PRCTICA

NO. 9
PIGMENTOS Y FOTOSNTESIS

En las plantas, la absorcin de luz se realiza en los pigmentos localizados en las
membranas de los tilacoides de los cloroplastos, donde se encuentran formando
complejos pigmentoprotena. Su extraccin se puede lograr con el uso de solventes
orgnicos y la muestra obtenida contendr una mezcla de clorofila a, clorofila b y
carotenoides.
En el extracto de pigmentos no es posible observar las reacciones que
conducen a la transformacin de la energa solar en otras formas de energa como ATP
y NADPH mediante la extraccin con el solvente orgnico que disuelve los lpidos de las
membranas. Sin embargo, usando la clorofila se puede observar un flujo de electrones
si al extracto se le adicionan donadores y aceptores de electrones apropiados. Ejemplo
de ellos es el rojo de metilo (aceptor) y el cido ascrbico (donador). El rojo de metilo,
cuando est oxidado es un compuesto coloreado de rojo, pero cuando se reduce se
torna incoloro:

Ac. Ascrbico + Rojo de Metilo
Luz
Ac. Dehidroascrbico + Rojo de
(color rojo)

Metilo
Pigmentos
(incoloro)
Cada equipo deber traer por escrito:
Dibuje un cloroplasto y seale las diferentes partes que lo componen
Cul es el papel bioqumico de la clorofila a, b y carotenos?
En cuntas fases se divide la fotosntesis, en qu fase de la fotosntesis se reduce el
NADP+ y el ADP se fosforila en ATP, en qu fase se fija el carbono?

Objetivo: Planteado por el alumno.

Hipteis: Planteada por el alumno.

Reactivos y material
Material a solicitar:
Mortero con pistilo
Papel filtro
Embudo
Matraz Erlenmeyer de 50 ml
1 vaso pp de 50 ml
3 pipetas de 5ml
1 propipeta
3 tubos de ensayo
1 gradilla
1 pipeta Pasteur

Reactivos:
Acetona

 Acetona al 80%
Acido ascrbico
Solucin de Rojo de metilo (0.04 g de rojo de metilo disueltos en 100 ml de
etanol 96%)

Procedimiento
1. Extraccin de pigmentos fotosintticos
Lava y seca las hojas de espinaca a las que se van a extraer los pigmentos.
Elimina la nervadura ms gruesa y crta las hojas en pedazos pequeos.
Coloca los trozos en un mortero y tritura hasta destruir el tejido.
Adiciona pequeos volmenes de acetona, mientras continas la trituracin
Colca un papel filtro en un embudo y filtra el extracto en un matraz de 50 ml. Cuida
que en el papel filtro no caigan residuos de tejido, slo el solvente.
Aade ms acetona a los residuos del mortero y repite el procedimiento hasta
extraer los pigmentos (el tejido debe ir perdiendo su color).
Agrega acetona al 80% al matraz que contiene la solucin de pigmentos hasta
obtener un color verde claro.
2. Accin de la clorofila como intermediario de reacciones redox
Vierte en un tubo de ensayo 3 ml del extracto de pigmentos obtenido.
Aade algunos cristales de cido ascrbico, agita y disuelve hasta saturacin.
Aade de 3 a 5 gotas de solucin de rojo de metilo, agita vigorosamente y observa.
Rotula este tubo como A y colcalo a la luz.
Simultneamente prepara otro tubo de igual forma que el anterior, rotlalo como
B y colcalo en la oscuridad.
Prepara otro tubo de ensayo que contenga todos los componentes anteriores,
excepto la solucin de pigmentos, la cual ser sustituida por 3 ml de acetona al
80%.
Rotula este frasco como C y pnlo a la luz como A.

Resultados
Tubo Composicin de la solucin reaccionante Condiciones de
Variaciones del
iluminacin
color de la solucin
A
Extracto de pigmentos + cido ascrbico
luz

+ rojo de metilo
B
Extracto de pigmentos + cido ascrbico
oscuridad

+ rojo de metilo
C
Acetona + cido ascrbico + rojo de
luz

metilo

Discusin

Conclusiones