1. Explique la regulacin hormonal de la glicolisis.

2. Explique el funcionamiento de la va glicoltica en un organismo con

FFK-1 mutada en el sitio alostrico para AMP y PyrK muatada en el sitio
alostrico para Ala.
3. Explique cmo se conoci el orden de las enzimas en la va
glicoltica?

El Glucagn es una hormona polipeptdica, secretada por las clulas Alfa de los Islotes de
Langerhans del Pncreas que regula los niveles de glicemia en el cuerpo. Esta hormona es
liberada cuando los niveles de glucosa en sangre disminuyen por debajo de los niveles
fisiolgicos, por lo tanto, su funcin consiste en aumentar los niveles de la misma en el
organismo.
Esta hormona una vez que llega a la clula, se une a su receptor y provoca una cascada de
sealizacin, la cual activa, a su vez, diversas rutas que permiten que se lleven a cabo varios
procesos metablicos a travs de diversas enzimas.
Cuando la hormona glucagn se une al receptor de glucagn en la membrana citoplasmtica,
ste sufre un cambio conformacional e interacciona con la protena heterotrimrica Gs. Esta
interaccin causa un cambio por la finalidad de GDP a GTP en la subunidad alfa y la
disociacin de esta subunidad del dmero beta-gamma. Luego, la subunidad alfa difunde por la
membrana plasmtica e interacciona con la Adenilato Ciclasa estimulndola. Por su parte, la
Adenilato Ciclasa cataliza la sntesis de AMPc y PPi a partir de Mg2+ y ATP. El AMPc es un
mensajero secundario que difunde por el citoplasma y se une a una protena quinasa
dependiente de AMPc, la Protena Quinasa A (PKA) y la activa. La PKA es un tetrmero
constituido por dos subunidades reguladoras y dos subunidades catalticas. Al unirse el AMPc
(modulador alostrico positivo) a las subunidades reguladoras, stas se separan de las
subunidades catalticas dejando expuesto el sitio activo de las mismas. La PKA activa
y fosforila protenas o enzimas especficas en residuos de serina y treonina para activarlas
o inhibirlas (Ctedra de Bioqumica UCV, 2012).
La Adenilato Ciclasa permanece activa mientras que interacciona con alfa-GTP, pero una vez
hidrolizado el GTP a GDP + Pi (por medio de la actividad GTPasa intrnseca de la subunidad
alfa), sta se separa de la Adenilato Ciclasa y se vuelve a asociar con el dmero beta-gamma.
Por su parte, el AMPc es rpidamente hidrolizado a AMP lineal por la fosfodiesterasa de AMPc
(PDE). Por ltimo, las protenas fosforiladas por la actividad quinasa de la PKA son
desfosforiladas por accin de enzimas fosfatasas. Es de esta manera como se logra finalizar la
cascada de sealizacin del glucagn (Ctedra de Bioqumica UCV, 2012).

TEJIDO HEPTICO
Metabolismo de carbohidratos
Gliclisis vs. Neoglucognesis
En el hgado; especficamente en el hepatocito, la PKA va a regular a dos enzimas
citoplasmticas claves para garantizar la inhibicin de la va glucolitica y la activacin de la va
neoglucognica y as aumentar los niveles de glucosa en el organismo.
En primer lugar, la PKA interviene en la actividad de la enzima dual para regular de manera
coordinada la glucolsis y la neoglucognesis. Esta quinasa forsforila a la enzima dual
activando su dominio fosfatasa (Fructosa-2,6-Bifosfatasa) e inhibiendo su dominio quinasa
(Fosfofructo Quinasa II). El dominio fosfatasa cataliza la formacin de Fructosa-6-Fosfato (F6P)
a partir de Fructosa-2,6-Bifosfato (F2,6BP). Esta ltima es el principal modulador alostrico
positivo de la enzima glucoltica Fosfofructo Quinasa I (PFK-I) y negativo de la enzima
neoglucognica Fructosa-1,6-Bifosfatasa (F1,6BPasa). La PFK-I es la principal enzima

reguladora de la glucolsis y cataliza la reaccin de F6P a Fructosa-1,6-Bifosfato (F1,6BP). La

reaccin inversa es catalizada por la enzima F1,6BPasa. Debido a que se estn reduciendo los
niveles citoplasmticos de F2,6BP por la actividad fosfatasa de la enzima dual, disminuye la
estimulacin de la PFK-I y la inhibicin de la F1,6BPasa. Por lo tanto, la va glucolitica se
desacelera y se favorece la va neoglucognica (Devlin, 2008).
En segundo lugar, la PKA fosforila e inactiva a la enzima glucoltica Piruvato Quinasa. Esta
enzima cataliza la formacin de Piruvato a partir de Fosfoenolpiruvato (PEP) en el citoplasma.
Por consiguiente, la va glucoltica se inhibe y la va neoglucognica se activa.
En conclusin, la hormona glucagn regula de manera coordinada la glicolsis (inhibindola) y
la neoglucognesis (activndola) en el hepatocito, principalmente a travs de la enzima dual y
secundariamente por la enzima Piruvato Quinasa. El resultado final de estas regulaciones es la
produccin de glucosa con el fin de aumentar los niveles plasmticos y as ofrecerle una fuente
de energa constante a los tejidos perifricos que la necesitan, especialmente el encfalo.

El Glucagn no acta sobre el tejido adiposo, sin embargo, existe otra hormona, la
Adrenalina, que ejerce efectos parecidos al Glucagn en este tejido. La unin de
Adrenalina a su receptor beta adrenrgico en la membrana citoplasmtica
del hepatocito desencadena la cascada de AMPc igual a la del glucagn.
En los adipocitos, existen unas gotas lipdicas llenas de triacilglicridos (TAG),
rodeadas por unas protenas llamadas perilipinas. La Adrenalina, en los adipocitos
va a promover la liplisis, es decir, la hidrlisis de estos TAG en cidos grasos
libres (AG) y monoacil glicerol (MAG). La PKA activada por el mensajero
secundario AMPc fosforila y activa a la enzima Lipasa Sensible a Hormona (LSH) y
fosforila a las perilipinas permitiendo que la LSH se ancle a la gota de grasa. La
activacin de la LSH promueve la va lipoltica y se liberan cidos grasos y glicerol
a partir de TAG (Devlin, 2008).

Fuente: Maya Juleimy.

El glicerol liberado viaja por la sangre hasta llegar al hgado donde ser absorbido
y convertido en DHAP para ser incorporado en la va neoglucognica en estado
de ayuno. Por su parte, los cidos grasos se unen a la albmina (protena) en la
sangre siendo transportados al hgado y al tejido muscular donde servirn como
fuente de energa mediante la beta-oxidacin.

TEJIDO MUSCULAR
En el tejido muscular, al igual que el tejido adiposo, tampoco acta el glucagn
pero s la adrenalina. Esta hormona va a tener efectos similares a los causados por
el glucagn en el tejido heptico pero tambin habr protelisis muscular.
La Insulina es una hormona producida por las clulas beta del Pncreas para
regular los niveles de glicemia en el cuerpo. Todos los efectos de la Insulina estn
mediados por un receptor de membrana. (Adems de unir a la hormona, el
receptor de insulina puede unir, con menor afinidad, a los factores de crecimiento
similares a insulina IGF-I e IGF-II). El receptor de Insulina es una glicoprotena
heterotetramrica constituida por cuatro subunidades: dos alfa y dos beta, unidas
por enlaces disulfuro. Las subunidades alfa son perifricas y presentan el sitio de
unin para la insulina. Las subunidades beta estn ancladas en el interior de la
clula, atraviesan la membrana plasmtica y presentan actividad intrnseca de
tirosina quinasa.

Cuando la insulina se une al receptor, las subunidades alfa se acercan, se

dimerizan, y este cambio conformacional permite que se enlace ATP(Adenosin
trifosfato) a los dominios intracelulares de las subunidades beta. La unin de ATP
facilita la autofosforilacin del receptor, lo cual estimula la actividad tirosina
quinasa del mismo y promueve la fosforilacin de sustratos proteicos en residuos
de tirosina. Estos residuos de fosfotirosina son reconocidos por dominios
especficos y actan como puntos de anclaje para otros sustratos proteicos que a
su vez poseen residuos de tirosina susceptibles de ser fosforilados. Entre las
protenas intracelulares fosforiladas por la actividad tirosina quinasa del receptor
de insulina, se encuentran las protenas adaptadoras denominadas Sustratos del
Receptor de Insulina (1 al 4) o IRSs (Insulina Receptor Substrates 1-4). Los ms
importantes en la regulacin del metabolismo de los hidratos de carbono son el
IRS-1 y el IRS-2.
La Fosfoinositol 3-quinasa (PI3K) se asocia con residuos de fosfotirosina en el
IRS-1 a travs del dominio SH2. Una vez activada por esta unin, la PI3K fosforila
al lpido de membrana Fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) y lo convierte en
Fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PIP3). El PIP3 es reconocido por los dominios
PH presentes en las Protenas Quinasas Dependiente de fosfoinositoles (PDK1) y
en la Protena Quinasa B (PKB o AKT). La PKB se localiza en el citoplasma y la
estimulacin con insulina produce la translocacin a la membrana plasmtica
donde se une a PIP3. La PDK1 (tambin presente en la membrana) activa a la
PKB mediante las fosforilacion de sus dos sitios reguladores principales. Una vez
activada, la PKB se separa de la membrana plasmtica y difunde al citosol donde
fosforila residuos de serina y treonina, activando o desactivando otras protenas.
En el msculo y el tejido adiposo, la PKB desencadena el desplazamiento de los
transportadores de glucosa (GLUT4) desde vesculas internas a la membrana
plasmtica, estimulando la captacin de glucosa desde la sangre. La PKB fosforila
y activa a fosfatasas especficas y estimula a las fosfodiesterasas del AMPc, las
cuales degradaran las molculas de AMPc impidiendo que estas activen a la PKA
y esta a su vez fosforile y active o inactive a otras enzimas. (Ctedra de
Bioqumica UCV, 2012)

Va de sealizacion de la insulina y GLUT-4. Fuente: http://www.biomedicinahoy.com

TEJIDO HEPTICO
Las clulas de este tejido, a diferencia de las del tejido adiposo y muscular, poseen
transportadores de glucosa GLUT-2 (insulino independientes). El aumento de la
glicemia permite la entrada de glucosa al hepatocito, donde es fosforilada por la
glucoquinasa (enzima con un Km alto para la glucosa), para su posterior uso.
Gluclisis vs. Neoglucognesis
Una de las fosfatasas activadas por la PKB es la que defosforila y activa al dominio
Fosfofructo Quinasa II (PFK-II) de la enzima dual que cataliza la formacin de
Fructosa-2,6-Bifosfato (F2,6BP) a partir de Fructosa-6-Fosfato (F6P). Esto tambin
se ve favorecido gracias a la accin de las fosfodiesterasas de AMPc quienes
disminuyen las concentraciones de AMPc impidiendo que activen a la PKA y que
esta a su vez fosforile y activa al dominio F2,6BPasa de la enzima dual. F2,6BP es
el principal modulador alostrico positivo de la PFK-I y negativo de la F1,6BPasa.
La PFK-I es la principal enzima reguladora de la gliclisis y por lo tanto su

activacin promueve la va glucoltica. Esta enzima cataliza la formacin de

F1,6BP a partir de F6P. Por su parte, la F1,6BPasa es una de las enzimas
reguladoras de la neoglucognesis y su inhibicin desfavorece la va
neoglucognica.
El incremento de las concentraciones de F1,6BP causan la estimulacin y
activacin de la Piruvato Quinasa (PQ) por alosterismo positivo. Fosfatasas la
defosforilan y la activan; de la misma manera, los bajos niveles de AMPc impiden
que se active la PKA y que por lo tanto sta fosforile e inactive a la PQ. La PQ es
otra de las enzimas reguladoras de la gliclisis que cataliza la formacin de
Piruvato a partir de PEP (Fosfoenol Piruvato). Su activacin promueve la va
glucoltica. En conclusin, la hormona insulina regula de manera coordinada la
gliclisis (activndola) y la neoglucognesis (inactivndola) en el hepatocito,
principalmente a travs de la enzima dual y secundariamente por la Piruvato
Quinasa.
En este tejido, la insulina por el mecanismo ya descrito, incrementa la expresin de
receptores GLUT-4 en la membrana, aumentando as la entrada de glucosa, la
cual es posteriormente oxidada en la va glicoltica. Al promover la gliclisis, se
incrementa el aporte de Dihidroxiacetona Fosfato (DHAP), que puede ser
convertida en Glicerol-3-Fosfato (Glicerol-3P) por la enzima Glicerol-3-Fosfato
Deshidrogenasa (Glicerol-3P DH). El Glicerol-3P es un sustrato necesario en la
resterificacin de los cidos grasos para formar TAG.
A su vez, esta hormona por medio de las fosfatasas, desfosforila a 2 enzimas: la
Lipasa Sensible a Hormona (LSH) de la cual ya se habl anteriormente, y la
Lipoprotena Lipasa (LPL) que se encuentra en los capilares de este tejido. La
desfosforilacin de la LSH, provoca su inactivacin, inhibiendo as la liplisis.
Mientras que en el caso de la LPL, sta al estar desfosforilada se encuentra activa,
y cataliza la hidrlisis de TAG contenidos en las lipoprotenas
(VLDL y quilimicrones), liberando de esta forma cidos grasos libres (AGL) y
glicerol. Los cidos grasos libres que ingresan al adipocito, pueden ser utilizados
para la obtencin de energa, o a su vez pueden ser resterificados. En otras
palabras se puede decir, que la insulina en este tejido promueve el depsito y la
formacin de TAG.
En conclusin, la insulina activa las vas glucoltica, glucgenognica y lipognica
e inhibe las vas neoglucognica, glucgenoltica y de la beta-oxidacin.

Rutas metablicas en el hgado en presencia de la insulina. Fuente:

Fuente:http://www.jci.org/articles/view/22422/files/JCI0422422.f1/medium

TEJIDO MUSCULAR
La insulina en este tejido, al igual que en el tejido adiposo, induce la captacin de
glucosa por la traslocacin del GLUT-4 a la membrana celular del miocito,
promoviendo as la gliclisis y glucgenognesis, por medio de los procesos
explicados anteriormente.