NAMA

: BELLA AMALIA PUTRI

NAMA MEDIS : PANHYPOPITUITARY
NAMA ATOM : ENDOCRINOLOGY
NOMOR ABSEN
: 17

NO.ATOM :
05

Metabolic Profiling Provides a System Understanding of

Hypothyroidism in Rats and Its Application
Abstract
Hypothyroidism is a chronic condition of endocrine disorder and its precise molecular
mechanism remains obscure. In spite of certain efficacy of thyroid hormone replacement
therapy in treating hypothyroidism, it often results in other side effects because of its overreplacement, so it is still urgent to discover new modes of treatment for hypothyroidism. Sini
decoction (SND) is a well-known formula of Traditional Chinese Medicine (TCM) and is
considered as efficient agents against hypothyroidism. However, its holistic effect assessment
and mechanistic understanding are still lacking due to its complex components.
A urinary metabonomic method based on ultra performance liquid chromatography
coupled to mass spectrometry was employed to explore global metabolic characters of
hypothyroidism. Three typical hypothyroidism models (methimazole-, propylthiouracil- and
thyroidectomy-induced hypothyroidism) were applied to elucidate the molecular mechanism
of hypothyroidism. 17, 21, 19 potential biomarkers were identified with these three
hypothyroidism models respectively, primarily involved in energy metabolism, amino acid
metabolism, sphingolipid metabolism and purine metabolism. In order to avert the
interference of drug interaction between the antithyroid drugs and SND, the thyroidectomyinduced hypothyroidism model was further used to systematically assess the therapeutic
efficacy of SND on hypothyroidism. A time-dependent recovery tendency was observed in
SND-treated group from the beginning of model to the end of treatment, suggesting that SND
exerted a recovery effect on hypothyroidism in a time-dependent manner through partially
regulating the perturbed metabolic pathways.
Introduction
Hypothyroidism is a condition in which the body lacks sufficient thyroid hormone.
The thyroid hormone plays a fundamental role in the development, differentiation,
proliferation and physiology of all cells in an organism. Therefore, inadequate thyroid
hormone has widespread consequences for the body. Some studies have shown that
hypothyroidism may induce delayed skeletal development, cardiovascular diseases,
secondary hypertension, deterioration of human reproductive health, and changes in the brain
structure and fun.
The main treatment for hypothyroidism at present is thyroid hormone replacement
therapy. However, due to difficulties in controlling the level of thyroid hormones through use
of drugs or an exogenous source of thyroid hormone, although patients may experience
partial relief of the symptoms, they usually suffer over-replacement which may result in an
increased risk of cardiovascular disease, osteoporosis and subclinical liver damage.
Therefore, there is an urgent need to seek new strategies for the management of
hypothyroidism.
Traditional Chinese Medicine (TCM), a unique medical system with the significant
characteristics of pursuing an overall therapeutic effect with a multi-target treatment, attempts
to improve therapeutic efficacy and reduce drug-related adverse effects at the same time.

Here, kidney is not only the urinary organ, but it is regarded as the root of life activities and
represents the origin of our congenital or inherited foundation. To some extent, Kidney-Yang
Deficiency Syndrome represents a condition of holistic exhaustion of the whole body.
Modern medicine research indicates that Kidney-Yang Deficiency Syndrome is a functional
disorder with varying degrees of hypothalamic-pituitary-target gland (thyroid, adrenal and
gonad) axis. Sini decoction (SND), a well-known formula for invigorating Yang, is officially
recorded in Chinese pharmacopoeia (2010 edition). It consists of Acontium carmichaeli,
Glycyrrhiza uralensis and Zingiber officinate, and is mainly applied for Kidney-Yang
Deficiency Syndrome. However, it is still lacking of the evaluation of the holistic and
synergistic efficacy of SND on hypothyroidism due to the complexity of hypothyroidism and
the active compounds in SND.
This dilemma calls upon the debut of metabonomics at the end of last century. The
metabonomic approach as a top-down and nonhypothesis-driven analysis holds the promise
of a non-discriminatory analysis of metabolic biomarkers that could elucidate the
pathogenesis of diseases and help monitor therapeutic response. The systemic thinking of
metabonomics and its aim at grasping integral function make it pillars of potential bridge
between TCM and western medicine, which may beneficially provide an opportunity to open
up the black box between evidence-based Chinese medicine and the organism. To date, there
has been wide applications of metabonomic approach in the field of TCM, which strive to
illustrate the efficacy and mechanism of ancient TCM on modern diseases and make further
efforts to develop new drugs for complex diseases from the insight of TCM theory.
Van Ravenzwaay's group successfully employed standardized test protocols and
metabolomics to discover new biomarkers and specific patterns in response to
propylthiouracil (PTU)- and methimazole (MMI)- induced perturbations in rat plasma. Maria
Klapa's group applied metabolomic method to delineate significant alterations in cerebellar
metabolic physiology related to hypothyroidism. However, little is known about the overall
changes of urinary metabolites in an organism with hypothyroidism. In the present study, a
UHPLC/TOF-MS based urine metabolomic approach was employed to characterize the status
of thyroid dysfunction in three widely used rat models of MMI-, PTU- and thyroidectomyinduced hypothyroidism. In addition, in order to avoid the potential interference of drug
interaction between antithyroid substances (MMI and PTU) and SND, we used the
thyroidectomy-induced hypothyroid model to further investigate the protective effects of
SND on hypothyroidism.
Hypothyroidism models and Treatment
The study was approved by the national legislation of China and local guidelines and
performed at the Center of Laboratory Animals of the Second Military Medical University
(Shanghai, China). 64 male Wistar rats (17015 g) commercially obtained from the Slac
Laboratory Animal Co., LTD (Shanghai, China) were maintained under standard laboratory
conditions (temperature of 2123C, relative humidity 4565%, and 12 h/12 h light/dark
cycle) with aseptic food and tap water ad libitum. After one-week habituation, all animals
were housed individually in metabolism cages and allowed to acclimatize for additional 24 h.
The rats were randomly divided into eight groups (8 rats/group). A. antithyroid druginduced hypothyroid groups consisted of three groups: (1) the control group, which were
treated with normal tap water for 4 weeks, (2) MMI-induced hypothyroid group (MMI

group), which received 0.04% MMI (wt/vol) in the drinking water for 4 weeks as previous
study described, (3) PTU-induced hypothyroid group (PTU group), which received 0.05%
PTU (wt/vol) in the drinking water for 4 weeks as described by Srikanta Jena et al. The dose
of antithyroid drugs (MMI and PTU) was adjusted according to water intake and body weight
every 3 days throughout the experiment, as described before. B: surgery-induced hypothyroid
groups consisted of five groups: (4) Sham group and (5) Sham + SND group, which received
false thyroidectomy and postoperative treatment; (6) thyroidectomy-induced hypothyroid
group (Hypo group), (7) SND-treated thyroidectomized group (Hypo + SND group) and (8)
T4-treated thyroidectomized group (Hypo + T4 group), which had the thyroid gland removed
and postoperative treatment.
The thyroidectomy was done in rats anesthetized with ketamine (10 mg/kg,
intramuscular; i.m.) and xylazine (5 mg/kg, i.m.), as previously described. Briefly, a midline
skin incision was made along the length of the neck. The underlying tissues were cleared and
the salivary glands were retracted laterally. The two halves of the sternohyoid muscle were
separated and retracted laterally. Thyroid muscle was separated from the thyroid gland lobes
and retracted along with the sternohyoid muscle. A midline cut was made in the isthmus and
the thyroid glands were excised bilaterally. Extreme care was taken so as not to damage the
laryngeal nerve. Sham rats underwent a surgical procedure in which the rats were
anesthetized, the trachea was exposed and the incision was closed, simulating thyroidectomy.
After surgery, ketorolac (50 mg/kg, i.m.) and gentamicin (10 mg/kg) were administered over
5 days to alleviate pain and prevent infection. Rats were monitored closely for at least 1 week
after the surgery for complications and animals were used for treatment 4 weeks later.
During the phase of treatment, animals in the Sham + SND group and Hypo + SND
group received SND by oral gavage at a daily dose of 10 g/kg body weight (equal to 10
mL/kg body weight) for the following 4 weeks. Animals in Hypo + T4 group were
administered levothyroxin 20 ug/kg/day i.p. for 4 weeks according to previous study. And
animals in the Sham and Hypo groups were administered with saline for 4 consecutive
weeks.

Hypothyroidism adalah suatu kondisi kronis gangguan endokrin dan mekanisme molekuler
yang tepat yang tetap tidak jelas . Terlepas dari keberhasilan tertentu hormon tiroid terapi
penggantian dalam mengobati hipotiroidisme , sering mengakibatkan efek samping lain
karena selama bertahun - pengganti , sehingga masih mendesak untuk menemukan cara-cara
baru pengobatan untuk hipotiroidisme . Sini rebusan ( SND ) adalah rumus terkenal
Pengobatan Tradisional Cina ( TCM ) dan dianggap sebagai agen efisien terhadap
hipotiroidisme . Namun , penilaian efek holistik dan pemahaman mekanistik masih kurang
karena komponen yang kompleks .
Metodologi / Kepala Temuan
Sebuah metode metabonomic kemih berdasarkan kromatografi cair kinerja ultradigabungkan untuk spektrometri massa dipekerjakan untuk mengeksplorasi karakter
metabolisme global hipotiroidisme . Tiga model hipotiroidisme khas ( methimazole - ,
propylthiouracil - dan tiroidektomi -induced hipotiroidisme ) yang diterapkan untuk
menjelaskan mekanisme molekuler hipotiroidisme . 17 , 21 , 19 biomarker potensial
diidentifikasi dengan tiga model hipotiroidisme masing-masing, terutama yang terlibat dalam
metabolisme energi , metabolisme asam amino , metabolisme sphingolipid dan metabolisme
purin . Dalam rangka untuk menghindari gangguan interaksi obat antara obat antitiroid dan
SND , model hipotiroidisme tiroidektomi diinduksi digunakan lebih lanjut untuk secara
sistematis menilai kemanjuran terapi SND pada hipotiroidisme . Kecenderungan pemulihan
tergantung waktu diamati pada kelompok SND yang diobati dari awal model akhir
pengobatan , menunjukkan bahwa SND diberikan efek pemulihan hipotiroidisme dengan cara
tergantung waktu melalui sebagian mengatur jalur metabolisme terganggu .
Kesimpulan / Signifikansi
Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa pendekatan metabonomic merupakan instrumen
untuk memahami patofisiologi hipotiroidisme dan menawarkan alat yang berharga untuk
mempelajari sistematis efek terapi SND pada hipotiroidisme .
pengantar
Hypothyroidism adalah suatu kondisi di mana tubuh kekurangan hormon tiroid yang cukup .
Hormon tiroid memainkan peranan penting dalam pengembangan , diferensiasi , proliferasi
dan fisiologi dari semua sel dalam organisme . Oleh karena itu , hormon tiroid yang tidak
memadai memiliki konsekuensi luas bagi tubuh . Beberapa penelitian telah menunjukkan
bahwa hipotiroidisme dapat menyebabkan keterlambatan perkembangan tulang , penyakit
jantung , hipertensi sekunder , kerusakan kesehatan reproduksi manusia , dan perubahan
dalam struktur otak dan menyenangkan .
Pengobatan utama untuk hipotiroidisme saat ini adalah terapi penggantian hormon tiroid .
Namun , karena kesulitan dalam mengendalikan tingkat hormon tiroid melalui penggunaan
obat-obatan atau sumber eksogen hormon tiroid , meskipun pasien mungkin mengalami
kesembuhan sebagian dari gejala , mereka biasanya menderita over- pengganti yang dapat
mengakibatkan peningkatan risiko penyakit kardiovaskular , osteoporosis dan kerusakan hati
subklinis . Oleh karena itu, ada kebutuhan mendesak untuk mencari strategi baru untuk

manajemen hipotiroidisme .
Traditional Chinese Medicine ( TCM ) , sistem medis yang unik dengan karakteristik yang
signifikan mengejar efek terapi secara keseluruhan dengan pengobatan multi -target , upaya
untuk meningkatkan keberhasilan terapi dan mengurangi efek samping terkait obat pada
waktu yang sama . Di sini , ginjal tidak hanya organ kemih , tetapi lebih dianggap sebagai
akar dari kegiatan hidup dan merupakan asal dasar bawaan atau warisan kami. Untuk batas
tertentu , " Ginjal - Yang Deficiency Syndrome " merupakan suatu kondisi kelelahan holistik
seluruh tubuh . Penelitian obat modern menunjukkan bahwa " Ginjal - Yang Deficiency
Syndrome " adalah gangguan fungsional dengan berbagai tingkat kelenjar hipotalamushipofisis -target ( tiroid , adrenal dan gonad ) sumbu . Sini rebusan ( SND ) , formula terkenal
untuk menyegarkan Yang, secara resmi tercatat dalam farmakope Cina ( edisi 2010 ) . Ini
terdiri dari Acontium carmichaeli , Glycyrrhiza uralensis dan Zingiber officinate , dan
terutama diterapkan untuk " Ginjal - Yang Deficiency Syndrome " . Namun, masih kurang
dari evaluasi holistik dan kemanjuran sinergis dari SND pada hipotiroidisme karena
kompleksitas hipotiroidisme dan senyawa aktif dalam SND .
Dilema ini menyerukan debut metabonomics pada akhir abad lalu . Pendekatan metabonomic
sebagai analisis top-down dan nonhypothesis -driven memegang janji analisis nondiskriminatif biomarker metabolik yang dapat menjelaskan patogenesis penyakit dan
membantu memantau respon terapi . Pemikiran sistemik metabonomics dan tujuannya di
menggenggam fungsi integral membuatnya pilar potensial jembatan antara TCM dan
kedokteran Barat , yang menguntungkan dapat memberikan kesempatan untuk membuka
kotak hitam antara pengobatan Cina berbasis bukti dan organisme . Sampai saat ini , telah ada
aplikasi yang luas dari pendekatan metabonomic di bidang TCM , yang berusaha untuk
menggambarkan efektivitas dan mekanisme TCM kuno tentang penyakit modern dan
melakukan upaya lebih lanjut untuk mengembangkan obat baru untuk penyakit yang
kompleks dari wawasan teori TCM .
Grup Van Ravenzwaay yang berhasil digunakan protokol standar tes dan metabolomik untuk
menemukan biomarker baru dan pola tertentu dalam menanggapi propylthiouracil ( PTU ) dan methimazole ( MMI ) - diinduksi gangguan dalam plasma tikus . Kelompok Maria Klapa
yang menerapkan metode metabolomic untuk menggambarkan perubahan signifikan dalam
fisiologi metabolik cerebellar terkait dengan hipotiroidisme . Namun, sedikit yang diketahui
tentang perubahan keseluruhan metabolit kemih pada suatu organisme dengan
hipotiroidisme . Dalam penelitian ini , pendekatan metabolomic urin berbasis UHPLC / TOF
- MS digunakan untuk mencirikan status disfungsi tiroid dalam tiga model tikus banyak
digunakan MMI - , PTU - dan tiroidektomi -induced hipotiroidisme . Selain itu, untuk
menghindari gangguan potensi interaksi obat antara antitiroid zat ( MMI dan PTU ) dan
SND , kami menggunakan model hipotiroid tiroidektomi diinduksi untuk menyelidiki lebih
lanjut efek protektif SND pada hipotiroidisme .
Model Hypothyroidism dan Pengobatan
Studi ini disetujui oleh undang-undang nasional China dan pedoman lokal dan dilakukan di
Pusat Laboratorium Hewan dari Universitas Kedokteran Militer Kedua ( Shanghai , Cina ) .
64 tikus Wistar jantan ( 170 15 g ) komersial diperoleh dari SLAC Laboratorium Hewan Co
, LTD ( Shanghai , Cina ) tetap dipertahankan dalam kondisi laboratorium standar ( suhu 2123 C , kelembaban relatif 45-65 % , dan 12 h/12 h cahaya / siklus gelap ) dengan makanan

aseptik dan keran air ad libitum . Setelah satu minggu habituasi , semua binatang ditempatkan
secara individual di kandang metabolisme dan diizinkan untuk menyesuaikan diri untuk
tambahan 24 h.
Tikus-tikus secara acak dibagi menjadi delapan kelompok ( 8 tikus / kelompok) . A. antitiroid
kelompok hipotiroid obat-induced terdiri dari tiga kelompok : ( 1 ) kelompok kontrol , yang
diobati dengan air keran biasa selama 4 minggu , ( 2 ) MMI diinduksi kelompok hipotiroid
( kelompok MMI ) , yang mendapat 0,04 % MMI ( wt / vol ) dalam air minum selama 4
minggu sebagai studi sebelumnya dijelaskan , ( 3 ) PTU -induced kelompok hipotiroid
( kelompok PTU ) , yang mendapat 0,05 % PTU ( wt / vol ) dalam air minum selama 4
minggu seperti yang dijelaskan oleh Srikanta Jena et al . Dosis obat antitiroid ( MMI dan
PTU ) telah disesuaikan sesuai dengan asupan air dan berat badan setiap 3 hari seluruh
percobaan , seperti yang dijelaskan sebelumnya. B : kelompok hipotiroid operasi diinduksi
terdiri dari lima kelompok : ( 4 ) Sham kelompok dan ( 5 ) Sham + SND kelompok , yang
menerima thyroidectomy palsu dan perawatan pasca operasi , ( 6 ) tiroidektomi diinduksi
kelompok hipotiroid ( kelompok Hypo ) , ( 7 ) SND - kelompok perlakuan thyroidectomized (
Hypo + kelompok SND ) dan ( 8 ) kelompok T4 yang diobati thyroidectomized ( Hypo +
kelompok T4 ) , yang memiliki kelenjar tiroid dihapus dan pengobatan pasca operasi .
Tiroidektomi ini dilakukan pada tikus dibius dengan ketamin ( 10 mg / kg , intramuskular ,
im ) dan xylazine ( 5 mg / kg , im ) , seperti yang dijelaskan sebelumnya . Secara singkat ,
sayatan kulit dibuat garis tengah sepanjang leher . Jaringan di bawahnya dibersihkan dan
kelenjar ludah yang ditarik lateral . Kedua bagian dari otot sternohyoid dipisahkan dan ditarik
lateral . Tiroid otot dipisahkan dari lobus kelenjar tiroid dan ditarik bersama dengan otot
sternohyoid . Sebuah memotong garis tengah dibuat di tanah genting dan kelenjar tiroid yang
dipotong secara bilateral . Sangat hati-hati diambil agar tidak merusak saraf laring . Tikus
Sham menjalani prosedur pembedahan di mana tikus dibius , trakea terkena dan sayatan itu
ditutup , simulasi tiroidektomi . Setelah operasi , ketorolak ( 50 mg / kg , im ) dan gentamisin
( 10 mg / kg ) yang diberikan selama 5 hari untuk mengurangi rasa sakit dan mencegah
infeksi . Tikus dimonitor selama setidaknya 1 minggu setelah operasi untuk komplikasi dan
hewan yang digunakan untuk pengobatan 4 minggu kemudian .
Selama fase pengobatan , hewan di Sham + kelompok SND dan Hypo + kelompok SND
menerima SND oleh gavage oral dosis harian 10 g / kg berat badan ( setara dengan 10 mL /
kg berat badan ) selama 4 minggu berikutnya . Hewan di Hypo + kelompok T4 diberikan
levothyroxin 20 ug / kg / hari ip selama 4 minggu sesuai dengan penelitian sebelumnya . Dan
hewan di Syam dan kelompok Hypo diberikan dengan garam selama 4 minggu berturut-turut.

Alexander, E. 2004. Metabolic Profiling Provides a

System Understanding of Hypothyroidism in Rats and Its
Application. N Engl J Med; 351:241-249. Diakses 7
september 2013 jam 21.25 WIB.