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DAO GENTICO POR RADIACIN EN ESTUDIANTES DE ODONTOLOGA

Esta investigacin pretende determinar si la exposicin crnica a rayos X durante la prctica clnica diagnstica,
que realizan los estudiantes de Odontologa como parte de su formacin acadmica, produce dao gentico. Para
ello se realizaron dos bioensayos: el test de microncleos en clulas de la mucosa bucal, que evala efectos
clastognicos como aneugnicos y otras anormalidades del ncleo que pueden ser utilizadas como marcadores de
dao celular; y el ensayo de electroforesis de clulas individuales o del cometa, en muestras de sangre
perifrica, que determina el dao a la cadena simple o a la doble cadena del ADN. Se analizaron dos cohortes,
una expuesta y otra control, de estudiantes de Odontologa, correspondiendo a la primera los estudiantes del
ltimo ao que realizan placas radiogrficas a pacientes durante un periodo de exposicin crnica de tres aos.
La cohorte control se caracteriz por estudiantes de los primeros aos de la carrera que no estn expuestos a

rayos X. Los resultados mostraron un aumento significativo en la frecuencia de microncleos (p< 0.05) y de
clulas en apoptosis y otras anormalidades del ncleo en los estudiantes expuestos crnicamente a la radiacin,
pero no hubo diferencias en la medicin del dao en el ADN mediante el test del cometa comparados con la
poblacin control. Los resultados permiten concluir que la dosis recibida y el tiempo de exposicin a los rayos X
tienen un efecto citotxico en clulas de la mucosa bucal y producen un dao mnimo al ADN en clulas de sangre
perifrica.
Por D. FRANCO DE DIANA. Licenciada en Biologa. Directora del Departamento de Ciencias Bsicas de la Universidad Catlica
Nuestra Seora de la Asuncin (deidamia_franco@uca.edu.py).
J. SEGOVIA. Licenciado en Biologa. Docente investigador senior de la Universidad Catlica Nuestra Seora de la Asuncin.
D. CASTIGLIONI. Licenciada en Biologa. Docente investigadora senior de la Universidad Catlica Nuestra Seora de la
Asuncin.
C. VEGA. Doctora en Microbiologa. Docente investigadora senior de la Universidad Catlica Nuestra Seora de la Asuncin.
Directora del Centro para el Desarrollo de las Ciencias (CEDIC).
N. LPEZ ACOSTA. Licenciado en Matemtica Estadstica. Docente tcnico de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la
Universidad Nacional de Asuncin.
A. GMEZ. Mster en Ciencias Biolgicas por el Centro para el Desarrollo de las Ciencias (CEDIC).

El principal efecto de las radiaciones ionizantes se produce sobre la molcula de ADN y est relacionado con las
dosis y el tiempo de exposicin. Si se considera que cualquier dosis, por pequea que sea, lleva aparejado un
riesgo, debe reducirse a valores tan bajos como sea posible. Sin embargo, es importante tener en cuenta el
tiempo de exposicin en forma crnica al que se exponen trabajadores y personas en formacin profesional, como
estudiantes de carrera del rea de la Salud, y que la radiosensibilidad puede variar de un individuo a otro
dependiendo de la edad, el sexo y el tipo de exposicin [1].
La exposicin a rayos X durante la radiografa panormica en pacientes adultos y en nios induce efectos
genotxicos en clulas gingiviales, incrementando el exdao cromosmico y la muerte celular. Por consiguiente,

estas radiografas panormicas dentales deberan ser solicitadas nicamente en casos muy necesarios, ya que este
procedimiento no puede ser considerado como de bajo o de ningn riesgo [2].
Tolbert y colaboradores (1992 ) sugieren la utilizacin del test de microncleos como una herramienta para
evaluar el efecto genotxico, ya que se origina por roturas de cromosomas o por divisiones mitticas anormales,
as como para detectar otras anormalidades nucleares atpicas como picnosis, cariorrexis o cariolisis, que son
indicadores de dao celular[4][5].
Otro ensayo til para la deteccin de dao en la cadena del ADN es la electroforesis de una sola clula, o ensayo
del cometa, que permite evaluar los niveles de dao en la cadena simple y doble del ADN en poblaciones celulares
sin necesidad de realizar estudios de proliferacin. Se trata de una herramienta potencialmente sensible para
evidenciar dao genotxico inducido por diferentes txicos en el sitio de accin de los mismos [6].
En Paraguay, tanto los profesionales como los estudiantes de la carrera de Odontologa se exponen con frecuencia,
durante las prcticas de diagnstico por imgenes, a recibir radiaciones sin tener ningn tipo de proteccin, ya
que este hbito de bioseguridad de radioproteccin no es practicado estrictamente a este nivel, pese a la
existencia de normas y legislaciones que regulan este tipo de actividad. Teniendo este hecho en cuenta, hemos
procedido al anlisis de microncleos en clulas de la mucosa bucal y en muestras de sangre perifrica para medir
el dao en el ADN mediante el test del cometa, procedentes de estudiantes de la carrera de Odontologa que
estn expuestos de forma crnica a dosis bajas de rayos X.

Materiales y mtodos
El diseo de la investigacin corresponde a un estudio observacional analtico de corte transversal, de cohortes de
expuestos y no expuestos, a quienes se le aplic una encuesta para evaluar el estado de salud, hbitos de fumar,
de consumo de alcohol y de drogas, tiempo de exposicin y mtodos de radioproteccin durante la realizacin de
placas radiogrficas.

Poblacin expuesta

Alumnos sin distincin de sexos con edades comprendidas entre 24 y 29 aos, que cursaban materias clnicas de la
carrera de Odontologa y que estuvieron expuestos a radiaciones ionizantes causadas por la toma de radiografas a
pacientes de la clnica odontolgica, durante por lo menos tres aos.
Poblacin no expuesta

Estudiantes de la carrera de Odontologa, del ciclo bsico, que no hayan estado expuestos a rayos X por la toma
de radiografas.

Tcnicas de instrumentos de recoleccin de datos


Anlisis gentoxico

Se evalu el efecto genotxico mediante dos bioensayos: el test de microncleos en clulas de la mucosa bucal y
el ensayo del cometa.
Las muestras de mucosa bucal y de sangre perifrica de cada individuo, tanto de la poblacin control como de la
expuesta, se tomaron en forma simultnea durante los meses de junio a octubre.
Anlisis de microncleos en clulas exfoliadas de mucosa bucal
Se evalu si la exposicin crnica a rayos X durante la prctica clnica diagnstica, que realizan los estudiantes de
Odontologa como parte de su formacin acadmica, produce dao gentico

Se obtuvo una muestra de clulas de la mucosa bucal mediante un raspado de la cara interna de la mejilla con
un bajalengua, con el cual se realiz un extendido en la lmina portaobjeto. Las muestras fueron fijadas con
metanol / ac. actico (3:1) y se colorearon con la tcnica de Feulgen. La observacin al microscopio se realiz

mediante la utilizacin de filtros especiales para contrastar el citoplasma. Se contaron 2.000 clulas por individuo
y se determin la frecuencia de microncleos en ambas poblaciones, la control y la expuesta, segn Tolbert (1992)
[7]
y Fenech(1999)[8].
Test del cometa para medir dao en el ADN
La tcnica del test del cometa se realiz segn Singh et al. (1988) y con pequeas modificaciones [9] y
consideraciones de optimizacin[10]. Se obtuvieron 2 l de sangre perifrica del dedo anular de cada uno de los
participantes. Las muestras fueron suspendidas en 0,5% de agarosa de bajo punto de fusin (LMP) y pipeteadas en
portaobjetos que previamente fueron cubiertos con una capa de agarosa de punto de fusin normal (NMP) al 1% y
llevados a 4C durante 10 minutos; luego se sumergieron en buffer de lisis (2,5M Nacl, 100 m Na2EDTA, 10 m
Tris- Hcl Ph 10,1, Triton X 100 y 10 % DMSO) durante una hora a 4C en oscuridad, a los efectos de provocar la
lisis y la descompactacin del ADN. Posteriormente, los portaobjetos fueron expuestos a bufferalcalino (1 mM
Na2EDTA, 300mM NAOH buffer) Ph >13 durante 20 minutos para degradar el ADN.
Para el efecto se desarrollaron dos bioensayos: el test de microncleos, en clulas de la mucosa bucal, y el ensayo de
electroforesis de clulas individuales o del cometa, en muestras de sangre perifrica

Cada portaobjetos fue sometido a electroforesis durante 20 minutos a 25 V y 300 m A, en el mismo buffer, y
posteriormente se lavaron con buffer 0,4 Try-Hcl (Ph 7, 5) para eliminar el exceso de lcali y remover los
detergentes. La fijacin de las muestras se realiz con alcohol p.a y las lminas finalmente fueron teidas con
bromuro de etidio (10 g/ml). Se examinaron las lminas bajo microscopio de fluorescencia con un aumento de
400 x .
Se evaluaron 100 clulas por placa mediante registro visual y a travs del software Casp Lab Comet Assay free.
Evaluacin por registro visual

Se realiz segn los criterios de Speit (1995) [12] y Collins (2004)[13] , donde las clulas se clasifican considerando que
a mayor descarga de ADN polifragmentado fuera del ncleo, mayor es el dao genotoxico. Para cuantificar el dao
al ADN se establece una categora de dao a las clulas basadas en el largo del cometa:
Categora 0: clulas sin dao (5 m).
Categora I: clulas con bajo nivel de dao (5-20 m).
Categora II: clulas con medio nivel de dao (entre 20 y 40 m).
Categora III: clulas con alto nivel de dao (entre 40 y 95 m).
Categora IV: clulas totalmente daadas (superior a 95 m).
Una vez establecido el porcentaje de clulas en cada categora se calcul el ndice de dao (N) por cada muestra
de individuo:
N= N Cl Cat I + 2XN Cl.Cat II + 3XN Cl. Cat III + 4 X N de Cel. Cat IV
Evaluacin por el software Casp Lab Comet Assay IV
Se obtuvieron valores de momento de la cola (tail moment), que permiten medir el porcentaje de ADN en la cola
del cometa, y momento olive (tail moment olive), que describe la heterogeneidad de la respuesta dentro de una
poblacin celular, ya que calcula las variaciones de la distribucin de ADN dentro de la cola, midindolas en m.
Anlisis estadstico
Para el anlisis exploratorio de los datos de microncleos en clulas de la mucosa bucal para el grupo de control
(n=31) y el grupo expuestos (n=30) se utiliz el paquete estadstico SPSS. Los resultados fueron analizados
estadsticamente mediante la prueba t de Student y se aplic, adems, la prueba no paranfrica U de MannWhitney para el contraste de hiptesis.

El anlisis de dao en el ADN con el ensayo del cometa se llev a cabo mediante la prueba de comparacin de
medias U de Mann-Whitney para dos muestras independientes de los datos de dao en el ADN y valores del
momento de la cola (tail moment) y momento olive (tail moment olive).

Resultados
Caracterizacin demogrfica de las poblaciones estudiadas

Poblacin control o no expuesta


Alumnos estudiantes de Odontologa, de edades comprendidas entre 18 y 20 aos, cursando el primer ao de la
carrera. El 84% de la poblacin es femenina (25/31) y el 16% (5/31) masculina.
El 43,3% (13/30) de la poblacin presenta antecedentes familiares con algn tipo de cncer, ya sea de pulmn,
prstata, tero y, mayoritariamente, mama. El 40% de la poblacin analizada es consumidora casual de alcohol.
Poblacin expuesta
La poblacin expuesta consiste en 30 estudiantes de Odontologa que actualmente cursan el sexto ao de la
carrera. Sus edades estn comprendidas entre 23 y 29 aos, el 83% de la poblacin es femenina (25/30) y el 17%
(5/30) es masculina. El 56,7% de la poblacin analizada es consumidora de alcohol de forma moderada.
El 26,7% (8/30) de la poblacin presenta antecedentes familiares con algn tipo de cncer, ya sea de huesos,
prstata, mama y, mayoritariamente, colon. Todos los estudiantes encuestados sealaron que trabajan desde hace
al menos tres aos en la sala de rayos X; el cien por cien de los encuestados no utiliza ningn tipo de proteccin
contra los rayos X .

En la tabla 1 pueden apreciarse los datos demogrficos ms destacados de la poblacin estudiada.


Poblacin expuesta

No expuesta

Sexo

80% (24/30) femenino


20% (6 /30) masculino

84% (25/31) femenino


16% (5/31) masculino

Edad

23 29 aos

17 20 aos

Consumo casual de alcohol

56,7%

40%

Antecedentes familiares de cncer

26,7%

43,3%

Tiempo de exposicin a rayos X por radiografas dentales

3 aos

No se expone

Tabla 1. Caracterizacin de la poblacin estudiada.


Evaluacin de efecto genotxico a travs del test de microncleos en mucosa bucal

En la tabla 2 se aprecian las frecuencias de microncleos determinadas en la poblacin no expuesta y algunas


anormalidades nucleares. La tabla 3 muestra los valores para la frecuencia de microncleos y anormalidades
nucleares en la poblacin expuesta. Y la tabla 4 compara los promedios de frecuencias de microncleos en ambas
poblaciones: 1,68 1,99 para la poblacin control y 6,67 5,2 para la expuesta y anormalidades nucleares. Al
aplicar la prueba de t de Student y la prueba no paranfrica U de Mann-Whitney para el contraste de hiptesis,
se obtuvo el valor de p= 0,006, considerndose como valores significativos aquellos que se encuentren por debajo
de 0,05. Por lo que la diferencia de frecuencia de microncleos entre ambas poblaciones es significativa, lo que
permite rechazar la hiptesis nula y aceptar la alternativa. Las anormalidades nucleares como picnosis, cariorrexis
y cromatina condensada tambin se tomaron como parmetros de evaluacin genotxica y citotxica.

Estudiante
nmero

Edad

Sexo

MN/2000
cel

Medias
desv. tp.

1,68
1,99

Anormalidades nucleares
BN Cariolisis Cariorrexis
0,39
1,05

0,61
2,216

1,42
6,302

Broken
eggs

Cromatina
condensada

Picnosis

2,06
3,434

0.37
0,6

0,48
0,63

18

19

19

18

19

18

17

18

10

18

11

18

12

18

13

18

14

19

15

20

16

19

35

15

Estudiante
nmero

Edad

Sexo

MN/2000
cel

Anormalidades nucleares
BN Cariolisis Cariorrexis

Medias

1,68

0,39
5

0,61

1,42

Broken
eggs

Cromatina
condensada

Picnosis

2,06

0.37

0,48

17

18

18

18

19

19

20

19

21

19

22

18

23

19

24

19

25

19

26

18

27

19

28

20

29

19

30

20

31

18

3
1

12

Tabla 2. Frecuencia de microncleos (MN) y anormalidades nucleares en clulas de poblacin no expuesta

Estudiante
nmero

Edad

Sexo

Medias

MN/2000
cel
1,68

Anormalidades nucleares
BN Cariolisis Cariorrexis
0,39

0,61

1,42

Broken
eggs

Cromatina
condensada

Picnosis

2,06

0.37

0,48

Broken
eggs

Cromatina
condensada

Picnosis

(control).
*BN = bi nucleada.

Estudiante
nmero

Edad

Sexo

MN/2000
cel

Anormalidades nucleares
BN Cariolisis Cariorrexis

Medias
desv. tp.

6,67
5,287

4,97
4,65

5,27
4,712

13,27
12,736

9,43
7,44

2,13
2,403

3,47
4,066

24

10

25

16

10

27

28

27

14

12

20

10

25

14

10

24

12

24

10

32

24

16

23

12

20

12

24

10

12

36

24

10

37

12

35

12

Estudiante
nmero

Edad

Sexo

MN/2000
cel

Anormalidades nucleares
BN Cariolisis Cariorrexis

Broken
eggs

Cromatina
condensada

Picnosis

Medias

6,67

4,97

5,27

13,27

9,43

2,13

3,47

11

24

10

12

12

12

24

10

14

28

12

13

24

14

24

15

24

26

12

16

24

17

24

10

18

27

19

24

20

24

16

12

21

24

22

24

10

23

26

24

29

25

25

26

24

Estudiante
nmero

Edad

Sexo

MN/2000
cel

Anormalidades nucleares
BN Cariolisis Cariorrexis

Broken
eggs

Cromatina
condensada

Picnosis

Medias

6,67

4,97

5,27

13,27

9,43

2,13

3,47

27

24

12

10

10

36

12

28

25

15

20

26

10

29

25

10

10

30

18

30

26

10

12

28

22

Tabla 3. Frecuencia de microncleos y anormalidades nucleares en clulas de poblacin expuesta


*BN = bi nucleada. MN = microncleos.

Poblacin no expuesta

Poblacin expuesta

Microncleos/2.000 clulas

1,68

6,67

Binucleadas

0,39

4,97

Cariolisis

0,61

5,27

Cariorrexis

1,42

13,27

Broken eggs

2,06

9,43

Cromatina condensada

0,37

2,13

Picnosis

0,48

3,47

Tabla 4. Comparacin de promedios de frecuencias de MN y anormalidades nucleares en poblaciones expuestas y


no expuestas (control).

Valor de P < 0.006 para frecuencia de MN y picnosis.

En las figuras 1 y 2 quedan reflejadas las medias de las frecuencias de microncleos en poblaciones no expuestas y
expuestas, respectivamente, distribuidas por edad, siendo mayor en la poblacin expuesta.

Figura
1. Diagrama de cajas de microncleos/2.000 clulas grupo control (no expuesto) distribuido por edades.

Figura
2. Diagrama de cajas de frecuencia de microncleos en clulas de la poblacin expuesta distribuido por edades.

La poblacin expuesta estuvo formada por estudiantes del ltimo ao de la carrera, que realizan placas radiogrficas
a los pacientes que asisten a las clnicas, durante un periodo de exposicin crnica de tres aos. El grupo control se
caracteriz por estudiantes de los primeros aos de la carrera que no estn expuestos a rayos.

La figura 3 indica comparativamente el promedio de anormalidades nucleares entre la poblacin expuesta y no


expuesta, observndose un aumento en las medias de los individuos expuestos, considerando la picnosis, la
cariorrexis y la cromatina condensada como figuras caractersticas de clulas en apoptosis, y las binucleadas y
broken eggs como figuras caractersticas de efecto genotxico. En las figuras 4 y 5 pueden observarse clulas de la
mucosa bucal teidas con la tcnica de Feulgen a un aumento de 1.000 x con microncleo y sin microncleo,
respectivamente. En las figuras 6 y 7 se aprecian anormalidades nucleares como binucleadas y clulas apoptticas
con cariorrexis.

Figura 3. Anormalidades nucleares en poblaciones expuestas y no expuestas.

Figura 4. Clulas de la mucosa bucal con microncleo. Tincin Feulgen 1.000 x.

Figura 5. Clulas de la mucosa bucal sin microncleo. Tincin Feulgen 1.000 x.

Figura 6. Clula de la mucosa bucal binucleda. Tincin Feulgen 1.000 x.

Evaluacin del efecto genotxico por el ensayo del cometa

Mediante registro visual


Los resultados mostraron un aumento significativo en la frecuencia de microncleos (p< 0.05) y de clulas en apoptosis
y otras anormalidades del ncleo como cariorrexis, cromatina condensada, broken eggs y picnosis, en los estudiantes
expuestos crnicamente a la radiacin emitida por los equipos de rayos X

La tabla 5 muestra valores para las medias de porcentaje de clulas con diferentes niveles de dao celular, segn
el criterio de Speit (1995) y Collins (2004). En la tabla se puede apreciar un aumento de los mismos para el nivel I
en la poblacin expuesta comparada con la no expuesta. Sin embargo, los valores obtenidos para los niveles II, III
y IV no son significativos, segn la comparacin de medias t de Student y la prueba no paramtrica de U Mann
Whitney para muestras independientes, arrojando un valor de p =0.006 menor a 0.05 para nivel I, por lo que se
consider estadsticamente significativo, y valores superiores a 0,05 en las dems categoras. En la figura 11 se
pueden observar los valores para los niveles I, II, II y IV en ambas poblaciones, resultando evidente el aumento
significativo de dao de nivel I en la poblacin expuesta. El clculo para ndice de dao (N= N Cl Cat I + 2XN
Cl.Cat II + 3XN Cl. Cat III + 4 X N de Cel. Cat IV) fue de 37,8 para la poblacin expuesta y de 3,4 para la
poblacin no expuesta, con una diferencia significativa (p< 0.05) segn la prueba de U Mann Whitney. Estos
valores indican que en la poblacin expuesta el ndice de dao celular es bajo, debido al predominio de clulas
con dao nivel I. Las figuras 8, 9 y 10 muestran clulas sin dao y con niveles de dao I y II, respectivamente.

Grupos
Dao total

grupo control
grupo expuestos

N
31
29

Media

Desviacin tp.

3,4*
37,8*

Nivel 0

grupo control
grupo expuestos

31
29

74,52
64,38

15,558
16,003

Nivel I

grupo control
grupo expuestos

31
29

,55*
6,41*

,888
10,527

Nivel II

grupo control
grupo expuestos

31
29

,03
,66

,180
1,542

Nivel III

grupo control
grupo expuestos

31
29

,00
,31

Nivel IV

grupo control
grupo expuestos

31
29

,00
,31

Tabla 5. Niveles de dao celular segn el criterio de Speit (1995) y Collins (2004).
*Prueba de U Mann Whitney p< 0.05.

,000
1,339

Figura 7. Clula de la mucosa bucal con cariorrexis apopttica. Tincin Feulgen 1.000 x

Figura 8. Clula sin dao (nivel 0)

Figura 9. Clula con escaso dao (nivel I).

Figura
11. Diagrama de cajas del dao genotxico por nivel en los grupos control y expuestos.

Con la tcnica del cometa es posible valorar la viabilidad celular por el porcentaje de viabilidad celular,
determinando la frecuencia de clulas en apoptosis (figura 12). La tabla 6 indica los valores medios obtenidos de
clulas en apoptosis de poblaciones no expuestas (22,6%) y expuestas (47,9%) mediante la determinacin visual.
La figura 13 refleja los valores de clulas en apoptosis para ambas poblaciones.

Apoptosis

Grupos

Grupo control
Grupo expuestos

31
29

Media
22,68
47,93

Desviacin tp.
13,029
12,473

Tabla 6. Valores de medias de apoptosis en grupos expuesto y no expuestos.


*Prueba de t p< 0,05

Error tp. de la media


2,340
2,316

Figura 10. Clula con medio nivel de dao (nivel II)

Figura

13. Valores para clulas apoptticas en ambas poblaciones.

Evaluacin por el software Casp Lab Comet Assay


No se encontraron diferencias significativas en la medicin del dao en el ADN, medido por el ensayo del cometa,
comparados con la poblacin control, lo cual indica un efecto citotxico ms que genotxico

En la tabla 7 se observan los valores de las medias determinados para tail moment y tail moment olive del ensayo
del cometa de las poblaciones expuesta y control, notando un leve aumento de los valores para la poblacin
expuesta, pero que segn la prueba t de Student no son estadsticamente significativas. Por otro lado, las

figuras 14 y 15 muestran en el diagrama de cajas los valores promedio para ambas poblaciones para el tail
moment y el tail moment olive, respectivamente.
Expuestos

Control

Tail moment

1,34 2,12

0,730,15

Tail moment olive

0,930,49

0,510,24

Tabla 7. Valores medios de tail moment y tail moment olive del cometa.
0,930,49 0,510,24 p>0.05 para prueba t.

Figura 14. Diagrama de cajas para valores promedios de momento de la cola del cometa para poblaciones expuestas y no expuestas.

Figura
15. Diagrama de cajas para valores promedios de momento de la cola del cometa para poblaciones expuestas y no expuestas.

Conclusiones
Los resultados indican la necesidad de realizar un biomonitoreo en otras poblaciones expuestas a dosis subtxicas y en
forma crnica a rayos X

Los resultados del estudio ponen de manifiesto que la dosis y el tiempo de exposicin a rayos X a que estn
sometidos los estudiantes que realizan placas dentales producen un dao de bajo nivel (nivel I) a la molcula de

ADN en clulas de sangre perifrica, y actan desencadenando efectos citotxicos. Esta observacin coincide con
la opinin de otros autores, que reportaron aumento de citoxicidad en mucosa bucal en pacientes adultos y nios
tras la realizacin de radiografas panormicas [14,15,16], mas no un aumento significativo en la frecuencia de
microncleos. Los valores significativos de las frecuencias de microncleos encontrados podran deberse al tiempo
de exposicin (ms de tres aos) y a la dosis recibida, ya que la frecuencia de microncleos aumenta con la dosis
y el tiempo de exposicin a rayos X (Ribeiro, 2008), y el origen de los mismos podra deberse a fallos en el
mecanismo de divisin celular y no a roturas de cromosomas [16].
De acuerdo a estas observaciones, se recomienda la exposicin solo cuando es muy necesario y adoptar las
precauciones de radioproteccin pertinentes.

A MODO DE GLOSARIO
Broken eggs. Atipia nuclear caracterizada porque la presencia de una protuberancia de tamao variable en el
ncleo de la clula. Est relacionada con un dao en el ADN.
Picnosis. Atipia nuclear, en donde se observa al ncleo de tamao muy reducido, generalmente en respuesta a
una lesin celular. Es caracterstico de clulas en apoptosis o necrosis.
Cariorrexis. Desintegracin del ncleo y de la membrana nuclear. La cromatina aparece condensada en pequeos
grupos, en clulas apoptticas.
Cariolisis. Aspecto del ncleo sin colorear, debido a la disolucin de la cromatina. Ocurre como resultado de la
necrosis.
Cromatina condensada. La cromatina aparece muy condensada dentro de la membrana nuclear, en respuesta a
altos niveles de lesin celular.

AGRADECIMIENTOS

A FUNDACIN MAPFRE, a travs del programa Ayudas a la Investigacin (2010). Al Centro para el Desarrollo de la
Ciencia (CEDIC), por permitir el uso de sus laboratorios.
Al Dr. Enrique Zamorano Ponce, de la Universidad del Bo Bo de Chilln (Chile), por su constante asistencia y
asesoramiento y por el entrenamiento recibido.
Al Dr. Jos Corvaln Amigo, Decano de la Facultad de Ciencias de la Salud de la Universidad Catlica, por su apoyo
para la ejecucin del proyecto y por facilitar las instalaciones de los laboratorios.
A los directivos de la Facultad de Odontologa Pierre Fauchard, por autorizar la participacin de los estudiantes en
la investigacin.
A los estudiantes de Odontologa que participaron en la investigacin.
A los estudiantes de Medicina de la Universidad Catlica Nuestra Seora de la Asuncin Juan Segovia, Luis Gatti
y Daniela Sols, por su participacin en el desarrollo del bioensayo del test de microncleos.

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