UNIDAD II

ESTUDIO DE LA
FISIOLOGA DE LOS
MICROORGANISMOS

PROFESORA: ELCI VILLEGAS

23/05/2006

Introduccin

La fisiologa bacteriana comprende el estudio de

las
funciones
realizadas
por
estos
microorganismos.
Las bacterias son muy eficientes fisiolgicamente,
sintetizan en forma muy rpida sus componentes
celulares, siendo la mayora autosuficientes a
pesar de su simpleza estructural.
En la bacteria se desencadenan una serie de
procesos qumicos que en conjunto constituyen el

Metabolismo Bacteriano
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CLASIFICACIN DE LAS
BACTERIAS

Aerobios Estrictos

Anaerobios Estrictos

Anaerobios
Facultativos

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Son aquellas bacterias en que el

aceptor final de e- es el O2
Aquellos microorganismos en que
el aceptor final es una molcula
inorgnica, como SO4 o NO3. No
utilizan O2, y ms an ste es
txico, ya que carecen de la
capacidad de sintetizar catalasa
superxido dismutasa.

Pueden vivir con O2 y sin O2

NUTRICIN BACTERIANA
Es el proceso por el que los seres
vivos toman del medio donde habitan
las
sustancias
qumicas
que
necesitan para crecer (nutrientes) los
que se requieren para:
Fines energticos
Fines biosintticos
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Clasificacin bacteriana
segn tipo de nutricin:
Aprovisionamiento de
energa

Biosintetico

Littrofas

Auttrofas

Organtrofas

Hetertrofas

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Nutrientes Bacterianos
Podemos clasificar los nutrientes en las
siguientes categoras:
1.-Macronutrientes: carbono, hidrgeno,
oxgeno y nitrgeno.
2.-Micronutrientes: fsforo, potasio, azufre,
magnesio.
3.-Vitaminas y hormonas
4.-Elementos traza: zinc, cobre,
manganeso, molibdeno, cobalto.
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MACRONUTRIENTES
Carbono. Todos los organismos necesitan carbono
en alguna de sus formas. El carbono forma el
esqueleto de los tres ms importantes nutrientes
(carbohidratos, lpidos y protenas) que se utilizan
para la obtencin de energa ascomo material
celular.
Los
microorganismos
que
utilizan
compuestos orgnicos como fuente de carbono se
llaman heterotrofosy aquellos que utilizan el CO2
como fuente de carbono se llaman autotrofos.
Hidrgeno y Oxgeno. El hidrgeno y oxgeno
forman parte de muchos compuestos orgnicos. Se
encuentran en el H2O, como componentes de
nutrientes y en la atmsfera. Adems el O2se utiliza
en la respiracin aerbica como aceptor terminalde
electrones.
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MACRONUTRIENTES
Nitrgeno. Todos los organismos requieren nitrgeno.
El nitrgeno es metabolizado y entra a formar parte de
las protenas, cidos nucleicos y polmeros de la
pared celular. Las fuentes de nitrgeno que pueden
ser utilizadas por diferentes organismos incluyen:-el
N2atmosfrico en algunos procariotas, -otros utilizan
compuestos inorgnicos como nitratos, nitritos o sales
de amonio, -mientras que otros requieren compuestos
nitrogenados orgnicos como son los aminocidos o
pptidos.

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MICRONUTRIENTES
Fsforo. El fsforo es esencial para la sntesis de cidos
nucleicos y ATP; tambin forma parte de los fosfolpidosy
polmeros de la pared celular. El fsforo se suministra
normalmente como fosfato inorgnico; alternativamente se
puede utilizar fosfato orgnico como son los glicerofosfatos y
fosfolpidos.
Potasio. El in potasio acta como coenzima y probablemente
como catin en la estructura de RNA y otras estructuras
aninicas celulares.
Azufre. El azufre es necesario para la biosntesis de los
aminocidos cisteina, cistinay metionina. Tambin forma parte
de coenzimas como biotina, coenzima A y ferredoxina. El azufre
se suministra en forma inorgnica como sulfato u orgnica como
cistina, cisteinay metionina.Magnesio. Se utiliza como cofactor
de reacciones enzimticasdonde acta el ATP.

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MICRONUTRIENTES
Nitrgeno (-NH2)

En aminocidos
Bases nitrogenadas

Azufre (-SH)
En determinados
aminocidos y
coenzimas

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VITAMINAS
Las vitaminas se clasifican en dos
grupos,hidrosolublesy liposolubles. Dentro de
stas ltimas la vitamina A, D y E no son
necesarias para el crecimientode las bacterias.
Todas las vitaminas hidrosolubles, excepto el
cido ascrbico, son necesarias para el
crecimiento de bacterias. La mayor parte de las
vitaminas hidrosolubles son componentes de
coenzimas. En los medios indefinidos se utiliza
como fuente de vitaminas elextracto de
levaduras.
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ELEMENTOS TRAZA
En general los requerimientos de
elementos traza se conocen slo
cualitativamente ya que es difcil
demostrar su requerimiento debido a que
las cantidades necesarias se suelen
encontrar a menudo como contaminantes
en otros constituyentes del medio. Son
necesarios para activar algunos enzimas;
por ejemplo, el Mo6+ se necesita en la
nitrogenasa que es el enzima que cataliza
la conversin del nitrgeno atmosfrico en
amonaco en la fijacin biolgica de
nitrgeno.
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Factores de crecimiento
Son

molculas orgnicas especficas

indispensables para la vida de la
bacteria pero que ella es incapaz de
sintetizar

Ej: coenzimas o sus precursores,

bases nitrogenadas, aminocidos,
vitaminas.
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Condiciones apropiadas para

el crecimiento bacteriano
Los principales factores que influyen en el
crecimiento microbiano son alimento, t,
humedad, disponibilidad de oxgeno y pH.
Es la fuente de energa
necesaria
para
la
vida
de
los
microorganismos.
Temperatura:
Influye mucho en la
velocidad de crecimiento.
Alimento:

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Condiciones apropiadas para

el crecimiento bacteriano
Es la cantidad de agua
disponible en el sistema.
Oxgeno: los microorganismos pueden
agruparse
en
distintas
categoras
basndose en sus requerimientos o
intolerancia al O2.
pH: Los microorganismos tienen pH
ptimos de crecimiento y pH lmites por
encima o debajo de los cuales no pueden
desarrollarse.
Humedad:

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Temperatura
Presentan

un estrecho rango de
crecimiento optimo. Delimita este
rango una t mnima de crecimiento y
una mxima.
debajo
de
la
mnima
Por
multiplicacin se deteriora
sobre la mxima muerte
Por
bacteriana
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Temperatura
Las

bacterias se pueden clasificar en

3 grandes grupos, segn su t optima
de crecimiento:

Psicrfilas 10 20C (15C)

Mesfilas 20 40C (30C)
Termfilas 50 60C (55C)
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pH

En el interior de la bacteria el pH es normalmente

neutro.
La mayora de las bacterias puede soportar
cambios entre 3 y 4 unidades de pH.
Se pueden clasificar en 3 grandes grupos segn
pH:
alcalfilas.
neutrfilas.
acidfilas.

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Condiciones Osmticas

Las bacterias tienen una tolerancia osmtica

importante, lo que les permite soportar grandes
cambios de la osmolaridad, todo esto gracias a la
PARED CELULAR que constituye una importante
barrera.

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Oxgeno
Conforme

con requerimientos de oxigeno

de la bacterias, se clasifican en:

Aerbicas: Requieren de Oxgeno para

su desarrollo.
Anaerbicas: crecen en ausencia o
presencia de Oxigeno.
Microaereoflicas: crecen mejor con
tensiones de Oxgeno bajas.

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Fases del crecimiento

bacteriano

El crecimiento bacteriano es autolimitante.

Multiplicacin de 3 a 5 hrs, llegando a un numero
y tamao mximo.
Todos esto es debido a mltiples factores que se
presentan luego de un determinado tiempo.
Fases:
fase de latencia o retraso
fase logartmica o exponencial.
fase estacionaria.
fase de regresin o muerte

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Fases del crecimiento

bacteriano

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Fases del crecimiento

bacteriano
Fase

de retraso:

Aprox. 4 horas.
Las bacterias tienen una
gran actividad
metablica.
No hay divisin, por lo
tanto su n no aumenta

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Fases del crecimiento

bacteriano

Fase logartmica:
Despus
de
6
aprox.
Crecimiento exponencial, en
donde las bacterias se dividen
en forma constante y mxima.
Las diferente poblaciones
bacterianas poseen una tasa
de crecimiento caracterstica
que depende de la t y los
nutrientes que el medio le esta
entregando.
Liberacin de exotoxinas.

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Fases del crecimiento

bacteriano

Fase
estacionaria:

Acumulacin
de
desechos metablicos
y disminucin de los
nutrientes.
Igualacin de la tasa
de crecimiento con la
de muerte.

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Fases del crecimiento

bacteriano

Fase de muerte:
Las bacterias dejan de
multiplicarse y mueren
con el tiempo.
Hay
trmino
de
nutrientes, acumulacin
de material de desecho y
disminucin del espacio
fsico.
Esta curva solo se
produce en condiciones
de laboratorio

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Metabolismo Bacteriano
Es

el conjunto de reacciones
qumicas que ocurren en la clula.

Funciones:
Obtener energa qumica del entorno
Convertir los nutrientes exgenos
Formar y degradar molculas.
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Metabolismo Bacteriano
Anabolismo
METABOLISMO

Catabolismo

En las bacterias se encuentran las 3 vas

centrales del metabolismo intermediario de los
Hidratos de Carbono:
Va glicoltica o de Embden Meyerhof Parnas
Va de pentosa fosfato o de Shunt de las
pentosas
Va de Entner-Doudoroff

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Metabolismo Bacteriano
Las bacterias son muy eficientes fisiolgicamente,
sintetizan en forma muy rpida todos sus componentes
celulares, siendo la mayora autosuficientes a pesar de
su simpleza estructural. Para que esto ocurra, en la
bacteria se desencadenan una serie de procesos
qumicos que en su conjunto constituyen el metabolismo
bacteriano.
En el metabolismo bacteriano, los procesos qumicos
por los cuales la bacteria construye componentes
celulares, a partir de compuestos simples externos
(nutrientes), se denomina anabolismo. En cambio,
aquellas reacciones destinadas a obtener energa a
partir de compuestos qumicos corresponden al
catabolismo.
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REGULACION DEL
METABOLISMO
Cada reaccin metablica est regulada no slo con
respecto a otras reacciones sino tambin con
respecto a la concentracin de nutrientes en el
medio. La regulacin se realiza a diferentes niveles:

Regulacin de la actividad enzimtica a travs de:

enzimas alostricas, inhibicin por retroalimentacin,
activacin alostrica, y cooperatividad.
Regulacin de la sntesis de enzimas por: induccin
enzimtica y represin por productos finales.
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ENZIMAS
Los enzimas son protenas que
catalizan reacciones qumicas en
los seres vivos. Los enzimas son
catalizadores, es decir, sustancias
que, sin consumirse en una
reaccin, aumentan notablemente
su velocidad. No hacen factibles las
reacciones imposibles, sino que
slamente
aceleran
las
que
espontneamente
podran
producirse. Ello hace posible que
en condiciones fisiolgicas tengan
lugar
reacciones
que
sin
catalizador requeriran condiciones
extremas de presin, temperatura o
pH.
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Especificidad de los enzimas

Los enzimas son protenas catalticas. Casi todas las
reacciones celulares estn catalizadas. Alguna actividad
cataltica no reside en las protenas sino en el RNA, es el
caso de la ribozima que tiene parte de RNA y parte proteica
aunque la catlisis la efecta el cido nucleico. Esto tiene
una importancia evolutiva pues demuestra que el RNA
catalizaba antes que los enzimas que luego se
especializaron. El RNA es peor catalizador. La funcin de
los enzimas ests relacionada con la unin de un ligando
que ser el sustrato. Se forma complejo enzima-sustrato,
que luego se convierte en producto:
enzima + sustrato enzima-sustrato enzima + producto

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Especificidad de los enzimas

Como es un catalizador el enzima no se consume, acelerando la

velocidad de reaccin sin modificar la posicin de equilibrio. Las
propiedades que tienen los enzimas que los hacen efectivos como
catalizadores son:
Capaces de acelerar las reacciones en las condiciones suaves de la
clula.
Alto poder cataltico por su gran actividad molecular, aceleran las
reacciones hasta 1017 veces. Esto es porque se une al sustrato en
relacin 1:1 y la reaccin que ocurre en los confines de ste ve
rebajada su energa de activacin como consecuencia de esa unin.
Son muy especficos respecto a.
a) Tipo de reaccin: ya que no son catalizadas reacciones de
naturaleza distinta.
b) Respecto al sustrato: el enzima no puede unirse con cualquier
sustrato. Hay enzimas ms especficos que otros. La especificidad
puede ser tan alta que se distinga entre estereoismeros. Sin
embargo los enzimas digestivos son poco especficos porque si no
haran falta demasiados. La ventaja de la especificidad reside en
que se pueden catalizar muchas reacciones a la vez sin reacciones
laterales ni que se acumulen los productos secundarios.

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Especificidad de los enzimas

Enzima con uno o dos

sitios activos y una
cadena de aminocidos.
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Enzima con varias cadenas de

aminocidos y varios sitios
activos.
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Las enzimas bacterianas

se clasifican:

Las enzimas bacterianas pueden clasificarse

segn
Su lugar de accin en: endoenzimas y
exoenzimas. Las endoenzimas, son aquellas
enzimas que actan en el interior de la clula.
Ej. oxidasas, reductasas y transaminasas. Las
exoenzimas, son enzimas que siendo tambin
sintetizadas en el interior de la clula, para
ejercer su funcin deben ser exportadas al medio
extracelular en bactarias Gram (+) y al espacio
periplsmico en las bacterias Gram (-). Su funcin
principal es degradar macromolculas, las que
por su tamao no atraviesan las capas
superficiales de la clula procaritica.

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Las enzimas bacterianas

se clasifican:
Las enzimas bacterianas, tambin pueden ser clasificadas
considerando s su sntesis es o no modificada por el
medio ambiente. De acuerdo a esto, las enzimas pueden
ser constitutivas o inducidas.

Las enzimas constitutivas son aquellas cuya sntesis es

independiente del medio externo. Se sintetizan siempre, Ej.
enzimas que degradan la glucosa.

En cambio, las enzimas inducidas son aquellas cuya

sntesis depende de la presencia o ausencia del sustrato
en el medio, Ej. -galactosidasa, la cual acta sobre la
lactosa, slo es sintetizada cuando existe lactosa en el
medio (Figura 3-1). Las bacterias son metablicamente
eficientes ya que la mayora de sus enzimas son inducidas.
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Agentes Fsicos y Qumicos que

actan sobre los Microorganismos

Existen ciertas sustancias qumicas que influyen

negativamente sobre las bacterias, pudiendo ejercer
dos tipos de efectos diferentes:
Bacteriostticos: cuando impiden el crecimiento
bacteriano.
Bactericidas: cuando destruyen (matan) las
bacterias.
En general, si no slo nos referimos a las bacterias,
sino a cualquier tipo de microorganismos, hablamos
respectivamente de agentes microbiostticos y
microbicidas. Ahora bien, para una misma
sustancia qumica, la lnea de demarcacin entre un
efecto microbiosttico y otro microbicida depende
muchas veces de la concentracin de dicha
sustancia y del tiempo durante el que acta.

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Agentes Fsicos y Qumicos que

actan sobre los Microorganismos
Agentes esterilizantes son aquellos que producen la inactivacin total de
todas las formas de vida microbiana (o sea, su muerte o prdida irreversible
de su viabilidad). (Tambin existen agentes fsicos esterilizantes).
Agentes desinfectantes (o germicidas) son agentes (sobre todo qumicos)
antimicrobianos capaces de matar los microorganismos patgenos
(infecciosos) de un material. Pueden (y en muchos casos suelen) presentar
efectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se suelen emplear slo sobre
materiales inertes.
Agentes antispticos son sustancias qumicas antimicrobianas que se oponen
a la sepsis o putrefaccin de materiales vivos. Se trata de desinfectantes con
baja actividad txica hacia los tejidos vivos donde se aplican.
Quimioterpicos son compuestos qumicos con actividad microbicida o
microbiosttica, con una toxicidad suficientemente baja como para permitir su
administracin a un organismo superior, en cuyos fluidos corporales y tejidos
permanece estable un cierto tiempo a concentraciones tales que los hace
eficaces como antimicrobianos dentro del organismo.

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FACTORES QUE AFECTAN LA

POTENCIA DE UN DESINFECTANTE
1) Concentracin del agente y tiempo de actuacin
2) pH: El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como
al grado de ionizacin del agente.
Los agentes aninicos suelen ser ms efectivos a pH cidos.
Los agentes catinicos muestran ms eficacia a pH alcalinos.
3) Temperatura. Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la
potencia de los desinfectantes. Para muchos agentes la subida de 10
grados supone duplicar la tasa de muerte.
4) Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la
poblacin microbiana
Segn la especie empleada: p. ej., el bacilo tuberculoso resiste los
hipocloritos mejor que otras bacterias
Segn la fase de cultivo
Dependiendo de la presencia de cpsulas o de esporas (suelen
conferir ms resistencia)
Dependiendo del nmero de microorganismos iniciales.
5) Presencia de materiales extraos: La existencia de materia
orgnica en el material a tratar (p. ej., sangre, suero, pus) afecta
negativamente a la potencia de los desinfectantes
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ANTIBITICOS
Los antibiticos son sustancias normalmente de
bajo peso molecular producidas por seres vivos
(antibiticos
naturales)
o
modificadas
artificialmente a partir de ellas (antibiticos
semisintticos), que a pequeas concentraciones
tienen efectos antimicrobianos (microbicidas o
microbiostticos), tras ser administrados por va
adecuada a un organismo receptor.
La mayor parte de los antibiticos proceden del
metabolismo secundario de microorganismos
procariotas (actinomicetos, Bacillus, etc.) o
eucariotas (hongos de los gneros Penicillium,
Cephalosporium, etc.).
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ANTIBITICOS
La mayor parte de los antibiticos comerciales se emplea para tratar
enfermedades de etiologa bacteriana, aunque algunos se usan
contra hongos y levaduras, y unos pocos presentan actividad
antitumoral.
Desde el punto de vista qumico, se clasifican en grandes familias:

antibiticos que contienen carbohidratos;

lactonas macrocclicas;
quinonas y compuestos relacionados;
antibiticos peptdicos y con aminocidos;
heterociclos del N;
heterociclos del O;
aromticos;
alifticos, etc.

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MODO DE ACCION DE
LOS ANTIBIOTICOS
En general, los antibiticos deben su toxicidad selectiva a
las diferencias entre las clulas eucariotas y procariotas. Su
eficacia txica es la consecuencia de su capacidad de
inhibir una reaccin bioqumica especfica y esencial, bien
sea para la clula eucariota o para la clula procariota. Para
que el antibitico ejerza su accin es necesario que llegue
al foco infeccioso, penetre en las bacterias (por difusin o
transporte activo) y alcance intracelularmente la
concentracin necesaria. Una vez dentro de la clula el
antibitico puede ser bacteriosttico si inhibe la
multiplicacin de forma reversible, o bactericida si tiene un
efecto letal. En general, cada grupo de antibiticos acta
preferentemente
de
una
forma
u
otra.
Antibiticos bacteriostticos: macrlidos, tetraciclinas,
cloranfenicol.
Antibiticos
bactericidas:
betalactmicos,
aminoglicsidos,
polipeptdicos,
polienos.
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