INFORME N2

ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LA CATALASA

I.

INTRODUCCIN

Muchos organismos pueden descomponer el perxido de hidrgeno (H2O2) por la

accin de las enzimas. Las enzimas son protenas globulares responsables de la mayor
parte de la actividad qumica de los organismos vivos. Actan como catalizadores, que
son sustancias que aceleran las reacciones qumicas sin ser destruidas o alteradas
durante el proceso. Las enzimas son extremadamente eficientes y se pueden utilizar una
y otra vez repetidamente. Una enzima puede catalizar miles de reacciones en cada
segundo. Tanto los valores de pH como de la temperatura a los que trabaja la enzima
son extraordinariamente importantes. La mayora de los organismos tienen un intervalo
de temperatura preferente en el cual sobreviven y sus enzimas funcionan mejor dentro
de dicho intervalo de temperatura. Si el ambiente donde se encuentra la enzima es
demasiado cido o demasiado bsico, la enzima puede desnaturalizarse de forma
irreversible o transformarse de modo que su forma no le permita ms realizar su
funcionamiento apropiado. El H2O2 es txico para la mayora de los organismos vivos.
Muchos organismos son capaces de destruir el H2O2 mediante la accin de enzimas
antes de que pueda realizar mucho dao. El H2O2 se convierte en oxgeno y agua segn
la siguiente reaccin:
2 H2O2 2 H2O + O2
Las enzimas, en un 95%, son protenas con actividad cataltica. Una de estas es la
Catalasa, enzima que encontramos en el hgado y que tiene como funcin el convertir el
perxido de hidrgeno (agua oxigenada) en oxigeno molecular y agua, haciendo que
exista un medio aerbico a nivel heptico. Esta enzima tambin se encuentra en algunas
bacterias que son catalasa positiva, donde realiza la misma funcin.
Agua oxigenada oxgeno + 2 H2O
Sustrato

Productos

El objetivo principal de esta prctica es analizar e interpretar la actividad enzimtica de

la catalasa in vitro.
II.

MARCO TERICO

Catalasa: La catalasa es una enzima perteneciente a la categora de

las oxidorreductasas que cataliza la
descomposicin
del perxido
de
hidrgeno (H202) en oxgeno y agua. Esta enzima utiliza como cofactor al
grupo hemo y al manganeso.

Perxido de hidrgeno: El perxido de hidrgeno es un residuo

del metabolismo celular de muchos organismos vivos y tiene entre otras una
funcin
protectora
contra
microorganismos
patgenos,
principalmente anaerobios, pero dada su toxicidad debe transformarse
rpidamente en compuestos menos peligrosos. Esta funcin la efecta esta
enzima que cataliza su descomposicin en agua y oxgeno.

Catabolismo: El catabolismo es la parte del proceso metablico que consiste en

la transformacin de biomolculas complejas en molculas sencillas y en el
almacenamiento adecuado de la energa qumica desprendida en forma de
enlaces de alta energa en molculas de adenosn trifosfato.

III.

MATERIALES
-

5 Tubos de ensayo 16 x 150 mm.

Pipeta de 5 ml.
Gradillas para tubos 16 x 150 mm
Morteros con piln.
Goteros de plstico.
Picetas c/agua destilada.

Materiales que debe traer el alumno:

-

IV.

Hgado fresco de pollo.

Agua oxigenada.

PROCEDIMIENTOS

Colocar en un mortero el hgado, triturarlo y repartir en 5 tubos en partes iguales.

Agregar a cada tubo agua oxigenada en cantidades crecientes: 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 ml y
observar desprendimiento de oxgeno en cada tubo. Anotar el tiempo (en segundos) de
formacin de espuma en cada muestra.
Una vez culminado la primera parte, se coloca nuevamente el hgado en 5 tubos de
ensayo titulados en forma creciente, en nuestro caso fue de 1ml, 2ml, 3ml, 4ml y 5ml.
Posterior a ello, se agrega 1,5 ml de agua oxigenada a cada tubo de ensayo. Observar
desprendimiento de oxgeno en cada tubo. Anotar el tiempo (en segundos) de formacin
de espuma en cada muestra.

V.

RESULTADOS

Paso nmero 1
4.95
4.4
3.85
3.3
2.75

Tiempo (segundos)

2.2
1.65
1.1
0.55
0

Tubos de ensayo

0,5 ml

1 ml

1,5 ml

2 ml

1 55

2 06

2 41

2 29

1 20

3 ml

3 ml

3 ml

3 ml

3 ml

2,5 ml

H2O2
Tiempo
Catalasa

Podemos observar en la grfica 1 sobre la actividad enzimtica, que en los tres primeros
tubos de ensayo el tiempo en el cual la catalasa descompuso al H2O2 ha ido
aumentando, posteriormente desde el tercer tubo de ensayo hasta el ltimo el tiempo
decreci. Una explicacin a esta variante es que la concentracin de la catalasa no ha
permanecido constante en el tiempo. En segundo lugar, se observa que el ltimo tubo de
ensayo, al cual se le poprocion la mayor concentracin de perxido de hidrgeno,
obtuvo el menor tiempo de descomposicin, con esto se demuestra que la concentracin
de la catalasa influye en el tiempo de la accin enzimtica, hacindola ms lenta cuando
esta se encuentra en menor cantidad. Tambin podemos mencionar el factor biolgico
ya que no sabemos en qu condicin se encuentra el hgado de pollo, si funciona
correctamente o no, esto puede influenciar en el tiempo de la accin de la enzima.

Paso nmero 2
4.95
4.4
3.85
3.3
2.75

Tiempo (segundos)

2.2
1.65
1.1
0.55
0

Tubos de ensayo

1,5 ml

1,5 ml

1,5 ml

1,5 ml

1,5 ml

0 40

0 55

1 46

1 31

2 09

1 ml

2 ml

3 ml

4 ml

5 ml

H2O2
Tiempo
Catalasa

En la grfica 2, se puede concluir que la velocidad de la accin enzimtica es

proporcional a la cantidad de catalasa en la muestra ya que en este caso la concentracin
de la enzima ha variado dndonos como resultado un tiempo de descomposicin
creciente. Esto reafirma la conclusin observada en la grfica 1, ya que se mencion que
la concentracin de la catalasa es un factor importante que afecta el tiempo de la
actividad enzimtica. Por otro lado, podemos mencionar un error personal, ya que el
hgado de pollo utilizado puede no haber sido triturado correctamente, esto puede alterar
la concentracin de la catalasa en los tubos de ensayo, teniendo un efecto en el tiempo
de descomposicin.

VI.

CONCLUSIONES - DISCUSIONES

La actividad enzimtica de la catalasa, puede ser influenciada por dos factores

importantes, la cantidad de perxido de hidrgeno a descomponer, as como
tambin la concentracin de la catalasa.

Se demostr experimentalmente que hay un aumento en la velocidad de la

actividad enzimtica cuando existe una mayor concentracin de la catalasa.

Como factores secundarios que afecta la accin de la catalasa sobre el H2O2,

mencionamos al factor biolgico, el cual cuestiona el correcto funcionamiento
del hgado de pollo, de donde se obtuvo la enzima. Y por ltimo el factor
personal, el cual es el hecho de no haber triturado correctamente el hgado de
pollo, lo cual afecta a la concentracin de la catalasa.

Como principal factor que afecta la actividad enzimtica tenemos la concentracin de la

enzima, en comparacin a otros trabajos realizados, se lleg a las mismas conclusiones,
sin embargo, tambin podemos mencionar a otros factores como son los inhibidores y la
temperatura.

VII.

BIBLIOGRAFA

[1] Amat, M. y Ivars, A. (2010). Estudio de los factores que influyen en la actividad
enzimtica de la catalasa. IES Alccer. Valencia, Espaa. Sitio web:
http://www.cac.es/cursomotivar/resources/document/2010/1.pdf

[2] Ciencias con lo mejor de vernier. Experimento 3. Actividad enzimtica: accin de la

catalasa. Sitio web: http://www2.vernier.com/sample_labs/CMV-03-enigma.pdf

[3] Cedillo, C. y Hernndez, J. (2010). Determinacin de la actividad enzimtica de

peroxidasas (catalasa). Facultad de Ciencias Qumicas, Universidad Autnoma de
Quertaro,
Mxico.
Sitio
web:
http://www.uaq.mx/investigacion/difusion/veranos/memorias-2010/12%20Verano
%20Ciencia%20Region%20Centro/UAQ%20Cedillo%20Jimenez.pdf

[4] Corona, L., Sigenza, A., Ubici, V., Gmez, E. G., Ortega, W. (2015). Cintica de
descomposicin de perxido de hidrgeno con catalasa. Instituto tecnolgico y de
estudios superiores de Monterrey, departamento de qumica, Campus monterrey,
Mxico.
Sitio
web:
https://www.academia.edu/11644450/Cin
%C3%A9tica_de_descomposici%C3%B3n_de_per%C3%B3xido_de_hidr
%C3%B3geno_con_catalasa