Seminario de Investigacin y Cultura

scar Snchez Daza

2011

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

INSTITUTO DE CIENCIAS
FACULTAD DE INGENIERA QUMICA

BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA

ENRIQUE AGERA IBEZ
Rector
JOS RAMN EGUBAR CUENCA
Secretario general
ALFONSO ESPARZA ORTIZ
Tesorero
LILIA CEDILLO RAMREZ
Vicerrectora de Extensin y Difusin de la Cultura
JORGE TORRES JCOME
Director del Instituto de Ciencias
SCAR ARROYO PORRAS
Director de la Facultad de Ingeniera Qumica
Cuerpo Acadmico de Qumica e Ingeniera Qumica
Bsicas y Aplicadas
DR. JOS LUIS ALCNTARA FLORES
DRA. YASMI REYES ORTEGA
MIQ ESIQUIO ORTIZ MUOZ

Martn Prez Zenteno

Edicin, correccin
J. Carlos Jimnez
Formacin
ISBN: 03-2013-08161 1583700-01
Instituto de Ciencias
Facultad de Ingeniera Qumica
Benemrita Universidad Autnoma de Puebla
4 Sur 104, Colonia Centro, CP 72 000, Puebla, Pue.
Impreso en Mxico/Printed in Mexico

ndice
PRESENTACIN
-7'HVHFDFLyQGHEDFWHULDVEHQpFDV\VXLPSDFWR
en agrobiotecnologa: avances y retos
Jess Muoz Rojas
-9La etnografa y los mayas
Rodolfo Reyes Corts
-250LFURXLGLFD\VXVDSOLFDFLRQHV
Eugenia Corvera Poir
-49MESA REDONDA
Esiquio Ortiz Muoz
-67Martha Moreno Bravo
-69Arturo Snchez Daza
-77Adrin Mendieta
FOTOGRAFAS

-85Construyendo otras realidades

Accin Directa Autogestiva
-93Poema
Estudiantes del Grupo de Investigacin de la
Facultad de Ingeniera Qumica
-1015

'HVHFDFLyQGHEDFWHULDVEHQpFDV\VXLPSDFWR
en agrobiotecnologa: avances y retos
Jess Muoz-Rojas*

LAS BACTERIAS SON RESPONSABLES del mantenimiento de vida de nuestro

SODQHWDGHVHPSHxDQIXQFLRQHVLPSRUWDQWHV\PXFKDVVRQEHQpFDVSDUD
sus hospederos. Por ejemplo, algunas bacterias son capaces de estimular
el crecimiento de plantas; otras degradan compuestos txicos para el ambiente o materia orgnica muerta, y otras son importantes por producir
productos de importancia para el consumo humano.
Bacterias promotoras del crecimiento de plantas
Las bacterias promotoras del crecimiento de plantas desempean sus beQHFLRVDWUDYpVGHGLYHUVRVPHFDQLVPRVHQWUHORVFXDOHVVHLQFOX\HQ
/DMDFLyQELROyJLFDGHQLWUyJHQRFBN), que consiste en captar niWUyJHQRDWPRVIpULFR12) y transformarlo mediante una enzima denomiQDGDQLWURJHQDVDDQLWUyJHQRELRGLVSRQLEOHHMDPRQLR/D FBN es desarrollada por bacterias diversas, entre las que destacan aquellas del gnero
Rhizobium, que interaccionan con leguminosas en una forma mutualista.
/DSURGXFFLyQGHWRKRUPRQDVSRUEDFWHULDVLQGXFHODGLYLVLyQ\
alargamiento celular de plantas, principalmente en races, permitiendo una
PHMRUDEVRUFLyQGHQXWULHQWHV/DVWRKRUPRQDVVRQGHGLYHUVDVFODVHV
como las auxinas, giberelinas y citocininas; algunos ejemplos incluyen la
SURGXFFLyQGHiFLGRLQGRODFpWLFRAIA) por Gluconacetobacter diazotrophicus
en caa de azcar y Azospirillum brasilense en maz.
3) El control biolgico, donde una cepa productora de sustancias inhi  0LHPEUR GHO *UXSR 6XSHUYLYHQFLD \ $QWDJRQLVPR GH %DFWHULDV %HQpFDV /DERUDWRULR GH
Ecologa Molecular Microbiana, Centro de Investigaciones en Ciencias Microbiolgicas, Instituto de Ciencias de la BUAP. La conferencia se present el da 7 de julio de 2011.

Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

bitorias impide el crecimiento de microorganismos patgenos por accin

antagonista, por lo que las plantas se mantienen sanas en comparacin con
SODQWDVTXHQRLQWHUDFFLRQDQFRQODEDFWHULDEHQpFD$OJXQRVHMHPSORV
incluyen el efecto de A. brasilense contra hongos por la accin de siderforos y la inhibicin de bacterias productoras de Pink disease por parte
GHEDFWHULDVEHQpFDVGHOJpQHURBurkholderia, productoras de molculas
inhibitorias.
4) La produccin de ACC desaminasa, una protena que impide el paso
de ACCDPLQRFLFORSURSDQRiFLGRFDUER[tOLFRDHWLOHQR(OHWLOHQRHV
una molcula seal que retarda el crecimiento de plantas en etapas tempranas, por lo que la inhibicin de su sntesis repercute positivamente en
el crecimiento de las plantas. Adems, debido a que el proceso implica
una desaminacin, el amonio generado es absorbido por las plantas como
fuente de nitrgeno, por lo que las plantas se ven favorecidas en su crecimiento. Un ejemplo explorado recientemente lo constituye la interaccin
de la bacteria Burkholderia unamae MTl641T con el tomate.
5) La induccin de la respuesta de defensa de plantas. Algunas bacterias como 3VHXGRPRQDVXRUHVFHQV son capaces de inducir un tipo de respuesta de defensa en plantas mediado por una molcula seal denominada
cido jasmnico. Las plantas que desencadenan esta respuesta de defensa
son protegidas ante el ataque de patgenos debido a que se estimul la
formacin de molculas de tipo fenlico que los contrarrestan.
6) La solubilizacin de nutrientes no biodisponibles. Algunas bacterias
solubilizan algunos minerales que son esenciales para el desarrollo de las
plantas, por ejemplo el fsforo y el zinc. Bacterias que realizan estas funciones son Azospirillum brasilense, para la solubilizacin de fsforo, y G.
diazotrophicus, para la solubilizacin de zinc a partir de rocas.
Inoculantes bacterianos
/DVEDFWHULDVFX\RVPHFDQLVPRVPROHFXODUHV\HIHFWRVEHQpFRVHQSODQWDVKDQVLGRVXFLHQWHPHQWHHVWXGLDGRVVRQFDQGLGDWDVSDUDOOHJDUDVHU
parte de formulaciones que impacten positivamente la agricultura. Estas
formulaciones son llamadas inoculantes; estn constituidas por un soSRUWHTXHSXHGHVHUGHFRQVWLWXFLyQYDULDEOHHMWXUEDVXHORDJDU\TXH
10

DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

ser encargado de transportar de forma viable y en nmeros adecuados

XQD EDFWHULD EHQpFD GHVGH HO ODERUDWRULR GRQGH HV SURGXFLGR KDVWD HO
sitio donde ser aplicada la formulacin. En funcin del tipo de bacteria
que constituye el inoculante podra tomar diferentes nombres: si el aporte
que la bacteria otorgar a la planta es va FBN la formulacin se llamar
biofertilizante. Si el aporte de la bacteria ocurre por va hormonal se deQRPLQDUiWRHVWLPXODQWH6LHODSRUWHGHODEDFWHULDHVPHGLDQWHODVROXbilizacin de nutrientes se llamar biosolubilizante. Y si el aporte es para
la degradacin de compuestos txicos se denominar biodegradante.
En la BUAP y en la UNAM se han desarrollado monoinoculantes que
portan la bacteria A. brasilense para potenciar el rendimiento de cultivos de
inters agrcola, principalmente gramneas. Sin embargo se han reportado
y publicado inconsistencias en la capacidad de estas formulaciones para
promover el crecimiento de maz. Algunas de las posibles causas por las
que la bacteria pudiera fallar para promover el crecimiento de plantas es
el tipo de suelo y el pH, que pueden afectar la interaccin en la rizsfeUDDPELHQWHLQXHQFLDGRSRUORVH[XGDGRVGHODVUDtFHVGHODVSODQWDV
RWUDUD]yQHVHOFXOWLYRGHSODQWDH[SORUDGR\QDOPHQWHODVFRQGLFLRQHV
climatolgicas, sobre todo en zonas de agricultura de temporal. Para asegurar efectos promotores del crecimiento de plantas se ha propuesto la
coinoculacin de dos especies bacterianas o una especie bacteriana con
un hongo de tipo micorrzico de tipo solubilizador de fosfatos. Por ejemplo, se ha explorado la coinoculacin de Bradyrhizobium japonicum con A.
brasilense en soya, observndose incrementos positivos en relacin con la
monoinoculacin con ambas bacterias. Otro ejemplo es la coinoculacin
de A. brasilense y micorrizas, donde se observa un mejor aporte de dicha
coinoculacin.
Recientemente se ha planteado que lo consorcios de diferentes especies de bacterias funcionan mejor que las bacterias solas, por lo que se han
explorado formulaciones multiespecies. Por ejemplo, en Brasil se ha formulado un inoculante multiespecies formado por A. amazonense, Herbaspirillum seropedicae, H. rubrisubalbicans, G. diazotrophicus y B. tropica. Aunque al
momento solo se ha explorado la capacidad de las bacterias para colonizar
la caa de azcar, es una formulacin prometedora para potenciar el desa11

Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

rrollo de la planta. En el laboratorio de Ecologa Molecular Microbiana se

han desarrollado inoculantes multiespecies, uno de ellos denominado IMM1,QRFXODQWHPXOWLHVSHFLHVSDUDPDt]IXHHYDOXDGRHQVXFDSDFLGDGSDUD
SURPRYHUHOFUHFLPLHQWRGHPDt]FULROORGHGLVWLQWDVYDULHGDGHVURMRD]XO
pinto, amarillo y pozolero). El IMM-1 es una formulacin lquida y est
compuesto por una bacteria representante de cada uno de los gneros siguientes: Azospirillum, Bradyrhizobium, Gluconacetobacter, Burkholderia, Pseudomonas y Sphingomonas. El IMM-1 potenci el crecimiento de plantas de maz
EDMRFRQGLFLRQHVGHLQYHUQDGHUR\FDPSR)LJXUDV\\DFWXDOPHQWHVH
est probando su efectividad en 500 hectreas de cultivo, con resultados
bastante bien aceptados por los agricultores.

FIGURA 1
Efecto del inoculante multiespecies en el crecimiento de plantas de maz
Plantas no inoculadas

12

Plantas muti inoculadas

DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

FIGURA 2
Efecto de un inoculante multiespecies en el crecimiento de mazorca
Arriba se muestran mazorcas de plantas no inoculadas y abajo
plantas de mazorcas inoculadas con el inoculante multiespecies IMM-1.

La desecacin de bacterias
Adentrndonos un poco ms en el terreno de los factores adversos que
afectan la efectividad de las bacterias de los inoculantes podemos resaltar
dos factores que son de suma importancia: la competencia contra microorganismos indgenas y la disponibilidad de agua. En referencia a la competencia de microorganismos es necesario contar con organismos altamente
competitivos y que enfrenten bien a bacterias presentes en la rizsfera de
ODVSODQWDVHQHVSHFtFRVHSUHHUHEDFWHULDVTXHVHDQFDSDFHVGHSURGXFLU
VXVWDQFLDVLQKLELWRULDV)LJXUD
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Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

FIGURA 3
Ejemplo de bacteria productora de sustancias inhibitorias
La bacteria es capaz de inhibir al crecimiento de otras
en el ambiente donde se desarrolla.

En cuanto a la disponibilidad de agua, una vez que las bacterias son

inoculadas en semillas de plantas y estas son sembradas en el terreno de
inters, inmediatamente ocurre prdida de agua de las clulas bacterianas
hasta el extremo de desecarse debido a que normalmente los sitios de
VHPEUDGRVRQGHWHPSRUDO/DGHVHFDFLyQVHGHQHFRPRODSpUGLGDWRWDO
de agua de las clulas hasta llegar al equilibrio con el agua presente en el
PHGLRDPELHQWH$OJXQRVDXWRUHVKDQGHQLGRXQWpUPLQROODPDGRGHVHFDFLyQH[WUHPDODFXDORFXUUHDSDUWLUGH&RPiVWHPSHUDWXUD\
RPHQRVGHKXPHGDGUHODWLYDHR). En estas condiciones las clulas
bacterianas conservan solo 10% de agua del peso total de masa seca. Algunas bacterias, como el caso de Rhizobium leguminosarum, resisten slo por
cuatro das en estado desecado. Asociada a semillas esta baja supervivenFLDLPSLGHREVHUYDUORVHIHFWRVEHQpFRVTXHODVEDFWHULDVGHEHQRWRUJDUD
las plantas, en este caso las leguminosas. Por esta razn el grupo SuperviYHQFLD\$QWDJRQLVPRGH%DFWHULDV%HQpFDVGHOODERUDWRULRGH(FRORJtD
Molecular Microbiana del ICBUAP trabaja intensamente en estudiar cmo
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DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

SRWHQFLDUODUHVLVWHQFLDDODGHVHFDFLyQGHEDFWHULDVEHQpFDV\H[SORUDU
cules son las bacterias ms resistentes ante este estrs. Bajo condiciones
de laboratorio la desecacin se realiza en cmaras a 25C y 50% HR, donde
se ha explorado la resistencia a la desecacin de bacterias de diversos gneros y especies. Se observa que muchas de ellas son resistentes a la desecacin y otras resultan sensibles (Figura 4). La resistencia a la desecacin se
mide con valores parametrizados a partir de un concepto llamado BSRSRU
sus siglas en ingls Bacterial Survival Rate), que es la tasa de supervivencia
EDFWHULDQD\TXHVLJQLFDODUHODFLyQHQWUHHOQ~PHURGHFpOXODVTXHKD\
antes de la desecacin y el nmero de bacterias que sobrevive despus de
la desecacin-rehidratacin y en distintos periodos de desecacin-rehidraWDFLyQ0DWHPiWLFDPHQWHORGHQHODVLJXLHQWHHFXDFLyQ
BSR

/RJ1RUFC/ml DD;/RJ1RUFC /ml AD).

'RQGH/RJ1R UFCVLJQLFDORJDULWPRGHOQ~PHURGHXQLGDGHVIRUmadoras de colonia. DDVLJQLFDGHVSXpVGHODGHVHFDFLyQ\AD antes de la

desecacin.
FIGURA 4
7DVDGHVXSHUYLYHQFLDEDFWHULDQDDODGHVHFDFLyQDPELHQWDO&\HR)
Se muestra la supervivencia de tres cepas del gnero Klebsiella, donde la cepa T29A
HVODPiVUHVLVWHQWH'SGVLJQLFDGtDVSRVWGHVHFDFLyQ

15

Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

Bsqueda de genes implicados en la resistencia a la desecacin bacteriana

Las cepas bacterianas que han resultado ms resistentes a la desecacin,
como es el caso de Klebsiella variicola T29A, han sido consideradas para
explorar cules son los genes involucrados en dicha resistencia, para ello
se ha hecho uso de herramientas moleculares. Una de las ms usadas en el
laboratorio es la mutagnesis al azar usando minitransposones de tipo
Tn5. Los minitransposones saltan desde un vector plasmdico hasta el genoma de la bacteria en estudio de forma azarosa insertndose y truncando la funcin del gen en el que ha cado la insercin. El plsmido pUT
porta los transposones miniTn5, los cuales bordean un gen de resistencia
a kanamicina. Adems el plsmido posee un origen de replicacin R6K
que depende de la protena lambda-pir que se encuentra en el genoma de
ODEDFWHULDKRVSHGHUDEscherichia coli S-17 lambda-pir) y una transposasa
SURWHtQD TXH IDYRUHFH OD WUDQVSRVLFLyQ XELFDGD SRU IXHUD GH ORV WUDQVSRVRQHVPLQL7QSRUORTXHHOWUDQVSRVyQVyORVDOWDXQDVRODYH]HQHO
genoma. Este plsmido es transferido desde E. coli mediante conjugacin
KDVWDODFHSDUHFHSWRUDK. variicola7$)LJXUDGRQGHHOSOiVPLGR
no puede replicarse debido a que la cepa receptora no produce la protena
lambda-pir. Por lo tanto el plsmido es suicida y la nica forma de conservar la resistencia a la kanamicina por parte de la clula receptora es que el
transposn salte a su genoma. La seleccin de cepas de K. variicola T29A2
que adquirieron un transposn en su genoma se realiza en un medio con
citrato como fuente de carbono y kanamicina; en el citrato no crece E. coli
y en Kanamicina solo crecen las cepas de K. variicola mutagenizadas.
FIGURA 5
Representacin de un evento de transposicin
miniTn5 en una bacteria receptora

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DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

De esta forma, en el laboratorio se ha construido una mutateca de

alrededor de 8 500 mutantes, de las cuales 15 se han vuelto sensibles a la
desecacin, lo cual indica que estas mutantes poseen genes mutagenizados
importantes para resistir al proceso de estrs. Los genes de las mutantes
LPSOLFDGDVKDQVLGRDPSOLFDGRVPHGLDQWHWpFQLFDVGH PCRs arbitrarias y
secuenciados. La secuencia obtenida es comparada en la base de datos
pblica NCBI y el resultado del gen en cuestin otorga pistas del mecanismo que emplean las bacterias para resistir a la desecacin. Por ejemplo,
encontramos que K. variicola T29A2 requiere de genes implicados en la
biosntesis de polisacrido para resistir a la desecacin. Si este componente
no est presente las clulas perecen bajo estas condiciones.
Cabe destacar que para determinar el nmero de bacterias antes de la
GHVHFDFLyQ\GHVSXpVGHODGHVHFDFLyQGHFDGDPXWDQWH\VXVUHpeticiones fue necesario desarrollar una metodologa de conteo masivo de
bacterias que se ha denominado GSPMJRWHRSRUVHOODGRHQSODFDPDVLYR
con la cual podemos procesar hasta 96 muestras en dos horas para su recuento despus del crecimiento respectivo. Este mtodo est en vas de ser
patentado y se encuentra en la segunda fase de evaluacin.
Formas alternativas de bacterias para tolerar a la desecacin
Un modelo que llam la atencin del grupo de investigacin fue el de P.
putida KT2440. Esta bacteria es muy estudiada a nivel internacional ya que
es capaz de usar los compuestos aromticos como fuente de carbono y
ha sido propuesta como modelo para llevar a cabo la bioremediacin y la
UL]RUHPHGLDFLyQELRUHPHGLDFLyQDFRSODGDDODUL]yVIHUDGHSODQWDV6LQ
HPEDUJRHVWDEDFWHULDHVVHQVLEOHDODGHVHFDFLyQ)LJXUDORTXHDEUH
la pregunta cmo una bacteria sensible a la desecacin puede ser cosmopolita y estar presente en ambientes adversos? Cmo ha enfrentado la
bacteria las desecaciones a lo largo de su evolucin? Existen varias alternativas y en el laboratorio se han explorado algunas. Por ejemplo, sabemos
que si P. putida KT2440 es adicionada con disacridos o polialcoholes en
concentracin 200 mM estos protegen a la bacteria de la desecacin. Es
sugerido que las bacterias toman estos compuestos y sustituyen a las molculas de agua durante la desecacin otorgando estabilidad a los fosfolpi17

Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

dos de membrana e impidiendo que sta pase de una fase de cristal lquida
a una fase de gel. Esta teora es conocida como teora de sustitucin de
molculas de agua.
Por otro lado, esos compuestos tambin protegen a protenas complejas de sufrir desnaturalizacin y una vez que la clula se rehidrata los
componentes celulares pueden volver a funcionar. Sin embargo en la naturaleza slo en pocos ambientes se podran alcanzar concentraciones de
GLVDFiULGRVVXFLHQWHPHQWHHOHYDGDVSDUDSURWHJHU8QRGHHVRVDPELHQtes es la rizsfera de plantas, por lo que se explor la posibilidad de que los
exudados de maz protegieran a P. putida KT2440 de la desecacin. Para
nuestra sorpresa solo una variedad de maz produjo compuestos rizosfriFRVFDSDFHVGHSURWHJHUDODEDFWHULDGHODGHVHFDFLyQ)LJXUD
FIGURA 6
Supervivencia a la desecacin de P. putida KT2440 a 25C y 80% HR
La lnea verde muestra que la bacteria sobrevive mejor cuando est en presencia
de exudados de plantas de una variedad criolla.

Otras seis variedades criollas exploradas de maz fueron incapaces de

producir sustancias protectoras para la desecacin de bacterias, por lo que
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DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

a pesar de que la interaccin con plantas es una posibilidad que las bacterias poseen para soportar la desecacin, no parece la alternativa general
para sobrevivir en el ambiente y salta a la vista que hay otra forma alternativa para sobrevivir a esta situacin adversa.
Es interesante que una vez que la bacteria cae completamente en su
supervivencia puede volver a ser aislada si se rehidrata en presencia de
exudados de planta, independientemente de si protegieron o no de forPDGLUHFWDDODGHVHFDFLyQQRPRVWUDGR(QFDVRGHXQDUHKLGUDWDFLyQ
SURORQJDGDDKRUDVWDPELpQHVSRVLEOHUHFXSHUDUODVEDFWHULDVTXH
previamente haban perdido la capacidad para crecer en los medios de culWLYRGHVSXpVGHVXUHKLGUDWDFLyQ)LJXUD(VWRVGRVUHVXOWDGRVPXHVWUDQ
que las bacterias durante la desecacin son capaces de entrar en un estado
viable no cultivable como estrategia de supervivencia, lo que equivale a
que las bacterias detienen su divisin celular quizs para evitar un gasto
energtico innecesario en condiciones adversas.
FIGURA 7
Supervivencia a la desecacin-rehidratacin de P. putida KT2440.
BSR en eje vertical y das durante la desecacin en el eje horizontal.
/DUHKLGUDWDFLyQVHUHDOL]yHQWUHVIRUPDVUHKLGUDWDFLyQUiSLGDPLQXWRVUHKLGUDtacin durante 24 h y durante 48 h. El estado viable cultivable se recupera en la rehidratacin de 24 y 48 h. En periodos largos de desecacin solo se recupera el estado
viable cultivable en clulas bacterianas con rehidratacin de 48 h.

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Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

La estrategia de las bacterias de entrar en una fase viable no cultivable

ha sido corroborada mediante dos metodologas: 1) tincin de integridad
celular con el kit live/deadYLYDVRPXHUWDVGRQGHODVFpOXODVVRQWHxLGDV
antes y despus de la desecacin-reehidratacin con un kit comercial que
PDQHMDGRVXRURFURPRVXQRGHQRPLQDGRSYTO 9, que tie de verde las
clulas cuya membrana no ha sido daada, y el bromuro de propilo, que
tie las clulas de rojo cuando la membrana ha sido daada, debido a que
esta molcula penetra y se intercala en el DNA y su intensidad sobrepasa al
verde del SYTO 9.
/DVFpOXODVDQWHVGHODGHVHFDFLyQVRQGHFRORUYHUGH)LJXUD\GHVpus de la desecacin su color se torna rojo, lo que implica que su membrana ha sido daada cuando ya no es posible cultivarlas. Bajo condiciones
de rehidratacin prolongada las clulas recuperan parte de su integridad y
nuevamente se observan de color verdoso. 2) El uso de una cepa que exSUHVDFRQVWLWXWLYDPHQWHODSURWHtQDYHUGHXRUHVFHQWHQRVGDSLVWDVSDUD
saber qu ocurre con el metabolismo de las clulas. La expresin de la
SURWHtQDYHUGHXRUHVFHQWHVHHYDOXyDQWHV)LJXUD\GHVSXpVGHODGHVHFDFLyQ6HREVHUYyTXHODH[SUHVLyQGHODSURWHtQDYHUGHXRUHVFHQWH
RFXUUHWDQWRDQWHVFRPRGHVSXpVGHODGHVHFDFLyQORTXHVLJQLFDTXHHO
PHWDEROLVPRFHOXODUHVWiDFWLYRHQDPERVFDVRV(VWRVLJQLFDTXHDSHVDU
de que no podemos cultivar las bacterias despus del proceso desecacinrehidratacin rpida las clulas estn viables y activas.
&RQHVWRVGRVH[SHULPHQWRVFRQUPDPRVTXHGXUDQWHODGHVHFDFLyQ
P. putida KT2440 sufri daos en su membrana y para contender con esa
situacin entr en una fase viable no cultivable donde la bacteria no se
divide en los medios de cultivo convencionales. Despus aparentemente la
bacteria repara ligeramente su membrana durante la rehidratacin prolongada y vuelve a entrar en una fase viable cultivable con una divisin celular
activa. En cualquier momento las bacterias no dejaron de estar metablicamente activas, siempre y cuando estn en condiciones hidratadas.
Una tercera forma mediante la cual P. putida KT2440 u otra bacteria
sensible podra soportar periodos largos de desecacin sera adquiriendo
sustancias protectoras durante la interaccin con otros microorganismos
protectores. Al respecto se estn desarrollando experimentos en cointe20

DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

raccin entre bacterias resistentes y sensibles que puedan aportarnos datos

TXHDSR\HQHVWDWHRUtD/RVHVWXGLRVGHGHVHFDFLyQGHEDFWHULDVEHQpFDV
nos pueden ayudar a comprender cmo podemos potenciar la resistencia
de aquellas que deseamos resistan en interaccin con semillas de plantas
en espacios de tiempo de baja disponibilidad de agua, pero tambin nos
podran aportar conocimiento de cmo se pueden desarrollar inoculantes ms estables y con vida de anaquel mayor antes de su aplicacin en
agricultura o bioremediacin, a pesar de pasar periodos prolongados en
condiciones anhidrobiticas.
FIGURA 8
9LVXDOL]DFLyQGHEDFWHULDVPHGLDQWHPLFURFRSLDGHXRUHVFHQFLD
Arriba: clulas de P. putida KT2440 antes de la desecacin teidas con el kit live/dead.
Abajo: clulas bacterianas con metabolismo activo expresando la protena verde
XRUHVFHQWHDQWHVGHODGHVHFDFLyQ

21

Seminario de Investigacin y Cultura OSD 2011

AGRADECIMIENTOS
Mi agradecimiento a los organizadores del SIC-OSD 2011, es una actividad
muy acertada que espero sigan fomentando en los aos siguientes. Agradezco al CONACYT ,&% SRU HO DSR\R UHFLELGR SDUD
continuar el desarrollo del proyecto de investigacin y las becas otorgadas a estudiantes de posgrado. A la VIEP-BUAP por apoyar parte de esta
investigacin becando a estudiantes de licenciatura. Agradezco a todos
los estudiantes de mi grupo actual y a los que han egresado o dejado el
laboratorio por causas de fuerza mayor pero que han contribuido con su
granito de arena en estos trabajos. En especial quiero hacer mencin de los
siguientes estudiantes por sus contribuciones en conocimiento de frontera en nuestro grupo: Yolanda Elizabeth Morales-Garca, Ligia Catalina
Muoz-Arenas, Laura Abisa Pazos-Rojas, Andrs Corral-Lugo, Osvaldo
Rodrguez-Andrade, Laura Hernndez-Tenorio, Dalia Jurez-Hernndez,
Alma Anglica Poceros-Coba y Dalia Molina Romero.
Finalmente quiero agradecer a dos colaboradores externos que han
apoyado incondicionalmente a miembros de mi grupo de investigacin:
GRFWRU)DELR2OLYDUHV%UDVLO\-XDQ/XLV5DPRV(VSDxD
REFERENCIAS RECOMENDADAS
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A Pseudomonas putida cardiolipin synthesis mutant exhibits increased sensitivity to drugs related to transport functionality, en
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DUQUE E., J. J. RODRGUEZ-HERVA, J. DE LA TORRE, P. DOMNGUEZ-CUEVAS,
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MARN-CEVADA V., MUOZ-ROJAS J., CABALLERO-MELLADO J., MASCARAESPARZA M. A., CASTAEDA-LUCIO M., CARREO-LPEZ R., ESTRADA
22

DESECACIN DE BACTERIAS BENFICAS Y SU IMPACTO EN AGROBIOTECNOLOGA

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