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MICROBIOLOGIA GERAL E APLICADA

Autor: Prof. Dra. Luciana Savoi Rossi


Aula Terica N.3
REPRODUO E CRESCIMENTO MICROBIANO
INTRODUO
O crescimento microbiano (CM) um fenmeno que est relacionado ao
nmero de clulas formadas em determinado tempo em um substrato. Assim, os
microrganismos em crescimento esto na realidade aumentando em nmero e se
acumulando em colnias (grupos) que contm milhares de clulas.
O crescimento microbiano (CM), necessariamente, um processo que refere-se
aos mecanismos envolvidos com a reproduo das clulas, que so os responsveis
pelo aumento em seu nmero e conseqente formao das colnias. Por meio do
entendimento do crescimento microbiano, podemos controlar o crescimento de
organismos patognicos ou estimular o crescimento de organismos benficos.
Antes de abordarmos os conceitos sobre CM das bactrias, vamos compreender
como ocorre sua reproduo.
A REPRODUO BACTERIANA
A reproduo nas bactrias feita, na grande maioria dos casos, pelo processo
de diviso binria simples (tambm conhecida como fisso binria transversa ou
bipartio), na qual uma clula, atingindo um determinado tamanho, divide-se ao
meio, dando origem duas clulas-filhas iguais. Este um processo que no envolve
clulas sexuais.
Inicialmente, antes de ocorrer a diviso celular, os contedos celulares se
duplicam e o nucleide replicado (A e B). Na medida em que a clula parental
aumenta (C), a membrana citoplasmtica se estende, invagina-se para o centro e o
material nuclear se separa (C e D). Esta etapa da diviso celular ocorre na zona entre
os dois nucleides. Ao mesmo tempo, um novo material para a parede celular cresce
na direo interna para formar uma parede cruzada (septo) entre as duas clulasfilhas (D). Finalmente, as clulas filhas podem se separar completamente (E), mas em
algumas espcies elas permanecem acopladas para formar pares, arranjos ou cadeias
(Ex. Bactrias do grupo dos estreptococos e estreptobacilos).

Outros modos de reproduo bacteriana podem ocorrer na natureza, mas estes


ocorrem em algumas espcies. Por exemplo, bactrias do grupo Rhodopseudomonas

sp. reproduzem-se por brotamento. Neste processo a clula apresenta a formao de


uma pequena protuberncia que cresce na extremidade da clula. Este brotamento
aumenta e eventualmente torna-se uma nova clula com todos os constituintes
celulares separando-se da parental ao final.
Outras espcies, como Nocardia spp. reproduzem-se pela fragmentao dos
filamentos, com formao de pequenas clulas em forma de basto que daro origem
espcie. Por fragmentao, tambm, as espcies de Streptomyces podem se
reproduzir, formando estruturas erroneamente chamadas de condios, pois este termo
associado a fungos filamentosos. So exemplos de reproduo por fragmentao,
algumas espcies de cianobactrias.
FATORES NECESSRIOS AO CRESCIMENTO MICROBIANO
Podem ser divididos em fatores fsicos e qumicos e afetam todos os grupos de
microrganismos, no apenas as bactrias.
Fatores Fsicos
1. Temperatura: o fator mais importante, pois afeta o crescimento e a
reproduo das clulas, ou seja, todas as suas reaes bioqumicas. Em geral, os
microrganismos crescem em uma ampla faixa de temperatura, mas h um ponto timo
que denominado temperatura tima de crescimento. Esta definida como a
temperatura ideal, em que o crescimento acelerado. Abaixo ou acima deste limite
definem-se a temperatura mnima de crescimento e temperatura mxima de
crescimento. Em funo de sua preferncia quanto faixa de temperatura, os
microrganismos so denominados:
- Psicrfilos: crescem em baixas temperaturas (15 a 20C);
- Mesfilos: crescem em temperaturas medianas (25 a 40C)
- Termfilos: crescem em temperaturas altas (50 a 60C).
2. Atmosfera Gasosa: refere-se quantidade de gases essenciais ao
crescimento microbiano, como O2, CO2, N e metano. Estes gases e outros so
utilizados no metabolismo celular, mas h diferenas quanto s espcies. Assim, em
geral, o CO2 sempre utilizado enquanto que o O2 utilizado com restries. Quanto
utilizao de O2, os microrganismos so definidos em:
- aerbios: so os que requerem o oxignio para o seu desenvolvimento e
somente crescem na presena deste elemento.
- anaerbios: so os que crescem somente na ausncia de oxignio, sendo este
um composto txico s clulas.
- facultativos: podem crescer tanto na presena quanto na ausncia de oxignio.
3. pH do meio: em geral, o pH timo ao crescimento microbiano definido para
cada espcie. Porm, independentemente do pH externo, um microrganismo deve ser
capaz de manter seu pH interno em torno de 7,5 para se manter vivel. Portanto, o pH
externo pode chegar a um ponto de desequilibrar o pH interno e causar a morte
celular.
Fatores Qumicos
Esto relacionados com as caractersticas nutricionais, essenciais ao
crescimento. Assim, alguns nutrientes como C, N, P, K, H, S e microelementos (Cu,
Fe, Mo, Mg, Mn, etc). so exigidos pelas clulas para sua nutrio. Estes so

fornecidos em maior ou menor quantidade pelo meio onde o microrganismo se


desenvolve, o qual pode ser um meio natural ou artificial (meios sintticos). Assim, os
microrganismos que no so capazes de sintetizar seu alimento so denominados
heterotrficos, enquanto que os que realizam fotossntese para obteno de energia
so os autotrficos. Os tipos e constituio dos meios de cultura sero esclarecidos na
aula prtica.
CRESCIMENTO BACTERIANO
O crescimento bacteriano est associado ao aumento na quantidade de clulas
e no ao aumento de tamanho da clula. Assim, quando uma colnia de bactrias
cresce no meio de cultura isto significa que milhes e milhes de novas clulas esto
surgindo, fruto da intensa atividade metablica e reproduo celular. A maioria das
espcies de bactrias conhecidas pelo homem reproduz-se de maneira assexuada,
em que no existe troca de material gentico e no ocorre meiose e produo de
gametas (clulas sexuais). A velocidade com que este processo ocorre depende da
disponibilidade dos fatores de crescimento j mencionados. Se as condies forem
ideais, o crescimento microbiano rpido at o momento em que todos os nutrientes
se esgotam, quando a colnia entra em fase de declnio.
Recordando, o principal processo de diviso das bactrias conhecido como
fisso binria transversa, em que a clula- me se divide dando origem a duas
clulas-filhas em tamanho aproximadamente igual. Conforme j estudado, outros
processos de diviso de procariotos podem ocorrer, dependendo da espcie, como
brotamento ou fragmentao. Portanto, temos o crescimento microbiano, em que
clulas vo se dividindo e dando origem a novas clulas, aumentando em escala
logartmica a populao.
Se partirmos de um exemplo hipottico em que 1 clula sofre fisso binria e d
origem a duas novas clulas temos que:
1

16

32... e assim, sucessivamente.

Neste modelo, podemos observar que o aumento expresso em progresso


geomtrica, podendo ser representando da seguinte maneira:
2
21
22
nmero de geraes.

23

24

25

2n, onde n o expoente que se refere ao

Assim, temos que 2n definido como o nmero total de clulas em uma


colnia, o que varia de acordo com o nmero de geraes. Quanto maior o nmero
de geraes, maior o nmero total de clulas.
Sabemos que este nmero aumenta em funo do tempo, que podemos
denominar de Tempo de Gerao (g) . Este tempo definido como o tempo
necessrio para a clula se dividir e, portanto, a populao da colnia dobrar de
tamanho . O tempo de gerao depende do nmero total de clulas e do nmero de
geraes, podendo ser varivel entre as espcies de bactrias e das condies
ambientais a que estes organismos vivem (Ex: E. coli demora 12 minutos para a
populao dobrar de tamanho, enquanto que M. tuberculosum demora at 13 horas).
Atualmente h expresses matemticas que definem o crescimento microbiano
e que ajudam os tcnicos e pesquisadores estudarem caractersticas de determinado
microrganismo, seja para fins de pesquisa ou aplicao em indstria de alimentos,
petrolfera, estudos de impacto ambiental, etc...
Se partirmos de um exemplo hipottico em que temos 1 clula, conclumos que:

Populao Final (N) = 1 x 2n


Porm, nunca uma cultura bacteriana ou colnia inicia-se de apenas uma nica
clula e sim de milhares de clulas que se multiplicam. Portanto, esta equao pode
ser melhorada considerando-se o nmero de clulas iniciais no tempo zero (No), ou
seja, no momento em que foram inseridas no meio de cultura para iniciar o
crescimento. Desta forma temos:
Populao Final N = No x 2n , onde No o nmero de clulas no tempo zero
(incio da formao da colnia).
Conforme foi constatado, o crescimento microbiano exponencial e no linear.
Assim, esta equao deve ser expressa em termos logartimos:
Log10 N = Log10No + nLog102
Realizando-se as devidas transformaes matemticas nesta frmula o valor n
(nmero de geraes) pode ser calculado como:
n=3,3(Log10N Log10No), onde N o nmero final de clulas e No o nmero
inicial de clulas no tempo zero.
Sabendo-se o nmero de geraes (n), podemos determinar o tempo de
gerao (g) e assim temos que:
g = t/n onde, t o tempo desejado e n o nmero de geraes.
Veja o exemplo:
Em uma populao inicial (N) de 1.000 clulas e final de 100.000.000 clulas,
qual o nmero de geraes (n) e o tempo de gerao (g) desta espcie?
a) o nmero de geraes ser: n=3,3(8-3) = 16,5 geraes
b) o tempo de gerao aps 5h (tempo final) ser: g=5/16,5 = 0,3 horas (ou
seja, a populao dobra a cada meia hora)
CURVA DE CRESCIMENTO BACTERIANO

A curva de crescimento bacteriano demonstra o crescimento das clulas durante


um perodo de tempo. Esta curva obtida quando se realiza a contagem da populao
em intervalos de tempo aps a introduo de um inculo contendo um pequeno
nmero de bactrias em meio de cultura sinttico (normalmente lquido). Existem
basicamente quatro fases de crescimento:
A) A FASE LAG
Durante certo perodo de tempo o nmero de clulas sofre pequenas variaes,
praticamente no h crescimento, pois as bactrias no reproduzem-se imediatamente
aps inoculadas em um meio. Antes, precisam passar por uma fase de adaptao,
em que h uma preparao da clula para o incio do crescimento. Assim, a fase lag
caracterizada pela ausncia de reproduo e adaptao celular ao meio de cultura.
B) A FASE LOG (EXPONENCIAL)
Aps a adaptao, as clulas iniciam seu processo de diviso intensamente,

entrando em um perodo de extremo crescimento, onde a multiplicao celular


abundante e logo a populao dobra de tamanho. A fase log tambm denominada
de fase exponencial. Nesta fase as clulas so uniformes e apresentam intensa
atividade fisiolgica.
C) FASE ESTACIONRIA
O crescimento exagerado que verificado na fase log chega em um momento
em que fica estacionado. Isto porque o nmero de clulas aumenta num ponto em que
falta espao e os nutrientes comeam a se extinguir. Nesta etapa, no ocorre mais
crescimento, a cultura atinge um ponto de equilbrio, caracterstico da fase
estacionria. Algumas clulas comeam a morrer devido ao acmulo de metablitos
txicos e falta de espao. Porm, a grande maioria das clulas esto em atividade.
D) FASE DECLNIO (MORTE)
Nesta etapa o crescimento negativo, pois o nmero de mortes supera o
nmero de novas clulas. Isto ocorre devido ao esgotamento nutricional do meio de
cultura e excesso de substncias txicas, prejudiciais s clulas. Com o passar do
tempo, o nmero de mortos continua a aumentar em funo do tamanho da populao
e o momento de uma parte das clulas vivas serem transferidas para um novo
substrato.
Todas estas etapas podem ser mais bem compreendidas observando-se o
crescimento da populao em termos grficos.

Figura 1. Curva de Crescimento microbiano


Bibliografia
TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. Microbiologia 8 ed. Traduo de Roberta
Marchiori Martins. So Paulo: Atmed Editora, 2005. 894p.
PELCZAR JR., J.M.; CHAN, E.C.S.; KRIEG, N.R. Microbiologia: conceitos e aplicaes 2nd
ed. Traduo de Sueli Fumie Yamada, Tnia Ueda Nakamura, Tereza Cristina R.M. Oliveira,
Benedito Prado Dias Filho, Lourdes Botelho Garcia. So Paulo: Makron Books, 1996. 517p.
volume 1.

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