La creatinina es, por tanto, el anhdrido de la creatina, la cual una
vez que pasa a sangre no vuelve a ser utilizada y se excreta de forma
constante por la orina. La creatina, en cambio, vuelve a ser reabsorbida por los
tbulos, lo que explica que slo aparezcan trazas de este metabolito en la
orina.

La creatinina se forma endgenamente en el metabolismo muscular, existiendo

una relacin directa con la masa muscular.
SE PUEDE MEDIR EN PLASMA Y ORINA POR LA FILTRACIN TUBULAR
Fundamentalmente la creatinina es filtrada por los glomrulos, no se reabsorbe
en circunstancias normales, y slo en una mnima proporcin se secreta a nivel
tubular, aumentando dicha secrecin con el incremento de la concentracin
srica de creatinina en la insuficiencia renal progresiva. Puede haber
reabsorcin tubular de creatinina en pacientes con insuficiencia cardaca grave.
A diferencia de la uremia, la concentracin plasmtica de creatinina es
prcticamente constante en un mismo sujeto e independiente del contenido
proteico de la dieta y dependiente tan slo de su funcin renal.
Por todo ello, como medida de filtracin glomerular, la determinacin de
creatinina es muy superior a la de la urea. Es decir, la medicin de los niveles
de creatinina srica es clnicamente ms especfica como ndice de la funcin
renal que la determinacin de urea; sin embargo, esta ltima es ms sensible.
Por tanto, si utilizamos ambas determinaciones como pruebas de screening de
la funcin renal, la determinacin de la urea producira ms falsos positivos,
mientras que la determinacin de la creatinina nos dara ms falsos negativos;
de hecho la funcin renal puede estar claramente restringida a pesar de los
valores normales de la creatinemia.
NIVELES NORMALES DE UREA Y CREATININA
Un resultado normal es de 0.7 a 1.3 mg/dL para los hombres y de 0.6 a 1.1
mg/dL para las mujeres.
Las mujeres generalmente tienen niveles de creatinina ms bajos que los
hombres, debido a que ellas normalmente tienen menor masa muscular.
En principio se recomienda la valoracin conjunta de ambas determinaciones,
as como la relacin entre ambas, expresada por el cociente de los valores
plasmticos de urea/creatinina, que normalmente se sita alrededor de 40.
Valores superiores se observan en situaciones de hipercatabolismo o cuando
hay un enlentecimiento del flujo de orina tubular (que permite una mayor
reabsorcin de urea), como cuando hay una disminucin de la perfusin renal o
en la obstruccin urinaria parcial bilateral. Un nivel de creatinina prximo al
lmite superior de la normalidad indica nicamente que el paciente debe tener

an un filtrado glomerular y un rendimiento renal de por lo menos el 50% del

normal. Aunque los valores plasmticos de urea y creatinina sean normales no
se puede descartar la existencia de nefropata, de hecho puede haber hasta un
50-60% de nefronas no funcionales sin que por ello se alteren los niveles de
urea y creatinina. Por tanto estas determinaciones bioqumicas presentan un
valor limitado por su escasa sensibilidad diagnstica. En este aspecto ambas
pruebas son superadas por un test de funcionalidad renal, el aclaramiento de
creatinina.
Las concentraciones sricas en creatinina aumentan en:
Insuficiencia

renal

crnica

secundaria

glomerulonefritis crnica,

nefrosis diabtica, rin poliqustico, nefroesclerosis, pielonefritis crnica

y gota, para nombrar algunos, debido a la incompetencia de los riones
para excretar la creatinina.
Los valores sricos de creatinina pueden ser normales en algunos casos
de insuficiencia renal aguda o crnica leve debido a que el valor
plasmtico de la creatinina emplea de 7-10 das para estabilizarse
cuando el IFG disminuye.
Una creatinina plasmtica elevada indica insuficiencia renal grave de
larga

duracin.

Un

incremento

de

4-5mg/100ml

es

evidencia

de disfuncin importante.
La nefritis crnica con uremia puede provocar valores tan altos como 2030 mg/100 ml.
Uropata obstructiva de larga duracin, que puede presentarse en
hipertrofia prosttica, estenosis uretral bilateral y clculos renales,
debido la dificultad para el flujo libre de la orina y del IFG. La depuracin
renal es baja.
Disminucin crnica del IFG debido a causas prerrenales, como se
observa en insuficiencia cardiaca congestiva.
Valores falsos reportados en algunos mtodos de anlisis (prueba
original de Jaff) que originan interferencias secundarias por reaccin de
otras sustancias.
Algunas personas con masa muscular muy grande, que producen
cantidades mayores de creatinina, por lo general, la elevacin es ligera.
Cetoacidosis diabtica, debido a una lectura falsamente elevada por el
aumento de cetonas en el suero.
Rechazo de trasplante de rin, debido a una filtracin escasa de
productos de desecho por el rin ineficaz. En tales casos, el indicador

ms sensible de la funcin renal pueden ser las determinaciones en serie

de creatinina srica.
MTODOS DE DETERMINACIN
Las tcnicas analticas de determinacin de la creatinina se resumen en el
mtodo colorimtrico de Jaff y en el mtodo enzimtico de la creatininasa.
En la reaccin de Jaff, el cido pcrico en medio alcalino forma con la
creatinina un tautmero de picrato de creatinina de color naranja rojizo
brillante que se mide a 500 nm.
El mtodo enzimtico se basa en la utilizacin de la enzima creatininasa
(creatinina-amidohidrolasa), que hidroliza la molcula de creatinina segn la
reaccin:

La disminucin de absorbancia a 340 nm es directamente proporcional al nivel

de creatinina de la muestra.
DEPURACIN DE LA CREATININA
El Clearence de creatinina es un mtodo muy preciso para determinar
la capacidad de filtrado de los riones. El trmino ingls es clearance, que
significa aclaracin o limpieza. El Clearence expresa la cantidad de plasma
sanguneo por unidad de tiempo liberada de una determinada mezcla de
sustancia. Por lo tanto, es un valor de la capacidad de eliminacin de
sustancias.
Incluso si el nivel de creatinina en el suero de la sangre se encuentra en el
rango normal, utilizando el depuracin de creatinina se puede determinar una
disminucin de la capacidad de filtrado. Por tanto, es adecuada para detectar

una enfermedad renal crnica o una insuficiencia renal incipiente. La medicin

de la depuracin de creatinina es un poco ms laboriosa porque adems de
tomar una muestra de sangre se debe recoger la orina durante un perodo
de 24 horas.
El mdico determina la concentracin de creatinina en la orina y en el suero, y
calcula el volumen de orina por minuto, es decir, la cantidad de orina que el
paciente elimina por minuto. El Clearence de creatinina se expresa por la
siguiente frmula:

Como los filtros del rin tambin se denominan glomrulos (ovillos capilares),
el valor calculado se llama tasa de filtrado glomerular o TFG. Se expresa en
mililitros por minuto y por superficie del cuerpo, y en sujetos sanos es de unos
por 120 mililitros por minuto por cada 1,73 m2 de superficie corporal. El valor
vara segn la edad y el gnero. En contraste con la concentracin de
creatinina en el suero, que aumenta con la disminucin de la funcin renal, la
depuracin de creatinina o TFG baja si se deteriora la funcin de los riones. La
depuracin de creatinina parece disminuir con la edad (cada dcada
corresponde a una disminucin de aproximadamente 6.5 ml/min / 1.73 m 2).
Las frmulas aproximativas, con cuya ayuda la determinacin de la TFG
requiere considerablemente menos tiempo, son sin embargo ligeramente
menos precisas y no son adecuadas en todos los casos, debido a que una
pequea cantidad de creatinina es secretada por los tubos de filtracin en los
riones, la depuracin de creatinina no es exactamente equivalente a la tasa
de filtracin glomerular. De hecho, la depuracin de creatinina generalmente
sobreestima esta tasa, lo cual es particularmente vlido en pacientes con
insuficiencia renal avanzada.. El representante ms conocido de las frmulas
aproximativas es la llamada frmula de Cockroft-Gault, que considera el
peso y la masa muscular aproximada del paciente.
VALORES NORMALES DE ANLISIS DE DEPURACIN DE CREATININA
La depuracin a menudo se mide como milmetros/minuto (ml/min). Los valores
normales son:
Hombres: 97 a 137 ml/min
Mujeres: 89 a 128 ml/min

REACCIN CINTICA
La cintica qumica es el estudio de las velocidades de las reacciones qumicas
y de los mecanismos mediante los que tienen lugar. La cintica qumica
introduce la variable tiempo en el estudio de las reacciones qumicas y estudia
el camino que siguen los reactivos para convertirse en productos.
La velocidad de reaccin es la rapidez con que se modifica la concentracin de
un producto o un reactivo al transcurrir el tiempo.
FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE REACCIN

Estado fsico de los reactivos: Las reacciones son ms rpidas si los

reactivos son gaseosos o estn en disolucin. En las reacciones
heterogneas la velocidad depender de la superficie de contacto entre

ambas fases, siendo mayor cuanto mayor es el estado de divisin.

Concentracin de los reactivos: La velocidad de la reaccin se
incrementa al aumentar la concentracin de los reactivos, ya que

aumenta el nmero de choques entre ellos.

Temperatura: Un incremento de la temperatura provoca un incremento
en la energa cintica de las molculas, lo que hace que sea mayor el

nmero de molculas que alcanza la energa de activacin.

Catalizadores: Los catalizadores cambian la energa de activacin de una
determinada reaccin, y por lo tanto varan la velocidad de reaccin

MATERIALES
Muestra sangunea

Reactivo 1 para
determinar creatinina
(Blanco)
Reactivo 2 para
determinar creatinina
(Verde)

Inserto

Estndar de creatinina
2 mg/dL

Agua destilada

Micro pipetas (1001000l y 5- 50l) y sus

puntillas

Tubos eppendorf

Celdillas para
espectrofotmetro

Espectrofotmetro

PROCEDIMIENTO
1.- La persona que trabajo el
procedimiento antes realizo su
lavado de manos
correspondiente, para eliminar
cualquier agente contaminante
tomando en cuenta uso de
guantes para un mayor
aislamiento.

2.- Utilizamos la muestra de la

prctica anterior sobre
flebotoma.

3.- Utilizamos el inserto que

proporciona el equipo siguiendo
el procedimiento para el clculo
del nivel de creatinina.

4.- Se prepararon 3 tubos eppendorf con las siguientes cargas de muestra

(tabla), utilizamos las micropipetas para realizar esta tarea, asimismo nos
apoyamos con las gradillas que contenan las puntas para las micropipetas
para llevar un conteo correcto del nmero de muestra preparada, despus
colocamos las puntas en una solucin para su limpieza.
En esta ocasin utilizamos 2 reactivos y nuestro blanco fue agua destilada.
Mtodo con dos reactivos
Reactivo 1
Reactivo 1
Muestra

5.- Calibramos la longitud de

onda en el espectrofotmetro.

200 L
200 L
40 L

6.- Se calcul la absorbancia

nmero 1 del estndar, 25
segundos despus de preparar
los reactivos con el estndar.

7.- Se calcul la absorbancia 2

del estndar que se tom 2
minutos despus de la
absorbancia 1.

8.- Calculamos la absorbancia

nmero 1 de la muestra, 25
despus de preparar los
reactivos.

9.- Se calcul la absorbancia 2

de la muestra que se tomo 2
minutos despus de la
absorbancia 1.

11.- Por ultimo aplicamos la frmula para obtener el resultado final de

ambas muestras:

(A2-A1) Muestra
X
(A2-A1) Estndar
n

(0.052-0.048) Muestra
X 2= 0.8
(0.055-0.045) Estndar
mg/dL

Conclusiones.
Durante esta prctica aprendimos que se debe de leer muy bien el inserto del
kit que se va a utilizar, con la finalidad de comprender correctamente cual es el
procedimiento que se debe de realizar, pues este puede cambiar de uno a otro
kit. En este caso en especfico, nos dimos cuenta que los detalles por ms
pequeos que parezcan o insignificantes que los creamos, nos pueden llegar a
alterar por completo nuestros resultados y por consiguiente tambin dar un
diagnstico equivocado el cual afectara a nuestros pacientes.
Bibliografa
Anlisis de depuracin de creatinina. (10 de Agosto de 2009). Obtenido de
Clinica DAM: https://www.clinicadam.com/salud/5/003611.html
Diaz Portillo, J., Fernandez del Barrio , M., & Paredes Salido, S. (1997). Aspectos
bsicos de bioqumica clnica. Madrid: Daz de Santos.
Examen de creatinina en la sangre. (8 de Abril de 2013). Obtenido de
MedinePlus:
https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003475.htm
Valores renales. (19 de Marzo de 2012). Obtenido de Onmeda.es:
http://www.onmeda.es/exploracion_tratamiento/valores_rinonesdepuracion-de-creatinina-4446-4.html