VP Laboratrio de Anlises LTDA - Veterinria Preventiva

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Leucose Enzotica Bovina: Diagnstico,

Preveno e Controle
Agottani, J.V.B.a, Oliveira, K.B.a, Fayzano, L.b Warth, J.F.G.c
a

Diviso de Antgenos, Instituto de Tecnologia do Paran, Curitiba, PR

b
VP Laboratrio de Anlises - Veterinria Preventiva, Curitiba, PR
c
Universidade Federal do Paran, Departamento de Medicina Veterinria.Curitiba, Pr.

DEFINIO:
A Leucose Enzotica Bovina* (LEB) uma doena infecciosa causada por vrus da famlia
Retroviridae, que se caracteriza pelo desenvolvimento de duas formas clnicas :
A forma maligna tumoral e fatal com formao de linfossarcomas em quase todos os
linfonodos e rgos, a qual ocorre em 5 a 10% dos animais infectados e a forma benigna,
caracterizada apenas pelo aumento geral do nmero de linfcitos sangneos, denominada de
linfocitose persistente (LP), de ocorrncia em 30% dos animais infectados*.
Observaes :
*Consideram-se quadros hematolgicos de linfocitose persistente quando ocorrer um aumento
nas contagens absolutas de linfcitos observadas durante trs meses consecutivos em animais
sem manifestaes clnicas de neoplasias linfoproliferativas.
HISTRICO E PREVALNCIA:
A primeira ocorrncia da LEB foi na Alemanha, em 1871, provavelmente, devido a importao
de bovinos infectados vindos dos Pases Blticos. Do continente europeu, a virose foi levada
para os Estados Unidos, no final do sculo XIX, sendo descrita no continente americano ainda
antes da Segunda Guerra Mundial. A partir de ento, a infeco espalhou-se entre os rebanhos
americanos e canadenses tendo, agora, uma alta prevalncia em muitas fazendas leiteiras destes
pases.
Em 1984, em levantamento sorolgico realizado em rebanhos leiteiros de alguns estados norteamericanos, foi relatada a prevalncia da infeco pelo vrus da LEB em taxas que variaram de
22% a 47%. No Brasil, levantamentos sorolgicos realizados em 1991, indicaram a prevalncia
entre 12,5% a 72,9%.
ETIOLOGIA:
O agente etiolgico da LEB denominado Vrus da Leucose Bovina (VLB). Pertence famlia
Retroviridae, sub-famlia Oncovirinae, e ao gnero Deltaretrovirus. Possuem uma nica fita
de cido Ribonuclico (RNA). Apresentam a capacidade de transformar seu material gentico

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em DNA, atravs da enzima Transcriptase Reversa, inserindo-se no genoma celular como
provrus, mantendo-se nesta forma por longo perodo de incubao. So vrus envelopados
sendo por isso facilmente inativados por solventes (ter, lcool e clorofrmio), detergentes
lipdicos e aquecimento a 56 C.
TRANSMISSO:
Historicamente, a alta prevalncia de linfossarcomas observada no rebanho sueco, por exemplo,
foi associada ao uso de sangue fresco de bovinos doadores infectados com Babesia bovis,
utilizado em programas de premunio contra a piroplasmose durante sete anos. Levantou-se, a
partir de tal prtica, a possibilidade de que o agente infecioso estivesse presente no sangue de
animais infectados. As suspeitas tinham fundamento.
O vrus geralmente transmitido atravs do sangue de um animal infectado.
Transmisso horizontal: comumente ocorre atravs de agulha ou seringa reutilizada,
descornador, tatuagem, equipamento de castrao, transfuso de sangue, utilizao da mesma
luva de toque retal para diversos animais, mesma argola (em touros) e monta natural. Animais
confinados esto mais suscetveis a se infectarem atravs de secrees nasais, saliva, urina,
fezes, descargas uterinas.
Transmisso vertical: A transmisso para os fetos pela placenta possvel, mas ocorre no mais
do que 4 a 8% dos casos. Quando bezerras so alimentadas com leite ou colostro de mes
infectadas, a transmisso horizontal pode ser menor, pela presena de anticorpos anti-VLB na
secreo. Para evitar a possibilidade de transmisso para o neonato atravs do colostro ou leite
de vacas infectadas preconiza-se o aquecimento desta secreo lctea a 56 C por 30 minutos,
ou a utilizao de um banco de colostro proveniente de vacas negativas, conservado a 20C
em freezer.
A pasteurizao destri facilmente o vrus.
No considerada uma Zoonose. Podendo, o leite e a carne bem como seus derivados, serem
consumidos sem preocupao.
A transmisso entre espcies j foi constatada em ovinos, porm, no apresentando sinais de
linfocitose. Infeces experimentais foram relatadas, tambm, em outras espcies como
chimpanzs, outros macacos, sunos, coelhos, ratazanas, ces, galinhas e gatos.

QUADRO CLNICO
Sinais clnicos:
Quadro 1: Principais sinais clnicos da forma multicntrica do adulto com sua relao anatomo-patolgica.
SINAIS CLNICOS
Perda de peso
Aumento de linfonodos superficiais
Baixa de produo de leite
Anorexia
Aumento de linfonodos (internos) (verificvel pela palpao
retal)
Paresia dos membros posteriores
Anemia
Febre

PROVOCADO POR
Diarria, anorexia, outras causas no determinadas
Presena de linfcitos tumorais
Anorexia, diarria, outras causas no determinadas
Causas no determinadas
Proliferao de clulas tumorais
Infiltraes tumorais na regio epidural da medula espinhal
Hemorragia com perda de sangue pelo trato gastrointestinal,
principalmente abomaso
Necrose tissular, infeces concomitantes, outras causas
no determinadas

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Exoftalmia
Dispnia
Constipao
Alteraes cardacas (insuficincia cardaca)
Edema subcutneo ventral
Pulso venoso positivo
Parto distcico
Morte fetal
Hidronefrose
FONTE: OLIVEIRA, K.B., 2000.

Infiltrao de clulas tumorais nos tecidos retrobulbares

Compresso das vias areas por linfonodos aumentados de
volume
Compresso do tubo gastrointestinal por linfonodos
aumentados
Infiltrao de clulas tumorais no miocrdio
Insuficincia cardaca congestiva
Insuficincia cardaca congestiva
Compresso das vias do parto por linfonodos aumentados
de volume
Infiltrao tumoral na parede do tero
Compresso dos ureteres por linfonodos aumentados

Formas:
Maligna : Linfossarcomas (multicntrica dos adultos),;
Benigna: Linfocitose persistente (processo linfoproliferativo benigno).
Patogenia: conseqncias possveis aps a exposio de bovinos ao vrus da LEB:
- animal no se torna infectado: provavelmente devido resistncia gentica;
- portadores latentes: infeco permanente e nveis detectveis de anticorpos;
- infeco permanente e animais soropositivos: desenvolvem linfocitose persistente e
processo linfoproliferativo benigno (30% 70%);
- linfossarcoma: animais soropositivos que desenvolvem tumores neoplsicos malignos (5%
10%).
O linfossarcoma mais comum entre 3 e 6 anos de idade. Pode ocorrer em linfonodos
perifricos, linfonodos internos, abomaso, corao, tero, espao retrobulbar e regio epidural
do sistema nervoso central.
Pode ocorrer:
perda de peso em 80% dos casos;

queda produo leiteira em 77% dos casos;

linfadenopatia externa em 58% dos casos;

reduo no apetite em 57% dos casos;

linfadenopatia interna em 43% dos casos;

paresia posterior em 29% dos casos;

febre em 23% dos casos;

comprometimento respiratrio em 14% dos casos;

exoftalmia bilateral em 15% dos casos;

diarria em 13% dos casos;

constipao em 14% dos casos;

exoftalmia unilateral em 7% dos casos;

alteraes cardiovasculares em 36% dos casos.

- Respirao dificultada 14%

Dados obtidos aps observaes clnicas em1398 animais apresentando a forma tumoral.

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Figura 1:
unilateral.

Animal com exoftalmia

Figura 2: Animal com aumento na

regio submandibular.

Figura 4: Linfonodos infartados.

Figura 3: Tumor na regio do

abomaso.

Linfocitose Persistente: Tem sido admitido que rebanhos com um alto ndice da forma adulta,
com a presena de linfossarcoma, muitas vezes, contm alguns animais com linfocitose
persistente (LP). Em aproximadamente dois teros dos casos, o desenvolvimento do
linfossarcoma precedido vrios anos por LP, sem qualquer sinal de doena clnica. Por causa
desta associao, tem sido comumente assumido que a LP a forma subclnica do
linfossarcoma. Desta forma, a leucose enzotica bovina tem sido descrita como tendo uma fase
pr-tumoral, caracterizada pela LP, seguida por uma segunda fase, na qual aparecem tumores
leucticos.
Fatores Genticos: LEWIN & BERNOCO, em 1986, realizaram testes de associao entre
fentipos/altipos BoLA (antgenos associados a membrana citoplasmtica dos linfcitos B de
bovinos) e infeco por VLB e LP, usando um painel internacional de aloantisoros bovinos. A
resistncia LP entre os animais soropositivos foi associada com a presena do antgeno
denominado de BoLA-DA7, e a susceptibilidade foi associada com o antgeno BoLA-DA12.3.
Isto sugere que a seleo gentica de bovinos com linfcitos B, de linhagens resistentes a
proliferao celular pode ser possvel de ser desenvolvida.

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DIAGNSTICO
Diagnstico clnico:
Animais adultos, com mais de 3 anos de idade, apresentam progressivo e visvel aumento de
volume dos linfonodos subcutneos principais, simulando linfoadenopatias infecciosas, porm,
sem febre. Uma vez presentes, torna-se fcil o diagnstico da Leucose de ser realizado atravs
de bipias enviadas para exames histopatolgicos cujos resultados destas tumoraes so
classificados como do tipo linfossarcoma. O diagnstico torna-se difcil quando estas
tumoraes encontram-se internalizadas ou disseminadas em linfonodos secundrios no interior
das cavidades torxicas e abdominais de difcil acesso. Porm, quando h perturbaes
digestivas crnicas (meteorismo, diarria), aumento de linfonodos, exoftalmia e, mais
raramente, paresia, paralisia e placas cutneas, deve-se suspeitar igualmente de leucose
enzotica .
Realiza-se o diagnstico clnico inspecionando-se os olhos e palpando-se diversos grupos de
linfonodos de rgos, como o tero.

Diagnstico laboratorial:
1. Histopatolgico, atravs de bipsias ou fragmentos de orgos: linfoadenoses (forma
folicular e difusa de leucose), reticulose, reticulossarcomatose e formas mistas de
alteraes.
2. Hematolgico, atravs da contagem de linfcitos: a linfocitose sugere infeco por VLB,
mas no descarta a possibilidade de outras doenas; a ausncia de linfocitose no exclui a
possibilidade de infeco pelo VLB. A LP diagnosticada realizando-se vrias anlises
consecutivas (pelo menos 3) a intervalos de 1 ms.
3. Imunolgico, atravs do diagnstico sorolgico: Tcnicas como a Imunodifuso em gar
gel, ELISA ou Radioimunoensaio so as mais utilizadas, Sendo as duas primeiras as de
eleio pela OIE (Office International des Epizooties). Existem tcnicas sorolgicas nas
quais se utilizam amostras de leite ao invs de amostras de soro sangineo, apresentando
igual sensibilidade.
4. Sondas Genticas: Atravs da Tcnica da PCR (Polymerase Chain Reaction), e com a
utilizao de primers iniciadores, pode-se identificar, em clulas bovinas infectadas,
sequncias de DNA caractersticas do retrovrus (virion completo) ou do provirus.

Reaes falso-positivas podem ocorrer em animais que receberam anticorpos pelo colostro de
mes positivas. Neonatos, que ingeriram colostro de vacas positivas e que esto com menos de
6 meses de idade, podem ainda resultar positivos devido a presena destes anticorpos
colostrais, que ainda no foram eliminados. Animais com idades acima de 6 meses com
resultados positivos por trs exames consecutivos (em intervalos de 1 ms) devem ser
considerados como positivos e infectados.

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Reaes falso negativas podem ocorrer em animais infectados cujo sistema imune ainda no
respondeu a infeco viral (denomina-se este lapso, ou demora de resposta imune, de janela
imunolgica). Para tanto, em caso de resultados sorolgicos iniciais negativos ps-infeco,
sero necessrios esperar-se 3 meses para considerar-se animal infectado ou no infectado, a
semelhana do que ocorre com infeces humanas com o vrus HIV.
Vacas infectadas podem apresentar reao sorolgica negativa (falso-negativa) quando os
exames sorolgicos forem realizados de entre duas a seis semanas antes e depois do parto. Os
ttulos sorolgicos tornam-se novamente detectveis seis semanas aps.

Figura 5: Teste de Imunodifuso em

gar Gel, mostrando as reaes
negativas (1) e positiva (2).

Tabela 1 Interpretao dos resultados de exames sorolgicos para a Leucose Enzotica Bovina.
LTIMO CONTATO
RESULTADO
IDADE
COM ANIMAL
INTERPRETAO
SOROLGICO
INFECTADO
Se nascido de vaca infectada: impossvel de distinguir os
anticorpos se resultantes de infeco ou se so do colostro.
Retestar aps 7 meses ou utilizar outra tcnica como por
Positivo
exemplo a PCR.
Menos de 7
Se nascido de vaca soronegativa, ou se no ingeriu o
meses
colostro de vaca soropositiva, est infectado
Menos de 3 meses
Retestar trs meses aps o contato com bovino infectado.
Negativo
Mais de 3 meses
Animal no infectado.
Positivo
Animal infectado.
Mais de 7
Menos de 3 meses
Retestar trs meses aps o contato com bovino infectado.
meses
Negativo
Mais de 3 meses
Animal no infectado.
FONTE: Adaptado de TOMA et al., 1990

PREVENO E CONTROLE:
Uma vez constatada na propriedade a presena de animais sorologicamente positivos ou
animais apresentando forma clnica da doena, recomenda-se:

Testar o rebanho a cada 3 a 6 meses at que todos os animais positivos sejam identificados;

Em casos de alta prevalncia de animais positivos, separar os animais positivos dos

negativos em dois lotes no campo, deixando-os em diferentes pastagens com distncia
mnima de 150 metros entre elas, evitando assim a possibilidade de transmisso mecnica
por insetos hematfagos;

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Ordenhar os animais soronegativos antes dos soropositivos. Utilizar, na aparelhagem da

ordenhadeira mecnica, desinfetantes eficazes aps a ordenha dos animais reagentes.
Exemplo: Hipoclorito de Sdio, Biocid;

Jamais utilizar instrumentais veterinrios como agulhas de vacinao ou de suturas, luvas

de palpao, brincadores, descornadores, bisturis, entre outros, utilizados no rebanho
positivo em animais do rebanho negativo, sem prvia desinfeco;

O mesmo procedimento com relao aos intrumentais deve ser realizado em neonatos filhos
de vacas positivas (estes bezerros ou bezerras devero ser considerados negativos at a data
da primeira colheita de soro, no sexto ms).

Instituir um banco de colostro na propriedade (colostro das primeiras 24 horas obtidos de

fmeas no reagentes e armazenados a 20C em freezer);

Promover pela bezerrada recm nascida, a ingesto de colostro de vacas soro-positivas

desde que este colostro seja submetido previamente a aquecimento a 56C, durante 30
minutos;

Realizar a primeira colheita de soro das bezerras e bezerros nascidas de animais positivos
somente aps o 6 ou 8 ms aps o parto, devido aos anticorpos maternos perdurarem at
prximo dos seis meses. Animais reagentes nesta colheita sero considerados como
positivos e segregados dos demais negativos;

Tentar obter neonatos negativos gerados de vacas positivas que possuam alto padro
gentico (infeco vertical ocorre em 10% dos neonatos). Consider-los infectados se no
oitavo ms for verificada a presena de anticorpos.

Caso seja economicamente vivel (em propriedades com baixa prevalncia), eliminar do
rebanho os animais reagentes e, caso no seja possvel, retirar aqueles em final de idade
econmica (a partir de 8 anos);

No introduzir no rebanho animais soro-positivos;

Combater os insetos hematfagos que possam transmitir o VLB;

Eliminar do rebanho os animais com sinais clnicos da doena, pelo sacrifcio sem
aproveitamento da carcaa;

Manter vigilncia epidemiolgica do rebanho atravs de exames sorolgicos anuais;

Limitar o comrcio de animais infectados e proteger de novos contgios os efetivos livres

(Ex: exposies.).
Em caso de Programas de Erradicao da Leucose Enzotica Bovina, recomenda-se a
eliminao sumria de todos os animais com sorologia positiva, alm das medidas gerais
sugeridas acima , que visam a manuteno de rebanhos lvres.

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Quadro 2: Preveno da transmisso do Vrus da Leucose Bovina (VLB) atravs de sangue contaminado.
PROCEDIMENTO CRTICO-FATORES DE
RISCO CONSIDERADOS ALTOS
Intervenes cirrgicas

AES CORRETIVAS

Desinfetar (submerso em hipoclorito de sdio), lavar

e ferver o material
Tatuagem e colocao de brincos
Desinfetar o instrumento aps cada uso
Descorna
Desinfetar o descornador aps cada uso. Controlar
hemorragia por hemostasia. Aplicar anti-sptico em
aerossol e repelente. Usar descornador eltrico ou
ferro quente
Vacinaes, injees, coletas de sangue e teraputicas Usar agulhas descartveis individuais ou desinfetar
grupais com utilizaes de agulhas
agulha aps cada uso
Palpao retal
Usar luvas descartveis individuais
Premunio e transfuses sangineas
Manter os doadores isolados e somente utiliz-los
aps de 3 testes consecutivos de IDAG negativos
com intervalos de 2 meses
Introduzir animais positivos em rebanhos negativos
Adquirir animais de propriedades idneas com
atestados negativos
FONTE: OLIVEIRA, K.B., 2000.

Observaes:
Transferncia de embrio de vacas positivas (de alto valor gentico), smem de reprodutores
positivos (de alto valor gentico), saliva de animais infectados, leite ou colostro de vacas
positivas, bem como a realizao do teste de tuberculinizao intradrmico, so prticas em
que os riscos de transmissibilidade so considerados limitados.
Prticas de exciso de tetos supranumerrios, contato prximo de animais positivos com
negativos, so considerados como fatores de transmissibilidade suspeitos.
Importante: O controle ir reduzir drasticamente a incidncia; porm, no eliminar a
enfermidade.
CONCLUSO:
Os ndices moderados de prevalncia e a lenta difuso da infeco, observados na maioria dos
rebanhos, favorecem a execuo de medidas de controle. O desconhecimento da enfermidade,
a ausncia de legislao oficial no Brasil e o fato de que a infeco pode permanecer inaparente
na maioria dos casos, fazem com que a maioria dos proprietrios no manifestem interesse
nesse sentido.
Mais de 95% dos animais infectados pelo VLB no manifestam clinicamente a doena, embora
possam transmiti-la. Por isso, so denominados portadores sadios, os quais so os maiores
responsveis pela disseminao da doena. Infeces iatrognicas devem ser evitadas atravs
da divulgao, para todos os mdicos veterinrios, dos riscos de transmisso provocada por
prticas profissionais no condizentes .
Dessa forma, evidencia-se a importncia do diagnstico laboratorial no controle da LEB pela
deteco de animais portadores. Vrios pases europeus, incluindo a Dinamarca e a Alemanha,
erradicaram essa enfermidade adotando programas para a remoo de animais portadores de
seus rebanhos, utilizando o teste de imunodifuso em gar gel. Apesar de no se pensar em
programas de erradicao a serem executados em nosso pas, preconiza-se a execuo de
programas de controle, possibilitando ao criador a eliminao gradual de animais positivos,
sem prejudic-lo do ponto de vista econmico. O criador poder substituir seus animais

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positivos pelos prprios descendentes destes, podendo, no final da vida produtiva de suas
vacas, aproveit-las para o consumo da carne.
Perspectivas Futuras de Vacinas contra a Leucose Enzotica Bovina
Experimentos com bovinos vacinados com antigenos inativados (glicoproteina de envelope, gp
51) e, posteriormente, inoculados com linfcitos de animais infectados, mostrou que 75% dos
animais estavam protegidos da agresso. Porm, quando a dose inoculante foi maior, o nmero
de animais protegidos caiu para 16%. Vacinas recombinantes, expressando a gp51, mostraramse efetivas, suprimindo a replicao viral em linfcitos perifricos. Porm, a vacina no
protegeu completamente os animais da infeco. Animais vacinados com gp 51, do reaes
positivas em testes sorolgicos, dificultando a diferenciao entre animais imunizados e
infectados. A utilizao da protena 24 (p24) como antgeno de diagnstico, a alternativa de
escolha, caso programas de vacinao contra esta doena sejam preconizados no futuro.
Observaes Finais:
A Leucose Espordica Juvenil, bem como a Leucose Espordica Adulta, no so causadas pelo
VLB, no sendo, portanto, identificados pelo teste de Imunodifuso em gar Gel.
Algumas caractersticas destas formas de Leucose:
- Espordica Juvenil (animais com menos de trs anos de idade):
- multicntrica (bezerros menos de seis meses): enfartamento mltiplo de linfonodos;
- tmica (jovens com menos de 2 anos): edema cervical causado por alteraes tmicas;
- cutnea (um a trs anos): ndulos e placas na pele.
Referncias Bibliogrficas:
BRAGA, F. M.; LAAN, C. W. Leucose Enzotica Bovina In: Doenas de Ruminantes e
Equinos. RIET-CORREA, F.; SCHILD, A. L.; MENDEZ, M. LEMOS, R. A. A . Varela
Editora e Livraria, 2001. p. 126-134.
DITTRICH, T. R. C.; OLIVEIRA, K.B. Deteco de Anticorpos contra o Vrus da Leucose
Enzotica Bovina no Rebanho da Fazenda Gralha Azul. Curitiba: PUC-PR, 2000
JOHNSON, R.;KANEENE, J. B. Bovine Leukemia Virus. Part I. Descriptive Epidemiology,
Climical Manifestations, and Diagnostic Tests. The Compendium Collection., v. 13, n.2, p.
122-129, 1991,
LEITE, R. C.; LOBATO, Z. P.; CAMARGOS, M. F. Leucose enzotica bovina. Revista do
Conselho Federal de Medicina Veterinria. Ano. 7, n. 24, 2001. p. 20-28.
LEWIN, H. A.; BERNOCO, D. Evidence for BoLA-linked resistecnce and susceptibility to
subclinical progression of bovine leukemia virus infection. Animal Genetic., v. 17, p. 197-207,
1986.
OLIVEIRA, K. B. Relatrio de Concluso de Curso Leucose Enzotica Bovina: reviso
bibliogrfica. Curitiba: PUC-PR, 2000.
REBHUN, W. C Doenas Infecciosas Variadas. In: Doenas do Gado Leiteiro. Editora Roca,
2000. p 577-612.
TOMA, B.; ELOIT, M.; SAVEY, M. Las enfermidades animales por retrovirus: leucosis
bovina enzotica, anemia infecciosa de los quidos, artritis/encepalitis caprina. Revue
Scientifique et Technique Office International Des Epoizooties, v.9,n.4, p.1077-1119, 1990.