Reporte de prctica de

laboratorio
Primera prctica de laboratorio
Ecologa Microbiana
Lic. Ecologa
Profesor: M.C Lidia Irene Len
Lpez
Por:
Nieblas Meja Johana De Jess
07/02/16

Investigar los siguientes puntos como reporte de la primera prctica de

laboratorio de Ecologa Microbiana:
1.- Qu es un medio de cultivo microbiolgico?
Los Medios de Cultivo se utilizan para diferentes propsitos: la enumeracin, el
aislamiento de ciertos tipos de bacterias, el mantenimiento de los cultivos para su
uso posterior y para facilitar el reconocimiento de algn tipo de bacteria en
particular.

2.- Qu es un medio de cultivo selectivo?

Frecuentemente, en el laboratorio se requiere aislar un tipo de bacteria a partir de
alguna mezcla de diversos tipos. Para esto se han diseado medios de cultivo que
favorecen el crecimiento de la bacteria de inters y que inhiben el resto. Esto
puede lograrse mediante el uso de sustancias inhibitorias como los antibiticos, o
cierta concentracin de alunas sales. A este medio de cultivo se le denomina
medio selectivo.
Un medio de cultivo selectivo favorece el crecimiento de ciertas bacterias e
inhibe de otras.

3.- Qu es un medio de cultivo diferencial?

Son los medios de cultivo que permiten distinguir diferencias metablicas de
diversas especies o gneros de bacterias o diversos grupos de las mismas.
Un medio diferencial permite distinguir diferencias metablicas de bacterias.

4.- Qu es un mtodo de esterilizacin microbiolgica?

La esterilizacin es un mecanismo por el que se consigue la muerte o
eliminacin de todos los microorganismos vivos de una muestra, medio,
superficie o material de trabajo. Entre los microorganismos vivos se
incluyen bacterias, hongos, protistas, virus y sus formas de resistencia.
Un objeto esterilizado est, por lo tanto, totalmente libre de
microorganismos incluyendo sus formas de resistencia.
5.- Cules son los mtodos de esterilizacin ms utilizados?

La esterilizacin se consigue generalmente por mtodos fsicos y

excepcionalmente por la aplicacin de compuestos qumicos. Entre los
mtodos fsicos ms comunes est la aplicacin de calor (calor hmedo
o calor seco), la filtracin o las radiaciones. La esterilizacin sin embargo
tambin se puede conseguir mediante la aplicacin de algunos productos
qumicos, como el xido de etileno, formaldehdo o glutaraldehdo.
6.- Describa el mtodo de esterilizacin de calor hmedo:
El calor hmedo por medio de utilizacin de vapor de agua es el agente
esterilizante ms frecuentemente utilizado. Este mecanismo destruye
eficazmente los microorganismos por desnaturalizacin de protenas y
enzimas, y desestabilizacin de membranas. La esterilizacin con calor
hmedo, se utiliza principalmente con el autoclave. El autoclave,
desarrollado por CHAMBERLAND en 1884, es un aparato (Fig. 1)
constituido por una caldera, que se puede cerrar hermticamente con
una tapa metlica y que presenta una resistencia elctrica en su interior
(antiguamente por gas) que calienta el agua. Este aparato permite que
en el interior de la caldera se desplace el aire por una vlvula de purga,
dejando que se acumule posteriormente vapor saturado a presin, que
alcanza temperaturas superiores a los 100C sin que se produzca
ebullicin.
7.- Qu es un mtodo de tincin microbiolgica?
La tincin es un proceso por el cual las molculas de un colorante se
absorben a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color
de las clulas de los microorganismos y poder realizar la observacin en
microscopio ptico.
8.- Cules son los mtodos de tincin ms utilizados?
Las tinciones se pueden clasificar como simples cuando toda la muestra
se tie del mismo color y se utiliza un slo colorante (azul de lactofenol o
tinta china); tincin diferencial, cuando se visualiza ms de un color
porque se utiliza ms de un colorante (Gram o Ziehl-Neelsen); tincin
especfica, cuando se utilizan anticuerpos marcados con una molcula
fluorescente para identificar una estructura celular en particular
(inmunocitoqumico).

9.- Cul es el principio o fundamento de la tincin de Gram?

Esta tincin es un procedimiento de gran utilidad empleado en los
laboratorios donde se manejan pruebas microbiolgicas. Es definida
como una tincin diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las
bacterias en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y bacterias
Gram positivas. Los principios de la tincin de Gram estn basados en
las caractersticas de la pared celular de las bacterias, la cual le confiere
propiedades determinantes a cada microorganismo. La pared celular de
las bacterias Gram negativas est constituida por una capa fi na de
peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que las
bacterias Gram positivas poseen una pared celular gruesa constituida por
peptidoglicano, pero no cuentan con membrana celular externa; as pues,
la composicin qumica y el contenido de peptidoglicano en la pared
celular de las bacterias Gram negativas y Gram positivas explica y
determina las caractersticas tintoriales.
10.- Describa el procedimiento de la tincin de Gram
La tincin de Gram se basa en colocar como colorante primario cristal
violeta, el cual tiene afi nidad con el peptidoglicano de la pared
bacteriana. Posteriormente, se coloca lugol, el cual sirve como mordiente
e impide la salida del cristal violeta por la formacin de un complejo
cristal violetayodo que satura los espacios del peptidoglicano de la pared
bacteriana. En seguida, se coloca una mezcla de alcohol-acetona, la cual
deshidrata la pared bacteriana y cierra los poros de la misma, tambin
destruye la membrana externa de las bacterias Gram negativas debido a
que sta es soluble a la accin de solventes orgnicos, como la mezcla
de alcoholacetona. Las bacterias Gram positivas, al contener una gran
cantidad de peptidoglicano, retienen con mayor fuerza este complejo,
mientras que las Gram negativas no lo pueden retener por tener menos
cantidad de peptidoglicano. Por ltimo, se coloca safranina, la cual
funciona como un colorante secundario o de contratincin y sirve para
teir las bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violetayodo.

INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA (2a ed.), Vera Garca.

Prez-Uz, B., de Silniz, M. I., Torralba, B., & Vzquez, C. (2011). Metodologa
de esterilizacin en el laboratorio microbiolgico. Reduca (Biologa), 3(5).
Lpez-Jcome, L. E., Hernndez-Durn, M., Coln-Castro, C. A., Ortega-Pea,
S., Cern-Gonzlez, G., & Franco-Cendejas, R. (2014). Las tinciones bsicas
en el laboratorio de microbiologa.