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Asimilacin del nitrgeno y del azufre

JOS MARA MALDONADO

1. Introduccin. 2. Asimilacin del nitrgeno. 3. Asimilacin del azufre.

1. INTRODUCCIN
El nitrgeno y el azufre constit uyen dos de los elementos
qumicos ms abundantes en la materia viva (vase el
Captulo 6) . La razn N/S en la biomasa vegetal es de alrededor de 20, que es, aproximadamente, la proporcin de
ambos elementos en la s molculas de protena. Todos los
aminocidos contienen nitrgeno, mientras que el azufre
se encuentra en los aminocidos cistena y metionina.
Ambos elementos se hallan presentes, adems, en otras
importantes biomol culas. Los animales, a diferencia de
las plantas, no son capaces de usar formas inorgnicas de
nitrgeno o de azufre, por lo que necesitan ingerir formas orgnicas de dichos elementos, principalmente como
protenas.
El nitrgeno y el azufre inorgnicos presentes en los
suelos experimentan cambios en sus estados de oxidacin
como consecuencia de la actividad metablica de diversos
grupos de bacterias. En los suelos aireados se encuentran
principalmente en sus formas ms oxidadas, esto es, como
nitrato (NO; ) y como su lfato (S02-). Las plantas tienen la
capacidad de reducir el nitrato y el su lfato a amonio (NH4)
Y.a sulfuro (H 2S) o tiol (-SH), respectivamente, e in corporar
dIchas formas reducidas a molculas org nica s. Estos procesos se denominan asimilacin del nitrato y asimilacin deL
suLfato. Las algas, las cianobacterias (algas verde-azuladas)
y muchas bacterias y hongos tambin asimilan el nitrato
~. el sulfato. Existen otros grupos de bacterias -anaerod~~s e~trictas- que utilizan el nitrato o el sulfato, en lugar
. OXIgeno, como aceptores terminales de electrones en la
OXIda Clon
'. de los sustratos orgnicos, con lo que producen

formas reducidas de nitrgeno o de azufre. En estos casos,

la reduccin del nitrato y del sulfato no tiene una finalidad
asimiladora, sino respiratoria.

2. ASIMILACIN DEL NITRGENO

Los dos procesos biolgicos por los que el nitrgeno inorgnico es convertido en nitrgeno orgnico son la fijacin
del nitrgeno molecular (N 2) y la asimilacin deL nitrato.
Aunque el gas di nitrgeno presente en la atmsfera constituye el mayor reservorio de nitrgeno inorgnico disponible,
s lo ciertos procariotas - en estado libre o en asociacin
co n algunas plantas (principalmente, leguminosas)-, son
capaces de fijar y asimilar dicha forma de nitrgeno (vase
el Captulo 16). La asimi laci n del nitrato consta de tres
etapas: 1) absorcin; 2) reduccin del nitrato a amonio; y
3) incorporacin del amonio a esqueletos carbonados para
la s ntesis de aminocidos, proceso que re ci be el nombre
especfico de asimilacin deL amonio.

2.1. El nitrato es transportado activamente

al interior de la clula mediante
un simporte con protones
La absorcin del nitrato del medio por las plantas disminuye a bajas temperaturas, en la anaerobiosis, y en
presencia de inhibidores metablicos, lo que demuestra
que es un transporte activo, esto es, dependiente de la
energa metablica. La absorcin muestra una tpica ci287

288

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

ntica de saturacin de Michaelis-Menten, lo que prueba

que su transporte a travs del plasmalema es facilitado
por una permeasa o protena transportadora (vase el
Captulo 7). Muchas especies vegetales muestran ms de
un sistema de transporte. Bsicamente se han descrito
dos: uno de alta afinidad y otro de baja afinidad. El sistema de transporte de alta afinidad (Km para el nitrato
entre 20 y 100 f.lM) se satura a concentraciones externas
de nitrato inferiores a 1 mM y es inducible por el propio
nitrato. Algunas especies poseen un segundo sistema
de transporte de alta afinidad que, a diferencia del anterior, es constitutivo y muestra mayor afi nidad por el
nitrato (K m < 20 f.lM) Y menor Vmo, de transporte. Con
concentraciones externas de nitrato superiores a 1 mM,
opera un sistema de transporte de baja afinidad. ste
se distingue del de alta afinidad en que su cintica de
transporte es lineal, y menos sensible a la temperatura
ya los inhibidores metablicos, lo cual sugiere que est
constituido por canales inicos.
Tomando como base el anlisis de los cambios transitorios que experimenta el potencial elctrico del plasmalema
al aadir nitrato a las clulas, y la dependencia de dichos
cambios del pH externo, se ha propuesto que el nitrato es
transportado al interior de la clula mediante un simporte
con protones con una estequiometra de 2 WjN0 3 (Fig.
15-1). El gradiente de potencial electroqumico de protones
a travs del plasmalema, necesario para sustentar el transporte activo de nitrato, es generado y mantenido por una WATPasa que bombea protones hacia el exterior con la energa
de hidrlisis del ATP.
El nitrato induce la sntesis de su propia protena transportadora. Adems, el transporte se encuentra regulado negativamente por la presencia de amonio o de otras formas
reducidas de nitrgeno, como la glutamina. Una elevada
concentracin interna de nitrato tambin ejerce un control
negativo sobre su propia absorcin.

Medio
externo

2W

'"
E

ro'"
~

a::'"

ADP + P;

Citosol

Figura 15-1. Mecanismos de transporte del nitrato y del

sulfato a travs del plasmalema. El gradiente de potencial
electroqumico de protones requerido para el transporte activo
de ambos aniones es generado por una H'ATPasa que, con la
energa del ATP, bombea protones al exterior.

2.2. La reduccin del nitrato a amonio

tiene lugar mediante dos reacciones
consecutivas catalizadas por las enzimas
nitrato reductasa y nitrito reductasa
En una primera reaccin, el nitrato es reducido a nitrito por
la enzima nitrato reductasa (NR). Dicha reaccin requiere
dos electrones suministrados por una molcula de piridnnucletido reducido. A continuacin, el nitrito es reducido a
amonio por la nitrito reductasa (NiR), en una reaccin que
requiere seis electrones donados por la ferredoxina reducida
(Fd rect ). La reduccin del nitrato a amonio consume, pues, un
total de ocho electrones:

nitrito reductasa

nitrato reductasa

(+5) NO;-

(+3)NO z

~ (-3)NH~

NADH

NAD'

6 Fd,ect

6 Fd o,

+W

+ H20

+8 W

+ 2 H20

El poder reductor requerido se genera en las reacciones

lumnicas de la fotosntesis o en la gluclisis y respiracin
(vase el apartado 2.5).

2.2.1. Nitrato reductasa

El poder redudor para la reduccin del nitrato en algas y plantas
superiores es suministrado por piridn-nucletidos reducidos,
siendo el NADH la forma ms comn. Algunas plantas, como la
cebada, poseen dos isoformas de NR, una que es especfica de
NADH y otra que puede usar tanto NADH como NADPH como
donador de eledrones. La NR se localiza en el citosol, aunque
en algunas especies se ha descrito que parte de la enzima tambin se puede encontrar dbilmente unida al plasmalema o a la
membrana externa del cloroplasto.
La NR es un homodmero con una masa molecular de
200-230 kDa. Cada una de las dos subunidades (100-115
kDa) contiene FAD, hemo (citocromo b557 ) y un cofador de
molibdeno (MoCo) como grupos prostticos redox. El MoCo
es un complejo entre un tomo de molibdeno y una pterina
fosforilada (Fig. 15-2). Dicho cofactor tambin se encuentra
presente en las enzimas sulfito oxidasa, que participan en
la destoxificacin del exceso de azufre; la xantina deshidrogenasa, esencial en la degradacin de purinas; y la aldehdo
oxidasa, que cataliza la etapa final de la biosntesis del cido
abscsico (Mendel, R.F. y Hansch, R. Journal of Experimentol
Botany 53:1689-1698, 2002). El anlisis de la secuencia de
aminocidos de la NR, y su comparacin con las secuencias
conocidas de otras protenas, han permitido identificar en la
molcula tres fragmentos funcionales de 28 kDa, 14 kDa Y
75 kDa que se corresponden con los dominios del FAD, hern o
y MoCo, respectivamente. Los tres dominios estn unidoS
entre s por regiones bisagras hidrfilas que son muy suscep'
tibles al ataque de las proteasas (Fig. 15-2). Los electrones
suministrados por el NADH son transportados, a travs de

CAPTULO

75kDa

Figura 15-2. A. Modelo estructural de la nitrato reductasa

de plantas. La enzima consta de dos subunidades idnticas,

cada una de las cuales posee tres regiones, correspondientes
a los dominios del FAD, el hemo y el cofactor de molibdeno
(MoCo) , respectivamente, que se encuentran unidas entre s por
regiones bisagras sensibles a las proteasas. B. Estructura del
cofactor de molibdeno (MoCo) de la nitrato reductasa.

las coenzimas redox FAD, hemo y MoCo, hasta el nitrato que,

como resultado, es reducido a nitrito:

NAW/

FAD

Hemo

NO:;

MoCo

NOz-

2.3. La asimilacin del nitrato est regulada

por la luz y por los metabolitos
nitrogenados y carbonados
Diversas seales regulan la sntesis y la actividad de la NR y
la NiR de forma coordinada. Los tejidos verdes de la planta
poseen mucha ms actividad NiR que NR, probablemente con
el fin de asegurar que todo el nitrito producido por la NR sea

ON A NR

e _ G luta m i n a - e l
Tran scripcin
0Transcripcin
El)
N 3
El)
Azcares
l
mRNA NR '\./v
pfr
'\./v mRNA NiR
FP
Traduccin

6 Fd ox

NOZ-

Traduccin

VV'

lJV Apoproteina NiR

Pfr

,1

sirohemo

NH ;'

1,

i
i

Grupos
prostticos

Pr

[J
Activa
(LUZ)

ATP~

ADP

t P;

Azcares

Inactiva
(OSC URIDAD)

Proteasas

lJVPre-NiR

LU Z

~P

La NiR cata liza la reduccin del nitrito a amonio en una reaccin

de seis electrones que son suministrados por la ferredoxina
reducida. Se encuentra en los cloroplastos de las hojas y
en los plastidios de las races. La NiR de las plantas es un
monmero con una masa molecular de 60-63 kDa; co ntiene
un centro sulfofrrico del tipo [4Fe-4S] y un sirohemo como
grupos prostticos redox involucrados en la transferencia de
los electrones de la ferredoxina reducida al nitrito:

[4Fe-4S]

Grupos
prostticos

H, O

2.2.2. Nitrito reductasa

'XXX DNA NiR

'XXX

Apoproteina NR

La NR es codificada por un nico gen. Las dos isoformas

de NR existentes en la ce bada son codificadas por genes
estructurales distintos. La biosntesi s del MoCo y su posterior ensamblaje a la apoenzima estn controlados por entre
tres y seis genes (segn la especie), que son esenciales, por
tanto, para la formacin de NR activa.

6 Fd,ed

289

ASIMILACIN DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

El sirohemo es una tetrahidroporfirina de hierro del tipo

de la isobacterioclorina que tambin se encuentra en la enzima sulfito reductasa (vase el apartado 3.2). La NiR y la
sulfito reductasa poseen en comn, asimismo, la caracterstica de que son enzimas que cata liza n reacciones de reduccin que suponen la transferencia de seis electrones.
Al igual que otras muchas protenas cloroplsticas, la
NiR es codificada por un gen nuclear y sintetizada en el
citosol en forma de una protena precursora que posee en su
extremo N-terminal un fragmento de unos 30 aminocidos
que co nstituye el pptido de trnsito. Dicho pptido acta
como seal de paso a travs de la envoltura del cloroplasto,
escindindose posteriormente y liberndose en el interior la
protena madura (Fig. 15-3).

14kDa

28 kDa

NADH

15:

lJV
[]lliJ

FP

Activa

FOTOsiNTESIS

Deg rad acin

Figura 15-3. Mecanismos de regulacin de la nitrato reductasa

y de la nitrito reductasa. Dichos mecanismos comprenden la

modulacin positiva o negativa de la transcripcin gnica por

diversos metabolitos y seales, as como la regulacin de la
actividad de la nitrato reductasa por fosforilacin reversible en
respuesta a los cambios luz/oscu ridad. FP: factor plastfdico;
NiR: nitrito reductasa; NR: nitrato reductasa; Pi: fosfato
inorgnico; PI: protena inhibidora; Pr y Pfr: formas inactiva y
activa, respectivamente, del jitoCTomo.

290

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

reducido, evitando as su acumulacin y los consiguientes

efectos txicos. El nitrato es la principal seal que controla
la sntesis de NR y de NiR. Ambas enzimas son inducibles
por el nitrato, aunque algunas especies tambin poseen
formas constitutivas de NR y NiR. Tras la adicin de nitrato
se produce una rpida activacin de la transcripcin de los
genes de NR y de NiR (Fig. 15-3).
Aunque el nitrato es el inductor primario de la expresin
de la NR y la NiR, la luz incrementa la transcripcin de
ambos genes y el nivel de las protenas que codifican. El
efecto estimulador de la luz est mediado por el fitocromo
(vase el Captulo 23), as como por productos de la fijacin fotosinttica del CO 2 , como lo sugiere el hecho de que
la adicin de azcares (glucosa, fructosa o sacarosa) a hojas
mantenidas en oscuridad tambin promueve la induccin de
NR y NiR. La expresin de los genes de la NR y la NiR exige,
adems, que los cloroplastos sean funcionales, habindose
propuesto que un componente originado en los cloroplastos
(factor plastidico), de naturaleza an desconocida, acta
como seal necesaria para que el nitrato y la luz puedan
activar la transcripcin.
La acu mulacin de metabolitos nitrogenados, como la
glutamina o el glutamato, que son productos finales de la
ruta asimiladora del nitrgeno, reprime la sntesis de NR y
NiR. Todo ello sugiere que ambas enzimas tambin se re gulan por la proporcin entre azcares y aminocidos, lo
que constituye una prueba de que el metabolismo del nitrgeno y el del carbono estn coordinados y regulados entre
s (vase el apartado 2.5). En los tejidos vegetales existen
proteasas con una alta especificidad por la NR, por lo que
el nivel de esta enzima dependera de sus tasas relativas de
sntesis y degradacin.
Los mecanismos de regulacin de sntesis y degradacin antes descritos son procesos que pueden tardar horas
en producirse. La NR, sin embargo, est sujeta, adems, a
un mecanismo de regulacin postraduccional que origina
cambios rpidos (en minutos) y reversibles de su actividad
-activacin e inactivacin- en respuesta a la luz y a la
oscuridad. Dichos cambios se producen como resultado de una
fosforilacin reversible de la proteina (Fig. 15-3). En la oscuridad, la NR es fosforilada con ATP, en un residuo de serina,
por una protena quinasa especfica. A la enzima fosforilada
se une entonces, en presencia de Mg 2 > o de Ca 2+, una protena
inhibidora de la familia de las protenas reguladoras 14-3-3,
originando la inactivacin de la NR. En la luz, el complejo NR
fosforilada-protena inhibidora es desfosforilado por una protena fosfatasa del tipo 2A, lo que produce la disociacin de la
protena inhibidora y la consiguiente reactivacin de la NR. La
NR fosforilada, unida a la protena inhibidora 14-3-3, es muy
sensible a la accin de las proteasas, por lo que en condiciones
de oscuridad prolongada es degradada (Kaiser, W.M. y Huber,
S.e. Joumal ofExperimental Botany 52:1981-1989,2001).
Es interesante mencionar el hecho de que la actividad de
la sacarosa-fosfato sintasa, enzima clave en la biosntesis
de sacarosa en las hojas, tambin se regula como respuesta
a la luz y a la oscuridad mediante un mecanismo de fosforilacin reversible similar al de la NR. Esta regulacin pos-

traduccional conjunta de ambas enzimas permite a la planta

paralizar, de forma rpida y transitoria, tanto la asimilacin
del nitrgeno como la del carbono cuando, como sucede en
la oscuridad, cesa la formacin fotosinttica del ATP Y del
poder reductor requeridos para ambos procesos.

2.4. El amonio generado en distintos procesos

metablicos se asimila a travs del ciclo
GS-GOGAT para la sntesis de aminocidos
En los tejidos vegetales se produce amonio en diversos procesos
metablicos, entre los que destacan los siguientes (Fig. 15-4):
1. Reduccin del nitrato y fijacin deL nitrgeno molecu-

lar. El conjunto de ambos procesos se denomina asimilacin primaria del nitrgeno.

2. Fotorrespiracin. En la conversin de glicina a serina en
la mitocondria se libera amonio que, en su mayor parte,
es reasimilado en el cloroplasto con un elevado coste
energtico (vase el Captulo 12). La cantidad de amonio
que se genera en los tejidos verdes de la planta por fotorrespiracin es hasta 10 veces superior a la producida
por reduccin del nitrato. Dicho amonio es rpidamente
reasimilado para evitar su acumulacin txica y la prdida de nitrgeno en el tejido.
3. Catabolismo de proteinas. Durante la germinacin de la
semilla y en la senescencia foliar, el nitrgeno proteico
es movilizado mediante la hidrlisis de las protenas de
reserva con el fin de suministrar nitrgeno orgnico a los
rganos en crecimiento. Gran parte de los aminocidos
resultantes de dicha hidrlisis son convertidos en glutamato, que es desaminado por accin de la glutamato
deshidrogenasa (GDH), produciendo amonio:

Coo-

cooI

I
HJN' -

C-

CH 2 + NAD(P)'

CH 2

I
cooGlutamato

c=o

GDH

CH z + NH + NAD(P)H

CH 2

COO-

2-Oxog luta rato

La GDH tambin cata liza la reaccin en sentido opuesto, esto es, sintetizando glutamato mediante la aminacin
reductiva del 2-oxoglutarato. De hecho, la reaccin en este
sentido fue considerada durante muchos aos como la ru~
de asimilacin del amonio en las plantas. Sin embargo, e
papel de la GDH en la asimilacin del amonio fue cuestionado cuando, ms tarde, se descubri el ciclo GS-GOGAT (vase
el siguiente prrafo). Se ha encontrado que la GDH se induce
de forma acusada en las plantas expuestas a altas concentraciones de amonio, lo que sugiere que, en dichas condiciones,

CAPTULO

ISNTES IS DE PROTENAS

'"

/:

'"

Ureldos

~ l

Glicina

'.

Asparraglna :

291

ASIMILACIN DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

ITRANSPORTE I
/ / .( ~" "" ,. .

IFOTORRESPIRACIN I

.
REDUCCION NODE NITRATO
3 -

15:

~ A~S G,utLI{JE2_0xog,utaratOjGAml ~OCldOS

NO-

NW

,-

tGDH

GS

GOGAT

Glutamato

AT

Glutamato

Oxocldos

I
ICICLO GS/GOGAT I.
Glutamato'

N,

I FIJACiN DE NITRGENO I

t
Figura 15-4. Procesos metablicos que generan amonio en los tejidos vegetales, y su asimilacin y transporte. AS: asparragina sintetasa;
AT: aminotransferasas; GDH: glutamato deshidrogenasa; GOGAT: glutamato sintasa; GS: glutamina sintetasa.

la enzima puede tener una actividad asimiladora actuando

como sistema de destoxificacin del amo nio.
El amonio directamente absorbido por la planta, o el
producido metablica mente en los tejidos, es asimi lado o
reasimilado, por la actuacin en tndem de las enzimas glutamina sintetasa (GS) y glutamato sintasa (GOGAT: glutamina: 2-oxoglutarato amido-tra nsferasa), que co nstituyen
el denominado ciclo GS-GOGAT (Figs. 15-4 Y 15-5) . En primer lugar, la GS cata Li za La incorporacin, dependiente de
ATP, deL amonio en una molcuLa de gLutamato para formar

gLutamina . A co ntinuacin, La GOGAT cata Liza La transferencia reductiva deL grupo amido de la gLuta mina aL ( -2 del
2-oxogLutarato, producindose dos moLcuLas de gLutamato
(Fig. 15-5). De Las dos moLcuLas de glutamato formadas ,
una de ellas es reciclada, y la segunda transfiere su grupo
amino a diversos oxocidos, en reacciones cataLizadas por
Las aminotransferasas (transaminasas), para la sntesis de
Los restantes aminocidos.

Genes
COO-

H3 N' -C- H

CH , _- -

_'" c=o

__ -

CH,

~----

/ /---- CIH,
.~

' -~C=O

A~P

Fd,cd o NADH
(2 e- )

GLU TAMINA

CIH,
COO-

2-0XOG LUT

~* ~
ATP

GLUTAMATO

g/n-I!

g /n o;'

g/n-

pre-

H3 N '-C- H

coo

I
~C-H
I

coo-

CH,

CH,
I

COO

~igura 15-5. Asimilacin del amonio por el ciclo GS-GOGAT.

S: glutamina sintetasa; GOGAT: glutamato sin tasa.

Polipptidos
(subunidades)

G)

(jJ)

j/j~j

tE

tE

GS n ,
GS,/GS,
(hoja/raz) (ndu lo)

GLUTAMAT(

COO-

I
I
CH,
I
CH,
I

g/n-y:

coo-

tE

GS",
(ndu lo)

~ro
Ci.
2
o

tE
GS,
(hoja)

Figura 15-6. Genes e isoformas de glutamina sintetasa (GS)

en Phaseolus vulgaris. Las distintas isoformas de GS son
codificadas por una familia de genes nucleares. Los genes a, B
y y codifican los polipptidos que constituyen las subunidades
de las isoformas citoslicas de GS. El gen gln-b codifica un
polipptido precursor (pre-b) que posee en su extremo Nterminal un pptido de trnsito de unos 50 aminocidos que,
al escindirse, libera en el interior del cloroplasto el polipptido
Ii, que constituye la subunidad integrante de la isoforma
cloroplstica de GS. (Adaptado de B. G. Forde y J. V. Cullimore,
en: Oxford Surveys of Plant Molecular and Cel! Biology. B. J.
Miflin (ed.). Oxford University Press, Oxford, pp. 246-296, 1989.)

292

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

Los estudios con plantas mutantes deficientes o con actividad reducida de GS o de GOGAT, el empleo de inhibidores
especficos de dichas enzimas, y los experimentos de marcaje
tras la aplicacin de 15NH4+ han permitido establecer que el
ciclo GS-GOGAT constituye la principal ruta de asimilacin
del amonio en las plantas. Obsrvese que la asimilacin de
una molcula de amonio para la sntesis neta de una molcula de glutamato consume un ATP y dos electrones proporcionados por la ferredoxina reducida o por la NADH. Por tanto,
el proceso global de asimilacin de una molcula de nitrato
en glutamato consume un total de diez electrones.
El nitrgeno asimilado, o reasimilado, puede ser tambin destinado al transporte a otros rganos. Las amidas
gLutamina y asparragina, cuyas molculas contienen dos
tomos de nitrgeno, son los aminocidos preferentemente
utilizados por la planta como compuestos transportadores
de nitrgeno a larga distancia (Fig. 15-4). En las leguminosas de origen tropical y subtropical, el nitrgeno fijado y
asimilado en los ndulos es transportado mayoritariamente
en forma de ureidos (vase el Captulo 16).

2.4.1. Glutamina sintetasa

La gLutamina sintetasa (GS) de las plantas es una protena
octamrica con una masa molecular de 320-360 kDa, y posee
una alta afinidad por el amonio (Km = 3-5 [lM). Existen varias
isoformas de GS con diferente composicin de subunidades
y distinta localizacin subcelular. Los diferentes polipptidos o subunidades que componen las diversas isoformas de
GS son codificados por una famiLia de genes nucleares. En
la Figura 15-6 se muestra la familia de genes GS de Phaseolus y sus productos de transcripcin. Cada gen codifica una
subunidad diferente de entre 40 y 48 kDa. Las subunidades
se ensamblan posteriormente para formar homooctmeros o
heterooctmeros.
En las hojas se encuentran dos isoformas de GS: GS1,
que se localiza en el citosoL, y GS2, que se encuentra en
los cLoropLastos. La GS2 (cloroplstica) es la isoforma predominante en las hojas yen los cotiledones verdes, en donde participa en la asimilacin del amonio producido en la
reduccin del nitrato y en la reasimilacin del amonio que
se libera durante la fotorrespiracin (vase el Captulo 12).
Por el contrario, en los tejidos etiolados y en las hojas y cotiledones senescentes, en los cuales tiene lugar una intensa
actividad proteoltica, los niveles de GSl son superiores a
los de GS2 . En estos casos, la funcin de la GS citoslica sera la de reasimilar el amonio liberado en el catabolismo de
los aminocidos para formar glutamina y asparragina para el
transporte de nitrgeno a los rganos en crecimiento (vase
el apartado 2.4.3). Este posible papel de la GSl viene apoyado por el hecho de que los genes que codifican dicha isoforma muestran una elevada expresin en las clulas acompaantes del floema. En la raz y en los ndulos radicales de
las leguminosas noduladas han sido identificadas isoformas
citoslicas de GS especficas de dichos rganos. La isoforma
de la raz (GS,) es la encargada de asimilar en dicho tejido el

amonio absorbido del suelo y el producido por la reducci

del nitrato, mientras que la isoforma de los ndulos (GS )n
cuya sntesis se induce durante el proceso de infeCcin" ~
el desarrollo del ndulo, se encarga de asimilar el amonio
producido por la reduccin del nitrgeno molecular (vase
el Captulo 16).
La regulacin de la GS se ejerce principalmente sobre la
transcripcin diferenciaL de los distintos genes de la fami.
lia. En efecto, dichos genes se expresan de forma distinta
segn el tipo de clula, el grado de desarrollo del tejido, y
en respuesta a factores nutricionales y ambientales. La luz
activa en las hojas la transcripcin del gen que codifica el
polipptido que compone la GS cloroplstica, promoviendo
as su sntesis. Al igual que sucede con la NR y la NiR, el
efecto positivo de la luz sobre la induccin de la GS2 se ejer.
ce a travs del fitocromo y de la sacarosa u otros azcares
fotosintetizados. La mxima induccin de la GS2 requiere,
adems, la funcionalidad de los cloroplastos. El nitrato y
el amonio tambin estimulan su sntesis. En la oscuridad
y durante la senescencia foliar, se incrementa la sntesis d~
la GSl en detrimento de la GS2, por lo que en tales condiciones la isoforma citoslica sera la encargada de sintetizar
glutamina (Tobin, A.K. y Yamaya, T. Joumal of Experimental
Botany 52:591-604, 2001).

2.4.2. Glutamato sintasa

La gLutamato sintasa (GOGAT) cataliza la transferencia reductiva del grupo amido de la glutamina al 2-oxoglutarato
para producir dos molculas de glutamato (Fig. 15-5). En
las plantas superiores existen dos formas de GOGAT, una dependiente de ferredoxina (Fd-GOGAT) y otra dependiente de
NADH (NADH-GOGAT) como donadores de electrones.
La Fd-GOGAT es una protena monomrica con una masa
molecular de entre 150 y 180 kDa, segn la especie. El anlisis de la secuencia de aminocidos de la protena revela la
existencia de una regin de unin de FMN, lo que sugiere
que podra tratarse de una flavoprotena. La Fd-GOGAT es la
isoforma ms abundante en los tejidos verdes, y se localiza
en los cloroplastos. All, en colaboracin con la GS cloroplstica, participa en la asimilacin primaria del amonio yen la
reasimilacin del amonio fotorrespirado. La luz, a travs del
fitocromo, es la principal seal que induce la sntesis de la
Fd-GOGAT en las hojas. Como ocurre con otras enzimas de la
asimilacin del nitrgeno (NR, NiR Y GS2), la sacarosa indu
ce la actividad Fd-GOGAT en la oscuridad. La enzima tambin
aumenta como respuesta al nitrato y al amonio.
La NADH-GOGAT es un monmero con una masa molecUlar de, aproximadamente, 200 kDa, que tambin posee un sitio de unin a FMN. En las hojas, los niveles de NADH-GOGAT
son considerablemente inferiores a los de Fd-GOGAT. En cambio, es la isoforma ms abundante en los tejidos no fotos in tticos, tales como races, ndulos o los tejidos etiolados. En
la raz participa en la asimilacin primaria del nitrgeno. la
NADH-GOGAT de los ndulos de las leguminosas desempea
un papel importante en la asimilacin del amonio producidO

CAPTULO

2.4.3. Sntesis de aspartato y asparragina

Tras su asimilacin inicial en glutamina y glutamato, el nitrgeno es incorporado a otros aminocidos mediante reacciones de transaminacin catalizadas por las enzimas denominadas transaminasas o aminotransferasas. Un ejemplo
de ellas es la aspartato aminotransferasa, que cataliza la
transferencia reversible del grupo amino del glutamato al
oxalacetato, produciendo 2-oxoglutarato y aspartato (Fig.
15-7). El aspartato constituye uno de los productos iniciales
de la asimilacin del nitrgeno y desempea un papel importante en la transferencia de nitrgeno y de carbono entre
compartimientos celulares y entre clulas, como sucede en
ciertas especies de plantas C4 (vase el Captulo 12).
El aspartato es tambin el precursor metablico de la asparragina. Este aminocido no slo forma parte de las protenas, sino que tambin desempea una importante funcin
en el transporte y el almacenamiento del nitrgeno, como lo
demuestra el hecho de que constituye uno de los compuestos nitrogenados ms abundantes en la disolucin del floema
de la mayora de las plantas, incluidas las leguminosas de
origen templado (amdicas). La asparragina, al igual que la
glutamina, posee en su molcula dos tomos de nitrgeno:
un Namino y un N amido. Sin embargo, la primera contiene
cuatro tomos de carbono y la segunda, cinco. Ello convierte
a la asparragina en un aminocido transportador de nitrgeno ms econmico que la glutamina en cuanto a gasto de
carbono, lo cual es de gran importancia para la planta en
situaciones de dficit de carbono.

COO-

I
@-C-H
I
CH 2
I
CH 2
I

coo-

COO-

I
I
CH 2
I
CH 2
I

Glutamina

I
I
CH 2
I

+ @ - C -H

coo-

cooOxalacetato

coo-

2-0xog lutarato

Aspartato

COOcoo-

H3 W-C-H

@-c=o

coo-

c=o

coo-

I
I
CH 2
I
CH 2
I

293

COO-

Aspartato
aminotransferasa

I
C= O
I
CH 2
I

Glutamato

DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

La sntesis de asparragina est catalizada por la enzima

asparragina sintetasa (AS), la cual transfiere el grupo amido
de la glutamina al aspartato para producir glutamato y asparragina. La reaccin requiere la hidrlisis de ATP hasta AMP y
pirofosfato (Fig. 15-7). En las bacterias existen dos isoformas
de AS, una dependiente de glutamina y otra dependiente de
amonio como donadores del grupo amido. Sin embargo, la AS
de las plantas utiliza preferentemente glutamina. La afinidad
de la enzima por la glutamina es mucho mayor que por el amonio. Por otra parte, la AS de las plantas posee en su molcula
el dominio de unin a la glutamina caracterstico de todas las
amidotransferasas dependientes de glutamina. No obstante,
en situaciones de elevadas concentraciones del amonio en el
tejido, la AS podra actuar como un sistema de destoxificacin
de amonio sintetizando asparragina como reserva temporal de
nitrgeno. La AS es una enzima citoslica que, al igual que la
GS1, tambin se expresa en las clulas acompaantes del floema, lo que sugiere que ambas trabajan de forma concertada
en la sntesis de asparragina para el transporte de nitrgeno
a larga distancia.
Los niveles de asparragina en los tejidos, as como la
expresin del gen AS, aumentan en situaciones que originan
un dficit de carbono en la planta, como, por ejemplo, en la
oscuridad prolongada . Dichos aumentos tambin se observan
en procesos tales como la germinacin, la senescencia foliar,
la infeccin por patgenos o estados de estrs, en los que se
incrementan la protelisis y el catabolismo de aminocidos,
originando una acumulacin de amonio en los tejidos. La estimulacin de la sntesis de asparragina en tales situaciones
servira para retirar y almacenar dicho amonio, evitando sus
efectos txicos, as como para exportar el nitrgeno movilizado a otras partes de la planta.
La luz reprime la expresin del gen AS a travs del fitocromo y de los azcares fotosintetizados (por ejemplo, sacarosa). El efecto represor de la sacarosa es contrarrestado por

la nitrogenasa, como se infiere del hecho de que su snporis se incrementa durante el desarrollo del ndulo de forma
te~alela a la sntesis de nitrogenasa, leghemoglobina y GS
~~dular (vase el Captulo 16).

15: ASIMILACIN

I
I

H3 W - C- H
CH 2

cooAspartato

I
I

coo-

H W - C- H
CH 2

(
ATP

"

AMP
+
PP;

I
CH 2
I

COOGlutamato

I
I
CH 2
I

H3 W - C-H

@-c=o
Asparragina

Figura 15-7. A. Sntesis de aspartato mediante la transferencia del grupo amino del glutamato al oxalacetato, catalizada por la aspartato
aminotransferasa. B. Sntesis de asparragina por transferencia del grupo amido de la glutamina al aspartato, catalizada por la asparragina
sintetasa.

294

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

los aminocidos, lo que sugiere que la AS est sujeta a una

regulacin metablica por la proporcin relativa de metabolitos carbonados y nitrogenados, o lo que es lo mismo, por
la razn carbono/nitrgeno orgnicos (Herrera-Rodrguez,
M.B., Maldonado, J.M . y Prez-Vicente, R. Plant Physiology
and Biochemistry 42:511-518,2004).

son proporcionados por la oxidacin de carbohidratos que,

en ltimo trmino, son formados por reduccin fotosinttica
del carbono. La asimilacin del nitrgeno es, por tanto
un proceso ntimamente conectado al metabolismo del car:
bono. En la Figura 15-8 se ilustra n esquemticamente dichas
interconexiones.
La reduccin del nitrato a amonio y su posterior asimilacin en glutamato requieren diez electrones, de los cuales
dos so n usados en el citosol como NADH por la NR, y los
ocho restantes son utilizados en el cloroplasto en forma de
ferredoxina reducida (seis por la NiR y dos por la Fd-GOGAT).
En las hojas, el NADH necesa rio para la reduccin del nitrato
a nitrito proviene, en su mayor parte, del NADPH generado
fotosintticamente en los cloroplastos, y que es exportado al
citosol mediante las lanzaderas triosa fosfato-fosfoglicerato
y malato-oxa lacetato . En los tejidos no fotosintticos, como
la raz, el NADH requerido por la NR es producido por el ciclo
de los cidos tri carboxlicos en la mitocondria, y exportado
al citosol mediante la lanzadera malato-oxalacetato. En las
hojas, la ferredoxina reducida que precisan la NiR y la Fd-GOGAT

2.5. El metabolismo del nitrgeno y

el del carbono estn interconectados
y se regulan reciprocamente para
mantener la adecuada proporcin
interna e/N
La asimilacin del nitrgeno por las plantas requiere poder
El poder reductor
y el ATP pueden ser suministrados por las reacciones lumnicas de la fotosntesis, o por la gluclisis y la respiracin
(vanse los Captulos 10 y 14) . Los esqueletos ca rb onados
reductor, ATP y esqueletos carbonados.

Almidn

~~

e
Triosas-P

Tri osas-P

::t Hexosas-P ::t ::t

I Sacarosa I

"---PEP - ------.,.

Pir

,HCOj

Citr

Icitr

VD

CLOROPLASTO

OG

Asp

Glu
(2)Glu

Gln

(@,, '

ATP

ADP

~;

I2IGlo

Glu

@GJ

OG

i? "\
NAD' NADH
@

{
IAsn l

Gln

(2)Gln-{

ATP ADP

P;

Gln

Glu
ATP

AMP + PP;

(2) NO i

NAD+ ~
NADH

-1 CD

CITOSOL

(2)NO j
(2)NO j

Figura 15-8. Conexiones entre el metabolismo del nitrgeno y el del carbono. Asn: asparragina; Asp: aspartato; CAT: ciclo de los cidos
tricarboxlicos; Citr: citrato; CRPP: ciclo reductivo de las pentosas fosfato; Fd ox Y Fd"d: formas oxidada y reducida, respectivamente, de la
ferredoxina; Glu: glutamato; Gln: glutamina; lcitr: isocitrato; OAA: oxalacetato; OG: 2-oxoglutarato; PEP: fosfoenolpiruvato; Pi: fosfato
inorgnico; Pir: piruvato; pp: pirofosfato. Enzimas: 1) nitrato reductasa; 2) nitrito reductasa; 3) glutamina sintetasa; 4) glutamato
sintasa; 5) aspartato aminotransferasa; 6) asparragina sintetasa; 7) isocitrato deshidrogenasa; 8) fosfoenolpiruvato carboxilasa.

CAPTULO

genera fotoqumicamente en el cloroplasto, mientras que,

s~ la raz, se forma a partir del NADPH producido en la va

exidativa de las pentosas fosfato. En los plastidios de las
lulas radicales se encuentran formas especficas de ferre~oxina Yde ferredoxina NADP+- oxidorreductasa, enzima que
reduce la ferredoxina con NADPH.
La sntesis neta de una molcula de glutamina o de asparrag ina requiere la asimilacin de dos molculas de amonio
y el aporte de una molcula de 2-oxoglutarato o de oxalacetato, respectivamente, como esqueletos carbonados. Dichos
oxocidos, o precursores de ellos, provienen del ciclo de los
cidos tricarboxlicos (Fig. 15-8). La actividad fosfoenolpiruvato carboxilasa contribuye a la formacin de oxa lacetato
para la snte ~is de as,p~rragin~ o para e~ ma~,te nimiento .del
acervo de Cldos orgamcos. DlCha contnbuclOn es cuantltativamente muy importante en el proceso de asimilacin del
amonio en los ndulos de las leguminosas.
La asimilacin del nitrgeno origina, pues, un flujo de
carbono desde carbohidratos hasta aminocidos. En ausencia de fotosntesis, el almidn o la sacarosa pueden sumini strar dicho carbono. En la luz, los azcares que se sintetizan
en el ciclo reductivo de las pentosas fo sfato constituyen la
fuente ltima de esqueletos carbonados para sustentar la
sntesis de aminocidos. As pues, en los tejidos foto sintticos, el carbono asimilado se reparte entre la formacin de
carbohidratos y la sntesis de aminocidos. El flujo de carbono orgnico hacia una u otra va se modula a travs de la
regulacin de enzimas claves de ambas rutas, como respuesta, principalmente, a la luz y a la disponibilidad de carbono

Altos

15: ASIMILACiN

OSCURIDAD
SENESCENCIA, GERMINACiN
Bajos nivel es de C reducido
Altos niveles de N reducido

nivele~~~ C reducido I

NOj __ 1 NR

/ \~
~

1
I

~e7'iOC'\

NiR \- - NH; - - \ GS2\ Fd -GOGAT \

GLUTAMINA
5C:2N

295

y nitrgeno. Por su relevancia metablica y fisiolgica, la

glutamina y la asparragina son, probablemente, los dos productos ms importantes de la asimilacin y la reasimilacin
del nitrgeno en la planta . Ambos aminocidos constituyen
un importante punto de conexin entre el metabolismo del
carbono y el del nitrgeno.
Como se ha descrito en apartados anteriores, y se resume en
la Figura 15-9, las respectivas sntesis de glutamina y de asparragina se encuentran reguladas de forma opuesta por aquellos
factores o seales que modifican la disponibilidad y los niveles
internos de nitrgeno y de carbono. En la luz, o cuando hay
suficiente disponibilidad de carbono (la razn C/N es alta), se
inducen las isoenzimas GS2 y Fd-GOGAT, mientras que la AS
permanece reprimida, con lo cual la asimilacin del amonio se
canaliza fundamentalmente hacia la sntesis de glutamina. En
cambio, en la oscuridad prolongada, que produce una limitacin
de carbono, o durante los procesos catablicos que dan lugar
a una acumulacin de amonio en los tejidos (baja razn C/N),
se induce la AS y se favorece la formacin de asparragina. En
estos casos la glutamina requerida para la sntesis de asparragina es suministrada por la accin coordinada de las isoenzimas
citoslicas GS1 y NADH-GOGAT, que en estas condi ciones so n
las predominantes frente a sus respectivas forma s plastdicas,
GS2 y Fd-GOGAT. Puesto que la molcula de asparragina (4C:2N)
contiene menos carbono que la de glutamina (5C:2N), su sntesis para el transporte y el almacenamiento de nitrgeno resulta
ms econmica en trminos de consumo de carbono.
Del mismo modo que el metabolismo del nitrgeno es
regulado por los metabolitos carbonados, la expresin de

I Bajos nivel es de N reducido

I Alto C/N

DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

NH; __ \ GS1\ NADH-GOGAT \--Gln - -

IGfHI P,,"61;,;, y
Glu -

catabo li smo
de am in oc idos

ASP~~!~GINA I

~gura 1~-9. Regulacin diferencial de la sntesis de glutamina y de asparragina por la disponibilidad de carbono y de nitrgeno reducido.
d snteSIS de asparragina es ms eficiente que la de glutamina en cuanto a consumo de carbono orgnico. Ambos aminocidos poseen
~s tomos de nitrgeno, pero la glutamina contiene cinco tomos de carbono mientras que la asparragina tiene nicamente cuatro. Los
~gn~S (+) y (-) denotan induccin y represin, respectivamente, de las enzimas indicadas. AS: asparragina sintetasa; GDH: glutamato

t;'drogena.sa; Gln: glutamina; Glu: glutamato; GOGAT: glutamato sin tasa; GSl y GS2: isoformas citoslica y plastdica, respectivamente,
e a glutamma sintetasa; NiR: nitrito reductasa; NR: nitrato reductasa.

296

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

muchos genes del metabolismo del carbono se regula por

compuestos nitrogenados (Fig. 15-10). As, el nitrato no slo
induce los genes que codifican las enzimas necesarias para
su reduccin y posterior asimilacin, sino que tambin acta
como seal reguladora positiva de genes involucrados en el
metabolismo respiratorio de los carbohidratos, y como seal
negativa de genes requeridos para la biosntesis de los mismos.
De esta forma, el nitrato estimula el flujo de carbono hacia la
formacin de cidos orgnicos, los cuales son necesarios como
esqueletos carbonados para la biosntesis de los aminocidos.
Esta regulacin recproca entre los metabolismos del carbono
y del nitrgeno permite a la planta coordinar las velocidades
de biosntesis de carbohidratos y de aminocidos, con el fin
de mantener el adecuado balance interno C/N.

'por la raz puede ser reducido y asimilado en la propia raz

o ser transportado a la parte area de la planta, donde e~
asimilado (Fig. 15-11). Cuando en el suelo existe amonio
ste tambin puede ser absorbido; no obstante, al ser bas:
tante txico, la mayora de las plantas evita su acumulacin
incorporndolo rpidamente en los aminocidos. Parte del
nitrgeno asimilado en la raz se exporta a la parte area
principalmente en forma de glutamina yasparragina.
'
Del total del nitrato absorbido del suelo por la planta
las proporciones que se asimilan en la raz o en las hoja~
dependen tanto de factores externos como de factores intrnsecos de la propia planta. As, si existe una baja concentracin de nitrato en el suelo, una elevada proporcin del
total absorbido es reducida en la raz, mientras que si ha~
suficiente nitrato disponible, la mayor parte es transportada
al vstago, donde puede acumularse tanto en el tallo como
en las hojas. Las vacuolas constituyen el principal sitio de
almacenamiento del nitrato. La acumulacin de nitrato e!
especialmente frecuente en representantes de las familia!
CruC1ferae, Compositae, Gramineae, Solanaceae y, sobre todo,
en las llamadas plantas nitrfilas, como Chenopodium album,
Anthriscus sylvestris o Urtica dioica. Asimismo, muchas halfitas pueden acumular nitrato, en lugar de cloruro, como ion
osmticamente activo.

2.6. El nitrgeno absorbido es asimilado,

transportado y movilizado durante
el desarrollo de la planta
Como resultado de la actividad metablica de las bacterias
nitrificantes, la mayor parte del nitrgeno inorgnico del
suelo se encuentra en forma de nitrato. El nitrato absorbido

. O)

~
EB

I ALMIDN I

ext.

Ciclo de
Calvin
Triosas-P

TN

I PROTENAS I

NO -

NH

/'

(r:.~.

/'
Ciclo GS -GOGAT

GOGAT

f'SPS\'--' .---_ _-,

I SACAROSA I

P~P

P2(EPC OAA

t-

C0 2

ACETIL-CoA

@1---~

Gln )

i,'~+6
"
'.- Glu

Hexosas-P

PIR

@) 12

, " Glu

NO) int.

@l

tt (8 DPGPV8

Cf 2

CITR

...
ICITR

OG

"<.

Ciclo de
Krebs

~
---- -- OG - --.-- - - "

Figura 15-10. El nitrato constituye una seal reguladora del metabolismo del nitrgeno y del metabolismo del carbono. El nitrato
induce los genes requeridos para la absorcin y reduccin del nitrato, la asimilacin del amonio, y la sntesis de esqueletos carbonados,
como el 2-oxoglutarato, exigidos para la formacin de aminocidos. En cambio, el nitrato reprime los genes involucrados en la
biosntesis de carbohidratos. Los signos (+) y (-) denotan induccin y represin, respectivamente, de las enzimas indicadas. CITR:
citrato; Gln: glutamina; Glu: glutamato; ICITR: isocitrato; OAA: oxalacetato; OG: 2-0xoglutarato; PEP: fosfoenolpiruvato; PIR: piruvato;
Enzimas: ADPGPP: ADP-glucosa pirofosforilasa; CS: citrato sin tasa; GOGAT: glutamato sin tasa; GS: glutamina sintetasa; IDH: isocitrato
deshidrogenasa; NiR: nitrito reductasa; NR: nitrato reductasa; PEPC: fosfoenolpiruvato carboxilasa; PK: piruvato quinasa; SPS: sacarosafosfato sin tasa; TN: transportador de nitrato.

CAPTULO

SEMILLA

HOJA

Protenas
de rese rva

Protenas
z~

,
uz

Cfl

ou

Cfl

j
w
1Z
'j

Cfl

cr:

W
1-

t?Z

Z
'j

WW
o~

FLOEMA

NH ;

-Aminoc id os -- - - - ~ - - - - - - ~

" " NO-

er
ACUO:~

r--

Aminoc idos

ASIMILACIN DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

297

semillas en desarrollo demandan gran cantidad de nitrgeno

orgnico. En los cereales, la mayor cantidad (70-80% del
total) del nitrgeno orgnico para el llenado del grano proviene de la degradacin de las protenas de los rganos vegetativos, principalmente de la hoja bandera (Fig, 15-11). El
resto lo constituye el nitrgeno asimilado de novo en la fase
posta ntesis. La movilizacin del nitrgeno orgnico desde
las hojas senescentes hacia las semillas constituye, pues, un
proceso muy importante en la economa del nitrgeno de las
plantas (vase el Captulo 28).

' l
I

L--_ _ _ _ _- '

3. ASIMILACIN DEL AZUFRE

03

NO;

W
-'

~
~

I
I

I
I

RAz

I
I

:'----

I
I

,
I
I
I

Proten as _

Aminocidos

r
NO ; ---. NO i ---. NH ;

15:

NO;

Figura 15-11. Esquema de las rutas del nitrgeno en la

planta, que comprenden los procesos de absorcin, asimilacin,
movilizacin y transporte a larga distancia ,

El reparto de la asimilacin de nitrato entre la raz y las

hojas es tambin una caracterstica de la especie vegetal.
Las especies de los gneros Xanthium, Gossypium y Cucumis
poseen una baja actividad nitrato reductasa en la raz y,
como consecuencia, prcticamente todo el nitrato tomado
por la planta es transportado a las hojas para su asimilacin,
Por el contrario, otras especies, entre las que se encuentran
representantes de los gneros Lupinus, Rhaphanus y Pisum,
as como diversas especies leosas, principalmente gimnospermas y de las familias En'caceae y Proteaceae, asimilan en
la raz la mayor parte del nitrato absorbido.
Otro factor que modifica la distribucin interna de la asimilacin del nitrato es la edad de la planta. En las primeras
etapas de crecimiento, la contribucin de la raz es significativa; sin embargo, a medida que la planta se desarrolla,
la reduccin del nitrato desciende en la raz y aumenta en
las hojas.
Cuando la planta entra en su fase reproductora, surgen
nuevas necesidades de nitrgeno. En efecto, los frutos y las

El azufre es un macronutriente esencial para el crecimiento

de las plantas. En los suelos, el azufre se encuentra en estado oxidado bajo la forma de sulfato (SOn (S: +6) . Como
tal, es absorbido por la raz y transportado por el xilema
ha sta las hojas, donde es reducido hasta sulfuro W-) (S:
-2), el cual es rpidamente asimilado como grupo sulfhidrilo
o grupo tiol (- SH) de los aminocidos cisteina y metionina .
Aunque la mayor parte del azufre orgnico de la materia
vegetal se encuentra formando parte de dichos aminocidos
en las molculas de protena, tambin se encuentra prese nte
en otras importantes biomolculas, co mo el glutatin, los
centros sulfofrricos, y diversas coenzimas y vitaminas. En
las protenas y en el glutatin, dos grupos tilicos de cistenas prximas pueden oxidarse para formar entre s un enlace
covalente estable denominado puente di sulfuro. No todo el
sulfato absorbido por la planta es reducido, una parte de l
se incorpora como tal sulfato a sulfolpidos y a diferentes
metabolitos secundarios.

3.1. La absorcin deL suLfato se asemeja

a La deL nitrato
El sulfato de la disolucin del suelo es transportado activamente al interior de las clulas de la raz mediante un
mecanismo de simporte con protones (3W/SO-). Al igual
que sucede con el nitrato, el gradiente de potencial electroqumico de W requerido para dicho simporte es mantenido
por una W-ATPasa del plasmalema que transporta unidireccionalmente W hacia el exterior (Fig . 15-1).
La velocidad de absorcin de sulfato por las races muestra en general una cintica bifsica que refleja la actuacin
de dos sistemas de transporte, un transportador de alta afinidad (Km = 10-20 AM), que trabaja a bajas concentraciones
externas de sulfato, y un sistema de libre difusin que es
operativo en concentraciones elevadas.
El transporte activo de sulfato al interior de las clulas
epidrmicas de la raz se estimula en condiciones de insuficien cia de azufre como resultado de la induccin del gen
que codifica el transportador de alta afinidad. En cambio, la
absorcin desciende cuando aumenta la concentracin interna de sulfato o de formas reducidas de azufre, como cistena
o glutatin. stos actan como reguladores negativos de la

298

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

expresin del gen del transportador de sulfato. As pues, la

velocidad de absorcin de sulfato est regulada por la disponibilidad y el estado nutricional de azufre de la planta.

3.2. La asimilacin reductiva del sulfato

comprende su reduccin a sulfuro
y la incorporacin de ste en
O-acetiLserina para la slntesis de cistelna
Una vez que el sulfato ha sido absorbido por la raz, es
exportado en su mayor parte a las hojas, donde puede ser
almacenado en la vacuola, o bien ser transportado al interior
de los cloroplastos, donde tiene lugar el proceso de asimilacin. Desde el punto de vista bioqumico, la asimilacin
reductiva del sulfato es muy parecida a la del nitrato. Ambos
aniones son reducidos a sulfuro y amonio, respectivamente,
en dos etapas sucesivas de dos y seis electrones, y a continuacin, dichas formas reducidas son asimiladas en cistena
y glutamato, respectivamente, con el consumo adicional de
otros dos electrones. Por tanto, en cada uno de dichos procesos se necesita un total de diez electrones:
2e-

6e-

(+6)SO ~- ~ (''')SO ~2e-

(+5) NO j

6e-

(+3)NOz-

2e-

52-

Cistena
Glutamato

Una diferencia importante entre la asimilacin del sulfato y la del nitrato es que el sulfato tiene que ser activado
previamente para poder ser luego reducido. La activacin
del sulfato por ATP est catalizada por la enzima ATP sulfurilasa, la cual transfiere el fragmento de adenosina 5'-fosfato del ATP al sulfato, formndose pirofosfato y adenosina
5'-fosfosulfato (APS), que constituye la forma de sulfato
activo (Fig. 15-12):
PPi + APS

Durante aos ha existido una gran controversia so bre si,

en las plantas, los intermediarios que se forman en la asimilacin reductiva del sulfato -sulfito y sulfuro- permanecen unidos covalentemente a un portador tilico durante
el proceso de reduccin (va intermediarios unidos), o bien
si, por el contrario, dichos intermediarios aparecen en forma libre (va intermediarios libres) . Las investigaciones ms
recientes apoyan la hiptesis de que el sulfato es reducido a
partir del APS, y que, durante la reduccin, se forman sulfito
y sulfuro libres (Fig. 15-12).
La reduccin del sulfato del APS hasta sulfuro se lleva a
cabo en dos reacciones sucesivas. En la primera, la enzima
APS reductasa transfiere dos electrones al APS, reducindose el sulfato activo a sulfito libre:
APS + 2 GSH

SO~- +

6 Fd,ed

S2- + 6 Fd ox

2e-

- (-J) NH ;'~

SO~- + ATP -

Los electrones son suministrados por dos molculas de

glutatin reducido (GSH) que, al oxidarse, forman una de glutatin oxidado (GSSG). En los cloroplastos, el glutatin reducido es regenerado a partir del oxidado mediante la enzima
glutatin reductasa. sta utiliza NADPH como donador de
electrones (vase el apartado 3.3), por lo que la reduccin
de sulfato a sulfito consume, en ltimo trmino, una molcula de NADPH generado fotosintticamente.
Desde hace tiempo se conoca la existencia en las plantas
de una actividad APS sulfotransferasa que cata liza la transferencia reductiva del sulfato del APS al grupo tiol del glutatin, formndose sulfito unido a dicho glutatin. sta fue
una de las principales pruebas que condujeron a proponer el
funcionamiento de una va de intermediarios unidos en la
reduccin del sulfato en las plantas. Sin embargo, recientes
estudios comparativos sobre las propiedades cinticas y moleculares de la APS reductasa y la APS sulfotransferasa han
mostrado que se trata de la misma enzima, y que la actividad reductasa es la predominante in vivo (Suter, M. y cols.
Journal of Biological Chemistry 275: 930-936, 2000) .
En la segunda reaccin, el sulfito es reducido a sulfuro libre mediante la transferencia de seis electrones suministrados
por ferredoxina reducida generada fotosintticamente. Dicha
reaccin es catalizada por la enzima sulfito reductasa:

~ SO~- + 5'-AMP +

GSSG + 2 W

La reaccin de reduccin por seis electrones de sulfito a

sulfuro es muy parecida a la de reduccin de nitrito a amonio
(vase el apartado 2.2.2). La sulfito reductasa y la nitrito reductasa tambin tienen en comn el hecho de poseer en sus
centros activos un sirohemo y un centro sulfofrrico [4Fe-4S].
Finalmente tiene lugar la sintesis de cisteina por la
accin secuencial de las enzimas serina acetiltransferasa,
que cata liza la sntesis de O-acetilserina (OAS), y la OAS
tiol-liasa, que cata liza la incorporacin del sulfuro a O-acetilserina para formar cistena (Fig. 15-12):
Serina + acetil-CoA
O-acetilserina + S2-

O-acetilserina + CoA
cistena + acetato

A partir de la cistena, las plantas sintetizan metionina

-otro aminocido azufrado- y glutatin. Todas las enzimas de la asimilacin reductiva del sulfato se hallan tambin
presentes en los plastidios de las clulas de la raz, aunque
en concentraciones bastante inferiores a las que se encuentran en los cloroplastos, por lo que la mayor parte del sulfato
absorbido por la planta es reducido en las hojas.
Una ruta alternativa de asimilacin del sulfato es la
denominada sulfatacin, que consiste en la incorporacin
de sulfato en compuestos orgnicos sin que se produzca la
reduccin del azufre. Para que se produzca dicha incorporacin, el APS ha de ser previamente fosforilado con ATP
mediante la enzima APS Quinasa, formndose 3' -fosfoadenosina-5' -fosfosulfato (PAPS):
APS + ATP

PAPS + ADP

CAPTULO

II

11

OH

0-

ASIMILACIN DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

299

Adenink'jc-o- r - o-w-o-

HHH

15:

Sulfotransferasa
11
(
~ R- O- W- OR-OH

PAP

o
Metabolito sulfatado

PAPS

O=P-O-

0-

O
11
-o- so-

ATP
sulfurilasa
_~---.,,:--

11

O
su lfato

ATP

(~

ADP

APS
qUlnasa

ATP
2

Ad eninaqOH C___

HH

HH

OH

OH

11

11

APS
red uctasa
(
~

0-P-0- S - 0 -

II

0-

0-

-(----,..-""~
-.....

0=1

2 GXSH
GSSG 5'-AMP

Sulfito
reductasa

0 - 6 Fd 'ed

S2I

6 Fd o ,

PP;
NADP'

APS
COO-

I
H3N' -CH
I
?H 2

Serina
acetiltransfera sa

f'

Acetil -CoA

OH

CoA

NADPH
COO-

H3N ' -?H

?H 2

Sulfito

Sulfuro

S2-"" - O:Acetilse rin a

"tiol-lia sa

0-

I
I

C= O

C=O

CH 3

I
I

COO-

I
I

H3N'-C H
?H2
SH

CH 3
Serina

O-Acetil se rina

Acetato

Cistena

Figura 15-12. Asimilacin del su lfata por las plantas. El sulfato necesita ser activado con ATP para poder ser reducido a sulfito y luego
a sulfuro. A continuacin, el sulfuro reacciona con O-acetilserina para formar cisteina. En la parte superior de la Figura se muestra la vio
de sulfatacin, en la que el sulfato es incorporado a ciertas molculas orgnicas sin ser reducido. 5'-AMP: adenosina 5'-monofosfato; APS:
adenosina 5'josfosulfato; GSH: glutatin reducido; GSSG: glutatin oxidado; PAP: 3'-fosfoadenosina-5'-fosfato; PAPS: 3'josfoadenosina-5'fosfosulfato.

Seguidamente, diversas su lfotransferasas localizadas en

el citosol catalizan la transferencia directa del su lfato del
PAPS a una serie de molculas orgnicas, entre las que se
encuentran sulfolpidos, oligosacridos, pptidos y metabolitos secundarios. Muchos de estos compuestos sulfatados
intervienen en procesos de sealizacin, por lo que la sulfatacin desempea un papel importante en la regulacin del
crecimiento y el desa rrollo de la planta.

3.3. El glutatin es un compuesto tilico con

mltiples funciones en la planta
El glutatin es el tripptido y-glutamilcisteini lglicina (Fig.
15-13) Yconstituye el compuesto tilico soluble ms abundante en las plantas. 5u concentracin en los tejidos puede
llegar a ser de hasta 10 mM, considerablemente mayor que
la de cistena, que se encuentra en concentraciones micromo~ares. La sntesis de glutatin, a partir de sus precursores
~mmoacd.icos glutamato, cistena y glicina, se produce en
Os reacclOnes sucesivas (Fig. 15-13) Y tiene lugar sobre
t~do en las hojas. El glutatin es sintetizado tanto en los
e oroplastos como en el citosol.
El glutatin desempea en la planta funciones muy diversas e importantes, entre las que destacan las siguientes:

1. Transporte y almacenamiento del azufre reducido. El

glutatin sintetizado en las hojas es exportado a travs

del floema a frutos, semillas, races y otros rganos en
desarrollo. En estos rganos importadores es degradado
en sus tres componentes aminoacdicos, y la cistena
producida se emplea para la sntesis de protenas y de
compuestos azufrados. Cuando en el medio existe abundante sulfato y se produce una elevada tasa de asimilacin, el exceso de glutatin sintetiza do es almacenado
para su uso posterior.
2. Mantenimiento en estado reducido de grupos sulfhidrilos de proteinas. Muchas protenas enzimticas posee n en sus sitios activos grupos sulfhidrilos (-5H) de
cistenas, que han de estar reducidos para que la enzima
muestre actividad cataltica. No obstante, dichos grupos
pueden llegar a oxidarse y formar puentes disulfuro (-5-5-),
lo que ocasiona la inactivacin de la enzima . El glutatin
reducido (GSH), en funcin de su grupo tiol, revierte
dicha oxidacin, ayudando as a conservar la actividad
enzimtica . Como resultado de esta accin se genera la
forma oxidada del glutatin (G5SG), que consiste en dos
moLcuLas de gLutatin unidas entre s por un puente
disuLfuro (Fig. 15-13). Los niveLes intraceLulares de GSH
son mantenidos por la enzima glutatin reductasa, que
reduce eL gLutatin oxidado a gLutatin reducido con

300

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

coo-

B
Glutamato

Cisteina

H3 N' -9 H
Glutamato

9
9c= o
H2

ATP

H2

I
I

ADP + P;

NH
Cisteina

)'-Glutamileistein a

H9- CH2-SH

c= o
I
I

Glicin a

Glicina

~ ATP
(2)

NH

ADP + PI

9cooH2

;--G Iuta m i le i ste i n i 19 Iiei na

(GLUTATIN)

GLUTATIN
(reducido)

e
" -G lu- Cys-Gly

)'-Glu-Cys-Gly

SH

s
I
s

SH

j'-G lu- Cys-Gly

2 GSH

Glutatin reduetasa

',rNADP'

""\

NADPH + W

l'-G lu-Cys- Gly

GSSG

Figura 15-13. A. Estructura del glutatin. B. Biosntesis del

glutatin. Enzimas: 1) y-glutamilcistena sintetasa; 2) glutatin
sintetasa. C. Oxidacin y reduccin del glutatin. GSH: glutatin
reducido; GSSG: glutatin oxidado.

NADPH como donador de electrones. El GSH acta, pues,

como un efectivo reductor (antioxidante) que ayuda a
mantener el estado redox intracelulac El contenido de
glutatin reducido en los tejidos es normalmente superior al 90% del total de glutatin, pero dicha proporcin
puede descender de forma acusada en situaciones en las
que se ne cesite un mayor consumo de ste, como, por
ejemplo, en situaciones de estrs oxidativo.
3. Destoxificacin de especies activas de oxigeno. Bajo
ciertas condiciones ambientales, co mo por ejemplo una
alta intensidad de luz asociada a un dficit hdrico, se
produce un exceso de excitacin de los fotosistema s, as
como una restriccin de la difusin del CO 2 atmosfrico
al interior de la hoja. Ello reduce la proporcin COz/0 2 en
el interior del cloroplasto, lo que favorece la fotorreduccin de O2 por el fotosistema I. Como consecuencia de
ello se forman especies activas de oxgeno, tales como
radical superxido (0;-) y perxido de hidrgeno (H 20 2),
los cuales producen daos oxidativos en la clula_ En
estas situaciones, el GSH, junto con el ascorbato y sus
respectivos sistemas enzimticos, actan formando parte
de un mecanismo de destoxificacin de dichas especies
activas de oxgeno (vase el Captulo 29).
4. Destoxificacin de xenobiticos. El GSH tiene la capacidad de formar complejos o conjugados, a travs
del tomo de azufre de su grupo tiol, con una amplia
variedad de compuestos electroflicos entre los que se

encuentran herbicidas, pesticidas, toxinas, e incluso

fitohormonas_ Dichas reacciones de conjugacin estn
catali~ada s por l.as enzi mas glut~~in. :-tra.nsferasas y
constItuyen un sIstema de destoxlficaclOn o lnactivacin
de dichas sustancias. La conjugacin del xenobitico al
glutatin se produce en el citosol. Los conjugados de GS
son as transportados al interior de la vacuola mediante
un transporte activo primario llevado a ca bo por transportadores del tipo ABC (ATP-binding cassette) localiza_
dos en el tonoplasto. Una vez dentro de la vacuola, los
conjugados son rpidamente degradados. Es interesante
destacar el hecho de que la exposicin a xe nobiticos estimula la formacin de glutatin, la sntesis de glutatin
S-transferasas y la expresin de los transportadores de GS
conjugado.
Las plantas tambin sintetizan una clase de pptidoS
estructuralmente relacionados co n el glutatin, denominados fitoquelatinas. Las fitoquelatinas so n sintetizadas por
la fitoquelatina si ntasa a partir de glutatin; se trata de
polmeros de diferentes tamaos con la estructura general
(y-Glu-Cysln-Gly, donde n vara entre 2 y 11. Su importancia
para las plantas radica en la capacidad que tienen de formar
complejos con metales pesados, especia lmente cadmio
(Cd 2+), evitando su acumulacin txica. Constituyen as un
meca nismo de destoxificacin de metales pesados. Una vez
formados en el citosol, los complejos so n transportados al
interior de la vacuola mediante transportadores del tipo ABC
ubicados en el tonoplasto. La exposicin al Cd 2+ incrementa
la biosntesis de fitoquelatinas en la planta. Adems, se ha
aislado un mutante de Arabidopsis que es sensible al Cd 2+ y
que carece de fitoquelatina sintasa funcional, lo que confirma la funcin de las fitoquelatinas en la resistencia a los
metales pesados.

3.4. La asimilacin del sulfato est regulada

por la disponibilidad de sulfato y la
demanda interna de azufre reducido
La asimilacin del sulfato en la planta est regulada tanto
en su absorcin (vase el apartado 3.1) como en su posterior
metabolismo. Las plantas regulan la velocidad de asimilacin
del sulfato en respuesta a la disponibilidad y la demanda de
azufre. Por ejemplo, algunos tipos de estrs, tales como
el estrs oxidativo o la exposicin a metales pesados, qu.e
incrementan la demanda de cistena, glutatin y fitoquelatlna s, producen un aumento de la velocidad de asimilacin de
sulfato. De la misma forma, cuando se priva a la planta de
sulfato, se activa tanto su absorcin como su asimilacin,
siendo contrarrestados dichos efectos por el suministro ~e
formas orgnicas de azufre reducido, como por ejemplo CldStena. Estas respuestas son el resultado de la regulaCl' ~ d e
la transcripcin de los genes que codifican el transporta or
de sulfato, la ATP sulfurilasa y la APS reductasa. En efe~O,
la expresin de dichos genes se activa cuando se requl~:
azufre y se reprime cuando existe suficiente azufre reduCl O

CAPTULO

n el interior de la clula. La cistena y el glutatin son los

~etabolitos azufrados represores de dichos genes, actuando

de esa forma como seales encargadas de mantener la homeostasis del azufre en la clula.
La asimilacin del sulfato se encuentra tambin regulada
por los niveles internos de O-acetilse rina (OAS), la molcula que se incorpora al sulfuro para formar cistena. La OAS
induce los genes del transportador de sulfato y de la APS
reductas a, e inactiva a la serina acetiltransferasa, enzima
responsable de su sntesis. Si se produce una acumulacin
de OAS en la clula por produccin insuficiente de sulfuro,
la sntesis de OAS disminuye, a la vez que la reduccin de
sulfato a sulfuro se estimula. Si, por el contrario, existe poca
disponibilidad de OAS, su sntesis se activa y la reduccin de
sulfato se reprime. Este sistema permite coordinar la sntesis
de OAS con la va de reduccin del sulfato para lograr una
sntesis adecuada de cistena.
En los ltimos aos se ha puesto de manifiesto que la
asimilacin del azufre est coordinada con la del nitrgeno
y la del carbono. Es bien conocido que, en situaciones de

15:

ASIMILACIN DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

301

deficiencia de nitrato, se produce un descenso de la asimilacin del sulfato, y viceversa, plantas privadas de sulfato
ven reducida su capacidad para asimilar nitrato. Por otro
lado, formas reducidas de nitrgeno, tales como el amonio
y los aminocidos, estimulan la reduccin de sulfato. Ms
recientemente se ha demostrado el papel regulador de los
carbohidratos sobre la asimilacin del azufre. As, se ha
observado que la adicin de sacarosa a la planta induce
de forma paralela la sntesis de APS reductasa y de nitrato
reductasa, dos enzimas claves de las vas de asimilacin
del sulfato y del nitrato, respectivamente, mientras que
ambas apenas se expresan en las plantas mantenidas en
aire libre de CO 2 Esta regulacin cruzada entre las vas de
asimilacin del carbono, del nitrgeno y del azufre permite a la planta coordinar las velocidades de asimilacin
de cada uno de dichos nutrientes para poder sintetizar en
cada momento las cantidades y las proporciones adecuadas de carbohidratos y de aminocidos, tanto azufrados
como no azufrados (Kopriva, S. y Rennenberg, H. Joumal
of Experimental Botany 55:1831-1842,2004).

RESUMEN
El nitrgeno y el azufre se encuentran en los suelos principalmente en forma de nitrato (NO)") y de sulfato (SO-), respectivamente. Las plantas tienen la capacidad de reducir y asimilar dichas formas inorgnicas oxidadas convirtindolas en
las correspondientes formas orgnicas reducidas: grupos amino o amido (- NH 2) Y grupos tilicos (- SH) de aminocidos
y otras molculas nitrogenadas y azufradas.
El nitrato es reducido a amonio por la accin secuencial de las enzimas nitrato reductasa y nitrito reductasa. A continuacin, el amonio, mediante la actuacin concertada de las enzimas glutamina sintetasa y glutamato sintasa (ciclo
GSjGOGAT), es incorporado a esqueletos carbonados para la formacin de aminocidos y de compuestos transportadores
de nitrgeno (glutamina y asparragina). El ciclo GSjGOGAT tambin participa en la reasimilacin del amonio que se
genera en la fotorrespiracin y en el catabolismo de las protenas de reserva durante la germinacin y la senescencia. La
asimilacin del nitrgeno es un proceso dependiente de la fotosntesis y del metabolismo del carbono para el aporte de
poder reductor, ATP y esqueletos carbonados. Por ello, no s lo el nitrato, sino tambin la luz y los carbohidratos, actan
como seales que modulan positivamente la sntesis de nitrato reductasa, nitrito reductasa y las isoformas cloro plsticas
de glutamina sintetasa y de glutamato sintasa, promoviendo as la formacin de glutamato y glutamina. Por el contrario,
la sntesis de asparragina, catalizada por la asparragina sintetasa, se ve favorecida, en detrimento de la de glutamina,
en condiciones de oscuridad y de baja disponibilidad de carbohidratos.
La asimilacin reductiva del sulfato tiene lugar mediante su activacin previa con ATP, formndose adenosina 5'-fosfosulfato (APS), y la posterior reduccin a sulfito (SO ~ -) y a sulfuro W-) mediante las enzimas APS reducta sa y sulfito
reductasa, respectivamente. El sulfuro es finalmente transferido a una molcula de O-acetilserina para formar cistena,
convirtindose as en el grupo tiol de dicha molcula. A partir de la cistena, la planta sintetiza metionina y glutatin.
El glutatin constituye la principal forma de almacenamiento y de transporte a larga di stancia del azufre orgnico. Dicha
molcula desempea otras importantes funciones en la planta, como la reduccin de los puentes disulfuro de los centros
activos de las enzimas y la destoxificacin de especies activas de oxgeno y de diversos xenobiticos. Las fitoquelatinas
son otras molculas azufradas, estructuralmente derivadas del glutatin, que actan como sistemas de destoxificacin
de metales pesados.
Las rutas de asimilacin del nitrgeno y del azufre se regulan entre ellas y, a la vez, con la de asimilacin del carbono.
Ello permite a la planta coordinar las velocidades de asimilacin del nitrgeno, el azufre y el carbono, para as mantener
un adecuado balance entre dichos elementos en la materia vegetal.

302

FUNDAMENTOS DE FISIOLOGA VEGETAL

PROBLEMAS Y CUESTIONES

Qu se entiende por asimilacin del nitrato y del

sulfato por las plantas?

Es la reduccin del nitrato la principal fuente de

amonio en los tejidos vegetales?

Cul es el origen del poder reductor necesario para la

reduccin del nitrato en las hojas? Yen las races?

Qu principales factores o seales promueven la aparicin de nitrato reductasa activa en la clula?

Qu papel desempean las enzimas glutamina sintetasa, glutamato sintasa, asparragina sintetasa y
glutamato deshidrogenasa en la asimilacin del
amonio?

0
0

De dnde provienen los esqueletos carbonados necesarios para la sntesis de glutamina y asparragina?

Cmo afecta la luz y la oscuridad a la biosntesis de

glutamina y de asparragina?

Qu reacciones catalizan las enzimas nitrito reductasa y sulfito reductasa y qu caractersticas comunes
poseen?

Qu es el glutatin y qu funciones desempea en la

planta?

Bajo qu forma se exporta el nitrgeno de la raz a

las partes areas de la planta: nitrato, nitrito, amonio, aminocidos o protenas?

Qu similitudes existen entre la absorcin por las

plantas del nitrato y del sulfato?

RESPUESTAS A LOS PROBLEMAS Y CUESTIONES

La reduccin de estos iones a amonio y sulfuro, respectivamente, y su incorporacin a molculas orgnicas para la sntesis de aminocidos. El sulfato puede
ser tambin incorporado a otras molculas sin ser
reducido, proceso que recibe el nombre de sulfatacin.

o
o

El nitrato, que acta como inductor primario de la

sntesis de la nitrato reductasa, y la luz, que estimula
dicha sntesis y, adems, mantiene la enzima en su
forma activa.

No. La fotorrespiracin puede llegar a producir hasta

diez veces ms amonio que la reduccin del nitrato.
Otros procesos que tambin producen amonio son el
catabolismo de las protenas que tiene lugar durante
la germinacin y la senescencia, y la fijacin del
nitrgeno atmosfrico.
El NAOH requerido por la nitrato reductasa en las
hojas proviene, en su mayor parte, del poder reductor
fotosinttico exportado desde el cloroplasto, mientras
que en las races se obtiene a partir del ciclo de los
cidos tricarboxlicos en la mitocondria. La ferredo xina reducida requerida por la nitrito reductasa proviene, en las hojas, de la fotosntesis y, en la raz, de
la reduccin de ferredoxina por NAOPH producido en
la va oxidativa de las pentosas fosfato.

La glutamina sintetasa y la glutamato sintasa son las

enzimas claves para la asimilacin del amonio de
cualquier origen. Forman el llamado ciclo GS-GOGAT,
que cataliza la incorporacin del amonio en los aminocidos glutamina y glutamato . La asparragina sintetasa produce asparragina, a partir de glutamina Y
aspartato, para el transporte del nitrgeno orgnico.
El 2-oxoglutarato necesario para la sntesis ltima de
la glutamina se deriva del citrato formado en el ciclo
de los cidos tricarboxlicos. El oxalacetato requerido
para sustentar la sntesis de asparragina puede provenir del ciclo de los cidos tricarboxlicos o de la carboxilacin del fosfoenolpiruvato .
Se puede exportar en forma inorgnica como nitrato
o en forma orgnica como aminocidos (glutamina y
asparragina, principalmente, y tambin glutamato y
aspartato) .

CAPTULO

15:

ASIMILACIN DEL NITRGENO Y DEL AZUFRE

303

RESPUESTAS A LOS PROBLEMAS Y CUESTIONES (Cont.)

La lu z y la oscuridad tienen un efecto opuesto
sobre la biosntesis de glutamina y de asparragina.
En la luz existe una mayor disponibilidad de carbono orgnico en los tejidos y se promueve la biosntesis de glutamina (5C:2N). En la oscuridad, la
disponibilidad de carbono orgnico es menor y se
estimula la biosntesis de asparragina (4C:2N) . Ello
es consecuencia de la regulacin diferencial de la
glutamina sintetasa y de la asparragina sintetasa
por la lu z y la oscuridad: en la luz se induce la sntesis de la glutamina si ntetasa (las isoformas cloroplsticas), mientras que la asparragina si ntetasa
se induce en la oscuridad.
Los dos son procesos activos llevados a cabo por pro tena
s transportadoras que cotransportan protones
(dos co n el nitrato y tres con el sulfato) . Los protones
que entran en la clula acompaando al nitrato y al

sulfato son bombeados hacia fuera por una

con el fin de mantener el gradiente de potencial electroqumico de protones.
La nitrito reductasa cataliza la reduccin de nitrito a
amonio, y la su lfito redu ctasa la de sulfito a sulfuro.
Ambas reacciones suponen una reduccin co n seis
electrones que, en los dos casos, son suministrados
por la ferredoxina reducida. Adem s, las dos enzimas
poseen, como grupos prostticos redox, un siro hemo
y un ce ntro sulfofrrico [4Fe-4S].
El glutatin es el tripptido glutamato-cistena-glici na . Es el principal co mpuesto de transporte y almace namiento del azufre orgnico. Protege de la inactivacin a numerosas enzimas manteniendo red ucidos
grupos sulfhidrilos ese nciales para su actividad. Partici pa en la destoxificacin de especies activas de
oxgeno y de diversos herbicidas.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA
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