Anda di halaman 1dari 4

Latar Belakang Klinis

Sifilis adalah infeksi kronis yang berlangsung pada beberapa tahap infeksi yang
berbeda, yaitu : primer, sekunder, dan kuartener. Tahapan ini menghasilkan gejala
klinis yang beragam, biasanya diawali dengan luka awal sebagai peluang kemudian
ruam sifilis diikuti oleh periode panjang dormansi. Infeksi yang tidak diobati pada
akhirnya dapat mengakibatkan masalah jantung dan neurosifilis.
Infeksi ini disebabkan oleh Treponema pallidum dan biasanya diperoleh melalui
kontak seksual, meskipun penyakit ini dapat ditularkan melalui transfusi darah yang
terinfeksi. Infeksi intrauterin juga dapat menularkan. Oganisme ini telah terbukti
hampir tidak mungkin untuk dibiakkan di media buatan, dan diagnosis infeksi
biasanya tergantung pada demonstrasi antibodi dalam darah, yang muncul segera
setelah infeksi awal.
Tes untuk sifilis dibagi ke dalam empat kategori: pemeriksaan mikroskopis langsung,
tes antibodi treponemal, non - tes antibodi treponemal dan tes antigen langsung.
Karena periode dormansi berlangsung lama dan antibodi anti - treponema non
spesifik dalam spesimen darah telah menjadi semakin populer untuk skrining.
Kegunaan
Kit ini dimaksudkan untuk digunakan oleh tenaga terlatih dan berkualitas untuk
mendeteksi antibodi terhadap Treponema pallidum dalam serum manusia dan
plasma
Prinsip Uji
Penggunaan TPHA Lab 21 dengan mengawetkan eritrosit burung yang dilapisi
dengan antigen T. pollidum (Nichols strain), yang akan mengikat antibodi spesifik
dalam serum atau plasma tertentu. Sel-sel yang tersuspensi dalam 3 media
mengandung komponen untuk menghilangkan reaksi nin spesifik tertentu. Reaksi
positif ditunjukkan oleh aglutinasi dari sel-sel. Reaksi negatif ditunjukkan oleh
pengendapan sel menjadi cincin kecil. Meskipun kit ini dimaksudkan untuk
digunakan terutama sebagai tes kualitatif. Tingkat antibodi dapat dititrasi dengan
menggandakan dilusi. Pola aglutinasi dapat ditafsirkan oleh mata atau oleh
pembaca plat yang mampu membaca pola aglutinasi.
Isi KIT
NAMA

REAGEN

100 test
TPHA /010

200 test
TPHA/020

1000 test

R1: sel tes

Awetan
eritrosit ayam
yang dilapisi
dengan

Cukup untuk
100 tes

Cukup untuk
200 tes

cukup untuk
1000 tes

antigen dari
T.pallidum
R2: sel kontrol

Awetan
eritrosit ayam
yang tidak
dilapisi

Cukup untuk
100 tes

Cukup untuk
200 tes

cukup untuk
1000 tes

R3: Pencair

larutan garam
yang
mengandung
penyerap

20 ml

2 x 20 ml

200 ml

R4: Positive

Serum
manusia Titer:
1280

1 ml

1ml

2 ml

R5: Negative
control

Serum
manusia Titer:
<80

1 ml

1 ml

2 ml

Instruksi untuk digunakan

Peringatan Dan Pencegahan


Untuk penggunaan in vitro diagnostik hanya
Semua reagen mengandung sodium azida (<0,1% w / v). cairan limbah crlsing dari
penggunaan kit harus memerah dengan sejumlah besar air untuk menghindari
accur
senyawa peledak dalam pipa laboratorium. Bahan kontrol yang disediakan berasal
dari serum manusia. Mereka telah diuji di tingkat donor dan menemukan negatif
untuk Hepatitis B dan C dan HIV 1 dan 2. Namun mereka harus diperlakukan seolaholah mampu menularkan penyakit. Spesimen serum manusia dan plasma harus
diperlakukan sebagai mikrobiologis berbahaya dan ditangani sesuai dengan
peraturan yang berlaku. Jangan menggunakan kit setelah tanggal kedaluwarsanya.
Jangan menggabungkan atau pertukaran reagen dari kit dengan nomor lot yang
berbeda.
Penyimpanan
Simpan pada 2-8 C jika tidak digunakan, toko botol tegak. Jangan membekukan
kehidupan rak tanggal yang valid tercantum pada label kit.
Peralatan Yang Dibutuhkan

Pipet terkalibrasi dengan volume 10, 25, 75 dan 190 mikroliter. 95 - baik
microplates (format U-baik).
TPHA kit mungkin untuk penanganan cair dan juga interpretasi hasil. Berbagai
sistem telah digunakan untuk sistem otomatisasi untuk saran pada otomatisasi.
Spesimen
Spesimen serum atau plasma harus bebas dari sel-sel darah dan kontaminasi
mikroba. Mereka dapat disimpan pada 2-8 c sampai 7 hari sebelum pengujian.
Spesimen membutuhkan penyimpanan yang lebih lama harus dibekukan pada 20 C
atau lebih rendah. spesimen beku harus dicairkan dan dicampur dengan baik
sebelum pengujian.
Uji Protocol (Manual)
Membawa semua reagen dan spesimen ke suhu kamar sebelum digunakan
Catatan: kit kontrol positif dan negatif harus dijalankan dengan masing-masing tes.
Uji Kualitatif
sumur ada yang diperlukan untuk setiap spesimen
NB: yang TPHA 1000 kit (. Cat No. TPHA / 1000) ditujukan untuk skrining sejumlah
besar spesimen dan mengandung sel control dalam volume kecil. Spesimen itu
dimaksudkan disaring hanya menggunakan sel uji dalam contoh pertama dan sel
kontrol digunakan saat mengulangi tes pada spesimen yang memberikan hasil
positif ketika pertama kali diuji.
1. Spesimen delution (untuk 1 di 20)
Tambahkan 190 mikroliter dari deluent untuk satu sumur, tambahkan 10 mikroliter
dari spesimen dari beberapa baik, Aduk
Catatan: Kontrol positif dan negatif disediakan siap untuk digunakan dan tidak
memerlukan pengenceran.
2. Uji
Tambahkan 25 mikroliter dari spesimen deluted dari langkah 1 untuk menguji baik,
tambahkan 25 mikroliter dari spesimen deluted dari langkah 1 untuk mengontrol
dengan baik. Resuspend tes dan mengontrol suspentions sel dengan gemetar botol.
Periksa untuk resuspension lengkap. Tambahkan 75 mikroliter sel tes untuk menguji
baik dan 75 kontrol mikroliter sel untuk kontrol dengan baik. Aduk rata. Inkubasi
pada 15 - 30 C pada permukaan bebas getaran selama minimal 45 menit. Membaca
pola jual. pola aglutinasi adalah musuh stabil setidaknya tiga jam jika tidak
terganggu

Uji Kuantitatif
8 sumur yang diperlukan untuk setiap spesimen
Catatan: Kit positif dan kontrol negatif harus dijalankan dengan masing-masing
banyak tes
1. Spesimen Dilusi (untuk 1 di 20)
Tambahkan 190 mikroliter pengencer untuk baik, tambahkan 10 spesimen mikroliter
dari beberapa baik, menjamin melalui pencampuran.
Catatan: kontrol positif dan negatif disediakan siap untuk digunakan dan tidak
memerlukan pengenceran.
2. Titrasi
Meninggalkan 1 juga kosong, tambahkan 25 mikroliter pengencer untuk masingmasing dari 7 sumur yang tersisa di deretan 8 sumur. Tambahkan 25 mikroliter dari
langkah 1 ke 1 dengan baik. Tambahkan 25 mikroliter dari langkah 1 ke ZND baik
dan campuran, kemudian serial encer sepanjang urutan baik, membuang kelebihan
25 mikroliter dari sumur akhir.
3. Uji
Lembut mencampur sel tes untuk memastikan resuspensi menyeluruh. Tambahkan
75 mikroliter sel tes untuk setiap baik (berbagai spesimen pengenceran final
setelah penambahan sel 1 n 80-1 di 10,24)
Campur menyeluruh, inkubasi pada 15 - 30 C pada permukaan bebas getaran
selama minimal of45 menit. Membaca pola menetap. pola aglutinasi stabil
setidaknya selama tiga jam jika tidak terganggu. Titer spesimen adalah kebalikan
dari yang tertinggi pengenceran pemberian aglutinasi.
Interpretasi Dan Uji Validation
Quality Control internal.
Untuk recuite yang akan berlaku kontrol negatif harus memberikan hasil negatif
(lihat panduan membaca bergambar) dan kontrol positif harus memberikan titer
680-2580.
Spesimen memberikan kurang aglutinasi dari itu ditampilkan sebagai +/- atas
adalah Negatif
Spesimen memberikan parutan aglutinasi dari itu ditampilkan sebagai +/- atas
harus dicatat sebagai sementara positif dan prosedur tes diulang seperti di atas
tetapi dalam rangkap menambahkan sel kontrol yang disediakan untuk satu set
sumur dan sel pengujian yang lain.

Anda mungkin juga menyukai