Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

Introduccin
El microscopio es un instrumento de precisin conformado por subsistemas :
Opticos : lentes, filtros, prismas, condensadores, diafragma.
Mecnicos: elementos para controlar la posicin de la muestra en el espacio tridimensional X, Y, Z;
Elctricos: transformadores y sistemas de iluminacin
Electrnicos: cmaras, sistemas de televisin, etc
Estos interactan entre s para amplificar y controlar la formacin de imgenes de objetos de tamao
reducido, cuyas caractersticas no alcanzan a ser detectadas por el ojo humano. Por lo general, para observar
las muestras se requiere que estas hayan sido preparadas de acuerdo con tcnicas que permiten resaltar los
detalles a observar.
Principio d funcionamiento
El microscopio ha sido construido utilizando las propiedades fsicas de los lentes al interactuar con la luz. Un
lente es un elemento ptico, fabricado por lo general en vidrio, que tiene la propiedad de refractar la luz. Es
de dimensiones calculadas con superficies generalmente parablicas o esfricas. Si los rayos de luz que
inciden sobre una de las superficies del lente convergen al salir del mismo en un punto F, el lente se conoce
como positivo o convergente; si el lente dispersa los rayos luminosos que lo atraviesan, se denomina
divergente o negativo. Los lentes positivos (convergentes), como el que se presenta a continuacin,
constituyen la base sobre la cual se fabrican los microscopios.

Relaciones matemticas que gobiernan la construccin de lentes:

1/f = 1/a+1/b, donde:
f = distancia al foco. (Lugar donde se concentran las ondas luminosas);
[a] = distancia del lente al objeto y [b] = distancia del lente a la imagen.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Captulo: Microscopio

Un objeto [h], ubicado a una distancia [a] del lente, produce una imagen [h], a una distancia [b], donde
[h>h].

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

La magnificacin [M] de un lente se define como:
[M] = h/h = b/a.

Captulo: Microscopio

Partes de un microscopio

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

Armado de un microscopio binocular compuesto

B. Mecanismo sujeta-preparaciones (6): Gire el mando macromtrico (19) hasta que la platina (8)
quede en su posicin ms baja. Desenrosque completamente los dos tornillos de fijacin (18) del
mecanismo sujeta-preparaciones. Coloque el mecanismo sobre la platina con la palanca de la pinza
mvil hacia arriba (5) haciendo coincidir los orificios del mecanismo con los orificios de los tornillos
de sujecin. Rosque de nuevo los tornillos de sujecin firmemente.

C. Objetivos (4): Asegrese que el revlver porta-objetivos (3) est bien posicionado, para ello el
revlver no debe rotar libremente, sino, grelo hasta que oiga click y quede bloqueado. Coloque
entonces los objetivos empezando por el de menor aumento 4X en cualquiera de los orificios del

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Captulo: Microscopio

A. Condensador (10): Gire el mando macromtrico (18) hasta que la platina (8) quede en su posicin
ms alta. Gire el mando de enfoque del condensador (Fig. 1) hasta que el porta-condensador quede
en su posicin ms baja. Desenrosque el tornillo de fijacin del condensador, a continuacin inserte
el condensador en el soporte de forma que la palanca del diafragma de apertura (9) quede hacia la
parte frontal del microscopio de modo que pueda ajustarse con facilidad. Una vez est
completamente colocado en el soporte rosque de nuevo el tornillo de sujecin hasta que quede
suficientemente fuerte y gire el mando de enfoque del condensador hasta situarlo en su posicin
ms alta.

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

revlver. A continuacin coloque el siguiente objetivo mayor 10X en el orificio contiguo, luego el
objetivo de 40X y finalmente el objetivo de 100X.

D. Cabezal (15): Afloje el tornillo de sujecin del cabezal (16) y retire la tapa de proteccin del aro
donde se coloca el cabezal. Inserte el cabezal hasta que est bien apoyado sobre el estativo (16).
Aunque el cabezal puede colocarse en cualquier posicin, recomendamos por comodidad, que los
porta-oculares (14) queden hacia la parte frontal del microscopio. Apriete de nuevo el tornillo de
sujecin del cabezal firmemente.

E. Oculares (1): Retire las tapas protectoras de los tubos porta-oculares (14). Coloque los oculares en
los tubos suavemente y sin tocar la superficie de las lentes.

Retire la tapa protectora del tubo porta-ocular. Afloje el micro-tornillo de fijacin del ocular
situado en el lateral del tubo, usando un destornillador de relojero. Coloque el ocular en el tubo
suavemente y sin tocar la superficie de las lentes. Apriete de nuevo el micro-tornillo de fijacin
del ocular.

Filtro: Coloque el filtro azul en el porta-filtros (11) situado bajo el condensador (10), desplazando el
portafiltros horizontalmente. Asegrese de que el filtro queda bien posicionado
Funcionamiento

A.Puesta en marcha.
1. Antes de usar el microscopio, ajuste el control de intensidad de luz (23) al mnimo. Esta operacin debe
ser realizada cada vez, antes de encender o apagar el microscopio, as prologaremos la duracin de la
bombilla.
2. Pulse el interruptor de encendido en posicin ON. (Fig. 2)
3. Gire el control de intensidad de luz hasta que la imagen est iluminada.
4. La intensidad de luz debe ajustarse segn el objetivo utilizado o el tipo de preparacin a observar.

B. Ajuste interpupilar del cabezal.

2. Cuando los campos de visin en ambos oculares sean completos y se unifiquen en uno slo, entonces ser
la distancia interpupilar correcta. Tenga en cuenta el valor que marca la escala interpupilar (2) para el
siguiente paso.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Captulo: Microscopio

1. Mire a travs de los oculares desplace los tubos porta-oculares (14) horizontalmente cogiendo el cabezal
por los extremos rugosos destinados a esta funcin (13).

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

3. Ajuste las escalas diptricas (14) situadas en ambos tubos porta-oculares hasta que el valor de ambas
escalas coincida con el valor de la escala de la distancia interpupilar. Este paso es necesario para mantener la
parafocalidad de los objetivos.
4. Para cada usuario deber ajustarse la distancia interpupilar y las escalas diptricas.
C. Enfoque del microscopio.
1. Gire el revolver (3) y coloque el objetivo 4X (4) en el eje ptico comprobando que est debidamente
posicionado en el clic de bloqueo.
2. Gire el mando macromtrico (19) hasta que la platina (8) quede en su posicin ms baja.
3. Coloque una preparacin microscpica sobre la platina, fjese que el cubre-objetos quede hacia arriba.
Desplace la pinza mvil (5) del mecanismo (6), apoye la preparacin contra la pinza fija (7) y suavemente
vaya soltando la pinza mvil, hasta que la preparacin quede bien sujeta.
4. Asegrese que el objeto de la preparacin quede en el eje ptico, para ello desplace la platina con los
mandos de control de movimientos X/Y (21).
5. Observando a travs de los oculares, gire el mando macromtrico hasta que la preparacin aparezca
enfocada.
6. Reajuste el enfoque con el mando micromtrico (20) hasta que la imagen sea completamente ntida.
D. Ajuste diptrico en caso de diferencias en la vista.
1. Observe slo con el ojo derecho a travs del ocular (1) derecho y ajuste el enfoque con el micromtrico
(20).
2. A continuacin observe con el ojo izquierdo a travs del ocular izquierdo y ajuste el enfoque girando el
corrector de dioptras (14) del tubo izquierdo hasta obtener una imagen ntida. No ajuste el enfoque con el
micromtrico.
E. Ajuste del diafragma de apertura.

OBJETIVO

APERTURA DEL IRIS

4X

Desde apertura total a 1/8.

10X

De 1/8 a 1/4

40X

De 1/4 a 1/2

100X

De 1/2 a 3/4

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Captulo: Microscopio

El diafragma de apertura (9) no debe usarse como regulador de la intensidad de luz. Su funcin es obtener
una mayor resolucin del objeto proporcionando ms contraste de imagen. A menor apertura del iris se
obtiene mayor contraste de imagen, aunque si se cierra demasiado la apertura la resolucin no ser
correcta. La experimentacin es el mejor mtodo para determinar la correcta apertura del diafragma. Las
aperturas sugeridas para cada objetivo son:

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

F. Cambio de aumento.
1. Posicione el objetivo (4) de 10X en el eje ptico.
2. Este microscopio ya viene parafocalizado, aunque es posible que existan mnimas diferencias entre
objetivos. Para ello debe reajustarse ligeramente el enfoque con el micromtrico (20).
3. Cuando cambiamos a los objetivos de 40X y 100X debemos hacerlo con cuidado y asegurndonos que los
objetivos no rocen con la preparacin para prevenir posibles daos en las lentes frontales de los objetivos.
4. Para obtener una mxima resolucin con el objetivo de 100X, es necesario aplicar aceite de inmersin
entre el cubreobjetos de la preparacin y la lente frontal del objetivo.
a. Utilice poca cantidad de aceite de inmersin, una pequea gota ser suficiente.
b. Si aparecen burbujas de aire, pueden ser eliminadas moviendo ligeramente el revlver (3) y
posicionndolo nuevamente.
c. Cuando acabemos de observar, todas las partes que han estado en contacto con el aceite de inmersin,
deben limpiarse. Utilizando para ello, un pao suave de algodn ligeramente humedecido con Xileno. Si el
objetivo de 100X no se limpia, el aceite se secar sobre la lente frontal y no ser posible observar a travs de
l, adems podra quedar daado.
Nota: El aceite de inmersin SLO debe utilizarse con el objetivo de 100X. Es el nico objetivo preparado
para ello. Si cualquier otro objetivo entra en contacto con el aceite de inmersin debe limpiarse
inmediatamente.
G. Iluminacin crtica.
Es el punto ptimo de iluminacin que proporcionan el conjunto de elementos implicados en dicha
iluminacin, bsicamente el condensador (10). Para conseguir la iluminacin crtica, debemos poder enfocar
un objeto situado sobre el iluminador (22).
1. Enfoque una preparacin con el objetivo (4) de 10X.
2. Coloque un objeto plano sobre el iluminador, pero que permita el paso de la luz. Por ejemplo una
preparacin.
3. Sin soltar la preparacin, enfquela desplazando el condensador mediante el mando de enfoque (Fig. 1).

Mantenimiento
Generalmente representa una inversin de fondos significativa. Es un instrumento ptico sofisticado.
Requiere una limpieza y mantenimiento peridicos que garanticen la obtencin de imgenes de elevado
contraste de una calidad igual a la de la ptica, la electrnica y los componentes mecnicos del equipo.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Captulo: Microscopio

4. Habr obtenido entonces la iluminacin crtica. Ya puede retirar la preparacin del iluminador. Si en el
campo de visin aparece alguna irregularidad, es decir algn elemento del iluminador enfocado, desplace el
condensador justo lo suficiente para no ver esa irregularidad y entonces obtendr la iluminacin optima ms
cercana a la iluminacin crtica.

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

Cuando se descuida la exposicin al polvo, pelusas, suciedad, etc. o no se elimina correctamente y a
tiempo el aceite de inmersin, el rendimiento ptico experimenta un empeoramiento que aumenta con el
tiempo. Los componentes delicados SOLO deberan limpiarse cuando sea necesario. Muchos de los daos en
las superficies pticas se producen por fallidos intentos de limpieza
1. Al iniciar la limpieza recuerde usar un soplador de polvo, excepto cuando tenga que remover lquidos
(como aceites de inmersin).
2. Nunca limpie los lentes con hisopos o pauelos secos, esto crea raspaduras.
3. Evite materiales abrasivos como paos de piel, de lino seco o palillos de poliestireno.
4. Antes de aplicar algn solvente para remover la suciedad, intente con agua destilada, excepto cuando
deba remover grasa (una pelcula de agua destilada puede crearse si exhala sobre la superficie del lente).
5. Use hisopos con algodn extra puro en lugar de hisopos desechables de algodn, pues stos ltimos dejan
residuos.
6. Evite utilizar las barras de metal que ocasionalmente se sugieren, en lugar de los palillos de madera
(bamb), ya que pueden daar muy fcilmente los lentes frontales.
7. El aire comprimido presurizado es incorrecto para el proceso de limpieza del microscopio. Estos dejan
residuos ligeros, pero difciles de remover.
8. Nunca utilice cidos o amonio para limpiar los objetivos de los lentes ya que stos son sensibles a los
vapores cidos y alcalinos.

Para localizar la suciedad hay que mover ligeramente cada uno de los componentes pticos:

Captulo: Microscopio

9. Para limpiar las superficies pticas internas, las cmaras o los adaptadores pticos, se debe contactar al
fabricante.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

Rotar con cuidado el objetivo ligeramente.
Comprobar el cubre y el porta movindolos ligeramente mientras se enfocan la parte superior e inferior
sucesivamente.
Subir y bajar el condensador. La superficie ptica sucia se identifica porque la
suciedad sigue el movimiento de la parte
Una imagen borrosa no siempre significa que el objetivo est sucio.
Un cubreobjetos del grosor inadecuado producir una imagen borrosa con aberracin esfrica.
Un lquido de inmersin inapropiado tambin producir imgenes borrosas.

A. Mantenimiento ptico.

1. No intente desmontar ningn componente ptico.

2. Antes de limpiar cualquier lente, elimine las partculas de polvo de la superficie con un pincel
fino especial para lentes o con aire comprimido a baja presin. Puede encontrar estas
herramientas en cualquier tienda de fotografa.
3. Limpieza del ocular
a. No quite el ocular (1) del tubo porta-oculares (14).
b. Limpie nicamente la superficie externa, empaando la lente con vaho.
c. Despus seque la lente con papel especial para lentes con movimientos circulares desde
el centro de la lente al exterior. No limpie las lentes en seco ya que podran rayarse
fcilmente.
4. Limpieza de los objetivos.
a. No quite los objetivos (4) del microscopio.
b. Limpie nicamente la superficie externa. Utilice un pao suave de algodn humedecido
con Xileno. Despus seque la lente con el mismo pao.
5. Limpieza del condensador.
a. Limpie nicamente la lente superior del condensador (10) con alguno de los
procedimientos descritos anteriormente para la limpieza de oculares u objetivos.
6. Limpieza de la lente del iluminador.
Limpie nicamente la lente superior del iluminador (22) con alguno de los procedimientos descritos
anteriormente para la limpieza de oculares u objetivos.

ADVENTENCIA: POR SU SEGURIDAD, APAGUE Y DESCONECTE EL MICROSCOPIO ANTES DE EFECTUAR

CUALQUIER OPERACIN DE MANTENIMIENTO, A FIN DE EVITAR UNA DESCARGA ELCTRICA.
1. Cambio de la bombilla.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Captulo: Microscopio

B. Mantenimiento elctrico.

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

a. Apoye el microscopio sobre su costado
con extremo cuidado, especialmente con
los oculares (1) y con el mecanismo
sujeta-preparaciones (6).
b. Desenrosque completamente el tornillo
sealado con la flecha (Fig. 5).
c. Abra la tapa de acceso a la bombilla.
d. Con un pao coja cuidadosamente la
bombilla y tire de ella para desconectarla
del portalmparas.
e. No toque la bombilla de repuesto con los
dedos. Utilice un pao limpio e inserte los
pins de la bombilla en el portalmparas.
Tapa de
acceso
f. Si por accidente ha tocado la bombilla con
Fig. 5
los dedos, lmpiela, ya que podra verse
afectada la transmisin de la luz y la duracin de la bombilla.
g. Cierre de nuevo la tapa de acceso y enrosque el tornillo cromado firmemente.

2. Cambio del fusible.

a. Con un destornillador plano, presione ligeramente la ranura de la tapa del porta-fusible
(Fig. 2) y gire 1/4 de vuelta en el sentido que marca la flecha indicada.
b. Deje de presionar y la tapa del porta-fusible quedar suelta, entonces extrigala
totalmente.
c. Retire el fusible de la tapa tirando de l, e inserte el de recambio. Asegrese que es de
0.5 Amperios.
d. Inserte de nuevo la tapa con el fusible.
e. Repita el paso (a.) pero girando 1/4 de vuelta en sentido contrario a la flecha. La tapa
debe quedar bien cerrada.
C. Mantenimiento mecnico.
1. Ajuste de la tensin del enfoque macromtrico
El anillo de ajuste de tensin (Fig. 6) est situado entre el mando de enfoque macromtrico (19)
y el brazo (17).
La tensin del macromtrico viene ajustada de fbrica. El punto ptimo de tensin, es aquel que
permite el movimiento ms suave posible de los mandos del enfoque macromtrico sin que la
platina (8) se deslice hacia abajo por si sola.

Captulo: Microscopio

a. Para apretar la tensin de los mandos de enfoque del macromtrico, el anillo debe
girarse en sentido contrario a las agujas del reloj como indica la flecha. Para aflojarla,
gire el anillo en el mismo sentido de las agujas del reloj.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

Tornillo tope
de la platina
Tensor del
macromtrico

Mando de
enfoque del
condensador
Fig. 6
2. Ajuste del tope de la platina.
Los objetivos de 40X y 100X (opcional) poseen un sistema retrctil de seguridad para evitar
daos en la preparacin o en la lente frontal en caso de que sta contacte con la preparacin.
Tambin para evitar este contacto, el microscopio tiene un sistema de seguridad, que
consiste en un tope regulable del movimiento ascendente de la platina. Viene ajustado de
fbrica para la observacin de preparaciones estndar con cubreobjetos de 0.17mm de
grosor. Pero para la observacin de otro tipo preparaciones puede ser necesario su reajuste.
a. Afloje el tornillo del tope (Fig. 6) con la llave hexagonal de 2mm.
b. Enfoque la preparacin con el objetivo (4) de 4X primero y despus con el de 10X.
c.

Enrosque de nuevo el tornillo del tope slo hasta que quede apretado y la platina (8) no
pueda ascender.

Solucin de problemas
ELCTRICOS
CAUSA

SOLUCIN

No hay corriente en el enchufe.

Reparar por un tcnico

especializado.

PROBLEMA

Cable no conectado.
Bombilla fundida.
Fusible fundido.
Bombilla inapropiada.
La bombilla se funde en poco
tiempo.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

El voltaje es muy alto.

Conectarlo.
Reemplazar la bombilla.
Reemplazar el fusible.
Reemplazar por una bombilla
correcta.
Reducir al mnimo la intensidad de
luz antes de encender o apagar el

Captulo: Microscopio

La bombilla no funciona.

1
0

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

microscopio.
La bombilla se funde
inmediatamente.

Bombilla inapropiada.

Reemplazar por una bombilla

correcta.

La bombilla parpadea.

La bombilla no esta correctamente Insertarla correctamente.

insertada en el porta-lmparas.
Bombilla a punto de fundirse.

Reemplazar bombilla.

Tapa del porta-fusible mal cerrada.

Cerrarla correctamente.

Mal contacto en la toma de

corriente.
Reparar por un tcnico
especializado.
El fusible se funde en poco tiempo. Fusible inapropiado.

Reemplazar por un fusible

apropiado.

El fusible se funde
instantneamente.

Reparar por un tcnico

especializado.

Cortocircuito

CALIDAD DE IMAGEN
CAUSA

SOLUCIN

PROBLEMA

Resolucin pobre.

Revlver mal posicionado.

Girarlo hasta el clic posicionador.

Imagen demasiado brillante.

Reducir la intensidad de luz.

Objetivo sucio.

Limpiar objetivo.

Ocular sucio.

Limpiar ocular.

Preparacin mal colocada.

Colocar la preparacin con el cubreobjetos hacia arriba.

Cubre-objetos de la preparacin
incorrecto.
Luz demasiado brillante.

Condensador sucio.
Puntos en el campo de

Ocular sucio.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

Usar cubre-objetos de 0.17mm.

Reducir la intensidad de luz o ajustar la

apertura diafragma.
Limpiar condensador.
Limpiar ocular.

Captulo: Microscopio

No hay imagen.

1
1

Apunte de Ctedra - Equipamiento de Laboratorio Clnico - UFIDeT

visin.

Iluminacin parcial del

campo de visin.

Preparacin sucia.

Limpiar preparacin.

Condensador sucio.

Limpiar condensador.

Revlver mal posicionado.

Girarlo hasta el clic posicionador.

Diafragma de apertura demasiado

cerrado.

Ajustarlo apropiadamente.

MECNICOS
CAUSA

SOLUCIN

PROBLEMA

La platina desliza hacia abajo sola.

Ajustar la tensin del macromtrico.

No se consigue el enfoque.

El tope del movimiento ascendente de

la platina esta mal ajustado.

Reajustar el tope.

Captulo: Microscopio

No se mantiene el enfoque.

Profesor: Ing. Mario Cazn 3 Ao

1
2