Introduccin

Objetivo
Fundamento

Trabajo Prctico N 9

ESTERILIZACIN
POR FILTRACIN

Procedimiento
Resultados
Conclusiones
Bibliografa

INTRODUCCIN
La esterilizacin por filtracin se logra por el paso de
un lquido o un gas a travs de un material capaz de
retener los microorganismos presentes.
La esterilizacin por filtracin se emplea para materiales sensibles al calor, tales como ciertos medios de
cultivo, azcares, soluciones de antibiticos y otros
medicamentos, etc.

TIPOS DE FILTROS
Hay varios tipos de filtros, entre ellos los que ms se
usan son los filtros de profundidad y los filtros de superficie o filtros de membrana.
Filtros de profundidad
Estos filtros estn elaborados por un material fibroso
(papel, asbesto o fibra de vidrio) dispuesto al azar, de
manera que dentro de la estructura del filtro se crean
vas tortuosas donde pueden quedar retenidos la mayora de los contaminantes presentes.

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Entre sus ventajas se encuentran su alta capacidad

de retencin de partculas sobre su superficie y a
travs de toda su estructura y que permiten filtrar
grandes volmenes. Sin embargo, tienen como desventajas que no presentan un tamao de poro uniforme y existe la posibilidad de liberacin, hacia el
material filtrado, de partculas y microorganismos
que hayan crecido dentro del filtro.
Dadas sus caractersticas los filtros de profundidad se usan principalmente como
prefiltros, ya que permiten eliminar las partculas grandes pero no la eliminacin
total de los microorganismos.
Filtros de superficie
Son filtros elaborados generalmente de acetato
de celulosa o nitrato de celulosa y contienen poros de tamao uniforme. Este tipo de filtro tiene
como ventaja que, al conocer exactamente el
tamao de poro que presentan, se pueden seleccionar filtros capaces de retener la totalidad de
los microorganismos presentes en una solucin.
Sin embargo, se saturan rpidamente y la velocidad de filtracin a travs de ellos es lenta.
Para la filtracin esterilizante se pueden usar combinaciones de un filtro de profundidad con un filtro de superficie que tenga un tamao de poro de 0.22 m. La
mayor parte de los filtros de membrana se pueden esterilizar en autoclave y luego
se manipulan aspticamente al ensamblar el equipo.
EQUIPOS DE FILTRACIN
Existen diferentes equipos de filtracin, la seleccin del mismo est determinado principalmente por el volumen de lquido a filtrar. As
tenemos equipos de filtracin para pequeos
volmenes, los cuales generalmente se esterilizan por separado y se ensamblan aspticamente en el momento de la filtracin. Cuando
se requiere filtrar volmenes mayores, el filtro
de membrana se dispone en un cartucho y se
coloca en un estuche de acero inoxidable.
Tambin existen pequeos cartuchos de plstico que se pueden esterilizar despus de la
insercin de un filtro de membrana; con estos dispositivos la filtracin se hace utilizando una jeringa que permite forzar el lquido a filtrar a travs del filtro hasta un
recipiente estril.
14. 2

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Antes de utilizar cualquier sistema de filtracin hay que determinar que los filtros
no presenten ninguna ruptura, ya que esto puede ocasionar fallas en el proceso de
filtracin.
OBJETIVO
Al finalizar el trabajo prctico el estudiante estar en capacidad de:
Demostrar la esterilizacin de un medio de cultivo al pasarlo a travs de un filtro
de membrana de 0,22 m.
FUNDAMENTO
Al pasar un medio de cultivo a travs de un filtro de membrana de 0,22m todos
los microorganismos quedan retenidos sobre la superficie del mismo.
PROCEDIMIENTO
1. Separar el medio de cultivo en dos porciones.
2. Pasar la porcin A a travs del equipo de filtracin preparado con un filtro de
membrana de 0,22 m.
3. Recoger el lquido filtrado en un recipiente estril y rotular.
4. Colocar la porcin B directamente en un recipiente estril y rotular.
5. Incubar ambas porciones a 32,5C +/- 2,5C durante 24 horas.
RESULTADOS
Observar ambas porciones despus del periodo de incubacin y anotar sus observaciones.
Aspecto de la porcin A: ______________________________________________

Aspecto de la porcin B: ______________________________________________

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CONCLUSIONES
Anotar sus conclusiones
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BIBLIOGRAFA
Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiologa. Manual de Mtodos Generales (segunda edicin). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela.
Filter Types, Structure and Characteristics. Millipore. Agosto 2001.
URL: http://www.millipore.com/catalogue.nsf/docs/C147
Madigan, M.; Martinko, J.; Parker, J. 2000. Biology of Microorganisms. Ninth edition. Prentice Hall. Inc. New Jersey.
The Pharmacopeia of the United States of America. Sterilization and Sterility Assurance of Compendial Articles. Cap 1211. 32 Edition. Rockville: USP; 2008.
Tortora G. J., B. R. Funke and Ch. L. Case 2007. Introduccin a la Microbiologa
9na Edicin. Editorial Mdica Panamericana.

Prof. Sofa Gutirrez de Gamboa

Octubre 2001
Revisin 2008

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