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ANATOMIA DOS VEGETAIS

ROTEIRO DE AULAS
PRTICAS
Profa. Dra. Mara Magenta
2 semestre - 2007

DATAS PREVISTAS PARA AS AULAS PRTICAS (SUJEITAS A ALTERAO)

1 bimestre
Aula I: 09 ou 10 de agosto
Aulas II e III: 30 ou 31 de agosto

2 bimestre
Aula IV: 19 ou 20 de outubro
Aula V: 08 ou 09 de novembro

TCNICAS HISTOLGICAS - CORTES MO LIVRE


1- Fixao - consiste em matar o material, mantendo-o o mais semelhante possvel ao material vivo.
Fixadores mais utilizados: etanol 70%; formalina; FAA. O corte de material fresco traz melhores resultados.
2- Verificar a orientao desejada - a partir do conhecimento morfolgico do rgo em questo, antes de
cortar. Tipos de orientao: - transversal, longitudinal (radial ou tangencial) ou paradrmico.
3- Uso de suportes - para material pequeno ou escorregadio: cortia, medulas de embaba (excelentes
resultados), sabugueiro, isopor. - Seccionar longitudinalmente ou perfurar um pedao de suporte,
"escavando" a parte central, para que o rgo a ser cortado se encaixe perfeitamente entre as duas partes.
4- O corte:
a- corte de nivelamento: a superfcie dever ser nivelada antes da realizao dos cortes; para isso, poder ser
utilizada uma lmina de barbear velha;
b- cortes histolgicos: realizados com lminas de barbear novas, da seguinte forma: - colocar uma gota de
gua sobre o material e segurando a lmina entre os dedos polegar e indicador, cortar com movimentos para
trs e para a direita. obs.: a lmina deve deslizar suavemente sobre o material; a fim de se obter cortes
delgados. O material cortado dever ser depositado, com a ajuda de um pincel ou estilete, numa placa de
Petri contendo gua destilada, para no haver dessecamento.
c- Selecionar, com o auxlio da lupa, os melhores cortes (enrolam-se, ao serem tocados com o pincel).
5- Clarificao mergulhar em hipoclorito de sdio (gua sanitria) 50%; terminado o processo, lavar
com gua destilada (usando pipeta) por vrias vezes, at no haver mais odor.
6- Dupla colorao: somente aps mergulhar os cortes em etanol 50%.
a- numa placa pequena, mergulhar os cortes em um pouco de corante AZUL DE ALCIAN ou AZUL DE
ASTRA; deixando por 30-50 segundos (ou at ficar azul);
b- retirar o corante (com pipeta) e lavar com gua e depois em etanol (EtOH);
c- pingar algumas gotas de FUCSINA BSICA (em geral esse corante est muito forte; pode-se deixar um
pouco de etanol, antes de adicion-lo) e deixar por 10-20 segundos;
OBSERVAO: O TEMPO EXATO DE COLORAO VARIA DE ACORDO COM O MATERIAL
BIOLGICO; S A EXPERINCIA PODE INDICAR O TEMPO EXATO PARA CADA UM.
d- lavar em etanol 50%, para retirar o excesso de corante; lavar em etanol 70% e 100%, por cerca de 1
minuto, para desidratao do material.
7- Montagem da lmina histolgica:
a- lminas temporrias: o meio de montagem no permanente (ex.: glicerina) ou o corante no durvel
(ex.: Cloreto de Zinco Iodado). So montadas durante os cursos de anatomia, da seguinte forma: - em uma
lmina, pingar uma gota de glicerina a 50%, colocando o corte j corado sobre a mesma, com auxlio de um
pincel; - colocar a lamnula com cuidado e vedar com esmalte incolor, em toda a borda da lamnula (obs.: se
houver glicerina em excesso, retirar com papel filtro antes de vedar). ESTE SER O PROCESSO
UTILIZADO EM AULA.
b- lminas permanentes: o meio de montagem permanente (Blsamo do Canad; resina sinttica) e os
corantes so durveis (dupla colorao). - desidratar o material gradativamente at lcool 100%; - passar em
solvente Acetato de Butila ou Xilol (txico); - montar com blsamo do Canad ou Entelan (resina).
c- lminas semi-permanentes: montadas em gelatina glicerinada (duram de 2 a 5 anos).

Aula prtica 1: CLULA VEGETAL


Material 1 : Diefembachia sp.
1. Efetuar alguns cortes transversais do pecolo da folha, depositando-os numa placa de Petri mdia com
gua, para no haver dessecamento;
2. Com ajuda de um pincel de ponta fina, transferir os cortes para placas de Petri pequenas e cobrir com
FL (fluoglucina), que evidencia lignina (em vermelho), substncia que confere resistncia s clulas
(DEIXAR POR 30 MINUTOS);
3. Aps esse tempo, transferir novamente os cortes para a placa com gua;
4. Transferir cada corte para uma lmina, pingar duas gotas de gua e cobrir com lamnula;
5. Observar em 100 e 400 x e anotar os resultados (positivo ou negativo).
6. Esquematizar e nomear as substncias ergsticas e organelas observadas.

Responder: a. Qual o resultado do teste para lignina?


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b. De que maneira a lignina est ligada ao desenvolvimento das plantas?
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Material 2: Licopersicon esculentum (tomate)
1. Cuidadosamente, destacar um fragmento da epiderme (pele) do tomate, com ajuda da lmina de
barbear ou da unha; com a lmina, raspar o excesso de tecido, at obter uma pelcula fina;
2. Usando uma pina de ponta fina, transferir para uma lmina histolgica, hidratar com uma ou
duas gotas de gua e cobrir com lamnula;
3. Observar ao microscpio e esquematizar as clulas, apontando a parede celular e as pontoaes.

Pesquisar: Qual o nome da membrana que normalmente transpassa as pontoaes? Qual sua
origem? Como se chama a estrutura que contm essa membrana? Qual sua funo?
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Material 3: Malvaviscus sp. (hibisco)
1. Efetuar alguns cortes transversais do pecolo da folha, depositando-os numa placa de Petri mdia
com gua;
2. Transferir os cortes para placas de Petri pequenas, e cobrir com Fucsina bsica, que evidencia
lignina (em vermelho). DEIXAR POR 20 SEGUNDOS;
3. Aps esse tempo, transferir novamente os cortes para a placa com gua;
4. Com o pincel, depositar os cortes numa lmina, pingar duas gotas de gua e cobrir com lamnula;
5. Observar em 100 e 400 X . Esquematizar e nomear as substncias ergsticas e organelas
observadas.

Pesquisar: Qual a substncia ergstica encontrada? O que sua presena sugere?


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Aula prtica 2:TECIDOS VEGETAIS - SISTEMAS DRMICO E FUNDAMENTAL


Material 1: Tradescantia sp. - folha.
a. Com a unha, ou usando uma lmina de barbear, destaque um pequeno fragmento da epiderme,
obtendo um corte paradrmico (vista superior).
b. Com ajuda de uma pina de ponta fina, transferir para uma lmina histolgica;
c. Observar ao M.O. e esquematizar em 40 X (vista geral da epiderme) e 100 X (aparelho estomtico).

Material 2. Chlorophytum sp. - corte longitudinal de raiz.


a. Observar ao M.O. (microscpio ptico) em 40,100 e 400 X;
b. Esquematizar em 100 X, apontando os meristemas apical e lateral e a coifa.

Responder: 1. Como se chama o meristema lateral observado? Qual a funo da coifa das razes?
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2. possvel observar alguma sustncia ergstica no interior de algumas clulas? Em
caso afirmativo, de que se trata?
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3. possvel observar alguma organela celular? Qual?

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Aula prtica 3:TECIDOS VEGETAIS - SISTEMA CONDUTOR

Material 1. Hemerocalis flava (lrio amarelo) - corte transversal de caule


a. Observar ao M.O. em 40, 100 e 400 X. Esquematizar em 100 X, uma poro do corte, no formado de
cunha (forma semelhante a uma fatia de pizza). Indicar o nome dos tecidos, usando legenda.

CORTE
INTEIRO
CUNHA
b.
1.
2.
3.
4.

Observar o sistema condutor em 400 X e apontar:


elementos de vaso do xilema
elementos de tubo crivado do floema
clulas companheiras dos elementos de tubo crivado (de dimetro menor)
fibras de qualquer origem (do xilema, do floema ou do parnquima)

Ateno: existem muitas fibras formando um crculo ao redor dos feixes vasculares. Procure
detectar a diferena entre elas e os elementos de vaso, quanto ao dimetro das clulas e a
espessura das paredes.

Material 2. Hemerocalis flava (lrio amarelo) macerado, contendo clulas do xilema.


a. Observar ao M.O. em 400 X.
b. Esquematizar os 3 tipos de clula componentes do xilema, nomeando cada um.

Aula prtica 4: ANATOMIA DO SISTEMA CAULINAR


Material 1: Corte transversal de caule de Hemerocalis flava (lrio amarelo) lmina pronta

a. Observar o corte em 40, 100 e 400 X;


b. Esquematizar em 100 X, em cunha;
c. Apontar, com legendas, os diferentes tecidos.

Responder: De acordo com a anatomia, esta planta mono ou dicotilednea? Porqu?


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Material 2: Caule de Sphagneticola trilobata (margarida amarela) Efetuar um esquematizando em
cunha e apontando os diferentes tecidos.

a. Efetuar um corte transversal;


b. Esquematizar em cunha;
c. Apontar todos os tecidos, com legendas.

Responder: 1. De acordo com a anatomia, esta planta mono ou dicotilednea? Porqu?


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2. O corte est em crescimento primrio ou secundrio? Justificar.
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Material 3: Corte transversal de folha

a. Esquematizar e legendar.

Responder: a. Que tecidos compem o mesofilo?


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b. Em sua opinio, esta folha pertence a uma planta mesfita, hidrfita ou
xerfita? Justifique.
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Aula prtica 5: ANATOMIA DO SISTEMA RADICULAR


ATENO: PARA EXECUO DA AULA, OS ALUNOS DEVERO UTILIZAR AS TCNICAS DE
CORTES MO LIVRE, DESCRITAS NA PGINA 1 DESTE ROTEIRO.

Material 1: Raiz de Phaseolus vulgaris (feijo)


a. Efetuar um corte transversal
b. Aplicar a tcnica da dupla colorao;
c. Esquematizar em cunha e pontar os diferentes tecidos com legendas.

Responder: a. De acordo com a anatomia, esta planta mono ou dicotilednea? Porqu?


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c.

O corte est em crescimento primrio ou secundrio? Justificar.


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Material 2: Raiz de Zea may (milho)


a. Efetuar um corte transversal
b. Aplicar a tcnica da dupla colorao;
c. Esquematizar em cunha e pontar os diferentes tecidos com legendas.

Responder: a. De acordo com a anatomia, esta planta mono ou dicotilednea? Porqu?


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d.

O corte est em crescimento primrio ou secundrio? Justificar.


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