Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO EN MATERIA DE SEGURIDAD Y SALUD LABORAL

TRABAJOS
CON
BIOLGICOS

EXPOSICIN

AGENTES

1. OBJETO
El objeto del presente documento es el establecer unas disposiciones
mnimas en materia de seguridad y salud aplicables a las actividades en las que
los trabajadores estn o puedan estar expuestos a agentes biolgicos debido a la
naturaleza de la actividad desarrollada.
2. MARCO JURDICO Y TCNICO DE REFERENCIA
Ley 31/1995, de 8 de noviembre, de Prevencin de Riesgos Laborales.
Real Decreto 39/1997, de 17 de enero, por el que se aprueba el Reglamento
de los Servicios de Prevencin.
Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, sobre la proteccin de los
trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes
biolgicos durante el trabajo.
Gua Tcnica del Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo
para la evaluacin y prevencin de los riesgos relacionados con la exposicin a
agentes biolgicos.
Prevencin de riesgos biolgicos en el laboratorio. Instituto Nacional de
Seguridad e Higiene en el Trabajo.
Recomendaciones de la Sociedad Espaola de Enfermedades Infecciosas y
Microbiologa Clnica.
3. RESPONSABILIDADES
El responsable de cada Departamento deber adoptar las medidas
necesarias para que los miembros de la comunidad universitaria cumplan con
lo establecido en el presente documento.
El Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales evaluar los riesgos
derivados del uso de agentes biolgicos y realizar, caso que sea necesario, las
oportunas recomendaciones a los responsables. Realizar las comunicaciones a
la Autoridad Laboral. Asimismo, dentro de la programacin en materia de
prevencin de riesgos laborales, facilitar formacin e informacin a los
trabajadores de la Universidad sobre los riesgos en el uso de agentes biolgicos.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

Los trabajadores debern cumplir con lo establecido en el presente

documento, comunicando a su responsable directo cualquier incidencia.
4. INTRODUCCIN
Se entiende por exposicin a agentes biolgicos la presencia de stos en el
entorno laboral.
Los agentes biolgicos se clasifican en funcin del riesgo de infeccin en
cuatro grupos:

De esta forma, los agentes biolgicos del Grupo de Riesgo 1 (GR1) seran
aquellos que, habitualmente, no estn asociados con enfermedades en el
hombre. El GR2 lo constituyen agentes asociados con enfermedades en el
hombre, que raramente son serias, y para las cuales existen habitualmente
medidas preventivas o teraputicas. El GR3 lo componen agentes que estn
asociados con enfermedades graves o mortales, para las cuales son posibles
intervenciones de tipo preventivo o teraputico (alto riesgo individual pero bajo
para la colectividad). El GR4 lo forman agentes que, probablemente, causan
una enfermedad grave o letal en el hombre, para las cuales las intervenciones
preventivas o teraputicas no son eficaces (alto riesgo individual y para la
colectividad).
La relacin de los agentes biolgicos con su clasificacin se encuentra en el
Anexo I del presente documento.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

5. REQUITOS LEGALES.
El Real Decreto 664/1997 establece una serie de obligaciones en lo relativo
al uso de agentes biolgicos. Entre estas obligaciones se encuentra la
comunicacin a la Autoridad Laboral sobre el uso de estos agentes (Art. 10). Por
ello, previamente a la utilizacin de cualquier agente biolgico incluido en el
Anexo I, deber comunicarse esta circunstancia a Servicio de Prevencin de
Riesgos Laborales al objeto de tramitar la oportuna comunicacin.
6. RECOMENDACIONES
PARA
BIOLGICOS DEL GRUPO 1.

TRABAJOS

CON

AGENTES

Esta exposicin no est especficamente reflejada en la normativa legal dado

que el trabajo que se lleva a cabo no supone riesgo significativo de enfermedad
para un trabajador sano. No obstante, las recomendaciones seran:

El responsable del laboratorio podr limitar o restringir el acceso al

mismo cuando el trabajo o las prcticas donde se hallen presente este
tipo de agente biolgico se encuentre en marcha.
Las superficies de trabajo se descontaminarn, al menos, una vez al da y
siempre que se produzca un derramamiento de material contaminado.
Est prohibido pipetear con la boca.
No est permitido comer, beber, fumar, tomar medicamentos o
maquillarse en el laboratorio.
La comida se almacenar en armarios o refrigeradores destinados a tal
fin y situados fuera de la zona de trabajo.
Antes de dejar el laboratorio, el personal que haya manejado materiales
o animales contaminados debe lavarse las manos.
Cualquier tcnica o manipulacin debe ser efectuada de manera que
minimice la creacin de aerosoles.
Se recomienda el empleo de batas u otro tipo de equipamiento que
prevenga la contaminacin de la ropa de calle.
Los materiales contaminados se irn depositando en contenedores
apropiados, que se podrn cerrar para su traslado.
Normalmente no es necesario equipo de seguridad

7. RECOMENDACIONES
PARA
BIOLGICOS DEL GRUPO 2.

TRABAJOS

CON

AGENTES

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

Las recomendaciones para el uso de agentes biolgicos del grupo 2,

corresponden con las recomendaciones dadas para trabajos con agentes
biolgicos del grupo 1 con las modificaciones y ampliaciones siguientes:

Todos los residuos, tanto lquidos como slidos, deberan

descontaminarse antes de su eliminacin.
El responsable del laboratorio limitar el acceso al mismo. De esta
manera, personas con riesgo de adquirir infecciones o para las que una
infeccin pueda resultar especialmente peligrosa no tendrn permitida
la entrada al laboratorio.
Siempre que se est en el laboratorio, el personal llevar una bata o
proteccin similar.
Cuando se abandone el laboratorio para acceder a otras dependencias
(cafetera, biblioteca,), esta bata deber dejarse siempre en el
laboratorio.
Se prestar especial atencin para evitar la contaminacin a travs de la
piel, por lo que es recomendable llevar guantes cuando se manipule el
material.
Los derramamientos y otros accidentes que tengan como consecuencia la
sobreexposicin del personal a materiales infectados debern ser
comunicados.

Equipos de seguridad:

Cabinas de seguridad de clase I o II u otros sistemas de proteccin fsica

del personal, que se emplearn cuando se lleven a cabo tcnicas con un
alto riesgo de formacin de aerosoles o se utilicen grandes volmenes o
altas concentraciones de agentes infecciosos.

8. PRECAUCIONES UNIVERSALES
Las denominadas precauciones universales constituyen la estrategia
fundamental para la prevencin del riesgo laboral para los trabajos con agentes
biolgicos.
a) Vacunacin (inmunizacin activa): La comunidad trabajadora
est sometida a numerosos riesgos biolgicos, producidos por
bacterias, hongos, virus, etc., frente a los cuales se dispone de
vacunas que hacen posible su prevencin y, a veces, su
tratamiento. La inmunizacin activa frente a enfermedades
infecciosas ha demostrado ser, junto con las medidas generales de
prevencin, una de las principales formas de proteger a los
trabajadores.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

b) Normas de higiene personal: A continuacin se resumen un

conjunto de normas de higiene personal a seguir por los
trabajadores:

Cubrir heridas y lesiones de las manos con apsito impermeable, al

iniciar la actividad laboral.
El lavado de manos debe realizarse al comenzar y terminar la jornada y
despus de realizar cualquier tcnica que puede implicar el contacto
con material biolgico. Dicho lavado se realizar con agua y jabn
lquido.
En situaciones especiales se emplearn sustancias antimicrobianas. Tras
el lavado de las manos stas se secarn con toallas de papel desechables
o corriente de aire.
No comer, beber ni fumar en el rea de trabajo.
El pipeteo con la boca no debe realizarse.
c) Elementos de proteccin de barrera:

Todos los trabajadores de la salud deben utilizar rutinariamente los

elementos de proteccin de barrera apropiados cuando deban realizar
actividades que los pongan en contacto directo con agentes biolgicos. Dicho
contacto puede producirse tanto de forma directa como durante la
manipulacin de instrumental o de materiales utilizados.
Dentro de los elementos de proteccin de barrera podemos distinguir los
siguientes:
1. Guantes.
2. Mascarillas.
3. Batas.
d) Cuidado con los objetos cortantes y punzantes:
Se deben tomar todas las precauciones necesarias para reducir al mnimo
las lesiones producidas en el personal por pinchazos y cortes. Para ello es
necesario:

Tomar precauciones en la utilizacin del material cortante, de las agujas

y de las jeringas durante y despus de su utilizacin, as como en los
procedimientos de limpieza y de eliminacin.
Los objetos punzantes y cortantes (agujas, jeringas y otros instrumentos
afilados) debern ser depositados en contenedores apropiados con tapa

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

de seguridad, para impedir su prdida durante el transporte, estando

estos contenedores cerca del lugar de trabajo y evitando su llenado
excesivo.
e) Desinfeccin y esterilizacin correcta de instrumentales y
superficies:
El empleo de productos qumicos permite desinfectar a temperatura
ambiente los instrumentos y superficies que no resisten el calor seco o la
temperatura elevada.
Para llevar a cabo una desinfeccin del tipo que sea, es necesario tener
en cuenta:
a.
b.
c.
d.

La actividad desinfectante del producto.

La concentracin que ha de tener para su aplicacin.
El tiempo de contacto con la superficie que se ha de descontaminar.
Los agentes biolgicos que se han de eliminar.

El producto desinfectante debe tener un amplio espectro de actividad y una

accin rpida e irreversible, presentando la mxima estabilidad posible frente a
ciertos agentes fsicos, no debiendo deteriorar los objetos que se han de
desinfectar ni tener un umbral olfativo alto ni especialmente molesto. Una
correcta aplicacin de los desinfectantes ser, en general, aquella que permita
un mayor contacto entre el desinfectante y la superficie a desinfectar. El
producto desinfectante se debe poder aplicar de tal manera que no presente
toxicidad aguda o crnica para los animales y el hombre que puedan entrar en
contacto con l. Debe tenerse en cuenta que por su propia funcin, destruccin
de microorganismos, muchos desinfectantes tienen caractersticas de toxicidad
importantes para el hombre, por lo que se debern adoptar las medidas de
proteccin y prevencin adecuadas y seguir siempre las instrucciones para su
aplicacin, contenidas en la etiqueta y en las fichas de seguridad.
Los desinfectantes que se utilicen deben estar adecuadamente etiquetados
segn la normativa correspondiente, tanto si se han adquirido comercialmente,
como si son de preparacin propia. Al adquirir productos qumicos, debe
exigirse siempre la entrega de la ficha de seguridad correspondiente.
La eficacia de los desinfectantes est limitada por la presencia de materia
orgnica, por lo que los tiempos de aplicacin de los mismos disminuir cuando
el instrumental que se deba desinfectar est limpio. En funcin de los agentes
manipulados, se redactarn por parte de cada laboratorio las instrucciones de
desinfeccin en las que consten los desinfectantes y las diluciones a las que se
deban emplear.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

Esterilizacin:
Con la esterilizacin se produce la destruccin de todos los agentes
biolgicos, incluidos esporas bacterianas, que pueda contener un material. Se
debe recordar que, en ciertos casos, los instrumentos son sometidos a la accin
de soluciones detergentes o antispticas para diluir sustancias orgnicas o evitar
que se sequen. Dado que este paso no es una verdadera desinfeccin, estos
instrumentos no debern ser manipulados ni re-utilizados hasta que se efecte
una esterilizacin.
Existen diferentes tipos de esterilizacin de los cuales, a continuacin, se
ofrece un listado:
a) Esterilizacin por calor hmedo bajo presin (autoclave): Es el mtodo de
eleccin, por ser el ms fiable, eficaz y de fcil empleo. Se introduce el material
a esterilizar en bolsas adecuadas y cerradas, dejndose durante 20 minutos a
121C (para algunos agentes pueden ser necesarias otras condiciones), teniendo
la precaucin de que la atmsfera del autoclave est a saturacin y desprovista
de aire. En este sentido es recomendable disponer de un manual de
procedimiento para el trabajo con el autoclave, siguiendo las instrucciones del
fabricante.
b) Esterilizacin por calor seco: Debe mantenerse por dos horas a partir del
momento en que el material ha llegado a los 170C.
9. CABINAS DE SEGURIDAD BIOLGICA. RECOMENDACIONES
GENERALES.
Inicio del trabajo:
- Poner en marcha la cabina durante 5-10 minutos, al objeto de purgar los
filtros y lavar la zona protegida
- Comprobar que el manmetro situado en la parte superior del frontal se
estabiliza e indica la presin adecuada (vara con el modelo de cabina).
- Apagar la luz ultravioleta (si estuviera encendida y encender la luz
fluorescente.
- Limpiar la superficie de trabajo con un producto adecuado.
- Antes y despus de haber trabajado en una cabina deberan lavarse con
cuidado las manos y brazos, prestando especial atencin a las uas.
- Se aconseja emplear batas de manga larga con bocamangas ajustadas y
guantes de ltex.
- En determinado casos, adems es recomendable el empleo de mascarilla.
Durante la manipulacin:

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

- Todo el material a utilizar (y nada ms) se sita en la zona de trabajo antes de

empezar. De esta forma se evita tener que estar continuamente metiendo y
sacando material durante el tiempo de operacin.
- Es aconsejable haber descontaminado el exterior del material que se ha
introducido en la cabina.
- Este material se coloca con un orden lgico, de manera que el material
contaminado se sita en un extremo de la superficie de trabajo y el no
contaminado ocupa el extremo opuesto de la misma.
- Segn el tipo de manipulacin y el modelo de la cabina, la zona de mxima
seguridad dentro de la superficie de trabajo vara. En general, se recomienda
trabajar a unos 5-10 cm por encima de la superficie y alejado de los bordes de
la misma. Especial atencin se prestar a no obstruir las rejillas del aire con
materiales o residuos.
- Una vez que el trabajo haya comenzado y sea imprescindible la introduccin
de nuevo material, se recomienda esperar 2-3 minutos antes de reiniciar la
tarea. As se permite la estabilizacin del flujo de aire. Es conveniente recordar
que cuanto ms material se introduzca en la cabina, la probabilidad de provocar
turbulencias de aire se incrementa.
- Mantener al mnimo la actividad del laboratorio en el que se localiza la cabina
en uso, a fin de evitar corrientes de aire que perturben el flujo. El flujo laminar
se ve fcilmente alterado por las corrientes de aire ambientales provenientes de
puertas o ventanas abiertas, movimientos de personas, sistema de ventilacin
del laboratorio...
- Evitar los movimientos bruscos dentro de la cabina. El movimiento de los
brazos y manos ser lento, para as impedir la formacin de corrientes de aire
que alteren el flujo laminar.
- Al igual que en el resto del laboratorio, no debe utilizarse el mechero Bunsen,
cuya llama crea turbulencias en el flujo y adems puede daar el filtro HEPA (si
existe).
- Cuando deban emplearse asas de platino es aconsejable el incinerador
elctrico o, mejor an, asas desechables.
- Si se produce un vertido accidental de material biolgico se recoger
inmediatamente, descontaminado la superficie de trabajo y todo el material que
en ese momento exista dentro de la cabina.
- No se utilizar nunca una cabina cuando est sonando alguna de sus alarmas.
Al finalizar el trabajo:
- Limpiar el exterior de todo el material que se haya contaminado.
- Vaciar la cabina por completo de cualquier material.
- Limpiar y descontaminar con alcohol etlico al 70% o producto similar la
superficie de trabajo.
- Dejar en marcha la cabina durante al menos 15 minutos.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

- Conectar si fuera necesario la luz ultravioleta (UV). Conviene saber que la luz
UV tiene poco poder de penetracin por lo que su capacidad descontaminante
es muy limitada.
Limpieza y desinfeccin de la cabina de seguridad biolgica:
- Se llevar a cabo una desinfeccin completa en las siguientes situaciones:
a) en caso de que se haya producido un vertido importante;
b) antes de cualquier reparacin;
c) antes de iniciarse los chequeos peridicos;
d) siempre que se cambie el programa de trabajo;
e) cuando se substituyan los filtros HEPA y
f) al cambiarla de lugar (incluso dentro del mismo laboratorio).
- Se realizar con vapores de formaldehdo y siempre por personal
debidamente entrenado y con las prendas de proteccin personal adecuadas.
- Por otro lado, debe tenerse en cuenta que una buena limpieza de la zona de
trabajo es una garanta de ausencia de polvo y otros contaminantes. La limpieza
tiene por objeto eliminar la suciedad que se halla adherida a las superficies y
que sirve de soporte a los microorganismos. Al limpiar se elimina tambin la
materia orgnica, contribuyendo de forma decisiva a la eficacia de la posterior
descontaminacin.
- Es conveniente una vez a la semana levantar la superficie de trabajo y limpiar
y descontaminar por debajo de ella.
- Nunca se debe utilizar la cabina como almacn transitorio de equipo o
material de laboratorio. Esta mala prctica conduce a una acumulacin de polvo
totalmente innecesaria.
- Evitar introducir en la cabina materiales que emitan partculas fcilmente
como algodn, papel, madera, cartn, lpices...
Mantenimiento de la cabina de seguridad biolgica:
- Semanalmente se limpiar la superficie de trabajo y el resto del interior de la
cabina.
- Semanalmente se pondr en marcha a fin de comprobar la medida que da el
manmetro.
- Mensualmente, con un pao mojado, se limpiarn todas las superficies
exteriores con objeto de eliminar el polvo acumulado.
- Mensualmente se revisar el estado de las vlvulas interiores con que vaya
equipada.
- Anualmente se certificar por una entidad cualificada.
10. UTILIZACIN DE OTROS EQUIPOS. RECOMENDACIONES
GENERALES.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

a) Normas Generales

Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso, en

particular en los pasillos del laboratorio.
Todos los aparatos con toma elctrica debern cumplir las normativas
de seguridad correspondientes. Nunca deben utilizarse en zonas mal
aisladas y expuestas a la humedad.
Las fuentes de calor (calentadores, termobloques, etc.), sobre todo si se
alcanzan temperaturas elevadas, debern estar debidamente sealizadas
para evitar quemaduras accidentales.
Todos los procedimientos de utilizacin de aparatos deberan contar
obligatoriamente con apartados relativos a su utilizacin segura.
b) Neveras y habitaciones frigorficas

Un adecuado mantenimiento, limpieza y desinfeccin sistemticos de los

aparatos reduce considerablemente los riesgos asociados a su utilizacin. Sin
embargo, aun en estas condiciones, hay que tener en cuenta lo siguiente:

No deben almacenarse cultivos de microorganismos patgenos por

inhalacin en recipientes que no estn convenientemente cerrados,
especialmente si la cmara tiene un sistema de circulacin de aire.
No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos voltiles
inflamables (ter etlico, por ejemplo) en neveras que no posean un
sistema de proteccin antideflagracin. En los aparatos de tipo
domstico que se utilizan en el laboratorio debe anularse la lmpara de
la luz.
c) Congeladores

La congelacin es un proceso que mantiene la viabilidad de muchos

agentes infecciosos, de ah un potencial riesgo y las siguientes
recomendaciones:

Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo

almacenado y sus riesgos potenciales.
El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos,
recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarn completamente, para
evitar que rebosen por efecto del aumento de volumen tras la
congelacin.
Descongelar peridicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

Utilizar guantes para manipular el contenido. Si la temperatura es baja

(por ejemplo -70C o inferior), los guantes representan una proteccin
adicional.
d) Estufas e incubadores

La limpieza y la desinfeccin, peridicas y sistemticas, son el mtodo

recomendable para reducir los riesgos derivados de la contaminacin accidental
del personal del laboratorio.
e) Microondas
Los microondas cada vez son ms populares en el Laboratorio de
Microbiologa y constituyen una nueva fuente de accidentes, entre los ms
frecuentes las explosiones cuando se usan para calentar medios con agar, ya
que la diferencia de velocidad de calentamiento produce burbujas que pueden
estallar.

Las botellas o matraces deben tener el tapn aflojado, ya que si est

cerrado estallan fcilmente.
Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y
controlar la intensidad del aparato, que slo puede ser la mxima con
agua y la mnima si se usa con agar.
Deber existir una tabla bien visible de los tiempos en cada posicin del
potencimetro y de las cantidades a emplear.
Los microondas interfieren con los marcapasos. No deben ser colocados
a una distancia inferior a 2 m de las personas que sean portadoras de
uno de estos dispositivos.
f) Autoclaves

Los autoclaves deben poseer manmetro y termostato, as como vlvula

de seguridad, sistema de desconexin rpido y la purga del vapor ha de
realizarse a un recipiente estanco y con agua, jams directamente al exterior.

No deben usarse si no se conocen perfectamente todos los mandos y su

fundamento.
Usar guantes especiales para protegerse del calor.
No abrir jams si el manmetro no est a "0" y la purga no ha sido
abierta.
Controlar una vez al mes su capacidad de desinfeccin mediante esporas,
no siendo suficiente el mtodo qumico. El uso de registros de presin y

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

temperatura de cada proceso y la instauracin de un programa de

mantenimiento tambin puede ser una alternativa vlida al control
mediante esporas. El agua debe ser cambiada regularmente.
g) Centrfugas
Los mayores riesgos derivan, sobre todo, de la contaminacin por los
aerosoles generados durante la centrifugacin de materiales biolgicos y, en
menor medida, de los traumatismos accidentales. Se recomienda:

Cuando se centrifugue material biolgico potencialmente infeccioso

deben utilizarse tubos cerrados; la centrfuga debe disponer de rotores o
cestillos de seguridad que protejan al operador de los posibles aerosoles.

La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una

incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al
Supervisor responsable, de forma que se proceda a la desinfeccin
segura del aparato.
No se deben utilizar centrfugas antiguas que no posean sistema de cierre
de seguridad, del que disponen todos los aparatos actuales, ni manipular
stas de forma que permitan su apertura mientras estn en
funcionamiento.
Si el laboratorio dispone de ultracentrfugas, el equilibrado cuidadoso
del rotor es fundamental.

h) Miscelnea

Las bombas de vaco y los aspiradores debern contar con las

correspondientes trampas y filtros.
Los baos de agua ("baos mara") debern contener un desinfectante
adecuado, ser limpiados una vez a la semana y desinfectados con
periodicidad mensual.
En la zona de trabajo no debe colocarse directamente material de
escritorio ni libros, ya que el papel contaminado es de difcil
esterilizacin o desinfeccin.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

ANEXO I
CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

ANEXO II
INDICACIONES RELATIVAS A LAS
CONTENCIN Y A LOS NIVELES DE CONTENCIN

MEDIDAS

DE

Las medidas que figuran en el presente anexo se aplicarn segn la

naturaleza de las actividades, la evaluacin del riesgo para los trabajadores y las
caractersticas del agente biolgico de que se trate.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

ANEXO III
RIESGOS
CELULARES

DERIVADOS

DEL

TRABAJO

CON

CULTIVOS

Los cultivos celulares son el resultado del crecimiento in vitro de

clulas obtenidas de organismos pluricelulares. Tienen la categora de agentes
biolgicos segn la definicin recogida en el Artculo 2; se refiere en este caso,
tanto a cultivos celulares primarios, como a los de lneas continuas celulares o
cepas celulares bien definidas.
Los cultivos celulares no contaminados generalmente no presentan un
riesgo significativo, y aun la inoculacin drmica origina slo una inflamacin
local. Sin embargo, estos cultivos pueden contribuir sustancialmente al riesgo
de exposicin a agentes biolgicos ya que pueden actuar como la base o ayudar
a la supervivencia y/o la replicacin de agentes oportunistas, o ser origen de
otros riesgos potenciales. Los agentes oportunistas ms caractersticos son los
virus y entre los otros riesgos pueden citarse la contaminacin por micoplasmas,
o productos celulares que pueden ser molculas biolgicamente activas con
propiedades farmacolgicas, de inmunomodulacin o sensibilizantes.
Evaluacin del riesgo
El nivel de riesgo que presenta el trabajo con cultivos celulares es
variado. Por un lado se debe considerar si las cepas o lneas celulares utilizadas
tienen una procedencia lo suficientemente documentada para garantizar y
evitar la problemtica asociada con la contaminacin cruzada de la lnea celular
original por otro tipo de clulas. Respecto a los cultivos celulares habr que
considerar asimismo tanto su origen anatmico como el de la especie, ya que
est directamente relacionado con su potencial infeccioso por virus u otros
agentes patgenos en humanos. En ningn caso el trabajador que realice los
cultivos celulares podr utilizar sus propias clulas para el desarrollo in vitro.
Las clulas humanas para cultivo debern obtenerse solamente de individuos
que no tengan relacin con el trabajo experimental.
Los cultivos celulares de mayor riesgo son los proceden de primates y
humanos, especialmente si derivan de sangre perifrica, tejido linfoide y
nervioso. Cuando se sospeche la infeccin del cultivo celular por un agente
patgeno para el hombre, dichos cultivos debern ser manejados en un nivel de
contencin adecuado al agente en cuestin.
La eleccin del nivel de contencin, segn el origen del cultivo celular, se
muestra en la siguiente Tabla:

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

Hay un riesgo adicional en el caso de cultivos celulares genticamente

modificados.
Riesgos en los procedimientos de cultivos celulares:
En la manipulacin de cultivos celulares debern minimizarse todas las
tareas que contribuyan a la formacin de aerosoles o salpicaduras: trasvases,
derrames, pipeteos continuados y rpidos, .... Las agujas no debern utilizarse
si existe una alternativa razonable. Como en todo trabajo con material
infeccioso o potencialmente infeccioso, debern utilizarse cabinas de seguridad
biolgica, las cuales estarn correctamente instaladas y regularmente
mantenidas y comprobadas.
Algunos productos celulares pueden ser alergnicos por lo que en estos
casos se requerirn unos estrictos niveles de contencin primaria y/o proteccin
personal de los trabajadores para prevenir la inhalacin o el contacto con las
mucosas.
Contencin:
Como se indico en la Tabla anterior, cuando hay evidencia o sospecha de
la presencia de patgenos (por ejemplo: Herpesvirus simiae en tejidos de
simios o VIH en clulas blancas de sangre perifrica), los cultivos celulares se
manipularn en el nivel de contencin requerido para el patgeno en cuestin.
Todos los procedimientos implicados en la propagacin de cultivos celulares

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

que estn contaminados deberan llevarse a cabo como mnimo en el nivel de

contencin 2, en la realizacin de las manipulaciones.
Cuando se utilice slo un pequeo nmero de clulas con un bajo riesgo
de infeccin y no se encuentren en fase proliferativa podr no se necesaria la
cabina de seguridad. Por el contrario, donde el volumen y nmero de clulas es
alto (proceso a gran escala) o donde el nivel de exposicin va aumentando por
la inevitable produccin de aerosoles, los niveles de contencin y planes de
contingencia debern ser ms estrictos.
Desinfeccin y desecho de residuos:
Es necesaria la existencia de normas efectivas para la descontaminacin
de todos los materiales utilizados en relacin con los cultivos celulares y fluidos
de desecho.
Los procedimientos de descontaminacin debern ser capaces de
inactivar virus y otros agentes contaminantes aun en presencia de fluidos con
una elevada carga de material orgnico. La descontaminacin qumica es por
esta causa menos efectiva que la que se obtiene por calor.
El riesgo de infeccin en las sucesivas etapas necesarias para el
tratamiento de los desechos deber ser valorado, tomando las medidas
adecuadas en cada caso.
Conclusiones:
Para el manejo seguro de los cultivos celulares es necesaria una
valoracin adecuada de los riesgos, una buena organizacin del trabajo y la
aplicacin de los principios de las buenas prcticas en el laboratorio. Es
importante adoptar procedimientos de separacin que prevengan la
transmisin accidental de agentes infecciosos de un cultivo a otro. Para evitar
dichas transmisin as como la contaminacin cruzada entre clulas, slo deber
manipularse una lnea celular cada vez, utilizando mtodos adecuados de
descontaminacin, especialmente en las operaciones desarrolladas entre
diferentes tipos de clulas.
Es recomendable que los cultivos celulares que estn infectados se
manipulen al final del perodo de trabajo o preferiblemente en un laboratorio
diferente de los que se reconocen como libres de infeccin.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

ANEXO IV
BIBLIOGRAFA Y OTRAS FUENTES DE INFORMACIN
- INSHT. Gua Tcnica para la Evaluacin y Prevencin de Riesgos
relacionados con la Exposicin a Agentes Biolgicos.
- Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, sobre la proteccin de los trabajadores
contra los riegos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos durante el
trabajo.
- Organizacin Mundial de la Salud. Manual de Bioseguridad en el laboratorio.
Ginebra 1994.
- Furr, A.K. CRC Handbook of Laboratory Safety. CRC Press, Boca Ratn, FL
1989.
- INSALUD. Manual de gestin interna para residuos de centros sanitarios.
INSALUD. Madrid 1990.
- INSHT. Condiciones de Trabajo en Centros Sanitarios. Madrid 2000
- INSHT. Prevencin de Riesgos Biolgicos en el Laboratorio. Madrid 1997
- INSHT. Notas Tcnicas de Prevencin, nmeros 202, 203, 299, 351, 372, 376,
384, 398, 402, 411 y 422.
- European Chemical Industry Council (CEFIC). Guidance on the health
protection of pregnant,
recently delivered and breast-feeding women at work. Gua de la Directiva
92/85/EEC.
- ACDP-HSE. Categorisation of biological agent according to hazard and
categories of containment.
1995.
- HSE. Biological Agent Approved Codes of Practice. HSE Book.
- Silva, J.; Fernndez, I. Curso Riesgos Biolgicos y Trabajo. GTP Cantabria.
1995.
BIBLIOGRAFA PARA LA AYUDA DE LA CLASIFICACIN DE LOS
AGENTES BIOLGICOS
- Bergeys Manual of Systematic Bacteriology.
Vol. 1, Krieg, N.R.; Holt, J.G., 1984
Vol. 2, Snealth, P.H.;Mair, N.S. 1986

Vol. 3, Staley, J.T.; Bryant, M.P. 1989

Vol. 4, Williams, S.T.;Sharpe, M.E. 1989
- Francki RIB; Fanquet C.M.; Knudson, D.L.; Brown, F. (Eds.). Classification
and nomenclature of viruses-Fifth Report of the International Commitee on
Taxonomy of Viruses. 1991. Archives of Virology.
Supple.2.
Springer-Verlag.

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS

Servicio de Prevencin de Riesgos Laborales

- Noble E. R.; Noble G. A. Parasitology: The biology of the animal parasites.

1989. (6th edit.) Leaand Febigier.
- HMSO. Medical Research Council Nomenclature of Fungi Pathogenic to man
and animals.1977.
HMSO
- En Internet:

Index to material safety data sheets (MSDS) for infectious substances.

http://www.hc-sc.gc.ca/main/lcdc/web/biosafty/msds/index.html.
Base de datos de patgenos aerotransportados.
http://www.bio.psu.edu/People/Faculty/Whittan/apdbase/aplist.html

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO CON EXPOSICIN A AGENTES BIOLGICOS