11A.5.

PORCENTAJE DE PROTENA
El contenido de protena es el siguiente anlisis a realizar en muestra de harina de
pescado.
a. Pesando la muestra: la primera etapa en un anlisis de protenas, es pesar
la muestra. Generalmente, la muestra se pesa en un papel celofn, que no
contamina la muestra con protena o nitrgeno, no alterando por tanto, los
resultados.
b. Colocando la muestra en tubo Kjeldehl: la siguiente etapa es colocar la
muestra pesada envuelta en el celofn dentro de un tubo especialmente
diseado para este anlisis denominado tubo Kjeldahl.
c. Agregando cido: a este tubo se le agrega cido sulfrico y una mezcla de
catalizador (sulfato de cobre y potasio) para realizar la digestin de la
muestra.
d. Digestin (lquido oscuro): el equipo de digestin est construido de tal
forma que el calor que se aplica a los tubos permite la digestin de la
muestra en un grado tal, que el nitrgeno es liberado desde las protenas y
convertido en amonaco. Este amonaco se combina con el cido sulfrico
concentrado, formando sulfato de amonio que es estable bajo las
condiciones de trabajo.
e. Digestin (lquido claro de color verde): una vez que se ha completado la
digestin, las muestras dentro de los tubos se ven de color verde y de
aspecto cristalino.
f.

Adicin de base: en este punto, se agrega una base (Hidrxido de sodio al

50%) y se coloca el tubo inmediatamente en la unidad de destilacin. La
base convierte el sulfato de amonio en amonaco, el que puede ser
destilado.

g. Solucin de cido dbil: se mide exactamente un volumen de una solucin

de cido dbil de normalidad conocida (Acido sulfrico 0,1 N) en un matraz
y se coloca en el final del tubo de destilacin para recibir el amonaco y
otros productos de destilacin.
h. Destilacin: a medida que se aplica calor al tubo Kjeldahl, la destilacin se
realiza, el amonaco sube por el tubo Kjeldahl pasa a travs de un
condensador de agua fra y cae dentro del matraz que contiene un volumen
exacto del cido de concentracin conocida. El amonaco se combina con el
cido sulfrico formndose sulfato de amonaco.
i.

Titulacin (rojo): la siguiente etapa es titular la solucin del matraz con una
base dbil en presencia de indicador rojo de metilo. Se puede observar que
la titulacin recin comienza y la solucin es color rojo.

j.

Titulacin (amarillo): en esta diapositiva la titulacin ha pasado el punto final

y el color de la solucin es amarillo. Por el volumen de base gastados y su

concentracin se calculan los miliequivalentes de cido que no

reaccionaron con el amonaco. Como el cido en un principio se agreg en
un volumen y concentracin exactamente conocidos, es posible entonces
calcular por diferencia entre los miliequivalentes totales de cido y los
miliequivalentes finales. Los miliequivalentes que reaccionaron con el
amonaco, (0.1 miliequivalentes de cido sulfrico equivalen a 0.0014 g de
nitrgeno) La cantidad de nitrgeno en la harina de pescado se multiplica
por 6.25 para determinar la cantidad total de protena presente en la
muestra.
La cantidad total de protena presente, dividido por el peso de la muestra y
amplificado por 100, da el porcentaje de protena de la muestra.

11A.6. PORCENTAJE DE CENIZAS

El siguiente anlisis a considerar, es el porcentaje de ceniza de la muestra de
harina de pescado.
a. Pesando la muestra: se pesa la muestra en balanza analtica, en una
cpsula de porcelana previamente tarada.
b. Estufa a 105C: se coloca la muestra en la cpsula en estufa a 105C por 5
horas, para remover la humedad de la muestra.
c. Sacando la muestra de la estufa: despus que han transcurrido 5 horas,
toda la humedad ha sido removida de la muestra y se saca sta de la
estufa.
d. Carbonizar en mechero: la siguiente etapa, es calentar la cpsula que
contiene la muestra sobre un mechero bajo campana, hasta carbonizarla.
e. Mufla a 550C: la muestra es colocada entonces, en mufla a una
temperatura de 550C. Esta etapa junto con el secado inicial y la
carbonizacin destruyen toda la materia orgnica de la muestra y el material
remanente son las cenizas.
f.

Pesada: despus que la muestra ha permanecido en la mufla por 18 horas,

se retira de ella y se deja enfriar en un desecador. Entonces, es pesada
para encontrar la cantidad de ceniza de la muestra.

g. Determinacin de las cenizas: esta muestra tiene un peso hmedo inicial,

que al dividirlo por la cantidad de ceniza obtenida, nos entrega el valor en
porcentajes de las cenizas presentes en la harina de pescado.