AO DE LA inversin para el desarrollo rural y la

seguridad alimentaria
UNIVERSIDAD
PIURA

NACIONAL

DE

FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL

ESCUELA AGROINDUSTRIAL

INFORME N01
CURSO: Microbiologa.

DOCENTE:

TEMA: Reglamento
microbiologa

para

el

laboratorio

NOMBRE: Iman Rivas Ronald Nelson

FECHA: 24/09/2013

de

I.

INTRODUCCION

Un laboratorio de Microbiologa es un lugar habilitado para manejar y estudiar

microorganismos.
El trabajo debe realizarse de acuerdo con los estndares tcnicos y de seguridad propios de
un laboratorio de Microbiologa Clnica.
Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos presentes en la
muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para evitar contaminaciones que
den lugar a resultados errneos.
Todas las muestras deben ser manejadas con precaucin por su potencial patogenicidad.
Para deshacerse del material contaminado se deben utilizar recipientes adecuados que
deben ser esterilizados posteriormente.
Nunca se puede tirar nada contaminado por el fregadero o al cubo de la basura comn sin
haber sido esterilizado previamente.
El el laboratorio deben existir unas recomendaciones generales de limpieza y en caso de
vertidos:
Procedimientos de limpieza de superficies externas mediante papel humedecido con
solucin desinfectante (alcohol 70%, desinfectante fenlico diluido, etc.). Aclarar con agua
los restos de desinfectante.
En caso de usar soluciones de hipoclorito en zonas metlicas, limpiar posteriomente para
evitar el efecto corrosivo.
En caso de derramamientos de material peligroso o formacin de aerosoles: evitar
inspiraciones de esos aerosoles, esperar 30 minutos hasta que las partculas se hayan
depositado y limpiar con mascarilla, guantes y otros tiles protectores.
En caso de vertido de materiales, cubrir la superficie con desinfectante y posteriormente
cubrir con papel humedecido con desinfectante. Dejar durante 15 minutos y limpiar. En caso
necesario aclarar con agua.
En caso de derramamientos menores limpiar el material vertido mediante papel humedecido
y posteriormente aclarar, cuando sea necesario.
Los laboratorios debern disponer de los aparatos e instrumental necesario para el correcto
desarrollo de su actividad.
Debe existir un procedimiento de control de calidad en el laboratorio de Microbiologa que
implique la monitorizacin de los medios e instrumentos, con el fin de asegurar la adecuada
realizacin de los aislamientos, identificacin y caracterizacin de los patgenos y la

realizacin precisa de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos como referencia

teraputica.
El sistema de la calidad deber contemplar la existencia de registros de formacin de
personal.es imprescindible la existencia de un procedimiento sobre medidas de proteccin
personal en el manejo de equipos y aparatos.
Los equipos del laboratorio deben funcionar de forma que se asegure la reproducibilidad de
los resultados de las pruebas diagnsticas.
El laboratorio deber estar bajo la direccin y responsabilidad de un facultativo con la
especialidad correspondiente, legalmente capacitado para realizar aqullas determinaciones
clnicas que el laboratorio tenga autorizadas.

Un laboratorio de microbiologa debe estar implementado con una serie de instrumentos

bsicos de acuerdo a los requerimientos cientficos actuales.
Los materiales pueden ser de vidrio, de plstico, de aluminio y de acero inoxidable.
Los vidrios empleados para el uso de laboratorio, tienen propiedades especiales, de acuerdo
a la composicin que paseen. Las marcas Kimax y Pirex, utilizan el boro silicato que
toleran temperaturas de hasta 510C sin deformarse.
Los plsticos presentan diferentes propiedades de acuerdo a la composicin resinas que
poseen, no sufren la accin de lcalis ni de cidos.
Los metales empleados en la fabricacin de los instrumentos, son de alta calidad que
toleran la actividad qumica de los acidos y lcalis y resistentes a la manipulacin y
funcionamiento continuo.
No solo es necesario conocer los instrumentos bsicos que se utilizan en el laboratorio de
microbiologa si no tambin se debe conocer la forma de cmo darles la limpieza y el
acondicionamiento adecuado
OBJETIVO: reconocimiento y utilidad de los instrumentos de uso frecuente en el laboratorio
de microbiologa y conocer los procedimientos para la limpieza y acondicionamiento de los
mismos
II.

MATERIALES Y METODOS

MICROSCOPIO
El microscopio se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y organismos
no visibles a simple vista. Se trata de un instrumento ptico que contiene una o varias lentes
que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refraccin. El
microscopio ptico puede ser monocular, binocular. La observacin en estos casos se hace
con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observacin se hace con los dos
ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepcin de la imagen, ms cmoda la
observacin y se perciben con mayor nitidez los detalles.

Est conformado por tres sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las
lentes que permiten el movimiento para el enfoque.
El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce
el aumento de las imgenes que se observan a travs de ellas
El sistema de iluminacin comprende las partes del microscopio que reflejan, transmiten y
regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observacin a travs del microscopio.
El sistema mecnico lo conforman:
BRAZO Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo del microscopio y el
revlver. Adems sirve para trasladar el microscopio de un lugar a otro.
BASE O PIE.- Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas las partes
del
microscopio.
PLATINA.- Es una pieza metlica, cuadrada, que tiene en su centro una abertura circular por
la que pasar la luz del sistema de iluminacin. Aqu se coloca el portaobjetos con la
muestra a observar
PINZAS DE SUJECION.- Parte mecnica que sirve para sujetar la preparacin. La mayora
de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que
permiten un avance longitudinal y transversal de la preparacin.
TORNILLO MACROMETRICO: Permite hacer un movimiento rpido hacia arriba o hacia
abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.
TORNILLO MICROMETRICO O DE ENFOQUE SUAVEREVOLVER.- Parte mecnica de
movimiento giratorio que nos permite colocar en posicin cualquiera de los objetivos que se
encuentran en l.
TUBO.- Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y objetivos.
CREMALLERA.- Permite que el movimiento de los tornillos macro y micromtrico sea de
mayor o de menor amplitud.
El sistema ptico;
OCULAR.- Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que Capta y
amplia la imagen formada en los objetivos. Los primeros microscopios eran monoculares, es
decir, posean una sola lente. Los microscopios actuales poseen dos oculares, uno para
cada ojo y se les llama binoculares.
OBJETIVOS: Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeos cilindros
colocados en el revolver que proporciona el poder de resolucin del microscopio y
determinan la cantidad total de aumento.
Existen 4 tipos entre los que se encuentran:
1.- La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento.

2.- El objetivo seco dbil (10 X) que se utiliza para localizar la imagen que se va a observar.
3.- El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen anterior, para poder observar se
necesita primero acercar el objetivo al portaobjetos y posteriormente, enfocar el objetivo
hasta que aparezca la imagen.
4.- El objetivo de inmersin (100 X) es un lente especial para observar imgenes tan
pequeas como las bacterias. Y se requiere del aceite de inmersin para lograr una buena
observacin.
La parte ptica del microscopio es la que determina el nmero de aumentos que presenta la
imagen observada .El aumento total que permite un microscopio ptico se calcula
multiplicando la magnificacin que producen el objetivo por la que producen los oculares.
Usando microscopios pticos avanzados se consiguen unos 1000-1500 aumentos (objetivo
de 100x ms oculares de 10x o 15x). Algunos microscopios pticos tienen lentes internas
que producen aumentos adicionales que tendremos que tener en cuenta para calcular la
magnificacin de la imagen que se observa.
El sistema iluminacin:
La fuente luminosa consiste en un espejo o una fuente de luz elctrica que dirige un haz de
luz hacia el condensador.
CONDENSADOR.- Es una lente de gran abertura que permite dirigir o condensar la mayor
parte de los rayos luminosos en la preparacin. En nuestro microscopio est integrado en la
platina y tiene un diafragma unido en la parte inferior.
DIAFRAGMA: Existe un diafragma en el condensador, que elimina el exceso de luminosidad
para tener una buena iluminacin del objeto a observar
FUENTE DE LUZ.- Para observar la muestra microscpica es necesario que sta se ilumine
con algn tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con un foco que da energa elctrica
que dirige sus rayos luminosos hacia el sistema condensador.

Autoclave
Es el equipo ms utilizado para la esterilizacin mediante calor hmedo. Se realiza en al
autoclave durante 15 20 min, segn el volumen, a 115C 121C, segn la naturaleza del
material que se desee esterilizar.
Auto clavado: es un procedimiento en el que se emplea vapor a presin (a 1 atmsfera).
Como tiene gran poder de penetracin la temperatura y el tiempo utilizado son menores que
los que se emplean con el horno Pasteur (121 C, 15-20 minutos).

Horno de Pasteur: emplea altas temperaturas (160-180 C) durante un tiempo prolongado

(1.5 a 3 horas). Debido a su poca capacidad de penetracin se usa para esterilizar vidrio y
metales. Acta principalmente desnaturalizando las protenas y secundariamente oxidando
los compuestos celulares.

Estufa o incubadora
Es una cmara de temperatura controlada para cultivo de microorganismos.
Se utiliza para facilitar el desarrollo de los microorganismos a su temperatura ptima de
crecimiento (generalmente 35-37).

Frigorfico o cmaras refrigeradas

Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de cultivo, reactivos) como

microorganismos generalmente estn a una temperatura fija de 4C.

La balanza
Se usa para pesar colorante, componentes de medio de cultivo, animales, etc

Bao maria
Tienen salida de aire presentan un termostato que regula la temperatura del agua
presenta un piso para colocar los materiales que se desea.

Bomba de vaco:
Extrae molculas de gas de un volumen sellado, para crear un vaco parcial.

Contador de colonias: Es un aparato que mediante la iluminacin de la placa y una lupa,

nos permite observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su recuento.

Asas de siembra:
Se utilizan para sembrar. Pueden ser metlicas o de plstico, curvas o rectas (para la
siembra por picadura).

Portas y cubres
Para realizar las observaciones al microscopio.

Cucharas y esptulas:
Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.

Matraces:

Potencimetro:
Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de un par de
electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados a un potencimetro
que indique las mediciones, Los potencimetros emplean un electrodo de vidrio, unido a
un electrodo de calomel como estndar.

Probetas:
Recipientes graduados de forma cilndrica y capacidad variable, con base para la
esterilidad. Pueden estar graduadas.

Pipetas:
Tubos cilndricos delgados terminados en punta, graduados al dcimo o al centsimo de mI.
Se emplean en la medicin de pequeas cantidades de lquidos
Volumtricas, se reconocen por presentar una dilatacin bulbosa central con unas marcas
de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la pipeta, se les llama
tambin pipetas de bola, las medidas ms conocidas son de 10, 25, 50 y 100 ml.

Pipetas Pasteur:
Confeccionados de varillas de vidrio de dimetro de 4 x 20mm de 30 40cm de longitud. La
calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la accin directa de la llama del
mechero, para conseguir por estiramiento la capilaridad deseada. Se emplea para la
toma de pequeos inculos de siembra.

Placas Petri:
Cajas cilndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y
aislamiento de microorganismos. Las ms usadas son las de 10, 15 20 mm x 100 mm

Pasos para la limpieza de los materiales de vidrio del laboratorio

1. Se considera como insegura la prctica de sumergir todo el material de vidrio (tubos,
placas, etc) con cultivos descartables o contaminados, dentro de un cubo de
desinfectante, dejndolo durante la noche, lavndolos despus o tirndolos. Por es
TODO EL MATERIAL DEBE SER ESTERILZADO EN EL AUTOCLAVE antes de
proceder a su lavado
2. Al sacarlos, aun en caliente quitar los tapones y vaciar el contenido.
3. Lavar con agua caliente y detergente.
4. Enjuagar con agua de cao a chorro continuo hasta la eliminacin del detergente o
agente bactericida. Luego con agua tibia y por ultimo tres veces con agua destilada.
5. Dejar escurrir y secar
Las pipetas y otros dispositivos se desinfectan sumergindolos en un recipiente de base
ancha que contenga una solucin bactericida dicromtica o una solucin de fenol al 5%
por 24 horas.
Los porta y cubre objetos pueden colocarse en una solucin de fenol al 5% por 24
horas. Luego hervirlos en agua jabonosa por 10 minutos.
Cuando el material de vidrio retiene muchas manchas se trata con la mezcla
sulfocrmica
Enjuagar y dejar secar
Pasos para el acondicionamiento de material de laboratorio
1. El material debe estar limpio y totalmente seco
2. Las placas Petri deben ser envueltas en papel Kraft aislados o en grupos. Es preferible
utilizar cilindros metlicos.
3. A los tubos de ensayo o frascos, debe colocrseles tapones de algodn largo y
suficientemente consistente para no permitir el paso de grmenes.
4. A las pipetas se le coloca en el extremo bucal un pequeo tapn de algodn,
ayudndose con un alambre fino; se elimina cualquier fibra suelta con el flameo, se
cubre la pipeta con una fibra de papel empezando por el extremo delgado para terminar
por el extremo bucal y se asegura la envoltura mediante la torsin del resto de papel
que queda.
5. Es preferible utilizar cilindros metlicos cuando se prepara grandes cantidades de
material.
II.

RESULTADOS

En esta prctica los resultados que obtuvimos es el conocer el material ms usado

incluyendo los equipos que se usan en el laboratorio de microbiologa y no es solo de
conocer si no tambin de saber cul es uso adecuado y para qu sirven.
Tambin se aprendi a como darle su limpieza y acondicionamiento adecuado el cual debe
ser primordial para que el material permanezca sin contaminacin al almacenarlos. Todo
material usado se debe drsele su limpieza despus de haber sido utilizado.

III.

DISCUSIONES

IV.

V.

CONCLUSONES
La mayora de los instrumentos usados deben pasar por el autoclave donde son
esterilizados para recin poder lavarlos y acondicionarlos en otras palabras no es
limpieza si no pasa por el autoclave.
Todo material para darle un buen acondicionamiento debe estar protegido del polvo
el cual tambin contiene microorganismos esto se hace al envolverle ya sea el papel
Kraft, algodn al colocarle como tapones o papel.
Adems se debe asegurar que antes de empezar a acondicionar el material, este
debe estar limpio y seco.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. http://micropartes.blogspot.com/
2. http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/Lab
Micro/
3. http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf