MOTILIDADE

A motilidade observada atravs do aspecto do meio. Utiliza-se um meio

semi-slido o que permite o crescimento bacteriano no interior do meio, por
todo o tubo. Se a bactria for mvel (motilidade positiva), o aspecto do meio
ser turvo. Se a bactria for imvel (motilidade negativa), o crescimento s
ser observado no local de inoculao.
Dica: observar os tubos contra uma folha de papel pautado, se conseguir
observar as linhas atravs do tubo motilidade negativa.
Meios: MILI( Motilidade, Indol e Lisina), MIO( Motilidade, Indol e Ornitina),
SIM ( Sulfato, Indol e motilidade)

CATALASE
PRINCPIO
A catalase uma enzima que decompe o perxido de hidrognio (H2O2) em gua e
oxignio.
UTILIDADE

A catalase produzida por muitos microrganismos e usualmente empregada para

diferenciar Staphylococcus, que so catalase positivos de Streptococcus, catalase
negativos, ou os bacilos Gram positivos catalase negativos Lactobacillus e
Erysipelothrix de Listeria e a maioria dos Corynebacterium catalase positivos.

PROCEDIMENTO
Colocar uma gota de perxido de hidrognio (gua oxigenada) 3% sobre uma lmina.
Com auxlio de fio bacteriolgico, agregar a colnia em estudo na gota de perxido de
hidrognio.
INTERPRETAO

Positivo: Presena imediata de bolhas - a produo de efervescncia indica a

converso do H2O2 em gua e oxignio gasoso.
Negativo: Ausncia de bolhas ou efervescncia.

OXIDASE

Este sistema enzimtico est relacionado com os citocromos da cadeia respiratria de

alguns microrganismos. A prova consiste em colocar uma gota do reagente incolor
tetrametil p-fenileno de amina, recm preparado e protegido da luz, em um papel de
filtro. Em seguida, vrias colnias do microrganismo em estudo so espalhadas sobre

a rea do papel de filtro contendo o reagente, utilizando uma ala de platina ou um

basto de vidro. A prova considerada positiva quando na mistura do reagente com a
massa bacteriana desenvolve-se a cor prpura em at 1 minuto. Na reao negativa
no h desenvolvimento de cor prpura. As enterobactrias so oxidase negativas e
podem ser diferenciadas de outros bacilos Gram negativos. A prova pode ser feita
tambm em culturas em meios slidos, adicionando-se o reagente oxalato de paminodimetilanilina. A reao inicia-se com o desenvolvimento de cor rsea, marrom
e finalmente uma colorao negra na superfcie das colnias indicativa da produo
de citocromo-oxidase, representando um teste positivo. O teste negativo se no
ocorrer alterao da cor ou houver o desenvolvimento de uma cor rsea plida.

e. C e.e. COLI

E. coli

Pseudomonas

CITRATO
Determina se a bactria capaz de utilizar o citrato de sdio como nica fonte de carbono para
crescer. Com a facilidade do transporte de citrato pela citrato-permease h a sua utilizao pela
citrase, com produo de hidrxido de amnia que eleva o pH, fazendo com que a reao se torne
azul. Nesse teste, utilizam-se tubos com meio inclinado para a cultura ter mais acesso ao oxignio,
que necessrio para utilizao do citrato.

A prova positiva resulta no transporte do citrato pela permease e a sua utilizao pela
enzima citratase resulta na formao de oxaloacetato e acetato. O consumo do citrato induz
a clivagem do fosfato de amnia, alcalinizando o meio. Tambm, com o metabolismo do
citrato h formao de carbonatos que alcalinizam o meio, de modo que a cor do indicador
vira para azul. Na prova negativa o meio no se altera pois no h crescimento microbiano.
Por esse motivo a inoculao deve ser feita com agulha e em linha reta para no haver
influncia de ingrediente do meio de onde se originou a cultura, dando resultados falsopositivos.
Prova da produo de urease
A urease uma enzima que degrada a uria em duas molculas de amnia e uma de
anidrido carbnico. A prova consiste em transferir uma poro do crescimento bacteriano
com uma ala para o meio contendo uria, pH neutro e um indicador de pH, o vermelho
fenol. Aps o crescimento a prova revelada positiva quando a urease ataca a uria
alcalinizando o meio que toma a colorao rosa choque. Na prova negativa no h alterao
da cor do meio. Os organismos do gnero Proteus so urease positivos diferentemente da
maioria das enterobactrias.