N 09
Protenas totales
INTRODUCCIN
Las protenas totales de nuestro organismo son un conjunto de compuestos
orgnicos macromoleculares, de un peso molecular elevado, que estn
OBJETIVOS
Cuantificacin de las protenas totales
Conocer los valores normales
Funciones de las protenas totales
FUNDAMENTO TERICO
Son partes importantes de todas las clulas y tejidos, el examen de protena
total mide la cantidad de las 2 clases de protenas
encontradas en la
humano.
Es
sintetizada
en
el
hgado
fundamental
para
el
Globulina
Son un grupo de protenas solubles en agua que se encuentran en todos los
animales y vegetales, proceso de sintonizacin en el hgado, siendo la LG las
que sintetizan dentro de las clulas plasmticas.
Entre las globulinas ms importantes destacan las seroglubulinas (la
sangre), el fibringeno de los anticuerpos (gamma-globulinas).
Funcin de la Globulina
Defienden al organismo de las infecciones, forman los anticuerpos y regulan
la actividad y funcionamiento de las clulas, contribuir a las necesidades
nitrogenadas.
Las globulinas es un componente importante de la sangre, especficamente
del plasma.
Fundamento del mtodo
Para la determinacin de niveles de protena total se utilizan varios
mtodos, entre ellos la densidad, el ndice de refraccin, absorbancia de la
muestra en n rango ultra- violeta, y por la tcnica de Folin-Cciocalteau.
Originalmente se media por el mtodo de Kjeldah, que actualmente se
utiliza como mtodo de referencia.
MATERIALES
MATERIALES DE LABORATORIO
6 Punteras
3 Tubos de ensayo
Gradilla
EQUIPO
Espectrofotmetro manual o automtico (rango 520 a 560 nm).
REACTIVOS
Conservaos entre 4 y 25 C. y protegidos de la luz, estables hasta la fecha
de caducidad indicada en la etiqueta.
Composicin del Reactivo Biuret:
Sulfato de cobre II 12 nM
Tartrato de sodio y potasio 32 nM
Ioduro de potasio 30 nM
Hidrxido de sodio 600 nM
Preservantes y surfactantes c.s.
MUESTRAS BIOLGICAS
Utilizar Duero libre de hemlisis.
PROCEDIMIENTOS
TCNICA MANUAL
1.
2.
3.
4.
CLCULOS:
Factor = Concentracin del calibrador/Abs. Calibrador
Protena Total (g/dL) = Factor x Abs. Muestra
RANGOS DE REFERENCIA:
Los rangos de referencia son: 6.0 a 8.0 gr/dL
RESULTADOS
Factor = Concentracin del calibrador/Abs. Calibrador
Factor = 6.1/0.993
Factor = 6.143
RESULTADO
2.1561 g/dL
CUESTIONARIO
1. En que casos se encuentra una Hiperproteinemia?
Cuando el valor de la protena total es mayor a 8 gr/dL.
Causas
Deshidratacin
Gammapatas
Hiperglobulinemia
2. En que casos se encuentra una Hipoproteinemia?
Cuando el valor de la protena total es menor a 2 gr/dL.
Causas
Desnutricin
Hepatopatas. Dficit de sntesis
Perdidas renales
Sndrome nefrtico
Sndrome de mala absorcin
Enfermedad celiaca
CONCLUSIONES
Las protenas son materiales polmeros que se encuentran en las clulas
vivientes. Sirven como materiales estructurales en el cuerpo y son
fundamentales para muchos procesos vitales. Las protenas son polmeros
de aminocidos y se producen en las clulas del cuerpo. Las protenas de
otros animales y de algunas plantas son un alimento importante, ya que
proporcionan los aminocidos que son esenciales para el cuerpo en la
produccin de las protenas necesarias. La realizacin de este trabajo nos ha
permitido tener una visin ms clara y completa de cmo se lleva a cabo la
medicin de protenas en las personas, adems de ensearnos la
importancia que tienen cada uno de los pasos insignificantes que puedan
parecernos, ya que por ejemplo, el cambio de valor de una determinada
protena podra ocasionar una Hipoproteinemia o una Hiperproteinemia.
Por otro lado podemos considerar ciertos rangos de especificacin de
valores normales dentro de la poblacin, por lo que no podemos decir que el
valor de una protena pueda producir siempre un defecto en alguna de sus
funciones, no obstante es lo ms comn.
BIBILIOGRAFA
1.
2.
3.
4.
5.
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003483.htm
http://proteinas.org.es/proteinas-totales
http://www.clinicadam.com/salud/5/003483.html
http://www.dclmexico.com/espa%F1ol/proteina_total.pdf
http://www.biolinker.com.ar/productos/PDF_BIO/11500%20Proteinas
%20Totales.pdf
6. http://www.tuotromedico.com/temas/proteinas_en_sangre.htm
7. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003628.htm
PRCTICA
N 10
Determinacin de
la albumina
INTRODUCCIN
Es un anlisis que se realiza por separado o en una peticin
general de bioqumico en la sangre. Mide la cantidad de albmina
presente en el suero.
La albmina es la protena de ms concentracin en la sangre. La
albmina transporta muchas molculas pequeas (bilirrubina,
progesterona, y medicamentos), y tiene tambin la funcin de
mantener la presin sangunea ya que favorece la presin
OBJETIVOS
- Cuantificacin de la albumina.
- Conocer los valores normales.
FUNDAMENTO TERICO
ALBMINA:
La albmina es la protena de ms concentracin en la sangre. La
albmina transporta muchas molculas pequeas (bilirrubina,
progesterona, y medicamentos), y tiene tambin la funcin de
mantener la presin sangunea ya que favorece la presin
osmtica coloidal para mantener lquidos en el torrente sanguneo
MATERIALES Y REACTIVOS
- Micro pipeta de 1ml.
- Micro pipeta de rango de 10ul a 50 ul.
- 1 gradilla.
- 6 punteras.
PROCEDIMIENTO
Determinacin de Albmina: La albmina reacciona
especficamente sin separacin previa- con la forma aninica de
la 3,3,5,5- tetrabromo cresolsulfon ftalena (BCF), en presencia
de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El
aumento de absorbancia a 625 nm respecto del blanco de
reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la
muestra.
-
CONDICIONES DE REACCIN:
Longitud de onda: 625 nm en espectrofotmetro o en
fotocolormetro con filtro rojo (620-650 nm).
Temperatura de reaccin: 15-28C.
Tiempo de reaccin: 10 min.
Volumen de muestra: 10 ul.
Volumen de reactivo BCF: 3,5 ml.
Calibrador
Desconocid
o
Muestra (ml
0.01
Calibrador
(ml)
Reactivo BCF
(ml)
1.0
0.01
1.0
1.0
RESULTADOS
MUESTRA
CALIBRADOR
1,965
1,811
ALBUMINA:
- F= C. Cali
Abs. Cal
- F= 2.9
1,811
- F= 1,6013
- PT= F x Abs. Muestra
- PT = 1,6013 x 1,965
- PT= 3,1465
CONCLUSIONES
- En esta prctica se determin albumina en suero, cabe
destacar que las protenas en suero se divide en
globulinas y albuminas, la albumina es una de las ms
importantes producidas en el hgado, si hay una alteracin
en los valores indican enfermedad endicho rgano, una
disminucin de los niveles de albumina indica que puede ser
signo de una enfermedad heptica crnica
Los niveles de albmina en suero por debajo de lo normal
pueden ser un signo de:
Enfermedades renales.
Enfermedad heptica (por ejemplo, hepatitis, cirrosis o
ascitis).
CUESTIONARIO
1. Cul es la protena plasmtica ms abundante?
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
- http://www.hepatitis.cl/albumina.htm
- Principios de Qumica. Editorial Mdica Panamericana.
- Fiscbach, T.F., Man u al de pruebas diagnsticas, 5 Edicin,
1997, EditorialMCgrawhill Interamericana, Mxico.
ANEXOS DE LA PRCTICA 09 Y 10
PRCTICA N 11
Identificacin de
protenas en
alimentos
INTRODUCCIN
Las protenas son materiales que se desempean el mayor nmero de las funciones
de las clulas de todos los seres vivos. Forman parte de su estructura bsica de los
tejidos y desempean funciones metablicas y reguladoras tambin son seres vivos
que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la base de la estructura del
cdigo gentico ADN y de los sistemas de reconocimiento de organismos extraos
en el sistema inmunolgico.
Las protenas son biomolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. El
nombre protena proviene de la palabra griega ("proteios"), que significa "primario"
o del dios Proteo, por la cantidad de formas que pueden tomar.
Por sus propiedades fsico-qumicas, las protenas se pueden clasificar en protenas
simples (holoproteidos), que por hidrlisis dan solo aminocidos o sus derivados;
protenas conjugadas (heteroproteidos), que por hidrlisis dan aminocidos
acompaados de sustancias diversas, y protenas derivadas, sustancias formadas por
desnaturalizacin y desdoblamiento de las anteriores. Las protenas son
indispensables para la vida, sobre todo por su funcin plstica (constituyen el 80%
del protoplasma deshidratado de toda clula), pero tambin por sus funciones
biorreguladora (forma parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son
protenas).
Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolculas
ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del
organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que
destacan:
Inmunolgica (anticuerpos),
Las protenas estn formadas por aminocidos los cuales a su vez estn formados
por enlaces peptdicos para formar esfingocinas.
Las protenas de todos los seres vivos estn determinadas mayoritariamente por su
gentica (con excepcin de algunos pptidos antimicrobianos de sntesis no
ribosomal), es decir, la informacin gentica determina en gran medida qu
protenas tiene una clula, un tejido y un organismo.
Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados los genes
que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a seales o factores externos. El
conjunto de las protenas expresadas en una circunstancia determinada es
denominado proteoma.
OBJETIVOS
FUNDAMENTO TERICO
Los prtidos o protenas son biopolmeros, estn formadas por gran nmero de
unidades estructurales simples repetitivas (monmeros). Debido a su gran tamao,
cuando estas molculas se dispersan en un disolvente adecuado, forman siempre
dispersiones coloidales, con caractersticas que las diferencian de las disoluciones
de molculas ms pequeas.
Por hidrlisis, las molculas de protena se dividen en numerosos compuestos
relativamente simples, de masa molecular pequea, que son las unidades
fundamentales constituyentes de la macromolcula. Estas unidades son los
aminocidos, de los cuales existen veinte especies diferentes y que se unen entre s
mediante enlaces peptdicos. Cientos y miles de estos aminocidos pueden participar
en la formacin de la gran molcula polimrica de una protena.
Todas las protenas tienen carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno, y casi todas
poseen tambin azufre. Si bien hay ligeras variaciones en diferentes protenas, el
contenido de nitrgeno representa, por trmino medio, 16% de la masa total de la
molcula; es decir, cada 6,25 g de protena contienen 1 g de N. El factor 6,25 se
utiliza para estimar la cantidad de protena existente en una muestra a partir de la
medicin de N de la misma.
La sntesis proteica es un proceso complejo cumplido por las clulas segn las
directrices de la informacin suministrada por los genes.
Las protenas son largas cadenas de aminocidos unidas por enlaces peptdicos entre
el grupo carboxilo (-COOH) y el grupo amino (-NH2) de residuos de aminocido
adyacentes. La secuencia de aminocidos en una protena est codificada en su gen
(una porcin de ADN) mediante el cdigo gentico. Aunque este cdigo gentico
especifica los 20 aminocidos "estndar" ms la selenocistena y en ciertos Archaea
la pirrolisina, los residuos en una protena sufren a veces modificaciones qumicas
en la modificacin postraduccional: antes de que la protena sea funcional en la
clula, o como parte de mecanismos de control. Las protenas tambin pueden
trabajar juntas para cumplir una funcin particular, a menudo asocindose para
formar complejos proteicos estables.
FUNCIONES
Las protenas ocupan un lugar de mxima importancia entre las molculas
constituyentes de los seres vivos (biomolculas). Prcticamente todos los procesos
biolgicos dependen de la presencia o la actividad de este tipo de molculas. Bastan
algunos ejemplos para dar idea de la variedad y trascendencia de las funciones que
desempean. Son protenas:
- Reguladoras: Las hormonas son un tipo de protenas las cuales ayudan a que exista
un equilibrio entre las funciones que realiza el cuerpo. Tal es el caso de la insulina
que se encarga de regular la glucosa que se encuentra en la sangre.
Estructura secundaria:
La estructura secundaria es la disposicin de la secuencia de
aminocidos en el espacio.
La a (alfa)-hlice:
Esta estructura se forma al enrollarse helicoidalmente sobre s misma la estructura
primaria.
La conformacin beta:
En esta disposicin los aminocidos no forman una hlice sino una cadena en forma
de zigzag.
Estructura terciaria:
Informa sobre la disposicin de la estructura secundaria de un
polipptido
al
plegarse
sobre
misma
originando
una
conformacinglobular.
Aparecen varios tipos de enlaces
Estructura cuaternaria:
Esta estructura informa de la unin, mediante enlaces dbiles (no
covalentes) de varias cadenas polipeptdicas con estructura
terciaria, para formar un complejo proteico. Cada una de estas
cadenas polipeptdicas recibe el nombre de protmero
MATERIALES
Materiales de Laboratorio
6 tubos de ensayo
1 Gradilla
1 Pipeta
1 Propipeta
Marcadores
Materiales Biolgicos
Una porcin pequea de:
Papa frita
Carne
Leche
Yogurt
Gelatina
Aceite
Reactivos
PROCEDIMIENTOS
CUESTIONARIO
1
con
29%
de
protenas
el
queso manchego
Otros alimentos con un lto porcentaje de protenas aunque con menos cantidad que
los anteriores son:
Carne magra de cerdo (Un 20% de la carne magra de cerdo son protenas)
Rape, salmn (El rape y el salmn son pescados que tienen un 19% de
protenas)
CONCLUSIONES
Se concluye que los alimentos que tienen protenas son:
Al agregar el sulfato de cobre y el hidrxido de sodio a la carne se
observa que cambia a una coloracin ligeramente rosada lo que
protenas.
Al agregar el sulfato de cobre y el hidrxido de sodio al aceite se
observa que cambia a una coloracin azul demostrando que no contiene
protenas.
Al agregar el sulfato de cobre y el hidrxido de sodio a las papas fritas
se observa que cambia a una coloracin azul demostrando que no
contiene protenas.
BIBLIOGRAFA
http://proteinas.org.es/alimentos-ricos-proteinas
http://guidewhois.com/2011/02/niveles-de-proteinas-en-los-alimentos/
http://www.slideshare.net/jomachi/practica-de-laboratorio-5-identificacinde-proteinas
http://www.monografias.com/trabajos93/reconocimientoproteinas/reconocimiento-proteinas.shtml
http://uni-biologia.blogspot.com/2011/01/identificacion-de-lipidos-yproteinas.html
http://www.joseacortes.com/practicas/protidos.htm
http://www.buenastareas.com/ensayos/Identificacion-DeProteinas/3033157.html
ANEXOS
PRCTICA DE
LABORATORIO # 14:
CARBOHIDRATOS
INTRODUCCIN
OBJETIVOS:
Identificar
las
diferentes
clases
Carbohidratos.
Identificar la propiedad reductora de
Carbohidratos.
de
los
FUNDAMENTO TERICO
MATERIALES
A. MATERIALES DE LABORATORIO:
16 tubos de ensayo: Son pequeos tubos
cilndricos de vidrio con una punta abierta (que
puede poseer una tapa) y la otra cerrada y
redondeada, que se utilizan en los laboratorios para
contener pequeas muestras lquidas, aunque
pueden tener otros usos, como realizar reacciones
qumicas en pequea escala, etc.
1 pipeta:
permite medir volmenes.
Utensilio
que
1 mechero:
Es un
metlico que permite calentar sustancias.
utensilio
1
vaso
de
precipitacin
de
250
cc:
Los vasos
de
precipitados son instrumentos
de
laboratorio de
vidrio que se utiliza para almacenar sustancias,
disolverlas, mezclarlas, calentarlas y en general
cualquier cosa que no necesite una medida de
precisin del volumen.
B. MATERIALES:
1 gr. de chuno ingles:
1 gr. de maicena:
1 gr. de
trigo:
harina de
1 ml. de jugo
caa:
de azcar de
C. REACTIVOS:
Felhing A y Felhing B:
Biuret:
Lugol:
Benedict:
PROCEDIMIENTO
RESULTADOS
CUESTIONARIO
composicin
del
Reactivo
de
Son
aquellos
azcares
que
poseen
su grupo
carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a travs del
mismo pueden reaccionar con otras molculas.
Los azcares reductores provocan la alteracin de
las protenas mediante la reaccin de glucosilacin no
enzimtica tambin denominada reaccin de Maillard o
glicacin.
Esta reaccin se produce en varias etapas: las iniciales
son reversibles y se completan en tiempos relativamente
cortos, mientras que las posteriores transcurren ms
lentamente y son irreversibles. Se postula que tanto las
etapas iniciales como las finales de la glucosilacin estn
implicadas en los procesos de envejecimiento celular y en
el desarrollo de las complicaciones crnicas de la
diabetes.
La glucosa es el azcar reductor ms abundante en el
organismo.
BIBLIOGRAFA
http://es.scribd.com/doc/50436357/EXPO-TGO-Y-TGP
Kooleman, Rhom. Edicin N 3.Editorial Mdica
Panamericana
Voet. Bioqumica. Edicin N 3.Editorial Mdica
Panamericana
http://www.alimentos-proteinas.com/
http://carbohidratos.org.es/alimentos-ricos-proteinas
http://www.nutricionnatural.info/alimentos/
http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanis/article
http://www.aula21.net/Nutriweb/proteinas.htm
http://carbohidratos.org.es/
http://www.um.es/molecula/prot.htm
http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.a
sp
http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/Carbohid.Estr
uct
ANEXOS