ENGINEERED NANOPARTICLES

INTERACTING WITH CELLS: SIZE MATTERS

Shang et al., Journal of Nanobiotechnology, v.12, n.5, 2014.

INTRODUO
Nanopartculas
Administrao
Respiratria

Oral

Intravenosa/Intramuscular
2

Tpica

INTRODUO
Administrao
Biomolculas presentes nos lquidos corporais
Cobrem a superfcie das NPs
Protein corona
3

INTRODUO
Protein corona
Composio depende da concentrao e afinidade dos
componentes com a NP
Determina a identidade biolgica da nanopartcula
Importante para a interiorizao das NPs pelas clulas
4

INTRODUO
Interiorizao
Endocitose
Vrios tipos
Tamanho da vescula transportadora, protenas carreadoras e
maquinrio utilizado no processo
5

INTRODUO
Endocitose
Ativa
Fagocitose

Pinocitose

Por receptor

INTRODUO
Endocitose
Por receptor
Protenas receptoras que reconhecem grupos qumicos de
molculas a serem endocitadas
Se a protein corona estimula esses receptores, h ativao do
maquinrio de endocitose da clula
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INTRODUO
Interao NP-clula
Propriedades fisico-qumicas das NPs
Tamanho

Morfologia

Composio qumica

Carga superficial
Qumica da superfcie

INTRODUO
Interao NP-clula
Propriedades
Propriedades fisico-qumicas
especficas dasdas
clulas
NPs
Tipo de clula

Fase do ciclo celular

INTERIORIZAO ATIVA
Endocitose
Clatrina

Caveolina
Independente

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INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho das NPs
Eficcia e cintica
Mecanismo de interiorizao
Distribuio subcelular
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INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho das NPs
Au, slica, poliestireno e xido de ferro
Relao direta da endocitose com o tamanho das NPs
30 ~ 50 nm
12

INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho das NPs
NPs de ltex de 50 ~ 1.000 nm
Clatrina (<200 nm)
Caveolina (>500 nm)
13

INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho das NPs
NPs de Au
Clatrina (45 nm)
Fagocitose (13 nm)
14

INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho das NPs
QDs & AuNCs
QDs & AuNCs (10 nm) so acumuladas na membrana plasmtica
antes de serem interiorizadas gradativamente
NPs de poliestireno (100 nm) so interiorizadas imediatamente
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INTERIORIZAO ATIVA
Qumica
Tamanho
dadas
superfcie
NPs
PS-COOH & PS-NH2 (100 nm)
M, PMA monocticos THP-1
Interiorizadas por mecanismos diferentes
16

INTERIORIZAO ATIVA
Qumica
Carga da
superficial
superfcie
AuNPs
Maior interiorizao de NPs com carga positiva

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INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho
Carga superficial
das NPs
A dependncia da interiorizao com o tamanho das NPs est
relacionada ao estmulo de receptores de endocitose
NPs pequenas estimulam pouca quantidade de receptores
NPs grandes estimulam grande quantidade de receptores

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INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho das NPs
Modelos matemticos e termodinamicamente
50 ~ 70 nm
Tamanho mnimo para estimular a interiorizao

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INTERIORIZAO ATIVA
Tamanho
Protein corona
das NPs
Depende da composio do meio
Os estudos so realizados em diferentes tipos de meio
NPs idnticas apresentam interiorizao diferente

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INTERIORIZAO ATIVA
Distribuio
Protein corona
subcelular
CdTe QDs positivos (5 nm)
Distribuem-se pelo citoplasma, sem entrar no ncleo

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INTERIORIZAO ATIVA
Distribuio subcelular
CdTe QDs positivos (2 nm)
Apresentam-se predominantemente no ncleo

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INTERIORIZAO ATIVA
Distribuio subcelular
AuNPs
Distribuio intracelular dependente do tamanho das NPs
2 nm
Ncleo

5 ~ 8 nm
Endossomos
23

16 nm
Sem interiorizao

INTERIORIZAO ATIVA
Estudo
Distribuio
da interiorizao
subcelular
Dependncia das variveis
Um parmetro particular
Mantendo os outros constantes
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INTERIORIZAO PASSIVA
Eritrcitos
No possuem ncleo, a maioria das organizas e privado do
sistema de endocitose
Modelo para estudo de interiorizao passiva de NPs

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INTERIORIZAO PASSIVA
Eritrcitos
PS-NPs <200 nm so interiorizadas
PS-NPs 1 m no so interiorizadas

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INTERIORIZAO PASSIVA
Eritrcitos
Avaliao da interiorizao de NPs de diferentes materiais,
tamanhos e carga superficial
A eficcia da interiorizao determinada pelo tamanho
NPs <200 nm so interiorizadas

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INTERIORIZAO PASSIVA
Eritrcitos
NPs de slica
100 nm: so adsorvidas sem danos na membrana
600 nm: adsorvidas com deformaes e hemlise

28

INTERIORIZAO PASSIVA
Eritrcitos
NPs de slica
Interiorizao dependente da presena de grupos silanol

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INTERIORIZAO PASSIVA
Citotoxicidade
Eritrcitos
Formao de poros
Evitada pela fuso da membrana com a NP

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INTERIORIZAO PASSIVA
Citotoxicidade
DPA-QDs 8 nm
Interiorizao dependente com o tempo de exposio
Sem danos membrana (fuso do DPA)
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CONCLUSO
Tamanho
Grande influncia na interao com as clulas
Eficcia da interiorizao, assim como o mecanismo a ser utilizado
Localizao intracelular e citotoxicidade
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CONCLUSO
Regras
Tamanho
gerais
H um tamanho timo para interiorizao
Independente da composio da NP
Dependente do tipo da clula e da superfcie da NP
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CONCLUSO
Regras gerais
NPs pequenas possuem maior probabilidade de serem
interiorizadas passivamente
NPs pequenas podem produzir maiores efeitos citotxicos

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