Como Se Estudia La Celula

EDICIN N 80
Cmo se estudia la clula

Hoy en da existe mucha informacin disponible acerca de qu es una clula, si es procariota
o eucariota, cules son sus componentes, su forma, su funcin, etc. De hecho, estos
contenidos son habituales y bsicos en la enseanza escolar. Pero, estudiar la estructura y
el funcionamiento celular no es una tarea sencilla. Para lograrlo, hay que entrar en un mundo
microscpico a travs de numerosas herramientas, desde las ms sencillas como el
microscopio ptico, hasta tcnicas ms sofisticadas que permiten discernir la estructura de
las macromolculas, sus movimientos y funciones. Los conocimientos actuales acerca de las
clulas son el resultado de observaciones, teoras y modelos que se fueron construyendo y
modificando a lo largo de aos de
investigacin, un proceso que an
contina.
Estructura de una clula eucariota animal.
Los modelos cientficos

La ilustracin es un modelo que representa la estructura de una clula eucariota animal. Los
modelos cientficos se caracterizan porque son construcciones de la mente humana, y
representan ideas o conceptos que se tienen sobre algn aspecto de la realidad (ver
Cuaderno N 50). Los modelos cientficos cumplen un papel importante en la construccin
del conocimiento y la comprensin de los fenmenos naturales. Ayudan a predecir, describir
y explicar fenmenos naturales, objetos y estructuras; y simplifican las observaciones
haciendo ms fcil trabajar con ellos, especialmente cuando se trata de objetos que no se
perciben a simple vista, como una estructura microscpica. Cmo se llega a determinar un
modelo de la clula que no solo representa su estructura sino tambin su funcin? Sin duda,
el desarrollo de instrumentos pticos cada vez ms precisos y de tcnicas moleculares de
"El Cuaderno de Por Qu Biotecnologa" es una herramienta didctica creada y desarrollada por el equipo
pedaggico del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa. Su reproduccin est autorizada bajo la
condicin de que se aclare la autora y propiedad de este recurso pedaggico por parte del Programa
Educativo Por Qu Biotecnologa.
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visualizacin, han desempeado un papel preponderante en estos logros cientficos ya que
permitieron conocer lo inalcanzable para el ojo humano.
Un poco de historia
Ya en la antigedad se saba que el tamao de los objetos poda aumentarse empleando
espejos curvos y esferas de cristal llenas de agua. A principios del siglo XVII se inici una
serie de experiencias utilizando lentes con el objetivo de lograr el mayor aumento posible.
Estas experiencias se inspiraron en el uso del telescopio que haba sido empleado por
primera vez en 1609 por Galileo con fines astronmicos.
Con el desarrollo de los microscopios, la biologa experiment una revolucin, ya que hasta
entonces los organismos ms pequeos descriptos eran los insectos diminutos. A partir de
entonces, el desarrollo y complejizacin de los microscopios (palabra que en griego significa
para ver lo pequeo) fue constante.
En 1665, el cientfico Robert Hooke public un libro llamado Micrographia; en el que pueden
encontrarse algunos de los mejores dibujos que se hallan hecho de observaciones
microscpicas. Una de sus observaciones simples pero ms importantes fue la de un delgado
trozo de corcho, un material muy liviano y firme que flotaba en agua, por razones
desconocidas hasta entonces. A travs de su microscopio Hooke observ que estaba
constituido por una fina trama de pequeas celdas a las que l llam clulas, un trmino
habitual para designar pequeas habitaciones en los monasterios.
Microscopio usado por Hooke y el dibujo de las clulas del tejido de corcho
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Ms tarde, el aficionado holands Anton van Leeuwenhoek logr, mediante las lentes
pequeas que l mismo fabricaba, aumentos de hasta 270 veces. As pudo, entre otras
cosas, descubrir y estudiar por primera vez a pequeos organismos invisibles a simple vista,
presentes en aguas estancadas, a los que nombr animlculos. Hoy se sabe que observ
desde clulas bacterianas hasta protozoos en aguas estancadas, espermatozoides y glbulos

rojos.
Microscopio usado por Van Leeuwenhoek
Qu es un microscopio?
El microscopio es una de las herramientas bsicas en el estudio de la biologa. Mediante un
conjunto de lentes, el microscopio aumenta el tamao de objetos que son demasiado
pequeos para ser visualizados a simple vista. Dos principios estn involucrados en el uso del
microscopio: la magnificacin (capacidad de aumentar el tamao de una imagen) y la
resolucin (capacidad de producir una imagen ntida, o la capacidad del instrumento para
dar imgenes bien definidas de puntos situados muy cerca uno del otro). Existen distintos
tipos de microscopios, cada uno con un propsito particular, ya que cada tcnica de
microscopa permite observar estructuras dentro de cierto rango de tamao, dependiendo
del lmite de resolucin del microscopio empleado, es decir, la separacin mnima que
permite que dos objetos puedan ser distinguidos como diferentes.
Los microscopios actuales
Desde su invencin, la microscopa ha experimentado increbles adelantos, aumentando no

solo su capacidad de resolucin sino tambin el poder de amplificacin. Se los puede
clasificar en dos grandes grupos: microscopios pticos y microscopios electrnicos.
La gran diferencia entre ambos tipos es la radiacin que emplean para iluminar el objeto
de inters y el lmite de resolucin, que depende de las caractersticas fsicas de la
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radiacin empleada (luz visible o electrones). En el caso de los microscopios pticos, la
radiacin utilizada es la luz visible. En los microscopios electrnicos, la radiacin es un haz
de electrones, posibilitando un poder de resolucin de 0,1nm.
Los microscopios pticos
Es el tipo de microscopio ms utilizado, y emplea la luz visible para crear una imagen
aumentada del objeto.
ojo
ojo
ocular
ocular
objetivo
objetivo
especmen
especmen
condensador
luz
Estructura del microscopio ptico (A:

esquema; B: foto). (Fuente: Alberts y col.,
Molecular Biology of the Cell, 2004).
Consta de una o ms lentes, y su factor

limitante son las caractersticas fsicas
de la luz visible (su longitud de onda).
De todas formas, pueden aumentar el
tamao de un objeto por encima de las
2.000 veces. Algunas partes del
microscopio ptico son: OCULAR: Lente
situada cerca del ojo del observador,
que ampla la imagen del objetivo;
OBJETIVO: Lente situada cerca de la
preparacin, que ampla la imagen de
sta; CONDENSADOR: Lente que
concentra los rayos luminosos sobre la
preparacin (o espcimen a estudiar).
Variantes en la microscopa ptica

En la microscopa ptica se pueden distinguir variantes que ofrecen diferentes imgenes de
un mismo objeto de estudio. Segn cul es el material de estudio, sus caractersticas y el
objetivo de quien lo examina, se elegir una u otra tcnica. A continuacin se muestran
cuatro imgenes de la misma clula (un fibroblasto en cultivo) generada mediante
diferentes tcnicas de microscopa ptica, que se explican a continuacin:
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A) Microscopa de campo brillante (B) Microscopa de contraste de fase (C) Microscopa diferencial de
contraste de interferencia (DIC) Nomarski. (D) Microscopa de campo oscuro (tomada de Alberts y col.,
Molecular Biology of the Cell, 2004)
A) Microscopa de campo brillante: el material se observa sin coloracin. La luz pasa

directamente y se aprecian detalles que estn naturalmente coloreados, o simplemente
contornos.
B) Microscopa en contraste de fase: se usa principalmente para aumentar el contraste
entre las partes claras y oscuras de las clulas sin colorear. Es ideal para especimenes
delgados, o clulas aisladas. El tipo de iluminacin que emplea provoca variaciones en cmo
refractan la luz algunos especimenes invisibles, hacindolos visibles. Este tipo de
microscopio es muy til a la hora de examinar tejidos vivos, por lo que se utiliza con
frecuencia en biologa y medicina.
C) Microscopa diferencial de contraste de interferencia (DIC) Nomarski: Utiliza dos
rayos de luz polarizada y las imgenes combinadas aparecen como si la clula estuviera
proyectando sombras hacia un lado. Se usa cuando la muestra es muy gruesa para usar
contraste de fases. Fue diseado para observar relieves de especimenes difciles de
manejar. Es muy utilizado en los tratamientos de fertilizacin in-vitro actuales.
D) Microscopa en campo oscuro: el microscopio utiliza una luz muy intensa en forma de un
cono hueco concentrado sobre el espcimen. Las porciones claras del ejemplar aparecen
como un fondo oscuro y los objetos minsculos que se estn analizando aparecen como una
luz brillante sobre el fondo. Esta forma de iluminacin se utiliza para analizar elementos
biolgicos transparentes y sin manchas, invisibles con iluminacin normal.
Fijacin, corte y tincin de muestras
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Para que una muestra de tejido permanezca intacta en el tiempo, y permita as su
observacin al microscopio todas las veces que se desee, hay que fijarla. Esto significa,
tratar a las clulas con un fijador que las inmovilice y las preserve. Luego, dado que la
mayora de los tejidos son muy gruesos como
para poder observar sus clulas individualmente
Movimiento del brazo
del micrtomo
a alta resolucin, se los debe cortar en pequeas
Espcimen embebido en
lminas o secciones con un instrumento
parafina
denominado micrtomo (figura). Debido a que
cuchilla de acero
los tejidos son generalmente blandos y frgiles
Tira de secciones
(an fijados), necesitan ser embebidos en un
medio que acte de soporte para poder
Secciones en un
portaobjetos, teidas
seccionarlo. Generalmente se emplea
y montadas bajo un
cubreobjetos
parafina (tambin algunas resinas), que en su
estado lquido penetra el tejido fijado, para
luego solidificarse y as formar un bloque slido
junto a la muestra.
Esquema de un micrtomo. Una porcin de tejido embebido en parafina es seccionada con una cuchilla de acero
para luego teir y observar al microscopio ptico. (Fuente: Alberts y col., Molecular Biology of the Cell, 2004)
Una vez obtenidas las secciones, usualmente el siguiente paso es teirlas con colorantes
especficos que poseen afinidad por distintos componentes celulares, permitiendo su
identificacin al microscopio. Algunos ejemplos de colorantes muy empleados son la
hematoxilina y la eosina. El primero tiene afinidad por las molculas cargadas
negativamente, por lo que se emplea para teir los ncleos celulares (por su contenido de
ADN) que adquieren un color violceo. El segundo tiene afinidad por las sustancias bsicas,
otorgando un color rosado al citoplasma celular cuya carga neta es positiva.
E) Microscopa de campo brillante con tincin: Los colorantes especficos aumentan el
contraste y revelan detalles que no se aprecian de otra manera.
Seccin de tejido teida observada con
un microscopio ptico de campo brillante.
La seccin observada corresponde a las
clulas de los conductos colectores de
orina del rin, y fue teida con una
combinacin de hematoxilina y eosina.
(Fuente: Alberts y col., Molecular Biology
of the Cell, 2004).
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F) Microscopa de fluorescencia: se emplean sustancias naturales de la clula o colorantes

que tienen la capacidad de absorber determinadas longitudes de onda, y emitir luz
fluorescente. Se utiliza para detectar protenas u otras molculas especficas en una clula.
Para lograrlo se puede acoplar la molcula fluorescente a otra molcula capaz de reconocer
al componente que interesa visualizar, o emplear molculas fluorescentes que directamente
tengan afinidad con determinados componentes celulares. Se pueden combinar distintos
compuestos fluorescentes para detectar distintas molculas en la misma muestra.
Microscopa de fluorescencia. Se observa una
micrografa de una clula en mitosis. Para obtener esta
imagen, se emplearon tres molculas fluorescentes
distintas con el fin de teir tres componentes celulares
diferentes. Se us un anticuerpo acoplado a una protena
fluorescente verde para detectar a los microtbulos,
otro anticuerpo acoplado a una protena fluorescente
roja para detectar a los centrmeros, y un colorante
fluorescente azul para teir el ADN, que se encuentra
condensado formando los cromosomas. (Fuente: Alberts y
col., Molecular Biology of the Cell, 2004).
G) Microscopa confocal: permite obtener imgenes tridimensionales, a diferencia de la

microscopa ptica. El microscopio ptico convencional enfoca un determinado plano focal
dentro de una estructura tridimensional; por encima y por debajo de dicho plano la muestra
est iluminada pero no en foco, y esto genera una imagen borroneada. El microscopio
confocal combina dos enfoques: ptico y computacional. Esto elimina las imgenes
provenientes de otros planos que no sean los que se desea enfocar en cada momento. Las
imgenes se integran mediante computadoras para obtener una imagen tridimensional.
Comparacin de la microscopa fluorescente convencional y confocal.
Las dos imgenes se obtuvieron del mismo estadio de desarrollo de un
embrin de la mosca Drosophila, donde se tieron los filamentos de
actina de las clulas con un colorante fluorescente. (A) En la microscopa
convencional, la imagen es borrosa debido a la presencia de estructuras
fluorescentes por encima y por debajo del plano de foco. (B) en la imagen
confocal, la informacin fuera de foco es removida, resultando en una
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observacin ntida de la seccin de clulas del embrin (Fuente: Alberts y col., Molecular Biology of
the Cell, 2004)
Los microscopios electrnicos
Desarrollados a partir de 1930, permiten una ampliacin del objeto mucho mayor que el
microscopio ptico, con muy alta capacidad de resolucin. Permiten observar virus y
organelas subcelulares, entre otras estructuras. Bsicamente, dos tipos de microscopios
electrnicos fueron desarrollados para diferentes usos:
A) Microscopio electrnico de transmisin (MET): proyecta electrones (partculas
subatmicas con carga negativa) a travs de una fina capa de tejido o material a observar.
Al hacerlo, produce una imagen en dos dimensiones sobre una pantalla fosforescente,
donde el brillo en un rea particular de la imagen es proporcional al nmero de electrones
que son transmitidos a travs del material.
B) Microscopio electrnico de barrido (MEB): da como resultado una imagen que parece
tridimensional. Emplea dos o tres puntos de la muestra donde llegan los electrones que
escanean la superficie del espcimen a observar y salen del mismo siendo detectados por un
sensor.
1
1. Imagen de la bacteria Escherichia coli a travs de microscopio electrnico de transmisin (aumento 92.750x)
http://www.pbrc.hawaii.edu/~kunkel/gallery. Se nota dentro de la clula, coloreado en rojo, el rea donde se
sita el ADN. En esta imagen la bacteria se halla en proceso de divisin.
2. Imagen de bacterias E. Coli a travs de microscopio electrnico de barrido. Se genera una imagen
tridimensional (aumentos 22.810x) http://www.pbrc.hawaii.edu/~kunkel/gallery.
Los colores de las imgenes no son reales, ni producto de colorantes, sino que se generan artificialmente
mediante programas de diseo para destacar el objeto de inters.
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tomo
Molcula pequea
protena
Virus - ribosoma
bacteria
Clula animal
Clula vegetal
De lo expuesto se concluye que se optar por uno de los tipos de microscopa descriptos
segn el objetivo de estudio, el tamao de las estructuras que permiten visualizar, el detalle
que aportan, las molculas que permite distinguir, entre otros criterios. El siguiente
esquema muestra las posibilidades que ofrecen los diferentes aparatos pticos en relacin
con la resolucin del ojo humano.
Microscopio electrnico
Microscopio ptico
Ojo desnudo
Se compara el poder de resolucin de los diferentes microscopios y del ojo humano. La escala graficada es
logartmica (Adaptado de Alberts y col., Molecular Biology of the Cell, 2004)
Cmo se estudian las molculas que integran la clula

Muchos procesos celulares pueden estudiarse combinando las tcnicas microscpicas con
otras herramientas. Actualmente se dispone de tcnicas que permitan detectar, medir y
realizar seguimientos de casi todas las molculas presentes en una clula viva. Entre ellas:
- Protenas fluorescentes: El descubrimiento de protenas fluorescentes presentes en
distintos organismos, como la Protena Verde Fluorescente (GFP en ingls) extrada de
- Aequoria victoria, abri paso a innumerables aplicaciones en el campo de la biologa celular.

La caracterizacin del gen que la codifica permiti, por ingeniera gentica, emplearla
como etiqueta para sealar otra protena de inters a la cual se fusiona. Un ejemplo se
puede observar en la microfotografa de plantas transgnicas de la especie modelo
Arabidopsis thaliana que lleva una nueva protena resultante de la unin de la protena GFP
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con otra protena de estudio denominada talina. De esta forma, se puede estudiar en un
organismo completo la ubicacin y el comportamiento de una protena particular.
Estudio de protenas por fusin a la protena GFP
A) la superficie de las hojas de Arabidopsis cubiertas
de estructuras glandulares llamadas tricomas. (B) la
microscopia confocal MEB
permite observar la
protena talina debido a su unin con la protena
fluorescente verde GFP. En rojo se observa la
autofluorescencia de la clorofila. (Fuente: Alberts y col.,
Molecular Biology of the Cell, 2004).
- Uso de radioistopos para seguir el destino de molculas en la clula : Las molculas

pueden ser marcadas o etiquetadas con istopos radioactivos. Los istopos constituyen
variantes de los diferentes elementos qumicos que cambian en la masa de su ncleo, aunque
poseen el mismo nmero de protones y de electrones, y las mismas propiedades qumicas.
Los istopos radioactivos, o radioistopos, tienen un ncleo inestable que se desintegra para
producir un tipo de tomo diferente. En el transcurso de la desintegracin se pueden
liberar distintos tipos de radiaciones (por ejemplo, rayos gama) que son detectadas por
dispositivos especiales. Dado que existen radioistopos de muchos de los elementos que
componen a la mayora de las molculas presentes en la clula, se han desarrollado tcnicas
para el seguimiento y localizacin de molculas especficas, tanto bioqumicamente como
microscpicamente. Una de las primeras aplicaciones de la radioactividad en biologa fue el
seguimiento de la ruta del elemento carbono durante la fotosntesis en la sntesis de
carbohidratos. Luego se comenz a emplear para seguir cualquier proceso en las clulas.
En un experimento tpico, las clulas son suplementadas con una molcula precursora en su
forma radioactiva que se mezcla con las molculas no marcadas preexistentes. As, todas
siguen el mismo camino ya que son vistas por la maquinaria celular como la misma molcula.
Otro de los usos importantes de la radiactividad en la biologa celular es la localizacin de
un compuesto radiactivo en la clula o en un tejido por autoradiografa. Brevemente, las
clulas se incuban en presencia de la molcula radioactiva durante un lapso breve de tiempo,
y luego se las fija para su observacin microscpica. Se las cubre posteriormente con una
capa delgada de emulsin fotogrfica, y luego de varios das en oscuridad se puede revelar y
se observar la localizacin de la radiactividad en cada clula.
- Indicadores para la medicin de cambios intracelulares en la concentracin de ciertos

iones: las cantidades de iones inorgnicos (ion sodio: Na+, ion potasio: K+, ion calcio: Ca++,
ion cloruro: Cl-, etc.) dentro de la clula son muy variables, y esto determina distintas
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funciones celulares (por ejemplo, la transmisin del impulso nervioso y la contraccin de las
clulas musculares). Por esto que se han desarrollado mtodos para medir en distintos
momentos y en respuesta a varios estmulos, la concentracin y distribucin de esos iones
en el interior celular. Los indicadores sensibles a iones son molculas que pueden emitir
distinta intensidad de luz (fluorescencia o luminiscencia) en respuesta a la presencia y
cantidad de determinados iones. Un ejemplo es la Aequorina, una molcula luminiscente
aislada de una medusa, que emite luz en presencia de concentraciones muy bajas de Ca++.
- Molculas enjauladas fotosensibles: La complejidad y la rapidez de muchos procesos
intracelulares dificultan su seguimiento a nivel de una clula aislada. Por ejemplo, el
movimiento de protenas del citoesqueleto. Para lograrlo se ha desarrollado una estrategia
que permite sintetizar una versin inactiva y fotosensible de la molcula que se desea
estudiar (molcula enjaulada), para luego introducirla en una clula y activarla en un sitio y
momento especiales con un fuerte pulso de luz.
Molcula X
Luz UV
Molcula X
Derivado inactivo de la
molcula X (molcula
enjaulada)
subproducto
Molcula X
libre y
activa
Molculas
enjauladas.
Un
derivado
fotosensible
e
inactivo de una molcula (X)
puede convertirse, mediante un
pulso de luz UV, en su forma
libre y activa. Por ejemplo, una
molcula pequea como el ATP.
(Fuente: Alberts y col., Molecular
Biology of the Cell, 2004).
CONSIDERACIONES METODOLGICAS
El objetivo de este Cuaderno es profundizar en la informacin que habitualmente se
encuentra en los libros de texto acerca del conocimiento de la clula. Esto implica conocer
algunas de las tcnicas que permiten ver o medir los componentes celulares, los procesos
celulares, y comprender cmo se interpreta esa informacin.
El hecho de que un contenido como la clula ocupe espacio y tiempo en la currcula no se
debe slo a su importancia como contenido de la biologa, sino tambin a la dimensin que
alcanza la clula en el nuevo contexto de desarrollo tecnolgico y social. Por ejemplo, para
comprender los procesos que emplea la biotecnologa moderna y sus aplicaciones actuales y
futuras, es preciso comprender la estructura y el funcionamiento celular.
Comprender un objeto invisible a simple vista como la clula requiere de la construccin de
una imagen (funcional y estructural) o representacin abstracta con relaciones y procesos
complejos.
En este aspecto es importante tener en cuenta el concepto de modelo (ver Cuaderno N

50). Todo modelo es una representacin abstracta del conjunto de interacciones que
conceptual y metodolgicamente se delimitan como objeto de conocimiento. Cada modelo
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permite que algunos de sus aspectos (por ejemplo, estructuras, procesos o ideas) estn en
una escala diferente de la que son normalmente percibidos, o bien que entidades abstractas
puedan hacerse visibles. Es decir, aquello que se representa como una clula es un modelo
consensuado en la comunidad cientfica (modelo cientfico). Los modelos cientficos son
conjuntos de ideas que describen un proceso natural. Los modelos cientficos pueden ser
caracterizados en base a las siguientes aseveraciones:
a- son construcciones de la mente humana, por lo tanto de naturaleza temporaria;
b- son representaciones de ideas o conceptos que se tienen sobre algn aspecto de la
realidad;
c- son uno de los principales productos de la ciencia;
d- cumplen un importante papel en la construccin del conocimiento y la comprensin de los
fenmenos naturales;
e- proveen representaciones de ideas y conceptos presentados dentro de una teora;
f- ayudan a los cientficos a predecir, describir y explicar fenmenos naturales, objetos y
estructuras;
g- simplifican fenmenos o los hacen ms fciles para trabajar con ellos;
h- coexisten distintos modelos que se pueden utilizar para describir un mismo aspecto de la
realidad.
Estos modelos pueden resultar una herramienta muy til en el momento de proponer a los
alumnos algunas temticas complejas, y pueden resultar de gran utilidad en el momento de
transponer en el aula estas representaciones de los cientficos.
Generalmente, la comprensin de los conceptos ms abstractos requiere complementar con
representaciones grficas, analogas (adecuadamente seleccionadas) o revisiones acerca de
cmo se fueron desarrollando los conceptos histricamente. Para comenzar a ensear la
clula se sugiere emplear dibujos y esquemas e integrar imgenes reales (fotografas de
microscopa electrnica y de microscopa ptica) y esquemticas de la clula, de forma que
el alumno pueda establecer relaciones entre unas y otras, y diferenciar lo real de sus
representaciones. Una estrategia til es comenzar seleccionando imgenes microscpicas
reales, hacer observaciones de preparados al microscopio ptico y, a partir de ellas,
elaborar esquemas. Es importante trabajar a partir de estos dibujos que realizan los
alumnos, para interpretar qu es lo que ven al microscopio, cmo se relaciona con las
microfotografas, y relacionarlo con los modelos cientficos.
Otro aspecto que se recomienda tener en cuenta para favorecer la comprensin de la
naturaleza molecular de la clula, es la integracin adecuada del nivel molecular en el nivel
celular. Suele ocurrir que la delimitacin entre distintos niveles de organizacin
microscpicos es confusa para algunos alumnos. Palabras tales como tomo, molcula,
partcula o sustancia se emplean casi indistintamente, y no es extrao que las enzimas sean
catalogadas como clulas, o los glbulos rojos o las mitocondrias como molculas. En muchas
ocasiones, el problema se ve agravado por la falta de referencias a la escala en los dibujos,
fotografas o esquemas que se presentan a los alumnos. Esto requiere trabajar los
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contenidos de niveles de organizacin, y volver a ellos en cada oportunidad que se trabaje
en clase la estructura celular.
Suele suceder que los alumnos preguntan cmo saben los cientficos acerca de
determinados procesos o componentes si no los pueden ver. Estas preguntas son muy
pertinentes y comprensibles al trabajar con entidades que resultan abstractas e
invisibles. En este sentido, es interesante que los alumnos puedan interpretar, al menos
bsicamente, las tcnicas que se emplean para ver las molculas, sus movimientos y los
procesos en los que intervienen, a travs de reactivos que permiten detectar su presencia
mediante reacciones de color o radioactividad. Para tal fin, se sugieren actividades que
pueden contribuir a la comprensin de estos conceptos que no siempre aparecen en los
libros de texto.
Conceptos relacionados
El tema de este Cuaderno se puede aplicar en diferentes instancias del aprendizaje, ya que
se relaciona con diferentes conceptos y temas. Entre ellos: seres vivos, microorganismos,
niveles de organizacin de la materia, clulas (estructura y funcin), tipos y clasificacin de
clulas, transformaciones qumicas, metabolismo (anabolismo y catabolismo), manejo y usos
del microscopio, modelos cientficos.
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ACTIVIDADES
Actividad 1. Repaso de conceptos
Objetivo: repasar conceptos abordados en el texto y trabajar conceptos vinculados con escalas
microscpicas y macroscpicas.
Nota: A muchos alumnos les resulta difcil valorar escalas microscpicas, por debajo de las que
usualmente se emplean. Un modo de evitar estos problemas en el aprendizaje es entrenar a los
alumnos en el manejo de escalas microscpicas en comparacin con otras usuales. Por ejemplo,
plantear problemas en los que se vean obligados a calcular relaciones entre dimensiones celulares y
dimensiones de objetos cotidianos pueden ser muy eficaces para este propsito.
Desde un tejido hasta los tomos que lo componen, la escala de tamao vara considerablemente. De
ello se desprende que, para estudiar cada uno de dichos niveles estructurales, se requieren diversos
tipos de herramientas. Respecto a la escala, 1 micrmetro (m) son 10 -3 mm, mientras que 1
nanmetro (nm) son 10-6 mm. A partir del esquema determinar:
a) qu representan las ilustraciones.
b) qu instrumento se empleara para observar las diferentes estructuras representadas en el

esquema.
Fuente: Alberts y col., Molecular Biology of the Cell, 2004.
c) Dada la siguiente lista de ejemplares, determinar qu tipo de microscopa (ptica o electrnica)

sera la ms adecuada para analizarlos: 1) clula animal 2) virus - 3) bacteria 4) protenas
5) mitocondrias 6) vulo 7) neuronas 8) piojo 9) sacarosa (azcar de mesa) 10) ADN
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d) Unir con flechas los elementos de la columna A con los de la columna B:
A
B
Se integran distintos planos de la imagen para
formar una nueva imagen tridimensional
Se utiliza para observar partculas virales
Se colorean las muestras con hematoxilina y
eosina
Emplea un haz de electrones para estudiar la
muestra
Emplea colorantes fluorescentes
Microscopio ptico
Microscopio confocal
Microscopio electrnico de barrido
Microscopio electrnico de transferencia
Microscopio de fluorescencia
Rta:
e) En la foto se muestra una clula vista al microscopio electrnico de transmisin (MET)
I)
II)
III)
IV)
Indicar si la clula de la foto es eucariota o

procariota. Justificar la respuesta.
Indicar si la clula de la foto es animal o vegetal Justificar.

Indicar el nombre de las estructuras sealadas
Realizar un dibujo en el que se represente lo que se observa en la fotografa, y comparar
con el modelo que representa la clula eucariota animal.
Fuente: http://web.educastur.princast.es/
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f) Qu tipo de microscopio permitira estudiar la secuencia ordenada de eventos que conducen a la
separacin de los cromosomas durante la mitosis? Rta:
Actividad 2. Una cuestin de tamaos
Objetivo: trabajar las dimensiones relativas de componentes microscpicos.

a) Cuntos tomos entraran en la cabeza de un alfiler
b) Cuntos glbulos rojos hay en una gotita de sangre (1 mm 3
Actividad 3. El seguimiento de una protena celular
Objetivo: Repasar a travs de un ejemplo concreto los conceptos desarrollados acerca del estudio de
las molculas en las clulas.
En un laboratorio de biotecnologa, se desarrollaron plantas transgnicas que expresan una protena
de fusin entre la protena verde fluorescente (GFP en ingls) y una protena que se encuentra en los
cloroplastos relacionada a la fotosntesis (protena D1). Adems, confirmaron que dicha protena de
fusin no modifica la actividad normal de D1, y que es fluorescente cuando se la ilumina con luz UV.
a) Cmo se podra determinar que las plantas realmente expresan esa protena de fusin?
.
b) Cmo podra confirmar que las protenas de fusin se ubican en los cloroplastos?
.
c) Cmo se podra estudiar si la protena D1 vara en funcin de la intensidad de luz (en relacin a
los picos de intensidad de luz durante el da) en el sistema mencionado?
Actividad 4. Trabajo Prctico: observacin de clulas al microscopio
Si la escuela cuenta con microscopios se sugiere realizar esta experiencia de observacin de clulas
humanas y comparar con clulas de tipo vegetal y de hongos.
Objetivos:
a) Realizar observaciones de distintos tipos celulares mediante microscopa ptica.
b) Ejercitar la preparacin de muestras para la observacin.
c) Adquirir prctica en el empleo del microscopio ptico, y en el clculo de los aumentos de
observacin.
c) Registrar las observaciones mediante esquemas y comparar con microfotografas.
Para cumplir con el ltimo objetivo y trabajar a partir de los registros, conviene dar a los alumnos
algunas instrucciones:
1. dibujar con lpiz afilado con trazos definidos.
2. el dibujo debe ser grande para ver detalles.
3. darle un ttulo al dibujo.
4. sealar mediante flechas los nombres de las partes que se identifican.
5. Sealar el aumento con el cual se observa el preparado a travs del microscopio. Nota: el aumento
se calcula multiplicando el aumento de la lente ocular por el aumento de la lente del objetivo. Por
ejemplo, si en la lente ocular dice X15 y en el objetivo X20, el aumento final con el cual se observa
ser de 300 veces.
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a) Preparacin y observacin al microscopio de una muestra de clulas humanas

Materiales:
- Microscopio ptico
- Portaobjetos y cubreobjetos
- Colorante azul de metileno
Procedimiento:
1 - Limpiar con alcohol el portaobjetos y raspar suavemente el interior de la mejilla en la boca con un
hisopo o una cuchara limpia.
2 - Extender el material recogido sobre el portaobjetos.
3 - Colocar una gota de agua y una de azul de metileno.
4 - Aplicar el cubreobjetos.
5 - Observar al microscopio y dibujar las estructuras que observa. Observar los
preparados incrementando progresivamente el aumento.
POR RAZONES DE SEGURIDAD ES IMPORTANTE NO COMPARTIR MATERIAL Y PONER A
LAVAR O DESECHAR EL MATERIAL EMPLEADO PARA EXTRAER LA MUESTRA.
6 - conseguir preparados de clulas sanguneas, nerviosas, musculares, etc., observarlos al
microscopio, y analizar las diferencias entre las clulas observadas.
b) Observacin microscpica de tejido epidrmico de cebolla
Adaptado de http://www.joseacortes.com/practicas/cebolla.htm
Materiales:
Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cubeta
Agujas
Pinzas
Escalpelo
Verde de metilo actico o azul de metileno
Cuentagotas
Cebolla
1. Separar una de las hojas interna de la cebolla y desprender la membrana fina que est adherida
por su cara inferior.
2. Depositar el fragmento de membrana en un portaobjetos con unas gotas de agua, y colocarlo

sobre la cubeta de tincin.
3. Escurrir el agua, aadir una gotas de verde de metilo actico (o azul de metileno) sobre la
membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente. No debe secarse la epidermis por
falta de colorante o por evaporacin del mismo.
4. Con el cuentagotas baar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte colorante.
EDICIN N 80
5. Colocar sobre la preparacin un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al
microscopio.
6. Observar la preparacin a distintos aumentos, empezando por el ms bajo. Identificar las

distintas clulas del tejido epidrmico y las de las hojas del bulbo de cebolla.
c) Observacin microscpica de hongos

Es una observacin cotidiana el hecho que si se deja un trozo de pan en un lugar hmedo, con el paso
del tiempo es probable que crezca sobre l una pelusa blanca que luego se oscurece, correspondiente
al hongo Rhyzopus stolonifer (o moho negro del pan) . Esa pelusa es el micelio del hongo, y su
oscurecimiento se debe a la formacin de esporangios, estructuras que dan lugar a millones de
esporas (una forma de reproduccin de stos organismos)
Los principales mtodos aplicados para la observacin microscpica de los cultivos son: la observacin
en fresco con una solucin adecuada, y las preparaciones en cinta adhesiva.
Materiales:
- Pan o manzana en el cual haya crecido moho
- Lupa
- aguja de diseccin
- portaobjetos y cubreobjetos
- azul de metileno
- Cinta adhesiva transparente
- Microscopio
Preparacin en fresco de mohos
1.
2.
3.
4.
5.
Con la ayuda de la lupa tomar, con una aguja de diseccin, una porcin muy pequea de muestra
Extender el material recogido en el portaobjetos.
Colocar una gota de agua y una de azul de metileno.
Aplicar el cubreobjetos.
Observar al microscopio ptico las estructuras del hongo y sus esporas, y dibujarlas.
Preparacin en cinta adhesiva

1. Colocar sobre un portaobjetos una gota de solucin de azul de metileno.
2. Cortar un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2cm.
3. Tocar con el lado adhesivo de la cinta la superficie de la fruta o el pan enmohecidos o el borde de
una colonia de hongo de un cultivo. En la zona central de una colonia puede haber una excesiva
concentracin de esporas.
4. Pegar la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos.
5. Eliminar el colorante sobrante con un papel de filtro.
Gua para el anlisis de resultados de las experiencias:

1.
Enumerar la variedad de estructuras que presentan las clulas humanas.
EDICIN N 80
2. Prestar atencin a la nitidez con que se ven las clulas vegetales debido a la presencia de la pared
celular.
3. Analizar las diferencias fundamentales entre las clulas vegetales, animales y hongos, y tambin
entre las clulas procariotas y eucariotas.
4. Comparar los dibujos realizados por los alumnos con imgenes de los libros (modelos cientficos y
microfotografas) y reconocer las estructuras observadas.
5. Analizar el detalle con que pueden observarse las estructuras celulares y proponer tcnicas para
observar ms detalles de las diferentes estructuras celulares.
EDICIN N 80
Material de consulta
- La modelizacin en la enseanza de la biologa del desarrollo. Antonio E. Felipe, Silvia C. Gallarreta y
Graciela Merino. Departamento Ciencias Biolgicas, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad
Nacional del Centro de la Prov. de Buenos Aires, Tandil, R. Argentina. Revista Electrnica de
Enseanza de las Ciencias Vol. 4 N 3 (2005).
- Gua de trabajos prcticos de la asignatura Biologa de la Carrera Ingeniera en Alimentos Universidad Nacional de Lujn http://www.unlu.edu.ar/~biologia10903/
- Captulo 29 Los hongos
http://www.educa.aragob.es/iescarin/depart/biogeo/varios/BiologiaCurtis/Seccion%205/5%20%20Capitulo%2029.htm
- La clula aprendida. Manuel Jos Andreu Guerrero. Espaa.
http://www.encuentros.uma.es/encuentros70/aprendida.htm
- Historia de la microscopa. Mariana Lanfranconi. FCEyN, Universidad Nacional de Mar del Plata
- Molecular Biology of the Cell. Alberts B., Johnson A., Lewis J., Raff M., Roberts K., Walter P. 4ta.
Edicin, Editorial Garland (2002). Captulos e imgenes disponibles (idioma ingles):
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?call=bv.View..ShowTOC&rid=mboc4.TOC&depth=2
- Hipertextos del rea de la biologa, sitio de la Universidad Nacional del nordeste.
Clula Eucariota I: generalidades disponible en
http://fai.unne.edu.ar/biologia/cel_euca/celula1.htm
- Aldea Educativa. http://www.aldeaeducativa.com/aldea/Fotos.ASP?which=/IMAGES/celula.gif

- El microscopio ptico compuesto. Una gua simple y accesible acerca de las partes, el uso, el manejo
y el mantenimiento del microscopio ptico http://www.joseacortes.com/practicas/microscopio.htm

Como Se Estudia La Celula

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Cmo se estudia la clula

Estructura de una clula eucariota animal.

Los modelos cientficos

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Microscopio usado por Van Leeuwenhoek

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Desde su invencin, la microscopa ha experimentado increbles adelantos, aumentando no

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A) Microscopa de campo brillante: el material se observa sin coloracin. La luz pasa

F) Microscopa de fluorescencia: se emplean sustancias naturales de la clula o colorantes

G) Microscopa confocal: permite obtener imgenes tridimensionales, a diferencia de la

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- Aequoria victoria, abri paso a innumerables aplicaciones en el campo de la biologa celular.

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En este aspecto es importante tener en cuenta el concepto de modelo (ver Cuaderno N

b) qu instrumento se empleara para observar las diferentes estructuras representadas en el

Fuente: Alberts y col., Molecular Biology of the Cell, 2004.

c) Dada la siguiente lista de ejemplares, determinar qu tipo de microscopa (ptica o electrnica)

Indicar si la clula de la foto es eucariota o

Indicar si la clula de la foto es animal o vegetal Justificar.

Actividad 2. Una cuestin de tamaos

Objetivo: trabajar las dimensiones relativas de componentes microscpicos.

Actividad 3. El seguimiento de una protena celular

Actividad 4. Trabajo Prctico: observacin de clulas al microscopio

a) Preparacin y observacin al microscopio de una muestra de clulas humanas

2. Depositar el fragmento de membrana en un portaobjetos con unas gotas de agua, y colocarlo

6. Observar la preparacin a distintos aumentos, empezando por el ms bajo. Identificar las

c) Observacin microscpica de hongos

Preparacin en cinta adhesiva

Gua para el anlisis de resultados de las experiencias:

- Aldea Educativa. http://www.aldeaeducativa.com/aldea/Fotos.ASP?which=/IMAGES/celula.gif

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