UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E
HISTOPATOLOGICO
INSTRUMENTACION II
LIC. CRISTIAN SILVA
INFORME-PRACTICA #4

Nombre: Fernando Rea

Semestre: Segundo A
Fecha: 07/01/16

1.- TEMA: Contaje de glbulos rojos/blancos en la cmara de neubauer.

2.-OBJETIVO GENERAL:

Aprender el correcto llenado de la pipeta de thoma y determinar el nmero de

glbulos rojos o blancos en la muestra del paciente.

3.-OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Correlacionar la prctica con lo analizado en clases sobre procesos automatizados.

Realizar un correcto enfoque del microscopio para el contaje de clulas sanguneas

4.- CONTENIDO CIENTIFICO:

Cmara de neubauer: Se trata de una gruesa placa de cristal con forma de portaobjetos, de unos
30 x 70 mm y unos 4 mm de grosor. En una cmara simple, la porcin central, que es donde se
realiza el conteo, est dividida en 3 partes. En la parte central se encuentra grabada una retcula
cuadrangular. En el caso de cmaras dobles, que son las ms comunes, existen 2 zonas de conteo,
una superior y otra inferior al eje longitudinal de la cmara. La retcula completa mide 3 mm x 3
mm de lado. Subdividida a su vez en 9 cuadrados de 1mm de lado cada uno. En caso de recuento de
sangre, los cuadrados de las esquinas son los destinados al recuento de leucocitos. Al existir estos en
menor nmero que los hemates, se necesitan menos lneas de referencia para realizar el conteo. El
cuadrado central es el destinado al recuento de hemates y plaquetas. Se divide en 25 cuadrados
medianos de 0,2 mm de lado y cada uno de estos cuadros se subdivide a su vez en 16 cuadrados
pequeos. El cuadrado central est por tanto formado por 400 cuadrados pequeos.

Las pipetas cuentan glbulos o de dilucin de sangre son utilizadas para el anlisis de la
densidad de eritrocitos (glbulos rojos) y leucocitos (glbulos blancos) en laboratorios de
analtica clnica. Las pipetas de Thoma consisten en un tubo de vidrio de fondo blanco
graduado en una escala con 10 subdivisiones, y que presenta un bulbo central con una
pequea perla en su interior. Las pipetas adems, siguen un cdigo de color y as, las de
eritrocitos presentan graduacin y perla rojas mientras que en las de leucocitos la
graduacin es azul y la perla del bulbo, blanca. Cada pipeta viene equipada con su
correspondiente tubo de goma y boquilla de aspiracin (roja para la pipeta de eritrocitos y
blanca para la de leucocitos).

5.- MATERIALES Y REACTIVOS:

MATERIALES:

Pipetas de thoma.
Cmara de Neubauer con cubre cmaras.
Absorvedor.
Papel higinico.

Tubos de ensayo.

REACTIVOS:

Lquido de turk.
Lquido de hayem.
Reactivo de Drabkin.

MUESTRA:

Sangre con EDTA

EQUIPOS:

Microscopio.
Agitador de pipetas.
Espectrofotmetro.

6.- PROCEDIMIENTO:
1) Se coloca un cubreobjetos sobre la cmara de Neubauer, y se coloca en posicin horizontal
sobre la mesa, en un lugar donde nos sea cmodo pipetear.
2) Se ajusta la micropipeta para succionar 10 uL de lquido. Generalmente este ajuste se
realiza girando el botn del embolo para seleccionar el volumen deseado.
3) Se introduce la punta de micropipeta en la muestra
4) Se pulsa el pistn o embolo superior de la pipeta suavemente hasta que se siente como el
pistn llega al final de su recorrido.
5) Se saca la punta de la pipeta de la muestra, y siempre mantenindola en posicin vertical se
lleva hasta la cmara de Neubauer.
6) Se coloca la punta de la pipeta en el borde del cubreobjetos, en el extremo de la cmara de
Neubauer. Se trata de dejar que el lquido penetre entre la cmara y el cubreobjetos desde el
lateral, por capilaridad.
7) Se suelta el pistn suavemente mientras se supervisa que el lquido est entrando
correctamente y de forma uniforme en la cmara.
8) En caso de que aparezcan burbujas, el cubreobjetos se haya movido o algo no haya
salido bien, repetir la operacin

7.- TECNICA:

1) Colocar la cmara de Neubauer en la bandeja del microscopio. Si el microscopio dispone de

pinza de sujecin, fijar la cmara con ella.
2) Encender la luz del microscopio.
3) Enfocar el microscopio hasta que pueden verse ntidas las clulas mirando por el binocular.
4) Buscar el primer cuadro donde vaya a realizarse el recuento. En este ejemplo vamos a contar 5
cuadros grandes de una cmara de Neubauer Improved de 0,1mm de profundidad.
5) Realizar el recuento de clulas en el primer cuadro.

8.- GRFICOS Y RESULTADOS:

RESULTADOS: Conteo de Glbulos Blancos (Leucocitos).
#CC= 120
GB= #CCx10x20
4
GB= 120x10x20
4
GB= 6000 GB/Cm3
OBSERVACION: Se encuentra dentro de los valores normales.
GRAFICOS:
CAMARA DE NEUBAUER

9.CONCLUSIONES:

 Se puso correlacionar la prctica con lo analizado en clases sobre procesos

automatizados.
Se realiz un correcto enfoque del microscopio para poder proceder con el contaje
de clulas sanguneas.
Se identificaron las clulas sanguneas y se pudo realizar en contaje en la cmara de
neubauer.

10.- RECOMENDACIONES:
Se recomienda seguir los parmetros de bioseguridad ya que se est trabajando con
sangre.
El cuidado de la cmara de neubauer ya que es muy frgil.

11.- BIBLIOGRAFA:
PRIETO,SantiagoLaboratorio Clnico Mc Grawn-Hill 1993 Primera Edicin.
KRUPP, Marcus
Manual de Diagnostico Clnico y de Laboratorio
Editorial
Manual moderno Octava edicin
HENRY, Jhon Bernard Diagnstico y tratamientos clnicos por el laboratorio Editorial
Ediciones cientficas y tcnicas S.A. Novena Edisin

Firma del alumno ...

Sello y firma del docente.
Director de carrera..