Anda di halaman 1dari 13

About 100 million dengue cases are reported annually and an estimated

2.5 billion
people are susceptible to the infection mostly in the tropical regions.
Dengue virus is a
member of the Flavivirus genus and consists of four serotypes (DV-1, DV2, DV-3, and DV4), each of which is capable of causing dengue fever and the more severe
dengue
hemorrhagic fever or dengue shock syndrome. There is an urgent need to
develop a safe and
effective vaccine that induces protective immune response to all the four
serotypes
overcoming antibody dependent enhancement. At present there is no
licensed vaccine or
specific therapeutic measures for prevention or management of the fatal
infection. This mini
review outlines the different vaccine candidates that are at various stages
of development.
Sekitar 100 juta kasus dengue dilaporkan setiap tahun dan diperkirakan 2,5
miliar
orang yang rentan terhadap infeksi terutama di daerah tropis . virus dengue
adalah
anggota dari genus Flavivirus dan terdiri dari empat serotipe ( DV - 1 , DV 2 , DV - 3 , dan DV4 ) , yang masing-masing mampu menyebabkan demam berdarah dan demam berdarah
yang lebih parah
demam berdarah atau dengue shock syndrome . Ada kebutuhan mendesak untuk
mengembangkan aman dan
vaksin yang efektif yang menginduksi respon imun protektif untuk semua empat
serotipe
mengatasi antibodi tambahan tergantung . Saat ini tidak ada vaksin berlisensi
atau
langkah-langkah terapi khusus untuk pencegahan atau pengelolaan infeksi fatal.
mini
Ulasan menguraikan kandidat vaksin yang berbeda yang berada pada berbagai
tahap perkembangan .

Ide pokok :

Keywords: Antigen, Bispecific antibodies, Clinical trials, dengue shock syndrome,


Dendritic cell
targeting, viral gene expression, Immunization, vaccine
Kata kunci : Antigen , antibodi Bispecific , uji klinis , demam berdarah shock
syndrome , sel dendritik penargetan , ekspresi gen virus , Imunisasi , Vaksin

In the last 20 years dengue has spread rapidly and is endemic in more than 100

countries. Dengue virus infection represents a major, growing public health problem
with an
estimated 2.5 billion people at risk of infection in tropical and subtropical countries
(WHO,
2009). Early reports on dengue fever outbreaks date back to about two hundred
years ago but in
recent times the major burden of the fatal disease are borne particularly in south
east Asia,
south and central America (Whitehead et al. 2007; Cardosa, 1998). Dengue Fever is
a debilitating
and often fatal flavivirus infection transmitted by Aedes mosquitoes (Edelman,
2007). There are
more than 100 million cases of dengue infections annually and about half a million
reports of
the more severe and threatening dengue haemorrhagic fever (DHF) and dengue
shock
syndrome (DSS) (Gubler, 2002a, 2002b). There are four serotypes of dengue virus
(DV1, DV2,
DV3 and DV4). All the serotypes are competent in causing asymptomatic
manifestations as well
as the more severe and fatal DHF and DSS. Dengue virus comprises if a singlestranded,
positive-sense RNA genome. Translation of the viral RNA results in a single
polypeptide that is
processed by proteases, generating three structural proteins and seven nonstructural (NS)
proteins (Lindenbach and Rice, 2001; Clyde and Harris, 2006). The structural
proteins consists of
the capsid, membrane and the envelope where as the non structural proteins are
NS1, NS2A,
NS2B, NS3, NS4A, NS4B and NS5. There is also a membrane precursor (prM), which
assists in
the folding of the envelope protein. The Envelope protein plays an important role in
infection of
the cells and is also reported to be the target to develop neutralizing antibodies
(Mukhopadhyay et al. 2005; Halstead, 1989).
Dalam 20 tahun terakhir dengue telah menyebar dengan cepat dan endemik di
lebih dari 100 negara. infeksi virus dengue merupakan, berkembang masalah
kesehatan masyarakat yang utama dengan diperkirakan 2,5 miliar orang pada
risiko infeksi di negara-negara tropis dan subtropis (WHO, 2009). Laporan awal
dari wabah demam berdarah tanggal kembali ke sekitar dua ratus tahun yang lalu
tapi di kali beban utama dari penyakit fatal yang ditanggung terutama di Asia
Tenggara,selatan dan Amerika Tengah (Whitehead et al 2007;. Cardosa, 1998).
Demam Berdarah adalah melemahkan suatu dan sering infeksi flavivirus yang
fatal ditularkan oleh nyamuk Aedes (Edelman, 2007). Ada
lebih dari 100 juta kasus infeksi dengue setiap tahunnya dan sekitar setengah
juta laporan
semakin parah dan mengancam demam berdarah dengue (DBD) dan syok dengue
syndrome (DSS) (Gubler, 2002a, 2002b). Ada empat serotipe virus dengue (DV1,
DV2,

DV3 dan DV4). Semua serotipe kompeten dalam menyebabkan manifestasi tanpa
gejala serta
sebagai DBD lebih parah dan fatal dan DSS. virus dengue terdiri jika untai
tunggal,
positif-sense RNA genom. Terjemahan dari hasil RNA virus dalam polipeptida
tunggal yang
diproses oleh protease, menghasilkan tiga protein struktural dan tujuh nonstruktural (NS)
protein (Lindenbach dan Beras, 2001; Clyde dan Harris, 2006). Protein
struktural terdiri dari
kapsid, membran dan amplop mana sebagai protein non struktural NS1, NS2A,
NS2B, NS3, NS4A, NS4B dan NS5. Ada juga prekursor membran (PRM), yang membantu
dalam
lipat dari protein amplop. Envelope protein memainkan peran penting dalam
infeksi sel dan juga dilaporkan menjadi target untuk mengembangkan antibodi
(Mukhopadhyay et al 2005;. Halstead, 1989).

Dengue has become a huge burden both in terms of lives lost particularly children
and
also the economic setback to the emerging economies of the world to contain the
disease. A
primary infection with any of the serotypes would induce lifetime immunity against
that
particular serotype but a subsequent infection with a different serotype can increase
the severity
of the disease due to a phenomenon known as antibody dependent enhancement
(ADE). Hence
development of an effective vaccine candidate catering to all the four serotypes,
which would
be safe and cost effective, is of great significance particularly for children and young
adults who
are the most susceptible (Jin, 2009). Currently there are no licensed vaccines
available for
dengue although there are vaccines available for a number of closely related
viruses. The World
Health Organization has prioritized the development of dengue vaccine and
therapeutics for a
long time. But so far due to unsuccessful development of any kind of vaccine or
treatment for
containing dengue, the arrangements so far pursued have been vector control and
individual
preventive steps which are tough to sustain and also expensive (Brandt, 1990;
Stephenson,
2006). The foremost issue associated with dengue vaccine development is the need
for
concurrent protective immunity against all four serotypes due to ADE (Guzman et
al. 2007;
Kliks et al. 1989; Morens and Halstead, 1990). This short article summarizes various
approaches
undertaken towards a successful dengue vaccine and the challenges associated
with it.

Dengue telah menjadi beban besar baik dari segi kehidupan yang hilang terutama
anak-anak dan juga kemunduran ekonomi dengan negara-negara berkembang di dunia
untuk mencegah penyakit tersebut. SEBUAH infeksi primer dengan salah satu
serotipe akan menginduksi kekebalan seumur hidup terhadap yang serotipe
tertentu, tetapi infeksi berikutnya dengan serotipe yang berbeda dapat
meningkatkan keparahan penyakit akibat fenomena yang dikenal sebagai antibodi
dependent enhancement (ADE). Karenanya pengembangan katering calon vaksin yang
efektif untuk semua empat serotipe, yang akan aman dan biaya yang efektif,
adalah sangat penting terutama untuk anak-anak dan orang dewasa muda yang
adalah yang paling rentan (Jin, 2009). Saat ini tidak ada vaksin berlisensi
tersedia untuk
dengue meskipun ada vaksin yang tersedia untuk sejumlah virus terkait erat.
Dunia Organisasi kesehatan telah memprioritaskan pengembangan vaksin dengue
dan terapi untuk lama. Namun sejauh ini karena perkembangan gagal dari segala
jenis vaksin atau pengobatan untuk mengandung dengue, pengaturan sejauh
dikejar telah pengendalian vektor dan individu langkah-langkah preventif yang
sulit untuk mempertahankan dan juga mahal (Brandt, 1990; Stephenson,
2006). Masalah utama yang terkait dengan pengembangan vaksin dengue adalah
kebutuhan untuk kekebalan protektif bersamaan terhadap keempat serotipe karena
ADE (Guzman et al 2007.; Kliks et al. 1989; Morens dan Halstead, 1990).
Artikel singkat ini merangkum berbagai pendekatan dilakukan terhadap vaksin
dengue sukses dan tantangan yang berkaitan dengan itu.

VACCINES: EFFORTS AND CHALLENGES


With the ever-increasing severity of the dengue virus and its crucial impact on loss
of life,
economics of the endemic region etc., the need of an effective vaccine is becoming
more and
more significant (Malabadi, 2008; Malabadi et al. 2010, 2011). The increase in
dengue incidence
in the past decade and the simultaneous presence of four different serotypes has
posed a greater
threat to the communities and has also witnessed higher volumes of the more
severe forms of
dengue infection. The development of an effective dengue vaccine has been not
easy although
focused and concerted efforts have been made for the past 70 years. Just after the
end of World
War II, Sabin and colleagues reported one of the first formulations of a dengue
vaccine. Their
work was based on live attenuated virus passaged multiple times in the mouse
brain (Sabin and
Schlesinger, 1945; Sabin, 1952). After about 15 passages in the mouse brain, the
virus became
attenuated enough for trial in humans (Edelman, 2007; Jin et al. 2009). Much later
Halstead and
coworkers made efforts by attenuating dengue virus in dog kidney cells (Thomas
and Endy,
2011). Other developments are focused on inactivated and subunit virus candidates
(Whitehead
et al. 2007). The major hindrance faced by researchers in vaccine development is
the

phenomenon of Antibody dependent enhancement (ADE). The presence of nonneutralizing


antibodies developed during a primary infection of dengue greatly increases the
severity of a
second dengue infection with a different serotype by formation of immune
complexes or
facilitating viral access to Fc-Receptor possessing cells (Calvert et al. 2006;
Halstead, 2003).
Therefore an ideal vaccine candidate should be able to circumvent the ADE
phenomenon and
be tetravalent in nature or a combination of four monovalent vaccines delivered as
a single
vaccine. The vaccine should also be able to confer immunity against all the four
different
serotypes. Also the need to understand the underlying molecular principles that
govern
pathogenesis of dengue is very important (Murrrel et al. 2011). Currently, though
over the past
decade efforts have been more aggressive to develop an effective intervention to
the fatal
infection with the advent of recombinant DNA technology. There are many targeting
approaches and the development of nanocarrier vaccine have been reviewed (Khan
et al. 2011,
2012). The absences of a proper animal system to test the vaccine candidates have
also been a
deterrent in dengue vaccine research. Emerging economies of the world bear the
greatest
burden of dengue fatality so an economically affordable vaccine is necessary which
would
Envelope glycoprotein that is part of the virus structure is considered a major target
for vaccine
research. Its functionality includes virus attachment and subsequent cell entry.
Domain III of
the envelope protein is considered most important owing to its role in cell receptor
binding
(Lok et al. 2008). Other proteins such as the membrane and NS1 are also thought to
be protective
(Schlesinger et al. 1986). Monoclonal antibodies against Envelope and pre
membrane proteins
have been efficient in protecting against severe infection (Crill and Roehrig, 2001).
There is also
evidence that protective anti dengue antibodies are effective in children with
maternal
inheritance. Cell mediated immune responses have also been shown to play a role
in active viral
clearance (Samuel and Diamond, 2006).

VAKSIN : UPAYA DAN TANTANGAN

Dengan terus meningkat keparahan virus dengue dan dampak penting pada
hilangnya nyawa ,ekonomi wilayah endemik dll , kebutuhan vaksin yang efektif
menjadi lebih dan lebih signifikan ( Malabadi , 2008; Malabadi et al 2010,
2011). Peningkatan insiden berdarah dalam dekade terakhir dan kehadiran
simultan empat serotipe yang berbeda telah menimbulkan lebih besar ancaman
terhadap masyarakat dan juga menyaksikan volume yang lebih tinggi dari bentuk
yang lebih parah infeksi dengue . Pengembangan vaksin dengue yang efektif
telah tidak mudah meskipun upaya terfokus dan terpadu telah dilakukan selama
70 tahun terakhir . Hanya setelah akhir Dunia Perang II , Sabin dan rekan
melaporkan salah satu formulasi pertama vaksin dengue . Mereka kerja
didasarkan pada virus hidup yang dilemahkan passaged beberapa kali dalam otak
tikus ( Sabin dan Schlesinger , 1945; Sabin , 1952) . Setelah sekitar 15
bagian dalam otak tikus , virus menjadi dilemahkan cukup untuk percobaan pada
manusia ( Edelman , 2007 ; Jin et al 2009). Banyak kemudian Halstead dan
rekan kerja membuat upaya pelemahan virus dengue dalam sel ginjal anjing
(Thomas dan Endy,2011). Perkembangan lain berfokus pada kandidat virus yang
tidak aktif dan subunit (Whitehead et al. 2007). Rintangan utama yang dihadapi
oleh para peneliti dalam pengembangan vaksin adalah Fenomena Antibodi
tergantung perangkat tambahan (ADE). Kehadiran non-menetralkan
antibodi dikembangkan selama infeksi primer demam berdarah sangat meningkatkan
keparahan dari Infeksi dengue kedua dengan serotipe yang berbeda dengan
pembentukan kompleks imun atau memfasilitasi akses virus ke Fc-Receptor sel
memiliki (Calvert et al 2006;. Halstead, 2003).
Oleh karena itu calon vaksin yang ideal harus mampu menghindari fenomena ADE
danmenjadi tetravalen di alam atau kombinasi dari empat vaksin monovalen
disampaikan sebagai tunggal vaksin. Vaksin ini juga harus dapat memberikan
kekebalan terhadap semua empat yang berbeda serotipe. Juga kebutuhan untuk
memahami prinsip-prinsip molekuler yang mendasari yang mengatur patogenesis
demam berdarah sangat penting (Murrrel et al. 2011). Saat ini, meskipun selama
masa lalu upaya dekade lebih agresif untuk mengembangkan intervensi yang
efektif untuk fatal Infeksi dengan munculnya teknologi DNA rekombinan. Ada
banyak penargetan pendekatan dan pengembangan vaksin nanocarrier telah
ditinjau (Khan et al. 2011,2012). Absen dari sistem hewan yang tepat untuk
menguji kandidat vaksin juga telah jera dalam penelitian vaksin dengue. Negara
berkembang dunia menanggung terbesar beban dengue kematian sehingga vaksin
ekonomis terjangkau diperlukan yang akan Amplop glikoprotein yang merupakan
bagian dari struktur virus dianggap sebagai sasaran utama untuk vaksin
penelitian. fungsinya termasuk virus attachment dan masuk sel berikutnya.
Domain III protein amplop dianggap paling penting karena perannya dalam
reseptor sel mengikat (Lok et al. 2008). protein lain seperti membran dan NS1
juga dianggap pelindung (Schlesinger et al. 1986). antibodi monoklonal
terhadap Amplop dan protein membran pra telah efisien dalam melindungi
terhadap infeksi berat (Crill dan Roehrig, 2001). Ada juga
bukti bahwa pelindung antibodi anti dengue yang efektif pada anak-anak dengan
ibu warisan. Diperantarai sel respon imun juga telah ditunjukkan untuk
memainkan peran dalam virus aktif cukai (Samuel dan Diamond, 2006).

Live attenuated vaccine development efforts are considered one of the effective
approaches. A wild type dengue virus can be attenuated by serial passages in tissue
culture to
be used in humans maintaining its ability to generate an immune response. In
another
embodiment a chimeric vaccine candidate is generated by modification of a
licensed yellow

fever virus vaccine with dengue proteins. Another important feature of a live
attenuated
vaccine is its ability to induce sustained immune responses very closely mimicking a
response
incase of a natural infection. Sanofi Pasteur has developed a chimeric vaccine based
on the
yellow fever vaccine by incorporating dengue premembrane and envelope genes of
dengue
(Guy and Almond, 2007; Murphy and Whitehead, 2011). Recently, efficacy trial of
the vaccine in
Thailand demonstrated impressive safety profile along with the ability to protect
against three
of the four-dengue serotypes. Further clinical trials are underway to validate vaccine
efficacy
and safety (www.sanofipasteur.com). Inactivated virus vaccines are also in
preclinical stages of
development and one of the dengue serotype 2 vaccines manufactured by the
Walter Reed
Army Institute for Research is scheduled to begin clinical trials shortly. Inactivated
vaccines
have certain advantages over the attenuated ones including inability to become
pathogenic and
also being able to induce immune response in all four dengue serotypes due to
immunogenic
equality (Whitehead et al. 2007). Recombinant subunit vaccine candidates have
also been
developed primarily based on the envelope protein. There has been a study by the
Pedro Kouri
Tropical Medicine Institute where the domain III of the envelope protein was fused
with a
carrier protein and monovalent constructs were made for all the four serotypes.
Each of the
constructs was able to induce neutralizing immune response and also demonstrated
protection
against viral challenge (Hermida et al. 2006). Another bivalent effort is based on a
domain III
and STF2D fusion protein conjugate. There is also a tetravalent conjugate of Domain
III and
Ag473 fusion protein being evaluated in animals (Das et al. 2009). A lot of Dengue
vaccine
efforts based on virus like particles (VLP) are in preclinical phases. Viruses like
particles lack
replication material but are able to mimic antigen presentation like a natural viral
infection
(Jennings and Bachmann, 2008). A tetravalent vaccine candidate have been
developed by Cytos
Biotechnology by chemically attaching envelope domain III to an E.coli expressed
VLP. Another
monovalent candidate has been in development in ICGEB, India where the basis is
the envelope

domain III and P. pastoris expressed VLP (Schmitz et al. 2011). The Carolina vaccine
Institute
(CVI) has been a pioneer in the development of a alpha virus replicon vector
expressing
envelope protein. This strategy was demonstrated by immunizing monkeys resulting
in the
generation of neutralizing antibodies and protection from viral challenge as well.
GenPhar Inc.,
developed bivalent vaccine candidates based on an adenovirus construct. Challenge
studies
resulted in absolute protection against dengue type 1 and 3 whereas significant
reduction in
viremia was observed against type 2 and 4. Another strategy adopted by the
Pasteur Institut is
centered on a tetravalent dengue antigen from a live attenuated measles vaccine
vector. The
construct expresses domain IIIs of all the four serotypes along with the membrane
protein ectodomain. Analysis in murine models showed induction of neutralizing
antibodies against all
the serotypes. Clinical trials of the construct have been planned in the near future
(Schmitz et al.
2011). With genetic engineering and recombinant technology rapidly making
progress, concept
of DNA vaccines have been gaining considerable momentum. Studies have been
conducted
with monovalent constructs of dengue in macaques that resulted in production of
neutralizing
antibodies. It also conferred protection to the vaccinated macaques when
challenged with a
wild type dengue virus strain (Raviprakasha et al. 2000). A follow up study was done
by the
same research group, to enhance the neutralizing efficiency of the earlier DNA
vaccine
construct. Neutralization efficiency increased significantly from the earlier construct
and was
stable for 6 months post vaccination. All the monkeys barring one were also
completely
protected from a virus challenge (Raviprakasha et al. 2000; Konishi et al. 2006).
These important
findings led to the transition of DNA based dengue vaccines towards clinical trial
(Danko et al.
2011). Advantages of DNA based strategies involve its ability to induce both
humoral and cell
mediated immune responses, lack of complicity like other vaccine approaches and
technically
simpler to develop. On the contrary there are also some drawbacks associated like
the level of
immunogenicity obtained from clinical studies have been slightly low. Another
limitation is

that of insufficient cell uptake (Murrrel et al. 2011) leading to reduced protein
expression.
Nonetheless, promising DNA based strategies are being explored at preclinical and
clinical
phases with varied outcomes. Further studies on DNA based vaccination including
design,
adjuvant selection, delivery methodology are needed to overcome the current
limitations as it
has the potential of being an effective strategy to counter dengue and other
infectious agents
owing to being cost effective, technically easier to manufacture, stability and the
ability to
deliver multiple agents in one single construct.
upaya pengembangan vaksin hidup yang dilemahkan dianggap salah satu yang
efektif pendekatan. Sebuah tipe liar virus dengue dapat dilemahkan oleh ayatayat serial kultur jaringan untuk digunakan pada manusia mempertahankan
kemampuannya untuk menghasilkan respon imun. di lain Perwujudan calon vaksin
chimeric dihasilkan oleh modifikasi dari kuning berlisensi Vaksin virus demam
dengan protein dengue. Fitur lain yang penting dari hidup seorang dilemahkan
Vaksin adalah kemampuannya untuk menginduksi respon imun yang berkelanjutan
sangat erat meniru respon memetikan dari infeksi alami. Sanofi Pasteur telah
mengembangkan vaksin chimeric didasarkan pada vaksin demam kuning dengan
memasukkan dengue premembrane dan amplop gen dari dengue (Guy dan Almond,
2007; Murphy dan Whitehead, 2011). Baru-baru ini, efikasi uji coba vaksin di
Thailand menunjukkan profil keamanan yang mengesankan bersama dengan kemampuan
untuk melindungi terhadap tiga dari serotipe empat dengue. uji klinis lebih
lanjut sedang dilakukan untuk memvalidasi keampuhan vaksin
dan keamanan (www.sanofipasteur.com). vaksin virus yang tidak aktif juga dalam
tahap praklinis pengembangan dan salah satu dengue serotipe 2 vaksin yang
diproduksi oleh Walter Reed Tentara Lembaga Penelitian dijadwalkan mulai uji
klinis lama. vaksin dilemahkan memiliki keunggulan tertentu atas yang
dilemahkan termasuk ketidakmampuan untuk menjadi patogen dan juga mampu
menginduksi respon imun dalam semua empat serotipe dengue karena imunogenik
kesetaraan (Whitehead et al. 2007). kandidat vaksin rekombinan subunit juga
telah dikembangkan terutama didasarkan pada protein amplop. Telah ada studi
oleh Pedro Kouri Tropical Medicine Institute di mana domain III dari protein
amplop itu menyatu dengan protein pembawa dan monovalen konstruksi dibuat
untuk semua empat serotipe. Masing-masing dari konstruksi mampu menginduksi
menetralkan respon kekebalan tubuh dan juga menunjukkan perlindungan terhadap
tantangan virus (Hermida et al. 2006). Upaya bivalen lain didasarkan pada
domain III dan konjugat STF2D fusi protein. Ada juga konjugat tetravalen dari
Domain III danAg473 protein fusi sedang dievaluasi pada hewan (Das et al.
2009). Banyak vaksin Dengue Upaya berdasarkan virus seperti partikel (VLP)
berada dalam fase praklinis. Virus seperti partikel kurang
bahan replikasi tetapi mampu meniru presentasi antigen seperti infeksi virus
alami(Jennings dan Bachmann, 2008). Calon vaksin tetravalen telah dikembangkan
oleh Cytos Bioteknologi oleh kimia melampirkan amplop domain III ke E.coli
menyatakan VLP. Lain calon monovalen telah dikembangkan di ICGEB, India di
mana dasar adalah amplop domain III dan P. pastoris menyatakan VLP (Schmitz et
al. 2011). The Carolina vaksin Institute(CVI) telah menjadi pelopor dalam
pengembangan vektor alpha virus replicon mengekspresikan
protein amplop. Strategi ini ditunjukkan oleh monyet imunisasi mengakibatkan
generasi antibodi dan perlindungan dari tantangan virus juga. GenPhar Inc.,

kandidat vaksin bivalen maju didasarkan pada konstruk adenovirus. studi


tantangan mengakibatkan mutlak perlindungan terhadap dengue tipe 1 dan 3
sedangkan penurunan yang signifikan dalam viremia diamati terhadap tipe 2 dan
4. Strategi lain yang diadopsi oleh Pasteur Institut adalah berpusat pada
antigen tetravalen dengue dari vektor vaksin campak hidup yang dilemahkan. Itu

membangun mengungkapkan IIIs domain dari semua empat serotipe bersama


dengan ectodomain protein membran. Analisis dalam model murine
menunjukkan induksi antibodi terhadap semua serotipe. uji klinis konstruk

telah direncanakan dalam waktu dekat (Schmitz et al.2011). Dengan rekayasa


genetika dan teknologi rekombinan cepat membuat kemajuan, konsep DNA vaksin
telah mendapatkan momentum yang cukup. Penelitian telah dilakukan
dengan konstruksi monovalen dengue di kera yang mengakibatkan produksi
menetralkan antibodi. Hal ini juga diberikan perlindungan kepada kera yang
divaksinasi ketika ditantang dengan liar jenis virus dengue regangan
(Raviprakasha et al. 2000). Sebuah studi tindak lanjut dilakukan oleh
kelompok riset yang sama, untuk meningkatkan efisiensi menetralisir vaksin DNA
sebelumnya membangun. Efisiensi netralisasi meningkat secara signifikan dari
konstruk sebelumnya dan stabil selama 6 bulan pasca vaksinasi. Semua monyet
pembatasan satu yang juga benar-benar dilindungi dari tantangan virus (.
Raviprakasha et al 2000; Konishi et al 2006.). ini penting
Temuan menyebabkan transisi dari DNA vaksin dengue berdasarkan menuju uji
klinis (Danko et al.2011). Keuntungan dari strategi berdasarkan DNA melibatkan
kemampuannya untuk menginduksi baik humoral dan sel respon imun dimediasi,
kurangnya keterlibatan seperti pendekatan vaksin lain dan teknis
sederhana untuk mengembangkan. Sebaliknya ada juga beberapa kelemahan yang
terkait seperti tingkat imunogenisitas yang diperoleh dari studi klinis telah
sedikit rendah. Keterbatasan lain adalah bahwa serapan sel tidak cukup
(Murrrel et al. 2011) yang menyebabkan berkurangnya ekspresi protein.
Meskipun demikian, menjanjikan strategi berdasarkan DNA sedang dieksplorasi di
praklinis dan klinis fase dengan hasil yang bervariasi. Penelitian lebih
lanjut tentang vaksinasi berdasarkan DNA termasuk desain, Temukan adjuvant,
metodologi pengiriman diperlukan untuk mengatasi keterbatasan saat seperti itu
memiliki potensi menjadi strategi yang efektif untuk melawan demam berdarah
dan agen menular lainnya karena biaya yang efektif, secara teknis lebih mudah
untuk memproduksi, stabilitas dan kemampuan untuk memberikan beberapa agen
dalam satu konstruk tunggal.

TARGETING STRATEGIES FOR DENGUE: A VIABLE ALTERNATIVE


Dendritic cells (DCs) are a unique class of antigen presenting cells that have an
important role
in both innate and cell mediated immunity. DCs have significant role in the
activation of T- and
B-cell immune responses and are deemed to be more efficient than other antigen
presenting
cells. Targeting of DCs via the surface receptors may be an alternative strategy for
development
of low dose targeted dengue vaccines. DC targeting greatly enhances antigen
delivery efficiency
to the DCs than traditional vaccination methods wherein enzymes and other cells
might have
adverse exposure before being taken up by the DCs (Wang et al. 2009; Tacken et al.
2006). DCs

internalize antigens using its many cell surface receptors including Gb3, CD40, Fc
receptors, Ctype
lectin receptors etc and present them to both MHC I and II pathways (Figdor et al.
2002;
Tacken et al. 2007). A lot of studies have been conducted on DC cell receptors and
antigen
targeting. DEC-205 is a part of the C-type lectin receptor family that has been
extensively
studied. It is present on both mature and immature dendritic cells and targeting
DEC-205
results in improved cross-presentation of antigens compared to other receptors
(Bozzacco et al.
2007; Jiang et al. 1995; Banchereau and Steinman, 1998). Reports illustrate that
DEC-205
targeting resulted in improvement in antigen presentation efficiency to T-Cells
(Wang et al.
2005). We have developed bispecific antibody based delivery vector to target DCs
with biotin
labeled antigens that could be proteins, DNA, peptides, gangliosides etc. (45, Wang
et al. 2005).
In this strategy, the antibody has dual specificity i.e. one arm can bind to any
biotinylated
antigen and the other arm is specific to the DC receptor DEC-205. Targeting resulted
in
reduction in antigen dosage by approximately 500 fold when compared with nontargeted
antigens. Animal studies demonstrated targeted strategy along with co-stimulatory
anti-CD40
monoclonal antibody significantly enhanced both humoral and adapted immune
responses for
SARS-CoV, Ebola GP1, MUC-1 peptide (Wang et al. 2009). Another study targeting
mucosal
DCs in murine model with SARS NP DNA induced strong immune response. When
CD40
monoclonal antibody as a DC maturation stimuli was used, the responses were
improved
considerably. Dengue specific DC targeted vaccine candidates are currently
investigated
(unpublished data). DC targeted systems involving bispecific antibodies could be
potentially a
viable alternative for the development of dengue vaccines which have been long
overdue
(Bonifaz et al. 2004; Malabadi et al. 2012) Exhaustive research on alternative
approaches needs to
be done to come up with potent strategies to counter dengue fatalities that have so
far taken
millions of lives around the world.

Fig: Schematic representation of DC Targeted Strategy


Acknowledgements
This work was supported by research grant from The Natural Sciences and
Engineering
Research Council of Canada (NSERC-Strategic). AG is a Ph. D graduate student and
RBM is a
Research Associate.

PENARGETAN STRATEGI UNTUK DEMAM BERDARAH: alternatif


sel dendritik (DC) adalah kelas yang unik dari antigen presenting sel yang
memiliki peran penting baik bawaan dan sel kekebalan yang dimediasi. DC
memiliki peran penting dalam aktivasi T dan B-sel respon imun dan dianggap
lebih efisien daripada presentasi antigen lainnya sel. Penargetan DC melalui
reseptor permukaan dapat menjadi alternatif strategi untuk pengembangan
dari dosis rendah ditargetkan vaksin dengue. DC penargetan sangat meningkatkan
efisiensi pengiriman antigen ke DC daripada metode vaksinasi tradisional
dimana enzim dan sel-sel lain mungkin memiliki paparan merugikan sebelum
diambil oleh DC (Wang et al 2009;. Tacken et al 2006.). DC internalisasi
antigen menggunakan banyak reseptor permukaan sel termasuk Gb3, CD40, reseptor
Fc, CTYPE lectin reseptor dll dan sekarang mereka untuk kedua MHC I dan jalur
II (Figdor et al 2002.; Tacken et al. 2007). Banyak penelitian telah dilakukan
pada reseptor sel DC dan antigen penargetan. Desember-205 adalah bagian dari
C-jenis lektin keluarga reseptor yang telah secara ekstensif dipelajari. Hal
ini hadir pada kedua sel dendritik matang dan dewasa dan menargetkan Desember205 Hasil di ditingkatkan lintas presentasi antigen dibandingkan dengan
reseptor lainnya (Bozzacco et al.
2007; Jiang et al. 1995; Banchereau dan Steinman, 1998). Laporan menggambarkan
bahwa Desember-205 penargetan mengakibatkan peningkatan antigen efisiensi
presentasi untuk T-Sel (Wang et al. 2005). Kami telah mengembangkan antibodi
vektor pengiriman berdasarkan bispecific untuk menargetkan DC dengan biotin
berlabel antigen yang bisa protein, DNA, peptida, gangliosida dll (45, Wang et
al. 2005). Dalam strategi ini, antibodi memiliki kekhususan ganda yaitu satu
lengan dapat mengikat terbiotinilasi setiap antigen dan lengan lainnya khusus
untuk DC reseptor Desember-205. Penargetan mengakibatkan
pengurangan dosis antigen oleh sekitar 500 kali lipat jika dibandingkan dengan
non-target antigen. Penelitian pada hewan menunjukkan strategi yang
ditargetkan bersama dengan co-stimulasi anti-CD40 antibodi monoklonal
signifikan ditingkatkan baik humoral dan disesuaikan respon imun untuk
SARS-CoV, Ebola GP1, MUC-1 peptida (Wang et al. 2009). Studi lain menargetkan
mukosa DC dalam model murine dengan SARS NP DNA yang diinduksi respon

kekebalan yang kuat. ketika CD40 antibodi monoklonal sebagai DC rangsangan


pematangan digunakan, respon ditingkatkan sangat. Dengue spesifik DC
ditargetkan kandidat vaksin sedang diselidiki (Data tidak dipublikasikan). DC
ditargetkan sistem yang melibatkan antibodi bispecific bisa berpotensi
alternatif untuk pengembangan vaksin dengue yang telah lama tertunda
(Bonifaz et al 2004;.. Malabadi et al 2012) penelitian Exhaustive pada
pendekatan alternatif perlu dilakukan untuk datang dengan strategi ampuh untuk
melawan kematian berdarah yang sejauh ini diambil
jutaan nyawa di seluruh dunia.