AO DE LA CONSOLIDACION DEL MAR DE GRAU

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

TEMA:

DETERMINACIN DE LA CONCENTRACION DE GLUCOSA EN SUERO SANGUINEO.

DOCENTE: Q.F MARIO CARHUAPOMA YANCE

CURSO:

BIOQUMICA

ALUMNA:

GOZME RAMOS STEFANY

PAREDES HUANUQUEO OSCAR RAUL

I.

FUNDAMENTO TEORICO

La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene

fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el
hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en
sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado
sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el pncreas.

La glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma de energa al
combinarlo con el oxgeno de la respiracin. Cuando comemos el azcar en la sangre se
eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora
que es la insulina producida por el pncreas (islotes pancreticos). Esta hormona hace
que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucgeno,
aminocidos, y cidos grasos. Cuando la glucosa en sangre est muy baja, en condiciones
normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagn que hace lo contrario y
mantiene los niveles de glucosa en sangre.
Principio del Mtodo de Determinacin cuantitativa de glucosa IVD (Spinreact)
La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidacin de glucosa a cido gluconico. El perxido de
hidrogeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor cromo gnico de oxgeno,
fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD):
Reaccin:

Fundamento:
En el metodo GODPOD,
en
un
primer
paso
la
glucosa oxidasa
cataliza la oxidacin
de la D-glucosa
a acido D-gluconico
con
formacin
de
perxido
de
hidrogeno. Este
es utilizado por la
peroxidasa para
oxidar
a
la
4aminofenazona
y al fenol, dando
lugar
a
una
quinonaimina
coloreada.
La
intensidad de color
ser
proporcional a la
concentracin
de glucosa presente
inicialmente. (En
ocasiones se utilizan
otros sustratos
en lugar de 4-aminofenazona+fenol, tales como o-dianisidina, guayacol y ABTS.)
DETERMINACIN DE LA CONCENTRACION DE GLUCOSA EN SUERO SANGUINEO

I. PROCEDIMIENTO.
Preparar los siguientes medios de ensayo:

MP (mL)
ST (mL)
REACTIVO (mL)

BLANCO
1.00

ST
0.01
1.00

MP
0.01
1.00

Colocar en los 4 tubos de ensayo de acuerdo a los requerimientos del cuadro.

 Mezclar e incubar
C durante 5 minutos
espectrofotmetro a

en bao mara a 37
y
leer
en
el
505 nm.

RESULTADOS.

Determinar la concentracin mg/dL utilizando el mtodo del factor de

calibracin.

Datos de lectura del espectrofotmetro:

ST. 2,341
Blanco: 0.257
Muestra: 1898

|MP||blanco|
Glucosa |ST|x|Blanco| x [ST ]

1,8980,257
Glucosa (mg) 2,3410,257

1,641
x 0,01
2 , 081

= 0,787x0, 01
= 0.0078
Llevndolo a mg/dl
= 78,7mg/dl

COMENTARIO

En las dos muestras tomadas de la mesa 1 y 3 los resultados obtenidos

76,82 mg/dl.

son 76,78 y

Respetivamente. Por lo tanto se encuentra dentro del margen para

considerar valores ubicados dentro de lo normal.

El valor normal est considerado entre 70 y 100 miligramos por decilitro (mg/dL).

DISCUSIN
En la presente prctica se logr obtener los resultados del nivel de glucosa de dos
personas. En la actualidad existen varios mtodos de

anlisis de la glucemia, siendo

utilizada en el laboratorio el mtodo GOx. La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada

para la determinacin y cuantificacin de glucosa libre en los fluidos biolgicos, tales
como sangre y orina, en materia prima vegetal y en la industria de los alimentos. Tiene
adems muchas aplicaciones en biotecnologa, y se utiliza para la fabricacin de
biosensores sensibles a glucosa
CONCLUSIN
En esta prctica se pudo determinar la concentracin de glucosa en sangre utilizando el

mtodo glucosa oxidasa GOx. De la misma forma los niveles de glucemia obtenidos a
travs de los clculos estn dentro de los parmetros normales establecidos.
La glucosa oxidasa oxida a la glucosa originando cido glucnico y H2O2. El perxido de
hidrgeno liberado reacciona con un cromgeno (fenol/4-aminoantipirina) por la reaccin
de Trinder, para dar una quinona que absorbe entre 492 y 550 nm. La intensidad de color
producida es directamente proporcional a la concentracin de glucosa. Puede analizarse
por

este

mtodo

cualquier

muestra:

suero

libre

de

hemlisis,

plasma,

lquido

cefalorraqudeo, orina, etc.

CUESTIONARIO
1. Cules son los valores normales de glicemia?
El valor normal de glucosa se sita entre 70 y 100 mg/dl en jvenes y personas adultas.
En nios, tiende a ser considerado normal entre 40 a 100 mg/dl.
2. En qu condiciones debe tomarse la muestra?
Estar completamente en ayuno el da del examen.
La noche anterior al da del examen se puede ingerir alimentos hasta las 7:00 p.m.
Disponer de tiempo suficiente (tres horas) para permanecer en reposo en el
laboratorio.
No debe fumar antes ni durante la realizacin del examen.

3. Como procedera si el resultado es 220 mg/dL?

Acudir de inmediato a un mdico para realizar una consulta sobre el problema que
acontece.
Cumplir con los pedidos que manda el mdico.
Mejorar la calidad de vida en cuanto a la alimentacin.

BIBLIOGRAFIA

Blanco A. Qumica biolgica 8va ed. Buenos Aires: El Ateneo; 2006.

Rodolfo H. Qumica general. 4ta edicin. Barcelona: Reverte S.A; 2002.

Freilderfer E. Tcnicas de bioqumica y biologa molecular. 3ra Ed. Espaa: Reverte

S.A; 2004.
Lozano - Galindo. Bioqumica para
Hill- Interamericana. 2001.

Ciencias

Luque
L.
y
Hermoza A.
Biologa
Gentica. Barcelona. Hartcourt. 2001.

de la Salud. Espaa McGraw Molecular

e Ingeniera