2 PRCTICA BIOTECNOLOGIA

TITULACIN AMINOACIDOS
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Para determinar los distintos pK de un aminocido podemos

realizar una valoracin cido base, midiendo el pH de la disolucin
mientras se va titulando y utilizando la grfica para el clculo. Para un cido,
a la mitad de su neutralizacin, el pH medido por el pHmetro corresponde a su
pKa. En el caso de un aminocido podremos determinar dos o tres valores de.
El pK para la desprotonacin del grupo amino protonado (cuando est como RNH3+ y se comporta como cido) se puede determinar por adicin de cido,
mientras que el pK para la protonacin del grupo carboxilo (comportndose, por
tanto, como una base, al pasar de R-COO- a R-COOH) se puede determinar
mediante la adicin de un cido fuerte. En la prctica lo que se hace
es preparar una disolucin de aminocido de
concentracin conocida para saber, desde el principio y por clculos
estequiomtricos, cul es la cantidad de cido o de base que deberemos
agregar para alcanzar el punto de equivalencia de la titulacin. As, se empieza
aadiendo cido (generalmente HCl) para determinar el pKa del grupo
carboxlico, R-COOH, y se se contina despus con la adicin de base
(generalmente NaOH) para determinar el pKa del grupo amino. Al adicionar HCl
al aminocido obtenemos la parte de la curva que queda a la izquierda desde
el punto de equivalencia (que coincide con el punto isoelctrico), y con la
posterior adicin de NaOH obtenemos la parte derecha.
MATERIALES
Bureta
Vaso de precipitados
Pipeta
pHmetro
Reactivos
Solucin aminocido problema
Acido clorhdrico 1M
NaOH 1M

PROCEDIMIENTO
Lavar la bureta con agua destilada. Llenarla con HCl 1 M hasta el cero de la
bureta.
- Aadir a un vaso de precipitados pequeo, 30 ml de la solucin del
aminocido problema. Medir el pH inicial de la solucin.
- Llevar a cabo la titulacin aadiendo HCl desde la bureta en fracciones de 0.5
ml. Agitar con una varilla de vidrio despus de cada adicin de HCl.
- Anotar en una tabla el pH y el volumen de cido correspondiente. Aadir
cido hasta llegar a pH 1.5 aproximadamente.
pH

ml HCl

pH

ml HCl

Lavar la bureta con agua destilada. Llenarla con NaOH 1 M hasta el cero de la
bureta.
- Aadir a un vaso de precipitados pequeo, 30 ml de la solucin del
aminocido problema. Medir el pH inicial de la solucin.
- Llevar a cabo la titulacin aadiendo NaOH desde la bureta en fracciones de
0.5 ml. Agitar con una varilla de vidrio despus de cada adicin de NaOH.
- Anotar en una tabla el pH y el volumen de cido correspondiente. Aadir
cido hasta llegar a pH 1.5 aproximadamente.

Dibujar el resultado.
Indicar cuantos pKa y sus valores.
qu tipo de aminocido tenemos? podemos decir cual es?