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Propiedades

qumicas y
valoracin de
protenas

INTEGRANTES:
Ortiz Pineda Marcos
Ramirez Prez Luis Alfredo
Guerrero Pedraza Mara Jos

OBJETIVO
A travs de mtodos como la desnaturalizacin de protenas y precipitacin,
observar las propiedades fsicas y qumicas as como su reaccin con diferentes
reactivos.

ANTECEDENTES
PROTENAS
Las protenas son sustancias complejas formadas necesariamente por los
elementos: C, H, O, N, S y en algunos casos fsforo. Son de alto peso
molecular, forman dispersiones coloidales y estan compuestas por L-alfaaminocidos en enlace peptdico, arreglados en secuencia lineal que se arrolla
despus para constituir cuatro niveles estructurales.
Las protenas se encuentran presentes en todas las estructuras de la clula y
son las molculas ms activas en la vida celular.
Una de las funciones ms relevantes de las protenas es constituir la parte
fundamental de las enzimas, los principales catalizadores de las clulas.
As como las protenas forman parte de todas las estructuras celulares
participan tambin como agentes activos en todas las funciones de la clula y
del organismo.
Las protenas membranales se ocupan adems de servir como marcadores de
la individualidad celular, se ocupan de realizar los principales tipos de
transporte activo y pasivo de la clula: difusin facilitada, uniporte, simporte y
antiporte.
ENLACE PEPTDICO
El enlace peptdico se forma por la unin del grupo amino de un aminocido
con el carboxilo del otro, formndose un enlace tipo amida con la salida de una
molcula de agua. Es un enlace covalente muy fuerte, es el nico que resiste a
la desnaturalizacin.
Una de las caractersticas ms notables de las protenas es que son capaces de
organizarse en el espacio para formar un nmero casi infinito de
configuraciones, que pueden ser estudiadas asignndolas a los cuatro niveles
estructurales.
NIVELES DE ORGANIZACIN EN LA ESTRUCTURA DE LAS PROTENAS

Estructura primaria: Esta estructura consiste en la secuencia lineal de


aminocidos en la cadena y se halla estabilizada por el enlace peptdico
entre los aminocidos. La primaria es la nica estructura que se

encuentra codificada en los genes y de ella derivan los restantes niveles


estructurales. Es decir que dada la secuencia de aminocidos, la cadena
proteica toma las estructuras secundaria, terciaria y en su caso
cuaternaria que corresponde.
Estructura secundaria: Consiste en el plegamiento de la cadena de
aminocidos para adquirir la forma del alfa-hlice, las placas paralelas y
antiparalelas y el enredamiento libre, que son los tipos o motivos
principales de la estructura secundaria. El nico enlace presente que
estabiliza este nivel estructural es el puente de hidrgeno, un enlace
dbil que se establece entre los componentes del enlace peptdico, CO y
NH. Este enlace es susceptible de ruptura por cambios en la
temperatura, el pH, la agitacin mecnica y la concentracin de sales.
El alfa hlice es el motivo ms frecuente en la estructura secundaria y
est formado por el giro a la derecha de la cadena de suerte que todos
los CO y todos los NH se ligan entre s mediante los puentes de
hidrgeno.

CLASIFICACIN DE LAS PROTENAS


1.- Basada en la forma de las protenas:
a)

Protenas globulares (esferoprotenas): Estas protenas no


forman agregados. Las conformaciones principales del esqueleto
peptdico incluyen la hlice, las lminas y los giros. Estas protenas
tienen

funcin

metablica:

catlisis,

transporte,

regulacin,

proteccin Estas funciones requieren solubilidad en la sangre y en


otros medios acuosos de clulas y tejidos. Todas las protenas
globulares estn constituidas con un interior y un exterior definidos.
En soluciones acuosas, los aminocidos hidrofbicos estn usualmente
en el interior de la protena globular, mientras que los hidroflicos
estn en el exterior, interactuando con el agua. Ejemplos de estas
protenas son la Hemoglobina, las enzimas, etc.

b)

Protenas

fibrosas

(escleroprotenas): Estas protenas son insolubles en agua y forman


estructuras alargadas. Se agregan fuertemente formando fibras o
laminas. La mayor parte desempean un papel estructural y/o
mecnico. Tienden a formar estructuras de alta regularidad, lo cual
deriva a su vez de la alta regularidad de la estructura primaria.
Usualmente son ricas en aminocidos modificados. Ejemplos de estas
protenas son la queratina y el colgeno.
2.- Basada en la composicin:
a)

Protenas Simples: Formadas solamente por aminocidos que


forman cadenas peptdicas.

b)

Protenas conjugadas: Formadas por aminocidos y por un


compuesto no peptdico. En estas protenas, la porcin polipeptdica se
denomina apoprotena y la parte no proteica se denomina grupo
prosttico.

De acuerdo al tipo de grupo prosttico, las


protenas conjugados pueden clasificarse a
su vez en:
Nucleoprotenas
Glicoprotenas
Flavoprotenas
Hemoprotenas

3.-

De

acuerdo

a su

valor

nutricional,

las

protenas

pueden

clasificarse en:
a)

Completas: Protenas

que

contienen

todos

los

aminocidos

esenciales. Generalmente provienen de fuentes animales.


b)

Incompletas: Protenas que carecen de uno o ms de los amino


cidos esenciales. Generalmente son de origen vegetal.

PROTENAS PLASMTICAS
Las protenas plasmticas son un conjunto de molculas formadas por la unin
de diversos aminocidos que se encuentran en el plasma sanguneo. Son
interesantes de analizar porque en muchos casos su exceso o deficiencia es un
signo claro de enfermedad.
Se determinan por electroforesis en acetato de celulosa y/o geles de agarosa.
De esta forma, las protenas se van a separar en bandas en funcin de su
carga, su tamao y su forma, el potencial elctrico aplicado, la fuerza inica del
tampn y por supuesto la temperatura.
Las principales protenas plasmticas son:
Prealbmina y protena transportadora de retinol. Son protenas que solo
duran unas horas en circulacin antes de degradarse. Se encargan del
transporte de hormonas y en problemas nutricionales y hepticos su nivel
desciende rpidamente.

Albmina. Es el 50% del total de protenas plasmticas. Se sintetiza en hgado


y permanece en circulacin durante 19 das, hasta que se metaboliza en los
tejidos donde es fuente de aminocidos. Sus funciones ms importantes
guardan relacin con su tamao, que le mantiene dentro de la circulacin, y de
su carga elctrica, que le deja transportar hormonas, iones, frmacos, etc
Alfa 1 Glicoprotena acida y Alfa 1 antitripsina son las principales
componentes de las alfa globulinas. La primera modula la respuesta celular y la
segunda inhibe proteasas en la reaccin de fase aguda.
Alfa 2 Macroglobulina. Es una antiproteasa que destaca por su gran tamao.
Ceruloplasmina. Protena que contiene cobre y cumple una funcin doble:
oxidante del hierro y antioxidante general.
Tranferrina. Protena transportadora de hierro. En la anemia ferropnica su
concentracin se eleva.
Beta 2 Microglobulina. Protena de pequeo tamao que forma parte de los
antgenos de histocompatibilidad. Se eleva en sangre cuando aumenta la
celularidad y en orina, en los fallos renales tubulares no se filtra y se pierde.
Protena C Reactiva. Es una protena muy sensible a los procesos de
inflamacin que causan elevacin temprana e interna de su concentracin
sangunea.
Inmunoglobulinas. Conjunto de protenas de accin defensiva, que son
reactivas frente a los antgenos.

ENFERMEDADES RELACIONADAS CON LA DEFICIENCIA O EXCESO


DE PROTEINAS PLASMATICAS.
Artritis reumatoide: aumenta la albmina y tambin las PCR, las beta y las
alfa 2 aumentan ligeramente, el resultado total es una disminucin en el
nmero de protenas.
Anemia ferropnica: aumentan mucho las beta globulinas.
Sndrome nefrtico: disminucin brusca de protenas totales, sobre todo de
albumina, por un mal filtrado en riones.

Hepatopata crnica: disminuye mucho las albuminas y tambin las gamma


globulinas. El resto bajan un poco.
Reaccin de fase aguda: disminuye la albumina pero aumentan mucho la
alfa globulinas y las PCR

Materiales y reactivos

Clara de huevo
diluida 1:5

Reactivo de
Biuret A

Sue
ro

Nitrato de plata
al 5%

Reactivo de
Biuret B

Bicloruro de

Vasos de
precipitado
Etanol al
95%

Reactivo de
Esbach

Matraz
aforado
Tubos
de
ensayo y
gradilla

Pinzas para
tubo de
ensayo
Pipet
as

Sulfato de amonio: saturado, al 50%


y al 10%

Procedimientos
PRECIPITACIN DE PROTENAS CON ETANOL Y ACETONA

A 2ml de clara de huevo diluido


agragamos 2ml de alcohol al 95%.

PRECIPITACIN CON METALES PESADOS


Se preparo un tubo con 1ml de
clara de huevo diluido y se le
agregaron 5 gotas de AgNO3 al
5% y se mezclaron.

Se preparo un tubo con 1ml de


clara de huevo diluido y se le
agregaron 5 gotas de HgC12 al
5% y se mezclaron.

REACCION DE BIURET

A 2ml de clara de huevo al 0.5%


se le agrego 1ml de disolucin de
NaOH al 40%. Despus se agrego
gota a gota y agitando 1ml de
disolucin de CuSO4 al 1%.

A 2ml de grenetina al 0.5% se le


agrego 1ml de disolucin de
NaOH al 40%. Despus se agrego
gota a gota y agitando 1ml de
disolucin de CuSO4 al 1%.

PRECIPITACION DE GELATINA Y DISOLUCION DE CLARA DE HUEVO CON


REACTIVO DE ESBACH
A 3ml de clara de huevo se le agrego 5ml de reactivo de Esbach,
despus se calent para observar si haba algn cambio

A 3ml de gelatina al 0.5% se le agrego 5ml de reactivo de Esbach,


despus se calent para observar si haba algn cambio

PRECIPITACIN SALINA: SALTING OUT


Se pesaron 3 papeles filtro con los siguientes resultados

Despues se prepararon 3 tubos con las siguientes cantidades de sulfato de


amonio mezcaldo con suero y agua destilada

Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3

Sulfato de
amonio
100%
50%
10%

Suero

Agua

2.0ml
2.0ml
1.3ml

2.0ml
2.0ml
1.3ml

Tubo
1

Tubo
2

Tubo
3

Conclusin.
Durante esta prctica logramos diferenciar algunas propiedades de las
protenas como lo fue su precipitacin, la desnaturalizacin y reacciones de
color tpicas, y estas las probamos con las distintas reacciones que realizamos.
Adems tambin se logr realizar un buen trabajo en equipo lo cual se
confirma al apreciar que cada equipos realizo correctamente el mtodo que se
les asigno y nos apoybamos cuando se requera aunque fuera algo fuera de
los que nos toc realizar.

Bibliografa.
Bioqumica interactiva. (7 de Noviembre de
http://laguna.fmedic.unam.mx/~3dmolvis/proteina/

2008).

Obtenido

de

La Supergalaxia. (21 de Noviembre de 2009). Obtenido de Las protenas


plasmticas:
https://lasupergalaxia.wordpress.com/2009/11/21/las-proteinasplasmaticas/
Temas de Bioqumica. (15 de Julio de 2008). Obtenido de Clasificacin de las
protenas: https://temasdebioquimica.wordpress.com/2008/07/15/clasificacionde-las-proteinas/