manual de tcnicas clnicas

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TCNICA CLNICA

Transferencia embrionaria
no quirrgica
Dorothe DucroSteverink1
Kees Peters1
Wouter Hazeleger2
Intstitute for
Pig Genetics BV
Beuningen, Holanda
2
Wageningen
University and
Research Centre
Wageningen, Holanda
1

La transferencia embrionaria en porcino es una

tcnica muy til para trasladar animales (embriones) de uno a otro rebao con bajo riesgo de transmisin de enfermedades. Considerando los costes,
el bienestar y la facilidad de manejo, resulta ms
conveniente realizar una tcnica no invasiva, por
lo que los procedimientos no quirrgicos son ventajosos respecto a los quirrgicos.
La transferencia embrionaria sin necesidad de
ciruga se estudi por primera vez en 1968. Sin
embargo, no fue antes de la dcada de los noventa cuando los ndices de gestacin y los tamaos
de camada obtenidos se incrementaron hasta un
nivel en el que este procedimiento comenz a
tener inters para propsitos comerciales.
Hazeleger et al. (1994 y 1999) utilizaron la tcnica Swinlet* y demostraron que era factible obtener una tasa de gestaciones del 60% al 73%. Este
mtodo ha sido probado bajo condiciones prcticas y ha sido desarrollado ms ampliamente por
el Institute for Pig Genetics (IPG), en Holanda. Es
este artculo se presenta un resumen del procedi-

miento utilizado, mientras que los resultados

obtenidos con la tcnica pueden encontrarse en el
artculo de Ducro-Steverink et al. (2004).
En Holanda, la citada tcnica slo puede llevarse a
cabo cuando se cuenta con un equipo de transferencia embrionaria oficialmente aprobado. Dicha
aprobacin debe ser establecida por las autoridades
veterinarias oficiales (VWA/RVV). Los embriones
recogidos deben ser procesados (lavados) de acuerdo con los protocolos de la International Embryo
Transfer Society (IETS) y almacenados bajo la responsabilidad del equipo de transferencia embrionaria, siguiendo los protocolos oficiales.
Slo se usarn como receptoras las cerdas adultas,
preferiblemente de segundo parto en adelante. El
momento de la ovulacin de las receptoras se sincroniza con los embriones (donadoras) usando eCG
y hCG y se comprueba mediante ecografa transrectal con un escner de seccin. Slo las cerdas que
muestran buenos signos de estro y que ovulan en un
periodo de 12 horas en torno al momento esperado
de ovulacin son preparadas como receptoras.

MATERIAL












Catter de transferencia embrionaria (o catter exterior), consistente en un tubo de

80 cm, semiflexible, con 1 centmetro de la parte superior doblado en un ngulo de 90.
Un catter interior, de 200 cm, con un sistema luer-lock incorporado
para conectar la jeringa.
Jeringas (1 cc, 30 cc y 60 cc)
Tubo Eppendorf cnico de muestras
con embriones
Pipeta y puntas
Placa de Petri
Alcohol (para limpiar la mesa de
laboratorio antes de comenzar la tcnica)
Medio de transferencia
Guantes
Tijeras
Jabn antisptico

* La tcnica toma el nombre de la denominacin comercial del catter usado en ella, Swinlet.

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DESCRIPCIN DE LA TCNICA
1 Los embriones habrn sido previamente depositados en el laboratorio
mvil, el cual es un camin que ha sido diseado para el manejo de los
mismos. ste posee una zona de recepcin (sucia), donde se depositan los
teros de las cerdas, y una sala (limpia) donde se procesan los embriones
recogidos.
Los embriones se almacenan y se transportan agrupados en funcin de la
hembra donadora, y se verifica su calidad cuando llegan al laboratorio
mvil. Posteriormente se reagrupan en un nmero de entre 27 y 33 unidades por camada transferible. La mayor parte de esos lotes provienen de
tres donadoras.
La composicin de los grupos se documenta cuidadosamente, de modo
que posteriormente puedan realizarse pruebas de filiacin para identificar la
procedencia de cada embrin correctamente. La camada se recoge en la
parte superior del catter interior, el cual se llena previamente con medio de
transferencia y se conecta a una jeringa de 1 cc.
2 Se coloca a la cerda en un corral individual, previamente limpio y desinfectado y se le permite que coma durante la tcnica, de forma que se sienta
cmoda y apenas se mueva. Hay que limpiar con cuidado el ano y la vulva
del animal con jabn antisptico y, a continuacin, desinfectar la zona. La
vulva ha de estar seca antes de insertar el catter exterior.

3 Todo el material debe prepararse en el laboratorio mvil, para luego

transportarlo a la nave cubierto con una hoja estril. El instrumental debe
colocarse al alcance de la mano, en una superficie horizontal cerca de la
cerda.
A lo largo de toda la operacin, una persona ayudar al tcnico. Ambos estarn duchados, llevarn ropa de trabajo limpia y guantes. Justo antes de la
transferencia se abrir el embalaje estril para extraer el catter exterior.
4 Se ha de utilizar una funda plstica que cubra el catter exterior para
prevenir la contaminacin del tero desde la vagina. Hay que cortar dicha
funda y doblarla hacia atrs unos 2 cm sobre la parte superior del catter,
una sola vez. Es necesario poner crema obsttrica en el extremo de arriba
de la funda y en la punta de los dedos del tcnico.
5 El tcnico ha de colocar el catter exterior en la punta de uno o dos de
sus dedos y, a continuacin, insertar stos unos pocos centmetros en la
vagina de la cerda.
Se debe empujar el dispositivo en el crvix mediante una presin muy leve,
con la ayuda de los dedos. Cuanto el catter est en el cuello uterino (en el
segundo o tercer pliegue) debe retirarse la funda desde el extremo de aqul
hasta sacarla de la vagina.

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DESCRIPCIN DE LA TCNICA (continuacin)

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6 Hay que seguir empujando el catter en el crvix mediante una presin muy leve. Slo en caso de que se atasque en los pliegues cervicales
habr que girarlo aproximadamente 180, despus de lo cual se continuar con la presin suave. Cuando repentinamente la resistencia decrezca,
se habr pasado el crvix y la parte superior del catter estar en el cuerpo uterino.
Es una tcnica muy delicada y requiere experiencia para asegurarse de la
localizacin del extremo del catter. De media se tarda, aproximadamente,
de cinco a diez minutos en introducir el dispositivo en el tero.
7 Se extraer el catter interior de la cubierta estril y se insertar su parte
superior en el catter exterior, hasta alcanzar el final de ste. Se empuja hasta

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la parte ms alta, lo que se notar por la resistencia que ejerce la punta curvada. Entonces se pone una seal en el catter interior, y se empuja el otro
todava unos 8 cm ms.
8 Se depositan los embriones en el cuerpo uterino con 0,1 cc de medio de
transferencia, empujando muy lentamente con la jeringa de 1 ml.
9 Despus de depositar los embriones, hay que sacar el catter exterior
del tero y de la crvix con mucho cuidado. Se deben revisar ambos dispositivos para verificar la presencia de moco o sangre. Esto proporciona una
indicacin de la calidad de la tcnica. Para que sea buena, no debera haber
ninguna de estas sustancias adheridas al catter.

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A TENER EN CUENTA


Las cerdas receptoras deben mantenerse en jaulas individuales durante dos o tres semanas y se
revisarn diariamente para vigilar un posible retorno al estro.
 En el da 28 se lleva a cabo una prueba de gestacin mediante ecografa transcutnea.

REFERENCIAS
Ducro-Steverink DWB, Peters CGW, Maters CC, Hazeleger W, Merks JWM. 2004. Reproduction results and offspring performance after
non-surgical embryo transfer in pigs.
Hazeleger W, Kemp B. 1994. Farrowing rate and litter size after transcervical embryo transfer in sows. Reproduction in Domestic
Animals 29: 481-487.
Hazeleger W, Bouwman EG, Noordhuizen JPTM, Kemp B. 1999. Effect of superovulation induction on embryonic development on Day
5 and subsequent development and survival after non-surgical embryo transfer in pigs. Theriogenology 2000;53:1063-1070.

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