TEMA IV.

GLUCLISIS
1.Generalidades
2.Reacciones de la gluclisis
3.Control de la gluclisis

PRINCIPALES DESTINOS DE LA GLUCOSA

SNTESIS DE GLUCGENO,
ALMIDN, SACAROSA
Reserva

GLUCOSA
Oxidacin va
Pentosas fosfato

RIBOSA-5-FOSFATO

Oxidacin va
gluclisis

PIRUVATO

PRECURSOR

INTERMEDIARIOS

(METABOLITOS)

PRODUCTO

Ecuacin global:
GLUCOSA + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi

2 PIRUVATO + 2NADH + 2H+ +2ATP+2H2O

La conversin de glucosa en piruvato es exergnica:

Glucosa + 2NAD+

2 piruvato + 2NADH + 2H+

G1o = -146 kJ/mol

y la formacin de ATP a partir de ADP y Pi, que es endergnica:

2ADP + 2Pi

2 ATP + 2 H2O

G2o = 61 kJ/mol

Por lo tanto, la variacin global de energa libre estndar es:

Gso = G1o + G2o = -146 kJ/mol + 61 kJ/mol = -85 kJ/mol

La gluclisis es un proceso esencialmente IRREVERSIBLE

IMPORTANCIA DE LOS METABOLITOS FOSFORILADOS

1. Los metabolitos fosforilados no pueden abandonar la clula

2. Los grupos fosforilo son componentes esenciales en la conservacin

enzimtica de la energa metablica
3. La fijacin de los grupos fosfato a los centros activos de los enzimas
proporciona energa de fijacin que contribuye a reducir la energa de
activacin aumentando adems la especificidad de las reacciones
catalizadas enzimticamente

TRANSFORMACIONES QUMICAS EN LA GLUCLISIS

La degradacin del esqueleto carbonado de la glucosa que produce piruvato

La fosforilacin del ADP a ATP por la accin de compuestos fosfato de alta
energa formados durante la gluclisis

La transferencia de un ion hidruro al NAD+, lo cual da como resultado la
formacin de NADH

NIVELES DE ESTUDIO DE LA VA GLUCOLTICA:

1. Los pasos de interconversin qumica

2. El mecanismo de la transformacin enzimtica
3. La energtica de las transformaciones
4. Los mecanismos de control

FASES DE LA GLUCLISIS
Primera
Fase:

Fase Preparatoria:
Fosforilacin de glucosa
y su conversin en
Gliceraldehdo 3-fosato

Segunda
Fase:

Fase de beneficios:
Conversin oxidativa del
gliceraldehdo 3-fosfato
a piruvato con formacin
acoplada de ATP y NADH

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

1. Fosforilacin de la glucosa

Glucosa + ATP

Glucosa-6-fosfato + ADP

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

1. Fosforilacin de la glucosa
 Es el primer paso de la gluclisis
 Es una reaccin irreversible Go=-16.7 kJ/mol
 La Hexocinasa cataliza la reaccin (Transferasa), es un enzima citoslica
 Requiere de Mg2+
 La hexocinasa cataliza la transferencia de un grupo fosforilo del ATP a la glucosa
para formar glucosa-6-fosfato y ADP

LA HEXOCINASA ES UN MONMERO

8A
De Levadura

Kuser et al. (2008)

Proteins 72:731

8A

MECANISMO CATALTICO DE LA HEXOCINASA

1. Forma un complejo ternario con la glucosa y el Mg2+-ATP
2. El Mg2+ forma un complejo con los oxgenos del ATP de tal modo que
apantalla las cargas negativas
3. Favoreciendo el ataque nucleoflico por un OH de la glucosa al ATP
ES EL PRIMER CONSUMO DE ATP
LA CTALISIS ES POR PROXIMIDAD

Kuser et al. (2008)

Proteins 72:731

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

2. Conversin de la glucosa 6-fosfato en fructosa 6-fosfato

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

2. Conversin de la glucosa 6-fosfato en fructosa 6-fosfato
Es una reaccin reversible Go=1.7 kJ/mol
 La Fosfohexosa isomerasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
 La Fosfohexosa isomerasa cataliza el reordenamiento de los grupos carbonilo y
e hidroxilo en el C-1 y C-2 de la glucosa

Es un dmero
de Thermus
termophilus

Yamamoto et al. (2008)

J. Mol. Biol. 382:747

Residuos de la
interface del dmero
responsables de
la estabilidad

Yamamoto et al. (2008)

J. Mol. Biol. 382:747

Residuos del sitio

cataltico

Yamamoto et al. (2008)

J. Mol. Biol. 382:747

REACCIN DE LA FOSFOHEXOSA ISOMERASA

CATLISIS BSICA

Glu

Glu

Glu

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

3. Fosforilacin de la fructosa 6-fosfato a fructosa 1,6-bifosfato

Fosfofructoquinasa-1
Mg2+
ATP
Fructosa-6-fosfato

ADP
Fructosa-1,6-bifosfato
MgATP2-

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

3. Fosforilacin de la fructosa 6-fosfato a fructosa 1,6-bifosfato
 Es una reaccin irreversible Go=-14.2 kJ/mol
 La Fosfofructocinasa-1 (PFK-1) cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
 La Fosfofructocinasa-1 cataliza la transferencia de un grupo fosforilo desde el ATP
a la Fructosa 6-fosfato para formar Fructosa 1,6-bifosfato
ES EL SEGUNDO CONSUMO DE ATP
ES CONSIDERADO EL PRIMER PASO COMPROMETIDO, EL PRODUCTO
FORMADO SLO PUEDE SEGUIR LA GLUCLISIS Y NO OTRA RUTA

ESTRUCTURA DE LA FOSFOFRUCTOCINASA (PFK-1)

La PFK-1 es un tetrmero
Es un enzima alostrica

La PFK-1 es un tetrmero
Es un enzima alostrica
(ATP ES UN MODULADOR
ALOSTRICO NEGATIVO)
[ATP] DISMINUYE
AUMENTO EN LA ACTIVIDAD
DE LA PFK-1

Schirmer et al. (1990)

Nature 343:6254

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

4. Rotura de la fructosa 1,6-bifosfato

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

4. Rotura de la fructosa 1,6-bifosfato
 Es una reaccin reversible Go=23.8 kJ/mol
 La Fructosa 1,6-bifosfato aldolasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
 La Aldolasa cataliza una condensacin aldlica reversible
 La fructosa 1,6-bifosfato se rompe dando dos triosas fosfato diferentes, el
gliceraldehdo 3-fosfato, una aldosa, y la dihidroxiacetona fosfato, una cetosa

La aldolasa es un homotetrmero

Msculo de Conejo

Sherawat et al (2008)
Acta Cryst. D64:543

Residuos del sitio activo del Aldolasa

Sherawat et al (2008)
Acta Cryst. D64:543

IMINA

FASE PREPARATORIA DE LA GLUCLISIS

5. Interconversin de las triosas fosfato
 Es una reaccin reversible Go=7.5 kJ/mol
 La triosa fosfato isomerasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica
 La isomerasa cataliza la conversin de dihidroxiacetona fosfato a gliceraldehdo
3-fosfato

1
2
3

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

GLUCOSA
2 ATP
2 ADP

2 MOLCULAS DE GLICERALDEHDO 3-FOSFATO

4 ADP
4 ATP

PASOS DE FOSFORILACIN
CONSERVADORES DE ENERGA

2 MOLCULAS DE PIRUVATO

POR UNA MOLCULA DE GLUCOSA SE FORMAN

2 MOLCULAS DE ATP

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

6. Oxidacin del gliceraldehdo 3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

6. Oxidacin del gliceraldehdo 3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato
 Es una reaccin reversible Go=6.3 kJ/mol
 La gliceraldehdo 3-fosfato deshidrogenasa cataliza la reaccin, es un enzima
citoslica
 La gliceraldehdo 3-fosfato deshidrogenasa cataliza la conversin del gliceraldehdo
3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato (HOLOENZIMA= ENZIMA + NAD+)

Es un tetrmero

E. coli

REACCIN DE LA GLICERALDEHDO 3-FOSFATO DESHIDROGENASA

OXIDACIN

ACIL FOSFATO
Grupo
aldehdo

Anhdrido de
cido carboxlico
con cido fosfrico

G= -49.3 kJ/mol
(Compuesto fosforilado con
alto valor de G de hidrlisis)

ACEPTOR DE HIDRGENO EN LA REACCIN ES EL NAD+

LOS NUCLETIDOS DE NICOTINAMIDA

HIDROGENACIN

340 nm

OXIDORREDUCTASAS
DESHIDROGENASAS
260 nm
+ 2e-

+ 2H+

NADH + H+

Eo

NADP+ + 2e-

+ 2H+

NADPH + H+

Eo

NAD+

LA ASOCIACIN ENTRE UNA DESHIDROGENASA Y

EL COFACTOR (NAD O NADP):
ES DBIL Y DIFUNDE FCILMENTE DESDE
UN ENZIMA A OTRO
PLIEGE DE ROSSMANN

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

7. Transferencia de fosforilo desde el 1,3-bifosfoglicerato al ADP

LA FORMACIN DE ATP POR

TRANSFERENCIA DEL GRUPO
FOSFORILO A PARTIR DE UN
SUSTRATO SE CONOCE COMO

FOSFORILACIN A NIVEL DE
SUSTRATO
IMPLICANDO ENZIMAS SOLUBLES
E INTERMEDIARIOS QUMICOS

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

7. Transferencia de fosforilo desde el 1,3-bifosfoglicerato al ADP
 Es una reaccin irreversible Go= -18.5 kJ/mol
 La fosfoglicerato cinasa cataliza la reaccin, es un enzima
citoslica
 La fosfoglicerato cinasa cataliza la transferencia del grupo fosforilo de el
gliceraldehdo 1,3-bifosfoglicerato al ADP

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

8. Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

8. Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato
 Es una reaccin reversible Go= 4.4 kJ/mol
 La fosfoglicerato mutasa cataliza la reaccin, es un enzima
citoslica
 La fosfoglicerato mutasa cataliza un desplazamiento reversible del grupo fosforilo
entre C-2 y C-3 del glicerato
ES UN DMERO
Humano
Levadura
Bacteria

Wang et al. (2005)

Biochem. Biophys. Res. Commun. 331:1207

Transferencia del gpo. Fosforilo del enzima

al sustrato

Transferencia del gpo. Fosforilo del C-3 del

Sustrato al enzima

SITIO ACTIVO DE LA FOSFOGLICERATO MUTASA DE LEVADURA

Wang et al. (2005)

Biochem. Biophys. Res. Commun. 331:1207

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

9. Deshidratacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

9. Deshidratacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato
 Es una reaccin reversible Go= 7.5 kJ/mol
 Es la segunda reaccin glucoltica que genera un compuesto con potencial
elevado de transferencia del grupo fosforilo
 La enolasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica, promueve
la eliminacin reversible de una molcula de agua del 2-fosfoglicerato
(HOLOENZIMA= ENZIMA + Mg2+)
Es un dmero

MECANISMO CATALTICO DE LA ENOLASA

2-Fosfoglicerato unido al enzima

Intermediario enlico

Fosfoenolpiruvato

1. Unin coordinada por dos iones Mg2+

2. Extraccin de un protn por catlisis bsica
3. Extraccin de un hidroxilo por catlisis cida

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

10. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP

FOSFORILACIN A
NIVEL DE SUSTRATO

FASE DE BENEFICIOS DE LA GLUCLISIS

10. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP
 Es una reaccin irreversible Go= -31.4 kJ/mol
 La piruvato cinasa cataliza la reaccin, es un enzima citoslica, promueve la
transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP

Es un tetrmero
Es un enzima alostrica

Fosforilacin
Hexocinasa
GLUCOSA

Isomerizacin
Fosfohexosa FRUCTOSA 6-FOSFATO
GLUCOSA 6-FOSFATO isomerasa
Fosforilacin
PFK-1

FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO

Rotura

FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO

Aldolasa

GLICERALDEHDO 3-FOSFATO Oxidacin y

Fosforilacin

Fosforilacin a nivel
de sustrato

G 3-P
Deshidrogenasa
DIHIDROXIACETONA FOSFATO

1,3-BIFOSFOGLICERATO

Fosforilacin a nivel
de sustrato
PIRUVATO

Piruvato cinasa

3-FOSFOGLICERATO
Isomerizacin

Fosfoglicerato
cinasa

FOSFOENOLPIRUVATO

Mutasa

Enolasa
2-FOSFOGLICERATO

DESTINOS DEL PIRUVATO

Condiciones
Aerbicas

Condiciones
Anaerbicas

Piruvato
CO2
Acetil-CoA
Ciclo de
Krebs
CO2
e-

Piruvato
NADH
NAD+
Lactato
Fermentacin del
cido lctico

Condiciones
Anaerbicas
(Levadura)
Piruvato

Etanol + CO2
Fermentacin
alcohlica

Fosforilacin
Oxidativa

Destino anablico: Precursor de la sntesis de alanina

CONDICIONES AERBICAS
PIRUVATO

NADH

Oxidacin

ACETATO

Ciclo de
Krebs

CO2 + H2O

eFosforilacin
oxidativa

NAD+

EN CONDICONES DE HIPOXIA
Msculo esqueltico muy activo, plantas sumergidas

EL NADH NO PUEDE SER REOXIDADO POR EL OXGENO

PARA REGENERAR LA POZA DE NAD+
SE REALIZA UNA TRANSFERENCIA DE LOS ELECTRONES
DESDE EL NADH PARA FORMAR
UN PRODUCTO FINAL REDUCIDO

ETANOL O LACTATO

LOS ERITROCITOS NO TIENEN

MITOCONDRIAS POR LO TANTO
EN CONDICIONES AERBICAS
DURANTE LA GLUCLISIS
PRODUCEN LACTATO

11. El piruvato es el aceptor electrnico terminal en la fermentacin lctica

ltimo paso de la va glucoltica

nica reaccin que dispone el

cuerpo para formar L-lactato o
utilizarlo.

Totalmente reversible.

11. El piruvato es el aceptor electrnico terminal en la fermentacin lctica

1. Es una reaccin irreversible Go= -25.1 kJ/mol
2. La reaccin esta catalizada por la lactato deshidrogenasa

LDH

NO HAY CAMBIO NETO

DE NAD+ O DE NADH

GLUCOSA

LACTATO

(C6H12O6)

(C3H6O3)

2 PASOS DE OXIDO-REDUCCIN

NO HAY CAMBIO EN
EL CONTENIDO NETO
DE NAD+ O DE NADH
HAY PRODUCCIN DE
2 ATP

NO HAY CAMBIO EN EL ESTADO DE

OXIDACIN DEL CARBONO
LA PROPORCIN H:C ES LA MISMA
FERMENTACIN.- Es un proceso que extrae energa (ATP) pero no hay consumo
de oxgeno ni cambian las concentraciones de NAD+ o NADH

Fermentacin alcohlica
La levadura y otros microorganismos

DOS PASOS:
1. Descarboxilacin del piruvato (irreversible) catalizada por la piruvato descarboxilasa
2. Reduccin del acetaldehdo para formar etanol a travs de la accin de la
alcohol deshidrogenasa

La piruvato descarboxilasa Holoenzima= Enzima + TPP (Tiamina pirofosfato) y Mg2+

Grupo prosttico
Anillo de
tiazolio

Protn relativamente
cido

Tiamina Pirofosfato (TPP)

Mecanismo cataltico de
la Piruvato descarboxilasa

Mecanismo de la
Alcohol
deshidrogenasa

EL NADH FORMADO EN LA GLUCLISIS DEBE RECICLARSE

PARA REGENERAR EL NAD+
CONDICIN:
AERBICA SE REGENERA DURANTE LA FOSFORILACIN OXIDATIVA
ANAERBICA: MSCULO, ERITROCITOS MEDIANTE FERMETACIN

LCTICA
LEVADURA Y OTROS MICROORGANISMOS MEDIANTE

FERMENTACIN ALCOHLICA

REGULACIN DE LA GLUCLISIS
GLUCOSA

HEXOCINASA

GLUCOSA 6-FOSFATO
FRUCTOSA 6-FOSFATO

FOSFOFRUCTOCINASA-1
FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO
DIHIDROXIACETONA FOSFATO + GLICERALDEHDO 3-FOSFATO
1,3-FOSFOGLICERATO
3-FOSFOGLICERATO
2-FOSFOGLICERATO
FOSFOENOLPIRUVATO

PIRUVATO CINASA

PIRUVATO

HEXOCINASA
ES UN MONMERO

REGULACIN
ALOSTRICA
ES INHIBIDA POR SU PRODUCTO,
LA GLUCOSA 6-FOSFATO
POR LA PRESENCIA DE
4 ISOENZIMAS (I A IV)

HEXOCINASA I A III EN MSCULO KM= 0.1 mM

HEXOCINASA IV EN HGADO

GLUCOCINASA KM= 10 mM

UNA BAJA [GLUCOSA] ES UTILIZADA POR MSCULO

UNA ELEVADA [GLUCOSA] ES UTILIZADA POR EL HGADO

FOSFOFRUCTOCINASA-1
La PFK-1 es un tetrmero
Es un enzima alostrica

Regulacin alostrica de la PFK-1

ELEVADO CONTENIDO DE ATP
INHIBE ALOSTRICAMENTE LA PFK-1
ELEVADO CONTENIDO DE CITRATO
(intermediario de la oxidacin aerbica
del piruvato) INHIBE LA PFK-1
AMP, ADP Y LA
FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
AUMENTAN LA ACTIVIDAD
DE LA PFK-1

ESTRUCTURA DE LA FOSFOFRUCTOCINASA-2

CONTROL DE LA SNTESIS Y DEGRADACIN DE LA

FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO

GLUCOSA ABUNDANTE
(Gliclisis activa)

CONTROL DE LA SNTESIS Y DEGRADACIN DE LA

FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO
GLUCOSA ESCASA

ELEVADA
GLUCOSA

ESCASA
GLUCOSA

PFK-2

FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO

PFK-1
MS
ACTIVA

PFK-2

FRUCTOSA 2,6-BIFOSFATO

PFK-1

FBPasa-2

FRUCTOSA 6-FOSFATO

PFK-1
MENOS
ACTIVA

+ ++2+ADP
GLUCOSA
GLUCOSA
+ 2 ATP
+ 2+NAD
2 NAD
4 ADP
+ 2+ Pi
2 Pi

2 PIRUVATO
2 PIRUVATO
+ 2 ADP
+ 2+NADH
2 NADH
+ 2H
+ +2H
+ +2+ATP
4ATP
+ 2+ H
2 2H
O2O
MECANISMOS
DE REGULACIN
DE LOS
ENZIMAS
RECUPERAR
LA POZA
DE
NAD+
QUE CATALIZAN LAS REACCIONES IRREVERSIBLES

Aerobiosis:
Anaerobiosis:

PIRUVATO

Fosforilacin oxidativa
Fermentacin lctica o alcohlica

HEXOCINASA: REGULACIN POR ALOSTERISMO Y POR ISOFORMAS

PFK-1: REGULACIN ALOSTRICA

PIRUVATO CINASA
Es un tetrmero
Es un enzima alostrica
1)REGULACIN ALOSTRICA:
ELEVADO CONTENIDO DE ATP Y LA ALANINA
LA INHIBEN ALOSTRICAMENTE
LA FRUCTOSA 1,6-BIFOSFATO LA
ACTIVAN ALOSTRICAMENTE
2) POR ISOENZIMAS
LA L PREDOMINA EN HGADO
LA M EN MSCULO Y CEREBRO
3) POR MODIFICACIN COVALENTE
SLO LA ISOFORMA L
LA FOSFORILACIN DEL ENZIMA RESULTA EN SU INHIBICIN

LA PIRUVATO CINASA SE REGULA POR EFECTORES ALOSTRICOS, POR LA

PRESENCIA DE ISOFORMAS Y POR MODIFICACIN COVALENTE

MODIFICACIN
COVALENTE
(Regulacin
Hormonal)

NIVEL ALTO
DE GLUCOSA
SANGUNEA

Piruvato cinasa
fosforilada
(Menos activa)

Piruvato cinasa
desfosforilada
(Ms activa)

EFECTORES ALOSTRICOS

NIVEL BAJO
DE GLUCOSA
SANGUNEA

REGULACIN DEL TRANSPORTE DE GLUCOSA

REGULACIN DE LA GLICLISIS
COMPARTAMENTALIZACIN: Se lleva a cabo en el citosol
ENZIMTICO: HEXOCINASA (Por alosterismo, isoformas)
PFK-1 (Por alosterismo)
PIRUVATO CINASA (Alosterismo, isoformas, modificacin covalente)
TRANSPORTE: Por isoformas

LA GLUCOSA PUEDE SER OBTENIDA A PARTIR DE

OTROS CARBOHIDRATOS Y ENTONCES ENTRAR A
GLUCLISIS
MALTOSA + H2O

LACTOSA + H2O

SACAROSA + H2O

Maltasa

Lactasa

Sacarasa

2 D-GLUCOSA

D-GALACTOSA + D-GLUCOSA

D-FRUCTOSA + D-GLUCOSA

LOS SUSTRATOS
O PRODUCTOS
DE LA
GLUCLISIS
PUEDEN SER A
SU VEZ
SUSTRATOS DE
OTRAS VAS
METABLICAS

FORMACIN DE ATP ACOPLADA A LA GLUCLISIS

Ecuacin global:
Glucosa + 2NAD+ + 2ADP + 2Pi

2 piruvato + 2NADH + 2H+ +2ATP+2H2O

La conversin de glucosa en piruvato es exergnica:

Glucosa + 2NAD+

2 piruvato + 2NADH + 2H+

G1o = -146 kJ/mol

y la formacin de ATP a partir de ADP y Pi, que es endergnica:

2ADP + 2Pi

2 ATP + 2 H2O

G2o = 61 kJ/mol

Por lo tanto, la variacin global de energa libre estndar es:

Gso = G1o + G2o = -146 kJ/mol + 61 kJ/mol = -85 kJ/mol

La gluclisis es un proceso esencialmente IRREVERSIBLE