2- Colorao lminas
Corantes hematolgicos: mistura de sais cidos e bsicos que permitem a colorao das
estruturas nucleares e citoplasmticas das clulas.
Tcnica
1- Cobrir a lmina com May Grnwald, deixar 3 minutos.
2- Adicionar 10 a 20 gotas de gua, pH 6,6 - 7,0 deixar 1 minuto.
3- Escorrer a soluo.
4-Cobrir a lmina com o Giemsa diludo, deixar 15 minutos.
5-Escorrer a soluo e lavar a lmina em gua corrente.
6-Limpar o verso da lmina e deixar secar.
1.2.
1.4.
2. Lquidos Diluidores
2.1 Lquido de Glover
Na2SO4 p.a ............................................................. 12,5 g
CH3 COOH (cido Actico Glacial) .............................. 33,3 ml
H2O destilada ........................................................ 200,0 ml
2.2 Lquido de Dacie
Citrato de Sdio ................................................... 31,3 g
Formol a 40% ....................................................... 10,0 ml
H2O Destilada ....................................................... 1000 ml
3. Diluio
0,02 ml de sangue ................................................ 4 ml lquido diluidor
1 ml sangue .......................................................... X
Portanto a diluio usada para a contagem de hemcias 1: 200
4. Clculos
1mm2
1/5 mm2
0,1 mm
1 : 200
x y
0,1
10
=
=
10 x 5 x
10.000 y
200
Sendo:
X = n de hemcias p/ mm3
Y = n de hemcias contadas (1/5 da rea do retculo central).
5. Resultado: x hemcias p/ mm3
6. Valor referncia: Homem: 4.500.000 55.000.000 /mm3
Mulher: 3.8000.000 48.000.000 /mm3
7. Interpretao
Valores aumentados: o aumento do nmero de glbulos vermelhos se conhece com o
nome de poliglobulia ou policitemia. um caso relativamente raro. Pode ocorrer nas
diarrias graves (desidratao), queimaduras (grandes extenses), na Policitemia Vera,
em algumas cardiopatias crnicas, em casos de intoxicaes por lcool etlico ou drogas,
fibroses pulmonares, diabetes, etc.
Valores diminudos: A baixa de glbulos vermelhos est presente em diversas anemias
que podem ser discretas ou intensas. Nestes casos haver necessidade de outros exames
para o diagnstico das anemias a partir da anamnese. Esto tambm diminudos nas
leucemias, aps hemorragias ou hemlises intensas e nas infeces severas.
4- Reativo:
Azul de cresil brilhante a 1%
Azul de cresil brilhante
Citrato de sdio
NaCl (0,85%)
1,0 g
0,4g
100 ml
Misturar bem o azul de cresil brilhante com o citrato de sdio e, em seguida, dissolver
com a soluo fisiolgica. Esperar 48 horas e filtrar em papel de filtro.
5- Valor de Referncia: (segundo Dacie & Lewis, 1984)
Adultos e crianas
Recm nascido
6- Interpretao:
Valores aumentados: indicam hiperatividade da medula ssea, Anemia hemoltica,
intoxicao pelo chumbo.
Valores diminudos: indicam hipoatividade da medula ssea (reticulopenia).
A reticulocitose alta e persistente milita a favor do diagnstico de anemia hemoltica e
de intoxicao pelo chumbo. A crise reticulocitria bom indicativo da eficcia de uma
teraputica no decurso das anemias: vitamina B12 na anemia perniciosa, ferro na
anemia hipocrmica, vitamina C na anemia do escorbuto.
Aula 4: Hemossedimentao
1. Definio
A hemossedimentao consiste na medida da velocidade de sedimentao das hemcias,
a qual est relacionada com a agregao das hemcias em grumos maiores e a queda
destes, devido gravidade, para o fundo da pipeta de Westergreen. medida que as
hemcias caem, forma-se uma corrente de plasma que sobe e que detm as hemcias.
Esta corrente ressuspende hemcias isoladas, mas no as agregadas. Logo a
hemossedimentao mede indiretamente a capacidade de formao dos aglomerados ou
rouleaux depende de uma resultante de foras. Sabe-se que as hemcias possuem
carga eltrica negativa (-) mantendo-se normalmente afastadas entre si. As
macromolculas plasmticas so capazes de neutralizar esta fora induzidas pelas cargas
negativas, sendo que as macromolculas maiores e mais assimtricas tm maior
capacidade neste sentido. Assim o fibrinognio tem maior responsabilidade pela
hemossedimentao que a gamaglobulina. A albumina praticamente no tem
importncia. De uma forma mais grosseira, podemos considerar a hemossedimentao
proporcional quantidade de fibrinognio e alfa globulina, haptoglobina, ceruloplasmina
e protena C reativa no plasma. Sabe-se que o sangue desfibrinado e o sangue com
microcogulos fornecem hemossedimentao nula ou muito baixa. A velocidade de
hemossedimentao possui as seguintes utilidades:
a) acusar molstias ocultas,
b) acompanhar o curso de uma determinada molstia (tuberculose, febre
reumtica, infarto do miocrdio),
c) confirmar um diagnstico e fazer um diagnstico diferencial (por exemplo,
entre infarto agudo do miocrdio e angina de peito, entre carcinoma
gstrico e lcera pptica).
2. Tcnica
2.1. Colher 5 ml de sangue do paciente em jejum.
2.2. Levar o sangue a um frasco com anticoagulante citrato ou oxalato e por inverso
ou movimentos circulares, promover a mistura do anticoagulante com o sangue.
x y
0,4
2,5 y
7. Interpretao
Valores aumentados:
Leucocitose: o aumento do nmero global de leuccitos por mm3. Este aumento ocorre
custa de uma ou mais das variedades de leuccitos. A leucocitose pode ser fisiolgica
ou patolgica.
Fisiolgica: no RN, na gravidez, durante o parto, variaes dependentes da postura do
corpo, em decorrncia de exerccios fsicos. Massagens, convulses etc
Patolgicas: Pode apresentar muito elevada em certas patologias. Geralmente, o
aumento de leuccitos se deve ao predomnio de uma variedade, quase sempre o
A leucopenia pode existir nas seguintes condies: febre tifide, brucelose, dengue,
rubola, caxumba, sarampo, poliomielite, tuberculose, intoxicaes, doenas do sistema
hematopoitico (anemia aplstica, anemia perniciosa), etc.
1.1 De acordo com o exposto anteriormente, localizar o local do esfregao para iniciar a
contagem.
1.2 Com a objetiva de imerso contar 100 leuccitos, usando um dos mtodos citados,
fazendo a diferenciao entre os tipos de leuccitos.
1.3 Anotar os diferentes tipos de leuccitos e os valores encontrados na contagem em %.
1.4 Baseando-se na contagem global de leuccitos e nos valores percentuais encontrados
na contagem diferencial, calcular os valores absolutos para cada tipo de leuccitos.
Ex:
Contagem global de leuccitos = 10.000 p/ mm3
Contagem diferencial de leuccitos
valor absoluto
2%
200/ mm3
Segmentados
60%
6.000/ mm3
Eosinfilos
4%
400/ mm3
Bastonetes
Basfilo
1%
100/ mm3
Moncito
5%
500/ mm3
Linfcito
Total
2.800/ mm3
28%
10.000/ mm3
100%
Se em 100 leuccitos
Em 10.000 leuccitos
2 bastonetes
x bastonetes
2. Resultado
expresso em nmero relativos e absolutos, conforme j citado anteriormente no
exemplo.
3. Valor referncia: (Segundo Dacie & Lewis, 1984)
Adultos
Neutrfilos
Eosinfilo
Basfilo
Linfcitos
Moncitos
%
40 a 75
1a6
<1
20 a 45
2 a 10
4. Interpretao
A contagem diferencial de leuccitos assume enorme importncia pelos dados
diagnsticos ou prognsticos que pode fornecer mediante uma anlise criteriosa do
esfregao sanguneo por um bom analista. Para facilitar a interpretao clnica,
indispensvel o clculo de cada tipo de leuccito. Dependendo deste valor, uma
leucocitose relativa, por exemplo, pode no ser absoluta.
4.1 Neutrofilia
Quando o organismo invadido por germes, principalmente por cocos: pneumonia,
meningite, apendicite, peritonite etc. Quando ocorre destruio de tecidos, como no
infarte de miocrdio e em abscesso asspticos. Fisiologicamente pode ser encontrada no
recm nascido, aps exerccios extenuantes, aps vmitos repetidos, convulses e
taquicardia.
Freqentemente, ocorre o chamado desvio esquerda quando h neutrofilia, embora o
mesmo possa ocorrer sem esta condio. Denomina-se desvio esquerda, ao
aparecimento no sangue circulante, das formas mais jovens que o neutrfilo bastonete.
O aparecimento no sangue circulante de elementos mais maduros que o neutrfilo
bastonete, configura o chamado desvio direita, que ser tanto maior quanto maior o
nmero de neutrfilos hipersegmentados. Este desvio aprece em processos infecciosos
crnicos de longa durao, tais como tuberculose, sfilis, etc.
Podem tambm ser observadas modificaes qualitativas dos neutrfilos: granulaes
txicas, vacolos, modificaes da cromatina, corpsculos de Dhle. Cumpre registrar
tambm as anomalias que acometem os neutrfilos: anomalias de Pelger Huet, de Alder,
de May Hegglin e de Chediak Higashi.
4.2 Neutropenia
Constitui a diminuio do nmero de neutrfilos em percentagem ou por mm3 de
sangue, havendo em conseqncia, linfocitose. A neutropenia relativa por aumento de
outro tipo de leuccito rara.
A neutropenia ocorre nas seguintes condies:
Induzida por medicamentos.
4.3 Eosinofilia
Aumento absoluto ou relativo dos neutrfilos. Ocorre nas seguintes condies:
Eosinofilia fisiolgica da infncia.
Molstias alrgicas: asma, urticria, dermatites, etc.
Nas infeces parasitrias: scaris, Enterobius, Schistosoma, Taenia, etc.
Eosinofilia familiar.
Doenas de pele: escabiose, Herpes, psorase.
Doenas do Sistema Hematopoitico.
Alguns agentes qumicos ou medicamentosos.
Aps irradiao.
Aps a cura de muitos processos infecciosos.
4.4 Eosinopenia
Ocorre em quase todas as molstias infecciosas agudas e em reagudizaes de processos
crnicos:
Estados txicos endgenos ou exgenos: coma diabtico, uremia, hemlise aguda.
Nas intervenes cirrgicas graves.
Na anemia perniciosa e outras insuficincias graves da medula ssea.
Aps administrao de hormnios e medicamentos.
Durante condies estressantes como infeces agudas, traumatismos, etc.
4.5 Basofilia
No apresenta grande importncia clnica. Pode ser encontrada nas seguintes condies:
leucemias mielides, Policitemia Vera, tumores sseos, algumas leucocitoses,
acromegalia, varola, etc.
4.6 Basopenia
Tem sido pouco estudada pelo nmero escasso de basfilos no sangue. Pode ocorrer
durante os processos infecciosos agudos sendo, porm, menos sensvel que a
eosinopenia.
4.7 Monocitose
Pode ocorrer nas seguintes condies: infeces por protozorios, doena de Hodkins,
tifo, endocardite, leucemias monocticas, tumores cerebrais, etc.
4.8 Monocitopenia
Pode ocorrer na fase aguda de processos infecciosos e na falta de reao por parte do
sistema mononuclear fagocitrio (caquexia e desnutrio).
4.9 Linfocitose
Consiste no aumento dos linfcitos que pode ser relativo ou absoluto. A linfocitose
absoluta , em geral, rara, enquanto que a relativa freqente, ocorrendo mais
comumente por diminuio dos neutrfilos.
A linfocitose pode ocorrer nas seguintes condies: infeces agudas (gripe, viroses,
toxoplasmose, infeces crnicas, leucemias linfticas, rubola, etc). Nas viroses de
modo geral, aparecem linfcitos atpicos que so clulas de grande tamanho e foram
classificados por Downey.
4.10 Linfopenia
Ocorre na fase aguda das molstias infecciosas. Quanto maior a linfocitopenia no incio
da molstia infecciosa aguda, mais sombrio o diagnstico.
Pode ser tambm observada a linfocitopenia, na cirrose heptica, caquexia, neoplasias,
linfosarcoma, reticulosarcoma e blastomicose generalizada.
200 eritroblastos
X eritroblastos