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PRUEBAS GENERALES PARA AMINOACIDOS Y PROTEINAS

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Nombres
E-mail
Alexander Gil Campo
alexandergilcampo@unicauca.edu.co
Yolima Hurtado Yacumal
Yolihurtado92@hotmail.com
Kerly Escalante
Yiseth_9702Qhotmail.com
3Biorgnica, Ingeniera Agropecuaria, Facultad de ciencias agrarias, Universidad del Cauca
4Grupo No: #4
5Fecha de realizacin de la prctica:
25/09/2014
6Fecha de entrega de informe:
02/10/2014
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1. RESUMEN
9Introduccin:
10Las proteinas son uno de los principales componentes de todas
nuestras celulas. los
11aminocidos(compuestos orgnicos) son los ladrillos de contruccion de la proteinas. Los
12aminocidos se agrupan de acuerdo con su comportamiento qumico.
13la sintesis de las proteinas ocurren mediante la union entre si de las cadenas de aminocidos. los
14distintos aminocidos imparten diferentes comportamientos quimicos en la estructura de las
15proteinas.
16Debido a la presencia de diferentes aminocidos en las uniones peptdicas las protenas
17reaccionan con una variedad de compuestos formando productos coloreados.
18Existen reacciones de coloracin que son especficas para aminocidos de esas protenas y son
19importantes tanto para la deteccin como para el dopaje de aminocidos y protenas.
20Existen tambin reacciones generales porque sirven para caracterizar grupos comunes a todas
21las protenas como grupos amino o uniones peptdicas (ninhidrina y biuret).
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23Resultados: las pruebas y el reconocimiento en la prctica al ser positivas indicaban un cambio
24de color o una reaccin esto se podra dar por la desnaturalizacin de la protena o lo
25aminocidos que la componen dependiendo tambin del reactivo.
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27Conclusin: mediante las pruebas realizadas en laboratorio, se logr identificar la presencia de
28aminocidos; las protenas estn constituidas por aminocidos, por lo cual estos mtodos se basan
29en el reconocimiento de estos, en diferentes muestras.
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31RESULTADOS

Xantoproteic
PRUEBA
Albumina
Gelatina
Urea
Fenilalanin
a
Asparagina

a
+
-

HopkinsBiuret
+ violeta
+ violeta
+ violeta

Ninhidrina
+
-

+
2Pruebas generales para aminoacidos y proteinas.
3

+
+

cole
-

Ehrlich
+ rojo
+ rojo
- amarillo

- amarillo
- amarillo

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Glicina
Histidina
Agua
Triptfano

+ violeta
-

+
+
+

+ naranja

- amarillo
+ rojo
- amarillo
+ rojo

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23. ANALISIS DE RESULTADOS
3Prueba Xantoproteica: Los compuestos que presentan bencenos sustituidos (con grupos unidos
4al anillo bencnico), al reaccionar con el cido ntrico concentrado forman compuestos nitrados
5de color amarillo, el cual se intensifica en medio alcalino.De los resultados obtenidos
6presentados en la Tabla 1 las muestras que tuvieron error experimental fueron: Glicina,
7Asparagina y Gelatina, puesto que al no tener en su estructura anillos aromtico, no se debe
8presentar la coloracin amarilla.
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10 El aminocido fenilalanina tambin tiene en su estructura un anillo aromtico pero no est
11activado, por lo tanto el proceso de nitracin no se da fcilmente y no se puede percibir entonces
12la coloracin amarilla.
13Las muestras de Triptfano, Histidina y Albumina al reaccionar con HNO3 y las gotas de
14solucin al 40% de NaOH reaccionaron de forma correcta y el resultado obtenido fue igual al
15terico. El agua no presento tincin alguna puesto que su composicin no presenta ningn tipo
16de aminocido presente estructuralmente.
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18Prueba Biuret: Es un mtodo general para la determinacin de protenas o pptidos. Se basa en
19la reaccin del sulfato de cobre con compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos, en un
20medio alcalino. El producto es un complejo color violeta cuya intensidad de color depende de la
21cantidad de enlaces peptdicos presentes.
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23 Los resultados obtenidos, indican que la Albumina, la Gelatina. histidina y la Urea presentan
24enlaces peptdicos por lo que se observ un color violeta, esto confirma lo establecido en la
25teora. Las dems muestras en excepcin con la Asparagina al igual que la glicina,,histidina y
26triptfano, que al el no tener enlaces peptdicos sus resultados fueron los esperados (no
27coloracin violeta). La prueba con el triptfano no la realizo el grupo al que le corresponda, por
28esta razn no se obtuvo un resultado
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30Prueba de Ninhidrina: Esta reaccin es bastante importante, pues es universalmente empleada
31para detectar cualitativamente y cuantitativamente a los aminocidos. Para los aminocidos estas
32es la nica reaccin de color, verdaderamente importante. La Ninhidirna es una agente oxidante
331 de los grupos alfa-amino, liberando amoniaco, CO2 y el correspondiente aldehdo, as como la
34forma reducida de la Ninhidrina. Una coloracin violeta determina positiva la prueba y para este
35caso tambin un color Vino tinto la determinara como positiva. En esta prueba se obtienen los
36resultados esperados para casi todas las muestras en excepcin para la Urea, la gelatina y el agua
37ya que a diferencia de las dems muestras estas no es un alfa- aminocido Ej. Glicina,Asparagina,
38Triptfano, Fenilalanina,Albumina, Histidina y Alanina(contienen alfa-amino), ni tampoco
39contiene alfa- aminocidos (Ej. Gelatina).
40El resultado para la muestra de Agua confirma que esta no contiene alfa- aminocidos.
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2Pruebas
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generales para aminoacidos y proteinas.

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1Prueba Hopkins cole: Los derivados indol dan productos de condensacin cuando se tratan con
2aldehdos aromticos en presencia de cido sulfrico o clorhdrico. El aminocido triptfano
3contiene un grupo indol y por eso la reaccin es especfica para triptfano. El resultado positivo
4de esta prueba se puede evidenciar con el anillo indolico que degrada el aminocido triptfano a
5Indol produciendo compuestos de color rojizo-anaranjado.
6 Los resultados obtenidos para esta prueba resultado son correctos ya que en ninguna muestra a
7excepcin del Triptfano hay presencia de este, todas las dems muestras estn libres en su
8estructura de este aminocido (Triptfano) por ende dio un resultado (rojizo-anaranjado).
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10Prueba de Ehrlich: La presencia de anillos aromticos fenlicos o nitrogenados en la cadena
11lateral de los aminocidos se puede identificar mediante la reaccin con cido sulfanlico y nitrito
12de Sodio por formacin de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo as detectar la
13presencia de Histidina libres o formando pptidos y protenas.
14 El resultado positivo de esta prueba se puede evidenciar con un color rojo o Vino tinto.
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16 Los resultados se interpretan as: las muestras de Urea, Agua, Glicina, y Fenilalanina (contiene
17anillo aromtico bencnico) tuvieron resultados correctos (negativos) ya que ninguna de estas
18muestras contiene anillos aromticos fenlicos y/o nitrogenados.
19Las muestra de Gelatina y albumina tambin arrojaron un resultado correcto (presento color rojo
20o Vino tinto) ya que este si contiene anillos fenlicos y/o nitrogenados. Por el contrario de las
21muestras de Histidina (contiene anillo aromtico nitrogenado),y Triptfano (contiene anillo
22aromtico nitrogenado) se obtuvieron resultados positivos. Finalmente la muestra de Asparagina
23tambin arrojo un resultado negativo, ya que presento una coloracin amarillenta cuando
24verdaderamente al este aminocido no tener ningn anillo aromtico fenlicos y/o nitrogenado en
25su estructura no tena por qu presentar dicho cambio de color.
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284. CONCLUSIONES
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Existen diferentes pruebas para la identificacin de protenas y aminocidos que permiten
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establecer un resultado positivo o negativo de acuerdo a las caractersticas y composicin
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de cada una de ellas, evidenciado en coloraciones, presencia de anillos, etc. Se
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establecieron las caractersticas de estas pruebas para la identificacin cualitativa de
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sustancias que pueden contener aminocidos, protenas o pptidos. Y cuando se usan
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varias pruebas en la muestra, se pueden determinar ciertas sustancias en especfico.
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Muchos resultados no dieron a los esperados (tericos) pero se pudo deber a la
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contaminacin de las muestras o la contaminacin de los equipos (tubos de ensayo).
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Se pudo determinar que todos los anlisis se hicieron de manera cualitativa y que para
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poder
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Hacerlo de manera cuantitativa se requiere de la ayuda de otros mtodos por ejemplo:
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Espectrofotomtricos.
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43PREGUNTAS PRELIMINARES
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1) cual es la reaccin de un alfa-aminoacido y ninhidrina?
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2) cual es la reaccin con el reactivo de biuret?
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3) Que protenas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
2Pruebas
3

generales para aminoacidos y proteinas.

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2DESARROLLO
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1) El grupo alfa-amino de los aminocidos forma complejos coloreados con la
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ninhidrina:
violeta.
violeta
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azuloso en la mayora de los aminocidos cuyo grupo amino es primario.
6
2) La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la
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presencia
8
del enlace peptdico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminocidos.
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Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una
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sustancia
11
compleja denominada Biuret.
12
3) La reaccin de Hopkins-Cole, tambin conocida como reaccin de Adamkiewiczs, es
13
una prueba estndar para el triptfano y para las protenas que contienen triptfano.
14
La solucin que se va a examinar se mezcla con cido glioxlico y se agrega cido
15
sulfrico concentrado. Un anillo entre violeta y rojo en la unin de los dos lquidos
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indica que la reaccin es positiva.
175. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
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1) Indicar los nombres y las estructuras de al menos 2 B-aminocidos.
19
2) Cules son los aminocidos denominados esenciales para el organismo
20
humano.
21
3) Consultar las frases S y R de los reactivos a manipular en la prctica.
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4) Cules son las fichas de seguridad de los reactivos a manejar en la prctica.
23Desarrollo:
24Beta-Alanina:
25El grupo amino

est unido al segundo carbono a partir del grupo carboxilo.

26
272) Cuando un alimento contiene protenas con todos los aminocidos esenciales, se
28dice que son de alta o de buena calidad, aunque en realidad la calidad de cada uno de
29los aminocidos contenidos no cambia. Combinaciones de alimentos que suman los
30aminocidos esenciales

31
32AMINOCIDOS ESENCIALES:
33Isoleucina: Junto con la L-Leucina
34formacin

2Pruebas
3

y la hormona del crecimiento intervienen en la

y reparacin del tejido muscular.

generales para aminoacidos y proteinas.

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1Leucina:

Junto con la L-Isoleucina y la hormona del crecimiento (HG), interviene con la

2formacin
3Lisina:

y reparacin del tejido muscular.

Es uno de los ms importantes aminocidos porque, en asociacin con varios

4aminocidos
5reparacin

de tejidos, anticuerpos del sistema inmunolgico y sntesis de hormonas.

6Metionina:
7protenas
8va

ms, interviene en diversas funciones, incluyendo el crecimiento,

Colabora en la sntesis de protenas y constituye el principal limitante en las

de la dieta. El aminocido limitante, determina el porcentaje de alimento que

a utilizarse a nivel celular.

9Fenilalanina:
10estructura

Interviene en la produccin del colgeno, fundamentalmente en la

de la piel y el tejido conectivo, y tambin en la formacin de diversas neuro-

11hormonas.
12Triptfano:

Est implicado en el crecimiento y en la produccin hormonal,

13especialmente
14en

en la funcin de las glndulas de secrecin adrenal. Tambin interviene,

la sntesis de la serotonina, neuro-hormona involucrada en la relajacin y el sueo.

15Treonina:

Junto con la con la L-Metionina y el cido Asprtico, ayuda al hgado en sus

16funciones

generales de desintoxicacin.

17Valina:

Estimula el crecimiento y reparacin de los tejidos, el mantenimiento de

18diversos

sistemas y balance de nitrgeno.

19Debemos

recordar que, debido a la crtica relacin entre los diversos aminocidos y los

20aminocidos

limitantes presentes en cualquier alimento. Solo una proporcin

21relativamente

pequea de aminocidos de cada alimento pasa a formar parte de las

22protenas
23grasa

si no debe de usarse inmediatamente.

2Pruebas
3

del organismo. El resto se usa como fuente de energa o se convierte en

generales para aminoacidos y proteinas.

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14)

las frases S y R de los reactivos.

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14
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176. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
18
1. VEJAR EVA IRMA. Prcticas de Bioqumica Descriptiva. Editorial UniSon. 2005.
19
Pag 169.
20
2. GIRALDO GERMAN ANTONIO. Laboratorio de Bioqumica: Una visin prctica.
21
24 Universidad del Quindo. 2010. Pag 97
22Libro
23
3. Mataix verdu, J, Protenas(capitulo 5),hergon 2002.Pag 96
24
25
4. http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-content/uploads/2010/08/TP26
Proteinas-generalidades.pdf , Fecha de visita: 01/10/1014
27
28

5. http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Ficheros

29

/301a400/nspn0363.pdf, Fecha de visita: 01/10/1014

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2Pruebas
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generales para aminoacidos y proteinas.

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1
2ECUACIONES DE LAS
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ALBUMINA
4

REACCIONES

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7GELATINA

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2Pruebas
3

generales para aminoacidos y proteinas.

FENILALALINA

UREA