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Para determinar la importancia de la separacin de las subunidades ribosomales nos

apoyaremos en el constructo un ribosoma quimirico 16s-23s, desarrollado por la


univerdad bla, en el cual indagaremos sus resultados en base a comportamiento
natural de un ribosoma.

En la produccin de ribosomas sintticos, los investigadores plantearon ciertos


parmetros entre los que se incluyen 1) interactuar correctamente con las protenas
ribosomales y factores de la biognesis de montaje ribosoma funcional, 2) evitar
Degradacin RNasa y 3) poseer un enlazador suficientemente corto para asegurar
subunidad cis-asociacin
El primer paso fue conectar ambas subunidades 50S y 30s
en zonas especificas de ellas (rARN), las cuales son 23S y
16S respectivamente, pero ambas zonas se encuentran muy
separadas una de la otra (alrededor de 0.17A), por lo cual
ellos injertaron rRNA 23S dentro de rRNA16S generando
una permutacin circular ,lo cual produjo puentes de unin
en el borde de comunicacin entre ambas subunidades , pero se necesitaba un sitio
de permutacin donde se adecuara a los parmetros anteriormente descritos, en la
bsqueda de ese sitio prometedor se encontr un mutante viable ,cp2861 que
corresponde a una unidad estructural , tena 23S rARN terminal dentro bucle de la
hlice 101 (H101),situada en el ribosoma cerca del bucle vertical de 16s rARN hlice
44 (h44). Debido a que la longitud de h44 vara entre las
diferentes especies, y sus secuencia de bucle terminal puede
tolerar alteraciones,h44 fue un sitio prometedor para injertar el
cp2861 23s rARN y asi generar una molcula 16s-23s rARN
hibrido. Una vez que ellos identificaron el punto de unin
ahora era necesario buscar un enlazador de longitud ptima,
ambos enlazadores T1 que conectan G1453 con C2858 y T2 que conecta C2857 con
G1454, varan entre ellos por 7 a 12 residuos de adenina ambos enlazadores. En
posteriores experimentos se

Anlisis de resultados obtenidos por

En la grafico a se puede observar que la


incorporacin del aminocido metionina tanto al
ribosoma hibrido como salvaje presentan
diferencias siendo este ltimo de una incorporacin
mayor, aun as el Ribo-T pudo incorporar grandes
cantidades de metionina lo cual implica una
produccin alta de protenas, tener en cuenta que la metionina es conocida como el
codo de inicio(AUG), por lo tanto no es trivial la incorporacin de este dado que es un
indicador de sntesis de protena.
Tanto la figura b y c, presenta la comparacin entre e ribosoma salvaje y Ribo-T en la
electroforesis bidimensional , la cual se puede observar una poblacin de protenas
disgregadas de acuerdo a su peso molecular y PH, si bien se presentan sutiles
diferencias entre la caractersticas proteicas sintetizadas entre ambos ribosomas,
estas diferencias no son suficientemente subtanciales para afirmar que la produccin
en cuanto a caractersticas de masa y PH son dismiles.

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