Glikosida flavonol antioksidan dalam daun murbei (Morus alba L.

)
terisolasi berdasarkan aktivitas antioksidan LDL
abstrak
Oksidasi low-density lipoprotein (LDL) telah terlibat dalam atherogenesis.
Antioksidan yang mencegah LDL dari oksidasi dapat mengurangi aterosklerosis.
Kami menyelidiki aktivitas antioksidan LDL dan diekstraksi senyawa murbei (Morus
alba L.) daun. Aktivitas antioksidan LDL dari 60% etanol diekstrak dari daun murbei,
yang menghambat oksidasi LDL manusia yang diinduksi oleh tembaga ion,
ditentukan atas dasar waktu oksidasi lag dan dihitung sebagai epigallocatechingallate setara 3 (58,3 mol EGCG
setara / g berat kering). Tiga glikosida flavonol [quercetin 3- (6-malonil glukosida),
rutin (quercetin 3-rutinosida) dan isoquercitrin(quercetin 3-glucoside)] diidentifikasi
sebagai senyawa antioksidan LDL besar dengan LC-MS dan NMR. Jumlah ini
glikosida flavonol dalam daun murbei dan teh murbei-daun ditentukan oleh HPLC.
Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa quercetin (Glukosida 6-malonil) 3 dan
rutin adalah glikosida flavonol dominan dalam daun murbei.
1. Perkenalan
Dalam beberapa tahun terakhir, telah terjadi peningkatan minat dalam
antioksidan berasal dari buah-buahan, sayuran, rempah-rempah, dan
minuman. Studi epidemiologis telah menunjukkan bahwa asupan makanan
antioksidan dari tanaman adalah terbalik terkait dengan kematian akibat
penyakit jantung koroner (Giugliano, 2000). Modifikasi oksidatif LDL adalah
berpikir untuk memainkan peran kunci dalam patogenesis awal aterosklerosis
(Aviram, 1993; Steinberg, Parthasarathy, Carew, Khoo, & Witztum, pakar
1989). Vitamin C dan E dari tanaman melindungi LDL dari modifikasi oksidatif
in vitro (Babiy, Gebicki, & Sullivan, 1990; Jialal, Vega, & Grundy, 1990) dan
menurunkan morbiditas koroner penyakit jantung (Enstrom, Kanim, & Klein,
1992; Rimm dkk., 1993; Stampfer dkk., 1993; Stephens et al., 1996).
Suplemen makanan pada manusia dari nutrisi kaya polifenol, seperti teh
hitam, hijau teh (Serafini, Ghiselli, & Ferro-Luzzi, 1994), anggur merah
(Aviram & AMDAL, 1993), dan minyak zaitun (Fuhrman, Lavy, & Aviram,
1995), telah terbukti berhubungan dengan peningkatan kapasitas antioksidan
plasma, dan berkurang risiko penyakit jantung koroner. Murbei (Morus alba L.)
daun, kulit batang dan cabang telah lama digunakan dalam pengobatan Cina
untuk mengobati demam, melindungi hati, memperbaiki penglihatan,
memperkuat sendi, memfasilitasi pembuangan urin dan menurunkan tekanan
darah (Zhishen, Mengcheng, & Jianming, 1999). Daun spesies murbei
dikonsumsi di Korea dan Jepang sebagai makanan nutracetical
antihyperglycemic untuk pasien dengan diabetes mellitus karena daun
mengandung 1-deoxynojirimycin, dikenal sebagai salah satu yang paling
ampuh
inhibitor a-glikosidase (Kim et al., 2003). Di Jepang,

konsumsi teh murbei-daun telah meningkat. Aktivitas antioksidan dari daun

murbei memiliki juga
dilaporkan. Doi, Kojima, dan Fujimoto (2000) melaporkan bahwa ekstrak 1butanol daun murbei memulung yang DPPH radikal dan menghambat
oksidasi modifikasi kelinci dan LDL manusia. Lima flavonol glikosida (rutin,
isoquercitrin, quercetin 3- (6-acetylglucoside), astragalin dan kaempferol 3(6-acetylglucoside)) telah dilaporkan dalam daun murbei (Matsuoka, Kimura,
& Muraoka, 1994;. Onogi et al, 1993). Namun, ada beberapa laporan tentang
kuantitatif aktivitas antioksidan atau jumlah menentukan antioksidan daun
murbei. Kami sebelumnya melaporkan bahwa aktivitas antioksidan tanaman
yang dapat dimakan, yang menghambat manusia Oksidasi LDL yang
diinduksi oleh ion tembaga, dapat ditentukan atas dasar oksidasi waktu lag
dan diwakili sebagai epigallocatechin 3-gallate (EGCG) setara (Katsube et al.,
2004). Hal ini dimungkinkan untuk memperkirakan LDL aktivitas antioksidan
sebagai nilai numerik dan membandingkan potensi antioksidan di antara
tanaman tersebut. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk memperkirakan
antioksidan LDL Kegiatan daun murbei, mengidentifikasi antioksidan
senyawa, dan menyelidiki tingkat senyawa.
2. Bahan dan metode
2.1. Bahan
Murbei (Morus alba L.) daun dipanen di Sakurae, Prefektur Shimane, Jepang, pada
bulan Juni 2004.
Daun murbei yang liofilisasi dan tanah untuk bubuk menggunakan mill sampel
bergetar (Heiko Seisakusho, Ltd, Tokyo, Jepang). Diaion HP20 (Mitsubishi Chemical
Co, Tokyo, Jepang) digunakan untuk kolom kromatografi. EGCG, rutin, quercetin,
etanol, bglucosidase, dan CuSO4 diperoleh dari Wako Chemicals Ltd (Osaka,
Jepang). Isoquercitrin, quercetin 3- (6-acetylglucoside), dan astragalin diperoleh dari
Funakoshi Co, Ltd (Tokyo, Jepang). Semua pelarut yang digunakan untuk isolasi
kromatografi adalah kelas analitis dan dibeli dari Wako Chemicals.
2.2. Pelarut ekstraksi (ekstrak kasar)
Dua gram daun kering murbei bubuk adalah diekstraksi dengan 20 ml berbagai
konsentrasi air solusi etanol (0%, 20%, 40%, 60%, 70%, 80%, 100%, v / v) dengan
inkubasi selama 3 jam. Setiap ekstrak dipisahkan dengan sentrifugasi (13,000g, 10
menit), solusinya dihapus, dan residu disuspensi dengan 20 ml sama pelarut dan
lagi dipisahkan dengan sentrifugasi. Itu dua solusi yang dihasilkan kemudian
digabungkan dan membuat hingga 50 ml dengan pelarut yang sama. Masingmasing sampel ini
kemudian disaring untuk analisis HPLC, menggunakan pakai jarum suntik dan filter
0,45 lm. Senyawa flavonol dari ekstrak dianalisis oleh sistem HPLC kuantitatif
(LaChrom, Hitachi, Ltd, Tokyo, Jepang), menggunakan C18 12L ST kolom (4,6 250
mm) (Amersham Biosciences Co, Piscataway, USA); pelarut, 0-30 menit, asetonitril /
0,1% asam format (18:82), 30-42 menit, gradien linier asetonitril / 0,1% asam

format (18:82) -acetonitrile / 0,1% asam format (50:50), 42-54 menit, asetonitril /
0,1% formiat acid (50:50). Kami menemukan bahwa berbeda etanol / air solusi
ekstraksi menghasilkan hasil yang bervariasi dan yang 60% etanol adalah pelarut
ekstraksi yang paling efektif (Gbr. 1). Sehingga kami memilih etanol larutan
60%sebagai pelarut ekstraksi sampel ekstrak kasar analisis.
2.3. LDL uji oksidasi
Darah vena diperoleh dari puasa, sehat relawan manusia dewasa dan tersebar ke
dalam tabung yang berisi EDTA (konsentrasi akhir 0,1%) dan plasma segera
dipisahkan dengan sentrifugasi (1700g,
10 menit, 4? C). Plasma kemudian dipindahkan ke centrifuge tabung dan
disentrifugasi (20 h, 40,000g, 4? C) oleh ultrasentrifugasi preparatif menggunakan
ultrasentrifus Beckman L-60 (Beckman, Palo Alto, USA) dilengkapi dengan rotor
SW40Ti. Setelah pemisahan VLDL fraksi di atas dan bagian bawah transparan
berikutnya, porsi sisa dipindahkan ke tabung baru dan volumenya dihitung dengan
berat. Densitas kemudian disesuaikan dengan 1,063 g / ml dengan menambahkan
kalium yang solid bromida dan sampel yang dihasilkan disentrifugasi (20 jam,
40,000g, 4? C). Fraksi LDL di atas kemudian dikumpulkan oleh aspirasi dan disimpan
di? 80? C sampai digunakan. Kemurnian fraksi LDL ini telah diverifikasi oleh 2-16%
elektroforesis gel poliakrilamida gradien. LDL dihilangkan garamnya menggunakan
Centricon-3 (Amicon, Inc, Beverly, USA) aparatur. Konsentrasi protein dalam LDL
adalah
ditentukan dengan menggunakan Protein Assay cepat kit (Wako Chemicals Ltd).
Assay oksidasi LDL dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya (Katsube et al.,
2004). Secara singkat, setelah preincubation dengan air diencerkan 60% etanol
ekstrak kasar dari daun murbei selama 5 menit, Reaksi dimulai dengan
menambahkan 5 lm CuSO4 ke LDL (20 lg protein / ml) campuran fosfat buffer saline
(pH 7,4) pada 37 C?; volume total adalah 120 ll. Pembentukan diena terkonjugasi
dipantau terus menerus pada 234 nm selama 7 jam dengan menggunakan
spektrofotometer (Shimadzu UV-1700, Tokyo, Jepang) dilengkapi dengan 16-posisi
sampel otomatis changer. Kami menganalisis kinetika oksidasi atas dasar oksidasi
jeda waktu, yang didefinisikan sebagai interval antara inisiasi oksidasi dan
mencegat tangen untuk kemiringan absorbansi kurva selama fase propagasi. EGCG
digunakan sebagai kontrol positif untuk estimasi aktivitas antioksidan daun murbei.
Aktivitas antioksidan 60% etanol solusi ekstrak kasar dari daun murbei dihitung
sebagai EGCG-setara per 1 g sampel (lmol / g) dengan asumsi bahwa unsur-unsur
antioksidan dalam sampel hanya EGCG. Tiga ekstraksi daun murbei dilakukan, dan
aktivitas antioksidan diukur untuk setiap solusi ekstraksi dan direpresentasikan
sebagai rata SD.
2.4. Validasi assay
Kinetika oksidasi lipid dalam LDL dipantau di 234 nm ditandai dengan tiga
parameter: panjang
fase lag, kecepatan maksimum produksi diena, dan jumlah maksimum produk

oksidasi (Pinchuk
& Lichtenberg, 2002). Ekstrak murbei-daun berkepanjangan oksidasi jeda waktu,
tetapi tidak memiliki pengaruh yang signifikan pada dua parameter lainnya, yaitu,
maksimum kecepatan produksi diena dan jumlah maksimum produk oksidasi (data
tidak ditampilkan). Lag waktu untuk volume tambahan dari ekstrak terjadi sebagai
garis lurus dalam rentang moderat pengenceran (Gbr. 2). Lag waktu dengan
konsentrasi ion tembaga juga diamati sebagai garis lurus antara 0,25 dan 0,75 lm
dari EGCG, seperti sebelumnya kami melaporkan (Katsube et al., 2004). Dengan
demikian, aktivitas antioksidan LDL dari sampel diukur secara kuantitatif dalam
kisaran pengenceran linear
2.5. Isolasi dan identifikasi antioksidan
Seratus gram daun murbei adalah dua kali diekstraksi dengan 1 l dari 70% (v / v)
larutan etanol. The
Ekstrak yang dihasilkan dipekatkan sampai kering di bawah berkurang tekanan, dan
residu dilarutkan dalam air (100 ml) dan dipartisi dengan etil asetat (3 100 ml).
Lapisan air dipompa ke dalam Diaion HP20 kolom kromatografi (46 400 mm) dan,
setelah mencuci dengan air, metanol ditambahkan. Fraksi 50 ml masing-masing
eluat dikumpulkan dan diuji untuk antioksidan LDL Kegiatan (metode yang
dijelaskan di atas). Terbesar aktivitas antioksidan diamati dalam metanoldielusifraksi (Gbr. 3). Fraksi metanol-dielusi ini adalah digabungkan dan
terkonsentrasi sampai kering di bawah berkurangtekanan, dan residu dilarutkan
dalam air dandisaring menggunakan filter 0,45 lm. Sebagian dari waterdissolved
yang fraksi itu dimuat ke sebuah preparatif Sistem kromatografi (AKTA pembersih,
Amersham Biosciences Co) menggunakan kolom C18 12lST (4,6 250 mm); pelarut,
0-8 menit, asetonitril / 0,1% asam format (12:88), 8-12 menit, gradien linier
asetonitril / 0,1% asam format (12:88) -acetonitrile / 0,1% asam format (20:80), 1240 menit, asetonitril / 0,1% asam format(20:80); tingkat, 1,0 ml / menit mengalir;
Deteksi UV, 370 nm. Bagian lain dari fraksi air-larut itu juga dimuat ke dalam LC-MS
(LCQ Deka XP, Thermo Elektron Co, San Jose, Amerika Serikat), menggunakan
Inertsil ODS- 80A kolom (4,6 150 mm) (GL Sciences Inc, Tokyo,Jepang); pelarut,
asetonitril / 0,1% asam format (20:80); tingkat, 1 ml / menit mengalir; ion sumber,
APCI. Masing-masing fraksi diakui sebagai puncak dalam kromatografi preparatif
diuji untuk aktivitas antioksidan LDL; pecahan nomor 17, 19 dan 23 menunjukkan
aktivitas terbesar (Gbr. 4). Nomor fraksi 17 dan 19 diidentifikasi sebagai rutin
(quercetin 3-rutinosida) dan isoquercitrin (quercetin 3-glucoside), masing-masing,
dengan menggunakan analisis LC-MS dan perbandingan dengan reagen yang
tersedia secara komersial. Itu puncak sesuai dengan fraksi nomor 23 itu lanjut
dimurnikan. Fraksi air-larut ini dimuat secara serial menjadi pembersih AKTA
menggunakan ODS preparatif 80 kolom Ts (25 400 mm) (TOSOH Co, Tokyo,
Jepang); pelarut, asetonitril / 0,1% asam format (20:80); mengalir tingkat, 10 ml /
menit; Deteksi UV, 370 nm. Fraksi puncak sesuai dengan nomor fraksi 23
dikumpulkan dan terkonsentrasi untuk kekeringan di bawah tekanan tereduksi yang
menghasilkan 160 mg dari bubuk kuning, berlabel sebagai '' Senyawa A ''.

2.6. Reaksi hidrolisis

Asam dan hidrolisis enzimatik senyawa A adalah dilakukan. Seratus lg senyawa A
dicampur dengan 2 N HCl dalam volume total 2 ml dan diinkubasi pada 60 ? C
selama 2 jam. Campuran reaksi terkonsentrasi ke kering pada tekanan rendah, dan
residu dilarutkan di 50% (v / v) larutan etanol. Seratus lg dari
Senyawa A juga dicampur dengan 0,1 mg b-glukosidase di 100 mM buffer asetat
(pH 4,1) dalam total volume 400 ll dan diinkubasi pada 37? C selama 30 menit.
Setelah Selain dari 400 ll 500 mM bufer fosfat (pH 2,5), 600 ll etil asetat
ditambahkan, dan sampel itu voltexed dan disentrifugasi. Supernatan terkonsentrasi
sampai kering di bawah tekanan tereduksi, dan Residu dilarutkan dalam larutan
etanol 50%. Itu flavonol yang dihasilkan dianalisis menggunakan KLT (RP-18 F,
Merck, Darmstadt, Jerman), dan komponen gula dianalisis menggunakan kolom
Carbo Pac PA1 dalam DX-500 kromatografi cair (Dionex, Co, Sunnyvale, USA)
sebagaimana telah dijelaskan sebelumnya (Katsube, Yamasaki, Iwamoto, & Oka,
2003).
2.8. Penentuan kuantitatif dari flavonol dalam murbei daun
Senyawa flavonol dari daun murbei diekstrak oleh menangguhkan 100 mg daun
murbei dalam
bentuk bubuk kering dalam 10 ml 60% (v / v) etanol berair solusi dan pengadukan
dengan pengaduk magnet-bar selama 3 jam pada suhu kamar. Setelah sentrifugasi
pada 13,000g selama 10 menit, solusi yang diambil disaring melalui filter 0,45 lm.
Jumlah senyawa flavonol dari ekstrak dianalisis dengan HPLC kuantitatif, seperti
yang dijelaskan di atas. The quercetin 3- (6-malonylglucoside) digunakan sebagai
standar dimurnikan dari daun murbei seperti dijelaskan di atas.
3. Hasil
3.1. Aktivitas antioksidan LDL daun murbei (ekstrak mentah) Aktivitas antioksidan
LDL daun murbei adalah dinilai dengan menggunakan ekstrak -ethanol 60% dan
diperkirakan di 58,3 0,4 lmol EGCG setara / g berat kering, rata-rata dari tiga
ekstraksi terpisah.
3.2. Flavonol antioksidan dari daun murbei
Hasil kromatografi Diaion HP20 menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan LDL
terbesar terjadi di
fraksi metanol-dielusi (Gambar. 3). Antioksidan fraksi yang dievaluasi lebih lanjut
oleh ODS preparatif kromatografi kolom, dan tiga senyawa menunjukkan kegiatan
antioksidan terkuat (Gambar. 4). Dua ini
diidentifikasi sebagai rutin (quercetin 3-rutinosida) (fraksi 17) dan isoquercitrin
(quercetin 3-glukosida) (fraksi 19) dengan analisis LC-MS dan perbandingan dengan
otentik reagen (data tidak ditampilkan).
Senyawa ketiga (Compound A), yang menunjukkan aktivitas antioksidan LDL
terbesar (fraksi 23),
dikurangi dengan penguapan menjadi bubuk kuning, dan hidrolisis asam dari
senyawa A terdeteksi quercetin dan glukosa, sedangkan pengobatan dengan b-

glukosidase yang dihasilkan tidak ada produk dihidrolisis, menunjukkan bahwa ini
adalah bukan quercetin b-glukosida. 1H NMR dan 13C NMR Data dari senyawa yang
identik dengan yang sebelumnya dilaporkan untuk quercetin 3- (6-malonil)
-glucoside (Ferreres, Gil, Castaner, & Tomas-Barberan, 1997). Kami mengkonfirmasi
ini dengan APCI-MS di mana ion molekul pada m / 549 [M? H]? diamati, sesuai
dengan quercetin monoglucoside diasilasi dengan asam malonat. Sebagai
tambahan, fragmen konsisten dengan hilangnya berurutan malonil yang residu (m /
z 463) dan residu glucosyl (m / z 301) juga diamati, mengkonfirmasikan bahwa ini
adalah quercetin
3- (6-malonil) -glucoside.
3.3. Analisis HPLC dari flavonol antioksidan dalam daun murbei
Pengukuran jumlah antioksidan LDL flavonol glikosida dalam daun murbei dilakukan
oleh
Analisis HPLC (Tabel 1). Quercetin 3- (6-malonylglucoside) adalah flavonol paling
banyak (900 mg / 100 g
berat kering). Rutin (573 mg / 100 g berat kering) juga berlimpah, diikuti oleh
kuersetin 3- (6-malonylglucoside). Jumlah isoquercitrin (194 mg / 100 g berat
kering) adalah seperlima yang quercetin 3- (6-malonylglucoside). Jumlah astragalin
rendah (31 mg / 100 g berat kering), dan bentuk asetat dari isoquercitrin dan
astragalin tidak ditemukan.

4. Diskusi
Dalam studi sebelumnya, kita diukur sebelumnya uninvestigated karakteristik antioksidan
tertentu yang dapat dimakan tanaman dengan LDL uji oksidasi, dan membuat perbandingan
analisis dengan DPPH uji radikal dan Hasil uji Folin Ciocalteu-(Katsube et al., 2004). Ia telah
mengemukakan bahwa pengukuran antioksidan LDL Kegiatan ini lebih penting
physiopathologically dan informatif untuk skrining aterosklerosis pencegahan
aktivitas antioksidan daripada metode lain, seperti Folin Ciocalteu-assay atau DPPH radikal uji;
Penelitian kami sebelumnya mengungkapkan tingkat tinggi antioksidan LDL aktivitas di produk
tanaman yang aktivitas tingkat telah diremehkan oleh dua yang terakhir jenis dari tes. Doi et al.
(2000) melaporkan bahwa ekstrak 1-butanol daun murbei menghambat modifikasi oksidatif
kelinci dan LDL manusia, tetapi ekstrak ini? s tingkat aktivitas, dibandingkan dengan yang
tanaman lain, tidak diketahui. Dalam penelitian kami ini, ekstrak murbei-daun menunjukkan
aktivitas antioksidan tinggi LDL (58,3 lmol dari Setara EGCG / g berat kering) relatif terhadap
tanaman pangan lainnya (Katsube et al., 2004). Di sini, kita mengidentifikasi tiga glikosida
quercetin sebagai LDL utama antioksidan dalam ekstrak murbei-daun: quercetin 3- (6malonylglucoside), rutin dan isoquercitrin. Onogi et al. (1993) mencatat empat glikosida flavonol
di murbei daun: isoquercitrin dan astragalin sebagai flavonoid utama, dan bentuk-bentuk mereka
asetat sebagai flavonoid minor. Dalam Penelitian ini, flavonol glikosida yang paling banyak
itu Quercetin 3- (6-malonylglucoside) (900 mg / 100 g daun kering), penyumbang terbesar untuk
antioksidan aktivitas di daun murbei (Gambar. 4). Quercetin adalah salah satu dari flavonoid
yang paling berlimpah dalam makanan manusia. Quercetin telah pulih di plasma tikus sebagai
sulfat, glukuronida, dan sulfoglucuronide konjugat setelah administrasi intragastrik dari
quercetin aglycone
Tabel 1

Jumlah glikosida flavonol antioksidan dalam daun murbei Senyawa Amounta (mg / 100 g berat
kering)
Rutin 573 86
Isoquercitrin 194 26
Quercetin 3- (6-malonylglucoside) 900 146
Astragalin 31 5
Data merupakan sarana standar deviasi selama tiga terpisah
pengukuran.
T. Katsube dkk. / Food Chemistry 97 (2006) 25-31 29 (da Silva, Piskula, Yamamoto, Bulan, &
Terao, 1998) dan konjugasi quercetin ini melindungi LDL dari oksidasi diinduksi oleh ion
tembaga (Yamamoto, Bulan, Tsushida, Nagao, & Terao, 1999). Hayek dkk. (1997) melaporkan
bahwa konsumsi diet quercetin aglycone, dengan apolipoprotein E-tikus kekurangan, attenuates
perkembangan lesi aterosklerotik, dan memperpanjang fase lag untuk pembentukan diena
terkonjugasi LDL diisolasi dari plasma, yang disebabkan oleh ion tembaga. Dalam makanan
nabati, quercetin terjadi terutama terikat ke berbagai gula melalui link-b glikosidik. Glukosida
Quercetin diserap lebih mudah daripada aglycone (Hollman, de Vries, van Leeuwen, Mengelers,
& Katan, 1995) mungkin dengan partisipasi dalam mekanisme laktase phlorizen hidrolase (LPH)
atau glukosa tergantung natrium transporter (SGLT1) (Sesink, Seni, Faassen-Peters,
& Hollman, 2003). Sebagai bioavailabilitas quercetin malonylglucoside tidak diketahui, penting
untuk menyelidiki metabolisme untuk memperjelas efek diet konsumsi daun murbei.
Alasan untuk tingkat yang lebih tinggi dari quercetin 3- (6-malonylglucoside) dalam
penelitian kami mungkin karena perawatan pra- metode daun murbei. Panaspengobatan glikosida flavonoid solusi malonat (80? C selama 16 jam) mengkonversi
sebagian besar glikosida flavonoid malonates ke bentuk mereka glikosida (Lin et al.,
2000), indikasi bahwa ikatan malonil ester mudah rusak oleh panas. Di sini,
kami menggunakan liofilisasi untuk pra-pengobatan murbei daun. Sementara
Quercetin 3- (6-malonylglucoside) telah diisolasi dari tanaman seperti selada
(Ferreres et al., 1997), semanggi merah (Lin et al., 2000), pohon lobak (Bennett et
al., 2003), Corchorus olitorius L. (Azuma et al., 1999), kita adalah laporan pertama
keberadaannya di daun murbei. Daun murbei merupakan sumber makanan yang
menjanjikan quercetin, salah satu antioksidan yang paling kuat (Vinson, Dabbagh,
Serry, & Jang, 1995), karena yang relatif tingginya kandungan senyawa (260 mg
sebagai aglycone / 100 g berat basah dalam hasil kami), dibandingkan dengan putih
bawang (48-56 mg / 100 g berat basah) dan bawang merah (40-100 mg / 100 g
berat basah), sumber yang dikenal lainnya quercetin (Arabbi, Genovese, & Lajolo,
2004).
Umumnya, etanol atau metanol solusi yang mengandung air, terutama yang
berkisar antara 40% sampai
80% etanol atau metanol, lebih efisien dalam ekstraksi senyawa polifenol dari air
murni, etanol atau metanol (Suzuki et al., 2002). Dalam sebelumnya kami studi, 52
jenis tanaman yang dapat dimakan diekstraksi menggunakan 70% larutan etanol
berair untuk skrining massal untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan LDL dari
ekstrak (Katsube et al., 2004). Dalam penelitian ini, sebuah etanol 60% solusi
terbukti menjadi yang paling efisien dalam mengekstraksi glikosida flavonol dari
daun murbei (Gbr. 1). Sebagai polaritas komponen antioksidan dari individu sampel

cenderung bervariasi, pilihan ekstraksi

pelarut sangat penting. Kesimpulannya, ekstrak murbei-daun menunjukkan aktivitas
antioksidan LDL yang relatif tinggi, dan quercetin 3- (glukosida 6-malonil) dan rutin
yang dominan yang antioksidan dalam daun murbei. Kami saat ini melakukan studi
tentang penyerapan, metabolisme, dan antioksidan fungsi in vivo daun murbei dan
quercetin 3- (glukosida 6-malonil) di laboratorium kami.