I.

GENERALIDADES
En personas visualmente normales, el ojo tiene un lmite en su
capacidad de discriminacin o separacin de imgenes; as, a una
distancia de 3m podr distinguir como distintos dos puntos
separados como mnimo por 1000,000 de Angstrom (); esto
constituye el lmite de resolucin del ojo humano. Por el contrario,
una persona con incapacidad visual no distingue (en las mismas
circunstancias) ambos puntos como diferentes, sino que los ve
como un punto nico indiscriminado.
El tallado de vidrios posibilit tanto la correccin de defectos
visuales (anteojos) como el acceso a una observacin ms
detallada de varios objetos (lupas); ms an, el empleo de estos
vidrios tallados (lentes) colocados de modo superpuesto a lo largo
de un soporte apropiado, posibilito una nueva capacidad de visin
lejana. En suma, esta disposicin de lentes superpuestas y
enhebradas sobre un mismo eje ptico, a lo largo de un soporte o
montura (sistema ptico centrado), permiti corregir, mejorar,
aumentar la percepcin del mundo visible.
Todos los organismos estn compuestos de clulas muy pequeas y
para estudiarlas usamos varios tipos de microscopios.
Los
microscopios magnifican la imagen y aumentan nuestra capacidad
para ver detalles que de otro modo no podramos percibir.

II. OBJETIVOS

Identificar las partes principales del

compuesto y sus funciones.
Utilizar el microscopio correctamente.

microscopio

Hacer preparaciones
simples
en fresco
para
observaciones al microscopio y aprender a enfocarlas a
diferentes magnificaciones.
Observar preparaciones con el objetivo de inmersin.

III. EQUIPOS Y MATERIALES

-

Un microscopio compuesto
Lminas portaobjeto
Laminillas cubreobjetos
Pipeta Pasteur
Agua estancada
Lmina coloreada
Aceite de cedro

IV. PROCEDIMIENTO
a) Enfoque de preparaciones en fresco en 10X
-

Conectar el microscopio
Prender la fuente de luz
Revisar que las siguientes partes del microscopio estn
en posicin:
La platina en su tope inferior
Objetivo 10X abajo
El carro de transporte centrado
El condensador en su tope inferior
El diagrama casi cerrado
Observar que el campo del microscopio se encuentre
uniformemente iluminado.
Colocar sobre un porta objetos una gota de la preparacin
en fresco con la pipeta Pasteur y cubrir con una
laminilla.
Colocar la preparacin en fresco, sobre la platina del
microscopio.
Sujetar la lmina con la palanca del carro de
transporte.
Centrar la preparacin sobre la fuente de luz en la
apertura circular de la platina.
Mirar la platina por el lado y mover el botn de ajuste,
subir, hasta llegar al tope.

Coloque la lmina en la platina con el lente objetivo de 4x

(panormico) en posicin vertical.
Luego pase al objetivo 10X.
Mirar ahora por el ocular y bajar suavemente la platina
hasta lograr captar la imagen del objeto en observacin.
Hacer el ajuste de las lentes oculares a su distancia
interpupilar desplazando los tubos porta-oculares con
ambas manos hasta que en el campo microscpico
aparezca solamente una imagen.
Ajustar la nitidez de la imagen moviendo lentamente el
tornillo micromtrico de ajuste.
b) Enfoque de preparaciones en fresco en 40x
-

1. Coloque la lmina en la platina con el lente objetivo de 4x

(panormico) en posicin vertical. Abra el gancho de la
platina mecnica, monte la lmina en el centro sin tocar el
lente objetivo con la laminilla y cierre el gancho suavemente.
Use los dos tornillos de la platina para mover el carril y
centrarla debajo del lente objetivo.
1. Use el tornillo macromtrico para subir la platina hasta la
posicin ms alta. Mirando por los lentes oculares (los
estudiantes que usan espejuelos pueden removerlos para
facilitar el uso del microscopio), use el tornillo macromtrico
para bajar la platina hasta que el objeto quede en foco.
Cierre el ojo izquierdo y use el tornillo micromtrico para
obtener una imagen en perfecto foco. Cierre el ojo derecho y
gire el ajuste del lente ocular izquierdo hasta obtener una
imagen perfectamente enfocada.
2. Observe la lmina. Para ver ms detalles, cambie al lente
objetivo de 10x y luego al de 40x, ajustando el foco
solamente con el tornillo micromtrico. El espcimen debe
mantenerse en el centro del campo de visin. Despus de
cambiar el lente objetivo, aumente ligeramente la apertura
del diafragma y la intensidad del iluminador (los lentes
objetivos de mayor aumento requieren mayor apertura del
diafragma y mayor intensidad de iluminacin).
c) Observacin de preparaciones con objetivo de inmersin
(100x)
1. Bajar al tope la platina.

1. Coloque la lmina en la platina con el lente objetivo de 4x

(panormico) en posicin vertical. Abra el gancho de la
platina mecnica, monte la lmina en el centro sin tocar el
lente objetivo con la laminilla y cierre el gancho suavemente.
Use los dos tornillos de la platina para mover el carril y
centrarla debajo del lente objetivo.
2. Subir totalmente el condensador para ver claramente el
crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y
donde habr que colocarse la gota de aceite.
3. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a
medio camino entre ste y el de 40x.
4. Dejar caer una gota mnima de aceite de inmersin sobre el
crculo de luz, sin permitir que el gotero toque la preparacin
5. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin
del objetivo de 100X.
6. Mirar directamente al objetivo y lentamente subir la platina
hasta que la lente toque la gota de aceite. En ese momento
se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
7. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de
trabajo entre el objetivo de inmersin y la preparacin es
mnima, an menor que con el de 40x por lo que el riesgo de
accidente es muy grande.
8. Subir el condensador
9. Abrir completamente el diafragma
10. Bajar el objetivo de 100X hasta que quede en contacto
con el aceite.
11. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se
baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento
girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la
preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersin en posicin de observacin.
V. RESULTADOS
a) Preparacin en fresco

MUESTRAS
ANALIZADAS

Microorganism FOTOS
os encontrados

OBSERVACIONE
S:

Agua de
charco

Algas
unicelulares

10x

No se pudo
determinar su
morfologa
exacta.

40x

b) Preparacin coloreada

Morfologa bacteriana en una muestra Coloreada con

Gram

VI.

CONCLUSIONES
1. En esta prctica analizamos el uso correcto del microscopio
ptico compuesto.

2. Es indispensable enfocar la muestra en primer lugar con el

objetivo panormico (4x), luego pasamos al de 10x y
finalmente el de 40x para muestras en fresco.
3. Asimismo para muestras coloreadas es primordial enfocar con
4x y pasar directamente al objetivo de 100x
4. Es primordial NO bajar el objetivo mientras se est mirando
por el microscopio. Puede golpear el portaobjeto y romperlo o
romper la lente.
5. Para obtener la nitidez en cada observacin es necesario el
uso del tornillo micromtrico para ajustar la visin de cada
observador.

VII.

DISCUSIN
- Al finalizar el trabajo con el microscopio:
1. Bajar la preparacin
2. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de
observacin.
3. Limpiar con papel suave secante la platina.
4. Limpiar los objetivos con papel ptico.
5. Bajar la intensidad de luz de la lmpara.
6. Apagar el microscopio y desenchufarlo.
7. Dejar enfriar el bombillo, antes de transportarlo a la Sala
de Microscopios.
8. Colocar una mano en la base y la otra en el brazo o
columna y desplazarlo en posicin erguida. No inclinarlo
ya que se pueden caer los oculares.
9. Cubrir el microscopio con la funda y colocarlo en su
estuche correspondiente.
- Mantenimiento y precauciones:

1. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio

(macromtrico,
micromtrico,
platina,
revlver
y
condensador).
1. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo
siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de
la lente con la muestra.
2. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del
mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del
ocular.
3. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se
derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un papel suave
absorbente.
4. No dejar los preparados sobre la platina, y menos an si el
microscopio est encendido. Tanto en la lupa como en el
microscopio ptico se destruir
5. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al
finalizar la sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a
un tcnico el ajuste y revisin general de los mismos.
6. No extraer las lentes ni tocarlas con los dedos.
7. Apagar mientras no se est utilizando.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

-

Carl Zeiss Microscopa > Microscopios verticales > Primo Star

[Internet].[cited
2010
Ago
15];
Available
from:
https://www.microshop.zeiss.com/index.php?
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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE MEXICO. LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA GENERAL I.
Maye Bernal Rivera. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE MEDICINA. DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA.
PRACTICAS DE LABORATORIO. MICROSCOPIA.
Jaime, Miguel; Edwin Santos. 1994. Manual de Prcticas de
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Mendo, Manuel. 2002. Instrumentacin DE Laboratorio.
Ediciones Laborales. S.R.L. LIMA. Per. Pg. 98-127.

Risco, Ronald; Cortez, Regne. 1980. Manual de prcticas de

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