Facultad de Medicina
Laboratorio de Biologa Celular
Profesores: Andrea Tapia
Mara Soledad Campano
Mitosis, Meiosis y
Fecundacin
BIO131
- 2016
Introduccin
La clula eucarionte puede reproducirse de dos formas: mitosis y meiosis. La primera busca
mantener un linaje gnico intacto y limitarse solo a aumentar el nmero de clulas o
recambiar clulas en un tejido. La segunda es propia de las clulas sexuales, ya que su
objetivo es disminuir a la mitad la carga cromosmica y generar una combinacin gnica
con el propsito de generar un nuevo individuo al fusionarse con el gameto del sexo
opuesto, genticamente diferente a ambos progenitores, causando variabilidad gentica en
su descendencia.
El ciclo celular se divide en dos etapas: interfase y fase M. Dentro de la interfase, se pueden
encontrar 3 sub-fases, G1, S y G2, mientras que la fase M se divide en profase, metafase,
anafase y telofase, terminando con la citoquinesis siendo la separacin completa de ambas
clulas. Cuando una clula sale del ciclo para especializarse, permanece en el Fase G0
haciendo que esta no se vuelva a reproducir.
La meiosis, en cambio, al ser caracterstica de la reproduccin sexual, tiene que disminuir a
la mitad el nmero de cromosomas en las clulas germinales, para esto, tiene las siguientes
etapas: Profase I, esta,para dar lugar a cromosomas genticamente variados y posee las subfases, leptoteno, cigoteno, paquiteno, diploteno y diacinesis; luego siguen Metafase I;
Anafase I; Telofase I. Despus de la primera divisin cada clula resultante tiene la mitad
del nmero de cromosomas original, pero cada cromosoma se encuentra duplicado y
compuesto por dos cromtidas hermanas. Ahora comienza la segunda divisin celular, sin
que se produzca una nueva duplicacin del DNA. (1) Esta segunda divisin se divide en:
Profase II; Metafase II; Anafase II; Telofase II. Tras finalizar la meiosis se tiene que cada
clula resultante despus de la segunda divisin meitica es haploide, ya que tiene slo la
mitad de los cromosomas originales de la especie y cada cromosoma tiene slo una
cromtida. (2)
Gametognesis, es el proceso por el cual las clulas precursoras sexuales maduran. Existen
dos tipos: la Espermatognesis en el caso de los machos, proceso por el cual un
espermatogonio se dividepor meiosis-, especializa y madura en 4 espermatozoides
funcionales. La ovognesis, por parte de las hembras, es el proceso por el cual un ovogonio
se reproduce, especializa y madura en 1 ovocito y 3 cuerpos polares, ms pequeos.
Cuando se encuentran ambas celulas sexuales espermatozoide y ovocito- se lleva a cabo la
fecundacin. Este proceso comienza cuando un espermatozoide reconoce al ovocito y se
acopla a l, al unirse sus membranas, el acromosa del espermio deja salir las enzimas
hidrolticas que contiene, pasando a travs de la capa pelcida del ovocito, cuando ocurre
esto, la membrana del ovocito se despolariza evitando el ingreso de otro espermio
opoliespermia. Una vez situado el ncleo espermatozoide dentro del ovocito, la
fecundacin termina cuando ambos pronucleos se fusionan, transformando el ovocito en
cigoto.
Objetivos
Identificar visualmente cada etapa de la mitosis.
Reconocer diferentes etapas de ambas gametognesis.
Diferenciar cada parte de un espermatozoide.
Resultados
Actividad N4: Reconocimiento de
espermatozoides
IMAGEN XX:
IMAGEN 6:
Nombre: Tbulos seminferos de rata
(rattusnorvegicus)
Tipo de muestra:Permanente
Tincin:Hematoxilina-eosina
Aumento objetivo:40X
Aumento ocular:10X
Aumento total:400X
Observaciones: (1) Lmina Basal; (2)
Espermatogonias; (3) espermtidas; (4) lmen del
tbulo seminfero.
Se puede observar que a medida que las
estructuras se alejan de la lmina basal, comienzan
a perder volumen citoplsmicodebido a su
maduracin.
IMAGEN : XX
IMAGEN 7:
Nombre:
Espermatozoides humanos
Tipo de muestra:
Permanente
Tincin:
Hematoxilina-eosina
Aumento objetivo:
100X
Aumento ocular:
10X
Aumento total:
1000X
Observaciones: (1) Cabeza; (2) Cola; (3) grupo
de espermatozoides; (4) Cuello.
Es notorio el cambio morfolgico que sufren los
espermatozoides, perdiendo casi la totalidad de
material citoplasmtico y obteniendo una larga
cola flagelada.
Resultados:
Actividad N2: Observacin microscpica de preparaciones permanentes de tejidos
vegetales en distintas etapas de mitosis.
Profase
Telofase
Citocinesis
IMAGEN 1:
Nombre: Raz de cebolla.
Tipo de muestra: Permanente.
Tincin:
Aumento objetivo: 40X
Aumento total: 400X
Observaciones: Etapas del ciclo celular;
Interfase, Profase, Telofase y Citocinesis.
*La
citocinesis
sealada
est
recin
comenzando.
*El crculo encierra una fase determinada para
una mejor identificacin.
Interfase
Metafase
Anafase
IMAGEN 2:
Nombre: Raz de cebolla.
Tipo de muestra: Permanente
Tincin: Azul de Toluidina.
Aumento objetivo: 40X
Aumento total: 400X
Observaciones: Etapas del ciclo celular;
Metafase, Anafase.
Metafase
*El crculo encierra una fase determinada para
una mejor identificacin.
Actividad N3:
Observacin microscpica de una preparacin permanente de tejidos en meiosis.
Folculo
primario
IMAGEN 3:
Nombre: Corte de tejido ovrico de rata.
Folculo primario.
Tipo de muestra: Permanente
Tincin: Hematoxilina-eosina.
Aumento objetivo: 40X
Aumento total: 400X
Observaciones: Se observa encerrado en un
crculo un folculo primario.
IMAGEN 4:
Nombre: Corte de tejido ovrico de rata.
Tipo de muestra: Permanente
Tincin: Hematoxilina-eosina.
Aumento objetivo:
Aumento total:
Observaciones: Se observa la corteza ovrica,
y un conjunto de folculos primordiales a la
izquierda del esquema.
Corteza ovrica
Folculos
primordiales
Folculo maduro
de Graff
ovocito
Zona
pelcida
IMAGEN 5:
Nombre: Corte de tejido ovrico de rata.
Folculo de Graff.
Tipo de muestra: Permanente
Tincin: Hematoxilina-eosina.
Aumento objetivo: 10X
Aumento total: 100X
Observaciones: Folculo de Graff, antro
folicular, corona radiada, ovocito, clulas
granulosas, zona pelcida.
Antro folicular
Corona radiada
Clulas
granulosas
Materiales y Mtodos
Discusin
La primera actividad consisti en comprender la fecundacin, mediante su proceso in vitro,
el cual sucede de la misma manera que en organismos vivos. El espermatozoide debe tener
contacto con el ovocito penetrando las clulas foliculares que lo rodean. Una vez en
contacto con la zona pelcida se lleva a cabo la reaccin acrosmica, en que se vierte el
contenido de enzimas hidrolticas del acrosoma al exterior y se genera entre los gametos un
reconocimiento mutuo y fuerte adhesin. Cuando ocurre la fusin de ambas clulas, el
ovocito sufre cambios a fin de evitar la polespermia, pierde la capacidad de volver a
fusionarse ya que modifica la estructura de la membrana pelcida, expulsando los otros
espermatozoides atrapados en ella. Finalmente, ambos proncleos se fusionan dando fin a
la fecundacin con la primera segmentacin del cigoto y posterior desarrollo embrionario.
(3)
Sin embargo, por motivos externos, no fue posible efectuarlo en este trabajo prctico,
rescatando solamente la informacin terica del proceso.
La segunda actividad fue posible llevarse a cabo mediante la tincin de Azul de Toluidina,
sustancia usada para identificar las sustancias bsicas de los ncleos celulares.(4)Se
identific correctamente la Interfase, cada etapa de la Mitosis y la Citocinesis,
diferenciando principalmente la disposicin de la cromatina y los cromosomas dispuestos
dentro de estas clulas vegetales. La Interfase consiste en la etapa de mayor actividad
biosinttica, tanto en el ncleo como en el citoplasma, duplicando su material gentico y su
tamao (5) es por esto, que el nuclolo cumple un rol fundamental y puede ser claramente
identificado por el microscopio como caracterstica de esta fase. La Profase se identifica
con el inicio de la condensacin de cromatina, manifestada en el oscurecimiento del ncleo,
la aparente desaparicin del nuclolo y discontinuidad de la envoltura nuclear ya que sta
se rompe. La Metafase fue fcilmente identificada ya que consiste primordialmente en la
ubicacin de los cromosomas ya condensados en el centro de la clula gracias al anclaje de
los microtbulos del huso mittico. (6) Luego se separarn las cromtidas hermanas hacia
los polos en la Anafase, con el acortamiento de microtbulos. En la Telofase se pueden
identificar los ncleos pequeos recin formndose pero que an estn muy juntos; como se
trat de clulas vegetales tambin se pudo identificar en esta etapa la creacin del tabique
que formara parte de la pared celular que separe ambas clulas hijas. Finalmente, es
posible identificar la citodiresis observando que ambos ncleos perdieron su forma
circular y que se encuentran ms separados que en la etapa anterior.
Las actividades siguientes se basaron en la observacin de distintas muestras permanentes
teidas con hematoxilina eosina el cual es lo ms usado para observar cortes histolgicos,
coloreando el citoplasma y algunas otras estructuras oscilando de rosa a rojo. (7)
La tercera actividad, se centr en gametognesis. La funcin de la meiosis en este proceso
est en que produce las clulas sexuales con la mitad del material gentico para que as, tras
la fecundacin, el cigoto obtenga la cantidad normal de cromosomas (46 en total) y no
aumente al doble en cada reproduccin como ocurrira con la mitosis. Mediante dos
divisiones sucesivas se generan cuatro clulas haploides (es decir, con la mitad de material
gentico): cuatro espermatozoides en el hombre; tres cuerpos polares y un ovocito en la
mujer. Adems, la meiosis es el proceso responsable de la variabilidad gentica ya que
Conclusin
Una vez finalizado este ltimo prctico y tras el anlisis de los resultados es posible
determinar que los objetivos se cumplieron satisfactoriamente, es decir, se obtuvo imgenes
que al ser interpretadas se establecieron los diferentes elementos buscados.
No cabe duda que poder ver las diferentes fases de la mitosis ha sido de gran ayuda para
poder no slo entender el mecanismo de la misma, sino en algunos casos, poder entender y
aplicarlo en fallas que desencadenan de una mutacin o enfermedad en un individuo.
Adems ha significado un importante avance en la ingeniera gentica, que cada vez avanza
ms y ms, permitiendo realizar intervenciones que aos atrs eran impensadas, como lo es
la fecundacin in vitro, actividad que incluso estaba propuesta para realizarse en este
prctico.
A modo de cierre, la posibilidad de ver en primera persona todas y cada una de las fases e
incluso sus sub-fases de procesos tan importantes y significativos, que de hecho son los que
no slo mantienen a un individuo vivo, mediante el recambio de clulas y regeneracin de
heridas, sino que incluso son los que dieron origen al mismo individuo completo mediante
la fecundacin de clulas obtenidas a partir de procesos meiticos es algo realmente
sorprendente, en especial, el hecho de observar espermatozoides humanos que fcilmente
en un contexto futuro habran sido parte de la formacin de un ser humano completo y
funcional.
Bibliografa
1.2.3. 5. 8. E. M. F. De Robertis, J. Hib, R. Ponzio. Biologa celular y molecular (2000). El
Ateneo. 13 edicin. Buenos Aires. pp 408-4012, 373, 390.
4.[Internet]
http://recursosbiblioteca.unab.cl:2243/buscador.aspx?NIVEL_BUS=3&LEMA_BUS=azul
%20toluidina; citado 12 de Julio de 2016.
6.Universidad Andrs Bello, Gua de laboratorio N6: Mitosis, meiosis y fecundacin,
curso de laboratorio de biologa celular BIO-131.
7.[Internet]
http://recursosbiblioteca.unab.cl:2243/buscador.aspx?NIVEL_BUS=3&LEMA_BUS=eosin
a; citado 12 de Julio 2016.
9. 10. L. C. Junqueira, J. Carneiro. Histologa bsica. (2004). Masson. 5 edicin,
Barcelona. pp.423-425, 412.
11. [Internet] http://www.ugr.es/~agros/ugr/basfis07.htm; citado 14 de Julio 2016.