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SUMRIO

INTRODUO........................................................................................ 02
OBJETIVOS............................................................................................ 03
MATERIAIS UTILIZADOS....................................................................... 04
MTODOS.............................................................................................. 04
RESULTADOS.........................................................................................05
CONCLUSO..........................................................................................05
ATIVIDADES DE VERIFICAO.............................................................06
BIBLIOGRAFIA........................................................................................07

INTRODUO

OBJETIVOS

Preparar material biolgico para realizao do Exame por Imerso;

Realizar as etapas da colorao de Gram;

Observar/Caracterizar o material microbiolgico quanto a forma arranjo o Gram;

Compreender os diferentes comportamentos celulares quanto a colorao de


Gram;

MATERIAIS UTILIZADOS

Palito de dentes

1 Pisseta

Reagentes para colorao de Gram (cristal violeta, lugol, lcool acetonado, fucsina
ou safranina)

1 gota de iogurte

1 gota de leo de imerso

1 Ala de Nichrome

1 Microscpio (Bioval / Bivolt)

2 Lminas de vidro

1 folha de papel absorvente

Fsforo

1 Lamparina

MTODOS
1) Preparo das amostras para microscopia:

Pegar 1 lmina e secar com papel absorvente;

Coletar material da boca, nos dentes com o palito de dentes;

Realizar o esfregao com uma camada fina de material biolgico, esfregar com o
palito em movimentos elpticos;

Esperar o esfregao secar e, aps de seco, passar ligeiramente a lmina pelo lado
oposto a amostra sobre a chama da lamparina por trs vezes;
2) Colorao de Gram:

Adicionar o corante cristal violeta por 1 minuto e em seguida lavar com gua e,
retirar o excesso de gua;

Adicionar o lugol por 1 minuto e em seguida lavar com gua e retirar o excesso de
gua;

Adicionar o lcool acetonado por 15 segundos e em seguida lavar com gua e


retirar o excesso de gua;

Adicionar a safranina ou fucscina por 30 segundos e em seguida lavar com gua e


secar suavemente com papel absorvente.
3) Tcnica de observao por imerso:

Colocar uma gota de leo de imerso sobre o esfregao;

Fixar a lmina na platina;

Mover a lmina com auxlio do charriot de forma que o leo de imerso fique na
direo da objetivas;

Girar o revlver e posicionar a lente objetiva de 100x;

Olhando pela lateral, girar o macromtrico at que a objetiva mergulhe no leo de


imerso e encoste na lmina;

Girar o macromtrico no sentido contrrio at achar o foco inicial;

Mover o charriot e analisar toda a lmina;

Aps anlise do material, limpar a objetiva com solvente apropriado (lcool/ter ou


xileno).

RESULTADOS

Esfregao/Material

Forma

Arranjo

Gram

01

Bacilo

Diplobacilo

Positiva

02

Bacilos

Diplobacilo

Negativa

CONCLUSES

ATIVIDADES DE VERIFICAO N. 2
1) Complete o quadro a seguir, descrevendo o que ocorre com as respectivas clulas
bacterianas a cada etapa da colorao de Gram.

Soluo

Clulas
Gram +

Gram -

Cristal Violeta
Lugol
lcool-acetonado
Fuscina ou Safranina

2) Explique a funo do leo de imerso utilizado.


Resposta:

3) As bactrias do gnero Mycobacterium no se coram pelo mtodo de Gram. Qual seria


uma explicao para esse fato? Como corar este tipo de microorganismo?
Resposta:
4) Sabe-se que se ocorrer um aquecimento exagerado no momento da fixao do
material, as bactrias G+ passam a se comportar como G-. Qual seria uma explicao
para esse fato?
Resposta:

5) Em geral, os corantes bsicos


Resposta:

BIBLIOGRAFIA
5

Disponvel em: <> . Acessado em: /07/2016.


Disponvel em: <> . Acessado em: /07/2016.
Disponvel em: <> . Acessado em: /07/2016.
Disponvel em: <> . Acessado em: /07/2016.
Disponvel em: <> . Acessado em: /07/2016.