Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Qumica Farmacutico Biolgica

Prctica No. 2 - Cromatografa

Laboratorio de Qumica Orgnica

Grupo: 2355

Autores:
Altamirano Chvez Braulio Alberto
Ruiz Padilla Eduardo

Profesor: Lorenzo Antonio Torres Barrientos

Resumen

Se separaron los componentes del chile guajillo empleando primero la

cromatografa en capa fina para determinar cul era el eluyente ms efectivo para
esto, y posteriormente se utiliz la cromatografa en columna, se recogieron los
eluatos y se analizaron por cromatografa en capa fina

Marco Terico

-Cromatografa
Es una tcnica de separacin de una mezcla de solutos, basndose en la diferente
velocidad con que se mueve cada uno de ellos a travs de un medio poroso,
arrastrados por un disolvente en movimiento. En todas las separaciones
cromatogrficas la muestra se desplaza con una fase mvil que puede ser un gas,
un lquido o un fluido supercrtico. Esta fase mvil se hace pasar a travs de una
fase estacionaria con la que es inmiscible y que se fija a una columna o a una
superficie slida. Las dos fases se eligen de tal forma que los componentes de la
muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase mvil y la fase estacionaria.
Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se
mueven lentamente con el flujo de la fase mvil, por el contrario, los componentes
que se unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez. Como
consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan
en

bandas

cuantitativamente.

zonas

discretas

que

pueden

analizarse

cualitativa

y/o

-Clasificacin de los Mtodos Cromatogrficos

Clasificacin

Mtodo

Fase

lquidos

reparto
Lquido slido

sobre un slido
Slido

Adsorcin
Intercambio Inico

Resina

Tipo de Equilibrio
General
Especfico
Estacionaria
Cromatografa de Lquido lquido o Lquido adsorbido Distribucin entre

Cromatografa de Gas lquido

gases

lquidos
Adsorcin
de Intercambio inico

intercambio inico
Lquido adsorbido Distribucin entre

sobre un slido
Gas slido
Slido
Gas fase unida Especies

un gas y un lquido
Adsorcin
Distribucin entre

qumicamente

el

orgnicas

lquido

la

enlazadas a una superficie

Cromatografa de

superficie slida
Especies

enlazada
Distribucin entre

fluidos

orgnicas

el

fluido

enlazadas a una supercrtico y la

superficie slida

superficie
enlazada

-Cromatografa en Capa Fina

En la cromatografa en capa fina, la fase estacionaria se fija sobre una placa plana
o a los intersticios de un papel, en este caso la fase mvil se desplaza a travs de
la fase estacionaria por capilaridad o por gravedad. Se utiliza una placa de vidrio,
aluminio ciertos plsticos u otros materiales inertes cubierta por un slo lado con
una capa delgada del adsorbente, comnmente, gel de slice. Las placas pueden
prepararse por inmersin, utilizando pares de portaobjetos de vidrio y una

suspensin de gel de slice en cloroformo, la tcnica de preparacin es sencilla

pero requiere cierta habilidad para que las placas tengan la calidad necesaria.
-Adsorbentes y Eluyentes
Los dos adsorbentes (fase estacionaria) ms ampliamente utilizados son el gel de
slice (

SiO 2

) y la almina (

Al 2 O3

), ambas de carcter polar. La almina

anhidra es el ms activo de los dos, es decir, es el que retiene con ms fuerza a

los compuestos, por ello se utiliza para separar compuestos relativamente
apolares (hidrocarburos, haluros de alquilo, teres, aldehdos y cetonas). El gel de
slice, por el contrario, se utiliza para separar sustancias ms polares (alcoholes,
aminas, cidos carboxlicos). El proceso de adsorcin se debe a interacciones
intermoleculares de tipo dipolodipolo o enlaces de hidrgeno entre el soluto y el
adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las sustancias a analizar y no
actuar como catalizador en reacciones de descomposicin. El orden de elucin de
un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase mvil o eluyente.
Un eluyente es un solvente que se usa en tcnicas de cromatografa para extraer
un compuesto que se quiere separar de otra fase.
-Eluyentes por Orden Creciente de Polaridad

Hexano
Tolueno
Cloruro de Metileno
Cloroformo
ter
Acetato de Etilo
Acetona
Propanol
Etanol
Metanol
Agua

Menos
polar

Ms
polar

En general, estos disolventes se caracterizan por tener bajos puntos de ebullicin

y viscosidad, lo que les permite moverse con rapidez. Raramente se emplea un
disolvente ms polar que el metanol.

-Cromatografa en Columna
Es el mtodo ms utilizado para la separacin y purificacin de compuestos
orgnicos, slidos o lquidos, a escala preparativa. La fase estacionaria
(adsorbente) se coloca en una columna de vidrio que termina en un
estrechamiento con una llave y se impregna con el eluyente (fase mvil). La
mezcla a separar se deposita en la parte superior de la columna y la fase mvil
atraviesa el sistema. Los compuestos se van eluyendo disueltos en el eluyente, se
van recogiendo ordenadamente en fracciones de pequeo volumen y se analizan
por cromatografa en capa fina. Los productos van saliendo de la columna segn
su polaridad, primero salen los menos polares que son los menos retenidos por el
adsorbente y los ltimos los ms polares por su mayor retencin en la fase
estacionaria. El adsorbente ms utilizado para este tipo de cromatografa es gel de
slice y en segundo lugar la almina. El tamao de partcula del adsorbente es
importante para la separacin y su eleccin depende en gran medida de que la
elucin de la cromatografa se realice por gravedad o a media presin (flash
chromatography). En una elucin a media presin se pueden emplear tamaos de
partcula ms pequeos, que permiten una separacin ms eficaz. Sin embargo,

en una elucin por gravedad el uso de tamaos de partcula pequeos impedira el

flujo del disolvente. Antes de realizar una separacin en cromatografa de columna
hay que elegir adecuadamente el disolvente haciendo ensayos en capa fina.

Fundamento Terico

Polaridad de los compuestos, fase mvil y fase estacionaria.

Objetivo

Identificar el nmero de componentes del chile guajillo a partir de la cromatografa

en capa fina y posteriormente utilizar la cromatografa en columna, usndola como
una tcnica de purificacin de los componentes.

Hiptesis

La cromatografa es una tcnica de separacin de una mezcla de solutos,

basndose en la diferente velocidad con que se mueve cada uno de ellos a travs
de un medio poroso, arrastrados por un disolvente en movimiento. Las distintas
tcnicas cromatogrficas se pueden dividir segn cmo est dispuesta la fase
estacionaria, puede ser por cromatografa en capa fina o cromatografa en
columna. Antes de utilizar la cromatografa en columna se hace uso de la
cromatografa en capa fina para hacer ensayos y poder elegir el disolvente
adecuado. En base a esto se utilizar la cromatografa en capa fina para encontrar
el eluyente ms apto para la cromatografa en columna, el cual ser ms afn a la
mezcla problema y mostrar una mayor ascendencia en los componentes.
Posteriormente en la cromatografa en columna se ver la separacin los
componentes del chile guajillo.

Variable Dependiente

Componentes del chile guajillo

Variable Independiente

Eluyente

Parte Experimental

Material
Frascos de vidrio
Portaobjetos
Papel filtro
Soporte universal
Pinzas para bureta
Bureta
Matraz Erlenmeyer
Embudo
Varilla de agitacin
Tubos de ensaye
Chile guajillo

Reactivos
Hexano
Metanol
Acetato de Etilo
Cloruro de Metileno
Acetona
Etanol
Cloroformo
Tricloroetano
Gel de Slice