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Extracin del ADN (cido Desoxirribonucleico) genmico y
electroferesis en gel
Informacin gentica. Genoma. Tcnicas. Separacin de molculas
Medicina / VARIOS

Extracin del ADN (cido Desoxirribonucleico) genmico y


electroferesis en gel
Ficha resumen del documento
Extracin del ADN (cido Desoxirribonucleico) genmico y
electroferesis en gel
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Extracin del ADN (cido Desoxirribonucleico) genmico y
electroferesis en gel
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PRACTICA N 3
EXTRACION DEL DNA GENOMICO Y ELECTROFORESIS EN GEL
RESUMEN
El proceso de extraccin del ADN geonmico sigue ciertas pautas para su
correcta purificacin que son muy diferentes a los empleados en la purificacin
de protenas, lo que refleja las diferencias bsicas en la estructura de estos dos
tipos de macromolculas. El primer paso en la purificacin del ADN por lo
general consiste en homogeneizar las clulas y asla los ncleos de los cuales
se extrae el ADN. El medio de extraccin ordinario contiene un detergente
(SDS); a continuaciones le agrega solucin de te para resuspender el ADN,
luego los cidos nucleicos se precipitan aadiendo etanol .Para concluir el
anlisis de la extraccin del ADN hay que resaltar que e n este proceso ocurre
una lisis celular lo cual significa que el ADN queda libre por consiguiente hay
que protegerlo de las enzimas porque estas podran degradarlo .

La electroforesis es el movimiento de partculas elctricamente cargadas a


travs de un gel de agarosa como resultado de un campo elctrico formado
entre unos electrodos sumergidos en el medio , este procedimiento permite la
separacin de molculas como consecuencia de su diferente movilidad en un
campo elctrico .

INTRODUCCION
El cido desoxiribonucleico o ADN (DNA) es la molcula que guarda el cdigo
gentico de todas las clulas. Sin importar que el organismo sea multicelular o
unicelular, eucariota o procariota, todos tienen el DNA como vehculo de su
cdigo gentico.
Durante el laboratorio de hoy estaremos utilizando un mtodo rpido para aislar
DNA a partir de tejidos animales. Este se llama "DNeasy Tissue Kit" y es
producido por QIAGEN. Este usa tecnologa avanzada de membranas de
silicato para purificar rpidamente DNA celular total sin usar extracciones
orgnicas ni precipitacin con etanol.
El primer paso en la purificacin del DNA consiste en homogeneizar las clulas
y distar los ncleos de los cuales se extrae el DNA. El medio de extraccin de
ordinario contiene un detergente, como el SDS, que sirve para lisar los ncleos
y liberar el DNA, hecho que aumenta notablemente la viscosidad de la solucin.
El detergente inhibe tambin cualquier actividad nucleasa en la preparacin.
El objetivo de los pasos de purificacin es separar el DNA de materiales
contaminantes, como RNA y protenas.
La desproteinizacin se logra en general agitando la mezcla con un volumen de
fenol. El fenol (o alternativamente cloroformo) es un desnaturalizador activo de
protenas que suprime la solubilidad de las protenas en la preparacin y las
precipita. Puesto que el fenol y la solucin salina amortiguadora no se mezclan,
solo se requiere centrifugar la suspensin para separar las bases,
permaneciendo el DNA (y el RNA) en la solucin dentro de la fase acuosa de
arriba y la protena presente como un precipitado concentrado en la interfase.
La fase acuosa se retira del tubo y se somete a ciclos repetidos de agitacin
con fenol y centrifugacin hasta agotar toda la protena de la solucin.
Aadiendo etanol fro. El etanol fro forma una capa arriba de la solucin
acuosa del DNA, el cual, se enrolla sobre una varilla de vidrio conforme sale de
la solucin. En la interfase el RNA sale de la solucin salina.
En contraste, el RNA sale de la solucin como precipitados que se asienta en el
fondo del vaso. Luego de este primer paso de purificacin, se disuelve el DNA y
se trata con ribonucleasa mediante tratamiento con una proteasa. Enseguida
se quita la proteasa por desproteinizacin con fenol y se vuelve a precipitar el
DNA.

La electroforesis es una de las tcnicas mas empleada en bioqumica y biologa


molecular, usada para separar y a veces purificar macromolculas,
especialmente protenas y cidos nucleicos, que difieren en tamao, carga o
conformacin. Cuando las molculas cargadas son sometidas a un campo
elctrico, migran hacia el polo positivo (nodo) como es el caso de los cidos
nucleicos o negativo (ctodo) de acuerdo a su cargas.
Los fragmentos de ADN lineal migran a travs del gel de agarosa con una
movilidad inversamente proporcional al log10 de su masa molecular,
situndose los ms pequeos ms cerca del polo positivo, adoptando una
apariencia similar a un cdigo de barras. Cada barra contiene un fragmento de
ADN de un tamao determinado ms o menos cada 23 pares de bases. Entre
los diferentes factores que afectan la movilidad de los fragmentos de ADN en el
gel de agarosa que pueden optimizarse para la separacin de los fragmentos
est la concentracin de agarosa.
La mayora de los estudios de electroforesis son para comparar una secuencia
conocida como el ADN plsmido con una no conocida; El ADN plasmidico
presenta tres lneas, circular abierta - lineal - circular covalente cerrado.
MATERIALES

Centrifuga

Eppendorf 1.5 ml

Tubos falcon de 12.5 ml

Micropipetas y puntas desechables

Pipetas de vidrio

Colador

Mortero y pistilo

Hgado

Cebada

Cloruro de sodio

Solucin de etanol

Isopropanol

Detergente SDS

Solucin de lisis celular

Agua destilada

Vortex

Hielo

Vaso de precipitado

Tubos eppendor

Incubadora

Agua destilada

Agarosa

RNAsa

Buffer TAE

Marcador de membrana.

Cmara de electroforesis

Bromuro de etidio
RPOCEDIMIENTO

HIGADO

Picar el hgado y Triturar el hgado con sal, solucin de lisis y SDS hasta
que la muestra quede liquida.

Filtrar y llevar a tubas falcon.

Centrifugar por 20 minutos a 500 rpm.

Tomar el sobrenadante y agregar 20 ml de alcohol isopropanol el cual


precipita el DNA.

Centrifugar por 20 minutos a 500 rpm.

Eliminar el sobrenadante y tomar el pele a este agregar 1 ml de solucin


de te y mezclar en vortex sino aparece un halo que indica la presencia
del DNA.

Agregar 3 ml de etanol absoluto.

Almacenar a 4C.

Centrifugar por 5 minutos a 500rpm, y desechar el sobrenadante.

Lavar el pele con etanol al 70%, por 5 minutos a 500 rpm.

Dejar el tubo destapado para que se evapore el etanol, luego


resuspender en solucin de TE 200l.

Tomar 100l de la resuspensin y llevarlos a un eppendor.

Agregar 20l de RNAsa, y llevar a incubadora por 30 minutos a 37C.

Agregar el buffer de carga (1l azul de bromofenol mas 1l glicerol).

Llevar a electroforesis a 120v.

CEBADA

Macere las semillas de cebada, tamice el macerado eliminando residuos


de las conchas de las semillas y siga el procedimiento anterior.

El gel de agarosa que se utilizo para la electroforesis se preparo de la siguiente


forma:

Preparar una solucin al 0.8% de agarosa (4g de agarosa, 450ml de


agua destilada y 50ml de buffer TAE) con un volumen final de 500ml a
una temperatura de 400C.

Tambin se preparo la solucin stop que contiene el fago hind III, y la solucin
del DNA plasmidico 12l.
RESULTADOS
1.

La solucin del DNA obtenido se almacena a 4C para posteriores estudios.


2.

Al observar la electroforesis en gel de agarosa despus de 2 horas, solo se


desplazo la muestra numero uno y el AND plasmidico.
ANALISIS DE RESULTADOS
Se debe tener en cuenta para posteriores extracciones de ADN que es
importante utilizar todos los materiales completamente esterilizados, porque
puede alterar los anlisis de la muestra.
Debido a que se mantuvo la muestra a una temperatura adecuada (4C), se
evito que el ADN desnaturalizara.
Gracias al rpido proceso de maceracin impedimos que las enzimas
destruyeran el ADN.
El procedimiento de extraccin del ADN no se puede interrumpir ni prolongar
pues el ADN con el tiempo se va deteriorando.
Gracias a la tcnica de electroforesis debamos evidenciar los fragmentos de
ADN
El bromuro de etidio es el reactivo fundamental para la deteccin por tincin de
fluorescencia y observacin bajo luz ultravioleta .
La muestra de nosotros (numero 3) no evidencio desplazamiento en el gel de
agarosa, posiblemente porque:
En el procesamiento del hgado y de la cebada se realizo un excesivo
rompimiento del ADN.
Al agregar inicialmente la solucin de lisis no se logro una desintegracin total
de las clulas.
CUESTIONARIO

Cules son las funciones del NaCl, etanol absoluto y el detergente?

Con el NaCl conseguimos producir el estallido de los ncleos para que queden
libres las fibras de cromatina.
El etanol se utiliza para precipitar la solucin del ADN.
La accin de este detergente es formar un complejo con las protenas y
separarlas del ADN. As nos quedar el ADN libre de las protenas que tiene
asociadas, e inhibe cualquier actividad nucleasa presente en la preparacin.

Por qu se lava con etanol?

Porque el etanol siempre forma una capa arriba de la solucin acuosa.

Que otras tcnicas son empleadas en biologa molecular para la


extraccin del ADN?

- Separacin del DNA mediante electroforesis en gel.


- Tcnica de extraccin de DNA de leucocitos (tcnica de miller)
- Mtodo wizard (promega, usa)
- PCR
- Ultra centrifugacin
- Espectrofotometra
- Tcnica de sedimentacin de cidos nucleicos.
BIBLIOGRAFIA

Gerald karp. Biologa celular y molecular. ED McGrawHill 1998. Pg.


727-730.

Biologa Molecular y Herencia. Robert A. Wallace, Jack L. King, Gerald


P. Sanders., 1a edicin. Editorial

Trillas. Mxico 1991: pgina 97, 98.

http://pdf.rincondelvago.com/biologia-molecular_1.html

El Rincn del Vago, en Salamanca desde 1998 - Condiciones de Uso Contacto

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El Salvador

Paraguay

Nicaragua

Honduras

CubaExtraccin de ADN en clulas animales:


El objetivo del presente trabajo es la extraccin de ADN presente en
las clulas del hgadode pollo. Para ello debemos provocar la ruptura
de los tejidos, el estallido de los ncleos y laseparacin de las
protenas asociadas al ADN.Los diferentes pasos de esta tcnica van
cubriendo estas etapas.

anterior
siguiente
(laarena favorece la ruptura de membranas) Agregar suavemente y
deslizando por las paredes del vaso de precipitado eletanol helado. Se
formar un sistema bifsico y en la interfase quedansuspendidas las
fibras de ADN, simulando esos fideos de sopa llamadoscabellos de
ngel

OBSERVACIN DEL ADN

FUNDAMENTO TERICO
El ADN es una de las partes fundamentales de los cromosomas, son
estructuras constituidas por dos pequeos filamentos o brazos, que
pueden ser iguales o desiguales, estn unidos por un punto comn
llamado Centrmero; varan en forma y tamao, pueden verse
fcilmente al momento de la divisin celular por medio de un
microscopio.
Los cromosomas qumicamente estn formados por protenas y por

el cido Desoxiribonucleico o ADN.


Estructura del ADN
El ADN est formado por unidades llamadas nucletidos, cada una
de las cuales tiene tres sustancias: el cido fosfrico, un azcar de
cinco carbonos llamada pentosa y una base nitrogenada.
El cido fosfrico forma el grupo fosfato; la base nitrogenada es de
cuatro clases: adenina (A), guanina (G), citocina (C) y timina (T).
Segn los descubridores del ADN, James Watson y Francis Crick, el
ADN est formado por una doble cadena de nucletidos que forman
una especie de doble hlice semejante a una escalera en espiral; a
los lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azcar y en
los peldaos dos bases nitrogenadas.
Funciones y Propiedades del ADN
a) El ADN controla la actividad de la clula.
b) Es el que lleva la informacin gentica de la clula, ya que las
unidades de ADN, llamadas genes, son las responsables de las
caractersticas estructurales y de la transmisin de estas
caractersticas de una clula a otra en la divisin celular.
Los genes se localizan a lo largo del cromosoma.
c) El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la divisin celular
para formar dos molculas idnticas, para lo cual necesita que en el
ncleo existan nucletidos, energa y enzimas.
OBJETIVO
El objetivo principal de este experimento es el de poder observar sin
ayuda de ningn instrumento ptico (microscopio) el ADN, utilizando
nicamente materiales caseros cuyo costo no sea alto.

MATERIALES
- Hgado de pollo
- Detergente lquido
- Enzimas (suavizador de carne en polvo o jugo de papaya
- Alcohol blanco
- Licuadora
- Recipiente de vidrio o plstico
- Vaso de precipitados o cualquier vaso con graduaciones (para
bebs)
PROCEDIMIENTO
1.- Debemos cortar en pequeos trozos el hgado de pollo, luego lo
colocamos en la licuadora y vertemos suficiente agua como para
que, al cabo de 10 segundos de licuar, tengamos la consistencia de
una crema.
Luego vertemos el licuado en un recipiente que tenga graduaciones
(vaso de precipitados) por medio de un colador para separar algunas
partes que no se hayan licuado lo suficiente.
Medimos el licuado en el recipiente y aadimos de detergente
lquido del total del licuado.
Revolvemos suavemente con ayuda de una cuchara.
2.- Aadimos 1 cuchara de Enzimas y revolvemos con cuidado y
lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con demasiada
rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de romper el ADN,
con lo que no podramos observarlo.

3.- Vertemos la mezcla en un recipiente alto y delgado hasta la mitad.


Ladeamos el recipiente y vertemos alcohol con mucho cuidado,
evitando que se mezcle con el lquido de abajo.
Luego de unos minutos se podr observar unos filamentos blancos
dentro del alcohol y que se elevan de la mezcla de hgado,
detergente y enzimas. Estamos observando el ADN!
OBSERVACIONES
Se ha usado una licuadora para separar las clulas unas de otras, en
esto ayuda tambin el detergente.
Las emzimas destruyen a las clulas y hacen posible que se pueda
ver el ADN que contienen.
Bibliografa
Vargas Palomeque, Miguel; Gonzales Mendoza, Rossemary;
Suplemento Tcnico Cientfico, editado por El Diario, La Paz, Bolivia,
1993.
Bolvar S, Rubn Daro; Gmez R., Miguel A., Biologa Integrada,
Editorial Voluntad S.A., Bogot, Colombia, 1989.

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Ms Experimentos

Cmo observar el ADN en un experimento en casa?

Oscar Rodrguez Snchez

oscar@ccg.unam.mx

Medimos el licuado en el recipiente y aadimos 1/4 de detergente


lquido del total del licuado. Revolvemos suavemente con ayuda
de una cuchara.

Platicando con Adrin y Sofa, sobre su parecido familiar en


el rbol genealgico que les toc, era inevitable hablar de
genes y acerca de que las clulas son la unidad de la vida y
que dentro de ellas se encuentran los ncleos que contienen
la informacin gentica, se me quedaron viendo con cara de
nos ests cuenteando pap y luego, luego preguntaron - Y
cmo puedes ver algo tan chiquito?- , pues bien,
regresando la pregunta les dije qu pasa cuando juntas una
gran cantidad de algo pequeo?, - pues se hace grande!-.
Exactamente pequeos, vamos a hacer un experimento en
casa, donde voy a juntar primero muchas clulas que forman
un rgano, como es el caso de un hgado de pollo. Asistieron
a la pollera a verificar que del cuerpo del pollo saliera el
rgano y luegosi ustedes quieren hacer la prueba, sigan
las instrucciones que vienen abajo y se podrn divertir un
muy buen rato!

El detergente, son molculas que destruyen las membranas


celulares que rodean a todas las clulas, ya que tienen un extremo
hidrofbico (como el de las grasas que no se mezclan con el agua)
y otro extremo hidroflico, que si se mezcla con el agua. El
detergente, entonces, se intercala en estas membranas e inicia lo
que se llama la lisis o ruptura celular, disolviendo las grasas
presentes en la clula...
2.- Aadimos 1 cuchara de ablandador de carnes y revolvemos
con cuidado y lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con
demasiada rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de
romper el ADN, con lo que no podramos observarlo.

Los ablandadores de carne comerciales, normalmente se trata de


proteasas (enzimas hidrolticas, que rompen protenas) liofilizadas
(que carecen de agua, deshidratadas) que en general se obtienen
de las semillas de la papaya (de ah que cuando queremos ayudar
a nuestro aparato digestivo, se recomiende el uso de jugo de
El cido desoxirribonuclico (ADN) es la molcula portadora papaya las semillas contienen mucha ms concentracin de
de la informacin gentica, en ella se encuentra codificado la enzimas, que el resto del fruto, de ah ese sabor amargo que
informacin de nuestros rasgos fsicos, capacidades para
agarra la lengua-); cuando agregamos estas enzimas, al contacto
poder digerir o no un alimento, as como algunas
con el agua se activan y empiezan a destruir todas las protenas
caractersticas para padecer o no cierto tipo de
que contiene el hgado de pollo.
enfermedades.
3.- Vertemos la mezcla en un recipiente alto y delgado hasta la
El ADN est formado por unidades llamadas nucletidos,
mitad. Ladeamos el recipiente y vertemos alcohol con mucho
cada una de las cuales tiene tres sustancias: el cido
cuidado, evitando que se mezcle con el lquido de abajo. Luego de
fosfrico, un azcar de cinco carbonos llamada desoxirribosa unos minutos se podr observar unos filamentos blancos dentro
y una base nitrogenada. El cido fosfrico forma el grupo
del alcohol y que se elevan de la mezcla de hgado, detergente y
fosfato; la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A), enzimas. Estamos observando el ADN!.
guanina (G), citosina (C) y timina (T). El ADN est formado
por una doble cadena de nucletidos que forman una especie Aqu el alcohol, est deshidratando las molculas de DNA
de doble hlice semejante a una escalera en espiral; a los
(quitndoles el agua intramolecular), las cuales por la gran
lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azcar cantidad de ADN existente, forman estos hilos blancos, que son
y en los peldaos dos bases nitrogenadas. Siempre A-T y G- muchsimas molculas de ADN .
C.
El ADN controla la actividad de la clula ya que lleva la
informacin gentica en las unidades de ADN, llamadas
genes, son las responsables de las caractersticas
estructurales y de la transmisin de estas caractersticas de
una clula a otra en la divisin celular. Los genes se localizan
a lo largo del cromosoma. Y en organismos multicelulares
como el pollo, los cromosomas se encuentran empaquetados
dentro del ncleo celular.
OBJETIVO.- El objetivo principal de este experimento es el
de poder observar el ADN, utilizando nicamente materiales

Despus de realizar este experimento, es conveniente que ahora


se ensayen modificaciones a la receta y observar que sucede,
as como intentar utilizando este mtodo, averiguar en otros
rganos de pollo el resultado.
Despus de este experimento, la siguiente pregunta es que hace
que una persona sea hombre o mujer; para lo cul, es necesario
explicar que los espermatozoides son los responsable del sexo en
los hijos, ya que todos los vulos son femeninos; es decir tienen el
cromosoma sexual X ; si un vulo es fecundado por un
espermatozoide masculino , es decir con el cromosoma Y ,
formar una clula XY , que resulta en un hombre; pero si es un

Diseo
Jos B. Esquivel Rojas

por que es mas facil de triturar y presenta menor cantidad de tejidos,


ademas contiene una gran cantidad de mitocondrias por lo que se hallan
mas cantidades de ADN
Fuente(s):
laboratorio de genetica medica unah

EL MARAVILLOSO MUNDO DE LA CIENCIA


Un testimonio de amor y compromiso hacia la ciencia que gracias a mis mayores
voy potencindome cada da, tomando conciencia de contribuir a la sociedad
cada vez nas y nejor
S A T U R D A Y, S E P T E M B E R 2 7 , 2 0 0 8

Informe de Investigacin Experimental

COMPARACIN DE DIFERENTES FORMAS


EXTRACCION DEL ADN EN ANIMALES Y
PLANTAS
Por: Mario Isaac Ros Gamboa
I.E. PNP Tupac Amaru
Av. Los Incas S/N, El Cercado Lima 1

mario_isaac96@hotmail.com

http://wwwme.org/web.php?id=32753&pag=19704

Resumen
La presente investigacin se describe el procedimiento para una tcnica casera con
sus diversas concentraciones moleculares, con el fin de establecer la concentracin
estndar para la extraccin del ADN, la cual se realiz teniendo como muestras
porciones del hgado del pollo y cebolla. Con el marco terico, en relacin al ADN, y
con la experiencia realizada se ha llegado a la conclusin de cual es la concentracin
estndar para conseguir la cromatina, de ah podemos inferir apoyado por el marco
terico que lo que sigue es el ADN.
Palabras claves: Membrana celular y nuclear, cromatina, ADN, protenas, tcnica
casera y concentracin estndar.
----------------------------------------------------------------------------------------------1. Introduccin
El ADN es considerado la macromolcula de la vida, en el que se encuentra guardado
la informacin gentica de los seres vivos, en ese sentido el ADN no solo almacena la
informacin gentica sino la expresa. Esta base conceptual nos da idea de la
importancia que tiene el estudio y la observacin del ADN y que en este caso lo

hacemos a travs de una experiencia casera, ayudndonos con el procedimiento de


extraer ADN de unas muestras biolgicas.
Para el presente proyecto hemos utilizado hgado de pollo por ser mas prctico para
trabajar, tambin lo hemos hecho con cebolla pero es un poco complicado por tener
ella pared celular.

2. Planteamiento del problema a investigar:


2.1 problema de la investigacin.
En las actividades de aula concerniente a los cursos de ciencias existe el problema
que cuando se hablan de temas aparentemente tan complejos como el ADN, los
estudiantes suelen considerarlo muy complicado y abstracto, pero como hemos visto
en la bibliografa toda la biologa es explicable a partir del estudio del ADN, de una
simple fisiologa o estructura de vida, hasta una enfermedad. Esta situacin
problemtica se sintetiza en que por un lado hay necesidad de que el ADN sea
entendido y por el otro existe cierta complejidad terica y experimental para lograr
que este concepto llegue a las capas ms amplias de la sociedad. Esta situacin nos
llev a sugerir experiencias sencillas que de alguna manera infieran el concepto de
ADN a partir de evidencias cientficas experimentales.
2.2 objetivos de la investigacin.
Objetivo General:
Mostrar la presencia de ADN (indirectamente) en los seres vivos.
Establecer la concentracin estndar de la tcnica casera.
Objetivos especficos
- Destacar la importancia del estudio del ADN a partir de experiencias caseras.
- Mostrar que a partir de fibras conseguidas podemos obtener ADN haciendo una
inferencia de conceptos.
- Establecer la concentracin estndar a travs de varias pruebas en algunos animales
y plantas.
2.3 justificacin de la investigacin.
La investigacin realizada servira mucho para socializar el concepto, que en
perspectiva y una vez aprendido por la poblacin, puedan entender las distintas
enfermedades congnitas y de esa manera se pueda elevar la calidad de vida,
tomando medidas preventivas.

3. Importancia:
Poblacin beneficiara: Los estudiantes y la comunidad porque a travs de la
comunicacin cientfica, en concordancia con las prioridades y planes de desarrollo
locales, regionales y nacionales:
Programa de Popularizacin y divulgacin del conocimiento cientfico.

4. Breve marco terico:


4.1 Antecedentes del problema
Sin duda estamos en el estadio de la segunda revolucin ms grande de la biologa; el
descubrimiento de la clula represent ese primer momento, el descubrimiento del
ADN represent ese segundo momento, y eso de alguna manera lo estamos viendo en
el llamado genoma humano, alimentacin transgnica, clonacin teraputica,
eventos cientficos sociales que est cambiando la visin del mundo.
El presente proyecto tiene que ver con un procedimiento que nos permite inferir la
existencia de esta biomolcula en tal sentido recogemos la experiencia que sobre el
tema se ha desarrollado acerca de la extraccin del ADN.
Desde el marco terico no ha sido un concepto fcil de construir, ya Erwin R.
Schrdinger en una publicacin de su libro que lleva por ttulo Qu es la vida?
Basado en principios de la mecnica estadstica postula que dicho evento de la vida
debe ser un cuasicristal. Posteriormente Watson y Crick este ltimo fsico que
trabajaba en rayos X descubre ese cuasicristal a travs de un patrn que se vera en
las placas, es ah donde sugiri la idea de una doble hlice enrollada (antes ya se
haba sugerido la idea una hlice), pero adems se entenda que esa doble hlice
deba tener un giro a la izquierda lo que es caracterstico del ADN en la tierra.
Las caractersticas sustanciales del ADN entre otras es la capacidad de
autoreplicarse, eso quiere decir que puede copiarse a si misma, sin embargo, de esos
procesos que puede ser tan exactos, en algn momento, y en forma aleatoria se da
biolgicamente una mutacin, eso quiere decir, pequeos cambios. La otra
caracterstica resaltante es que el ADN es una estructura estable, de no ser as, las
transformaciones sern dramticas y no habra estabilidad ni siquiera relativa en los
seres vivos.
4.2 definicin de trminos bsicos
ADN.- Estructura cuasicristalina que codifica la informacin acerca de la constitucin
funcional de la vida en la tierra.
Cromatina.- es el conjunto de ADN, histonas y protenas no histnicas que se
encuentra en el ncleo de las clulas eucariotas y que constituye el cromosoma
eucaritico.

4.3 formulacin de hiptesis.


Los filamentos que se extraen a partir de la descompactacin del ncleo por la
experiencia casera es la cromatina.

5. Materiales y mtodos
5.1 Descripcin de los materiales y mtodos
- Hgado de pollo (Gallus gallus, sp.)
- Cebolla (Allium cepa, sp)
- Varilla de vidrio
- Mortero
- Vasos de precipitado
- Pipeta
- Probeta
- Alcohol de 96%
- Cloruro de sodio (ClNa)
- Zumo de pia (Ananas comosus, sp)
- Trozo de tela
- Shampoo HS, para cabello normal
5.2 Procedimiento
1. Triturar medio hgado de pollo en un mortero con el fin de romper las membranas
y queden los ncleos sueltos.
2. Licuar la cebolla para romper la pared celular.
3. Aadir al triturado 50 cc de agua, remover hasta hacer una especie de papilla o
pur.
4. Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan
quedado por romper.
5. Medir el resultado con una probeta para calcular su volumen.
6. Aadir al filtrado un volumen igual de cloruro de sodio 2M, con esto debemos
conseguir el estallido de los ncleos.
7. A continuacin echamos 1 cc de detergente lquido. La accin del detergente es
formar un complejo con las protenas y separarlas del ADN.
8. Aadir con una pipeta de 50cc de alcohol de 96, esto se hizo de forma que el
alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas.
9. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma direccin. Sobre la
varilla se vana adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista que es el
resultado de la agrupacin de muchas fibras de ADN.

5.3 Modificaciones realizadas


Las modificaciones por un lado tienen que ver con los insumos, por ejemplo en vez
de ablandador de carne o enzimas, se usa pia, en vez de cloruro de sodio, se usa
sal. En la experimentacin se hace un contraste entre conseguir ADN de la cebolla y
conseguirlo del hgado de pollo.
Materiales
para la extraccin de la Cebolla
Materiales
para la extraccin del Hgado de Pollo
Una cebolla grande fresca
Detergente (champ)
Cloruro de Sodio (sal)
Agua destilada
Zumo de pia (enzima)
Alcohol de 96 (muy fro)
Vaso de precipitado (muy fro)
Pipeta
Probeta
Trozo de tela (filtro)
Varilla de cristal
Cuchillo
Licuadora
Hgado de pollo fresco
Detergente (champ)
Cloruro de Sodio (sal)
Agua destilada
Zumo de pia
Alcohol 96 muy fro
Vaso de precipitado (muy fro)
Pipeta
Probeta
Trozo de tela (filtro)
Varilla de cristal
Mortero

6. Resultados
Se realiz el tamiz dos veces para separar los tejidos de las clulas del hgado de
pollo, una vez conseguido separar las clulas se tena que hacer estallar que se hizo
con la sal (cloruro de sodio) tanto la membrana celular como la nuclear.
Se echa una pequea cantidad de detergente con el fin de capturar las grasas y las
protenas. La enzima (sumo de pia) descompacta los filamentos, liberando una
cadena. Y el alcohol forma una interfase en la cual el filamento se libera.

7. Discusin:
Decimos en esta parte que la mayora de la bibliografa y documentos flmicos
establecen en primer lugar que se trata de la extraccin del ADN
(http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/). Pues bien, si bien
es cierto que logramos descompactar el ncleo logrando filamentos, lo cierto es que
estas en realidad son las cromatinas o hebras de cromatina, Que es en fin de cuentas
el conjunto de ADN, histonas y protenas. Entonces podemos inferir conceptualmente
que es el ADN. No olvidemos que para extraer debers ADN se utilizan tcnicas muy
complejas como la ultracentrifugacin, electroforesis, espectrofotometra entre
otros.

8. Conclusiones
Del experimento podemos decir que:
1. Al descompactar el ncleo liberamos los filamentos que en realidad son las
cromatinas.
2. Haciendo una inferencia conceptual podemos concluir que en ese material subyace
el ADN.
9. Anexos

10. Referencias Bibliogrficas


FERNANDEZ ESTEBAN, Miguel Angel; Genoma, manual del docente, Ciencia
tecnologa y ambiente; Editorial Vicens Vives, Ministerio de Educacin del Per; 2005,
Lima Per; 253 pp

REISSIG, Jos Luis, La gentica y la revolucin en las ciencias biolgicas, Serie


Monografas de la OEA Nro 4, 1983, Edit. Departamento de Asunto cientficos OEA,
Washington DC
Videos:
Manual de Criminalstica de la Polica Nacional del Per, Direccin de Criminalstica
Kit del Cdigo Gentico, Ministerio de Educacin
Documental, El Poder de los Genes, Discovery

Rutas De Internet:
http://ciencia-y-educacion.blogspot.com/
http://pdf.rincondelvago.com/biologia-molecular_1.html
http://www.cienciafacil.com/experimentoscapitulo1.pdf
http://youtube.com/watch?v=yZ_IPafioSU&feature=related
http://youtube.com/watch?v=7jnHtKYI0ng&feature=related
http://youtube.com/watch?v=oJFjk4ArMrM&feature=related
http://youtube.com/watch?v=bKKduKtUfwg&feature=related
http://youtube.com/watch?v=NeoJiv_XiZs&feature=related
http://www.cienciafacil.com/adn.html
11. Agradecimientos:
A mis padres por su importante apoyo espiritual y material, a mis profesores por
dotarme de slidos conocimientos y a mi colegio que me da la oportunidad de poder
expresar mis ideas.
Al Profesor M. en C. Wilder Chicana Nuncebay, Responsable del Planetario Luis E. Erro
de Mxico, por su apoyo en la construccin del marco terico
Al profesor Lic. Mario Posso Rojas de la Universidad Nacional Agraria, por su apoyo en
la elaboracin del paper.

posted by Mario Ros Quispe @ 4:38 AM 0 Comments

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