Quantificação Da Deposição de Ferro No Cérebro Usando Ressonância Magnética: Um Estudo em Pacientes Com Doença de Parkinson.

Universidade de So Paulo
FFCLRP - Departamento de Fsica

Ps-graduao em Fsica aplicada Medicina e Biologia
JEAM HAROLDO OLIVEIRA BARBOSA
Quantificao da deposio de ferro no crebro

usando ressonncia magntica: um estudo em
pacientes com doena de Parkinson.
Dissertao apresentada Faculdade de

Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro
Preto da Universidade de So Paulo, como
parte das exigncias para a obteno do
ttulo de Mestre em Cincias, rea: Fsica
aplicada Medicina e Biologia.
Ribeiro Preto - SP
2013
JEAM HAROLDO OLIVEIRA BARBOSA
Quantificao da deposio de ferro no crebro

usando ressonncia magntica: um estudo em
Dissertao apresentada Faculdade de

Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro
Preto da Universidade de So Paulo, como
parte das exigncias para a obteno do
ttulo de Mestre em Cincias.
rea de Concentrao:
Fsica aplicada Medicina e Biologia.
Orientador:
Carlos Ernesto Garrido Salmon.
Verso corrigida
Verso original disponvel na FFCLRP - USP
Ribeiro Preto - SP
2013
ii
Autorizo a reproduo e divulgao total ou parcial deste trabalho, por
qualquer meio convencional ou eletrnico, para fins de estudo e pesquisa,
desde que citada a fonte.
FICHA CATALOGRFICA
Barbosa, Jeam Haroldo Oliveira
Quantificao da deposio de ferro no crebro usando
ressonncia magntica: um estudo em pacientes com doena
de Parkinson. / Jeam Haroldo Oliveira Barbosa; orientador
Carlos Ernesto Garrido Salmon. Ribeiro Preto - SP, 2013.
160 f.:il.
Dissertao (Mestrado - Programa de Ps-graduao em
Fsica aplicada Medicina e Biologia) - Faculdade de Filosofia,
Cincias e Letras de Ribeiro Preto da Universidade de So
Paulo, 2013.
1. Ressonncia Magntica.
3. Relaxometria. 4. Parkinson 5. Ferro.
2.
Suceptibilidade.
Nome: Barbosa, Jeam Haroldo Oliveira

Ttulo: Quantificao da deposio de ferro no crebro usando ressonncia
magntica: um estudo em pacientes com doena de Parkinson.
Dissertao
Filosofia,
Preto
apresentada
Cincias
Letras
Faculdade
de
de
Ribeiro
da Universidade de So Paulo, como
parte das exigncias para a obteno do ttulo

de Mestre em Cincias.
Aprovado em:
Banca Examinadora
Prof(a). Dr(a). :
Instituio:
Julgamento:
Assinatura:
Prof(a). Dr(a). :
Instituio:
Julgamento:
Assinatura:
Prof(a). Dr(a). :
Instituio:
Julgamento:
Assinatura:
Agradecimentos
Aos meus pais Luiz Carlos e Elizabeth por terem me concedido o dom
da vida e todo o cuidado que tiveram comigo at esta etapa de minha vida.
Saibam que quando eu tentava explicar o que eu estava estudando conseguia
aprender mais ainda. Obrigado por me ouvirem sempre com toda pacincia e
amor.
A minha amada Thamiris pelo apoio, compreenso e pacincia por ter
me esperado estudar em muitos dias e finais de semana. Esta vitria tambm
sua. Obrigado por fazer a distncia entre ns a mais curta possvel com suas
palavras e mensagens de amor.
Ao Prof. Dr. Carlos Garrido agradeo por ter me orientado como
aluno de mestrado e mais do que isso acreditado em mim. Sou muito grato
pela pacincia e por tudo que me ensinou: incluindo cincia e vida. Obrigado
por ter incentivado e aberto todas as portas do mundo cientfico.
Aos alunos do laboratrio Inbrain, muito obrigado! Sem vocs no
seria to prazeroso fazer cincia. Vocs acreditaram em mim e me apoiaram
em tudo, aulas de ingls, atividade fsica e muitos almoos. Obrigado por
poder dividir com vocs momentos de alegria e aflio.
Ao meus amigos da repblica Moita, obrigado por me incentivarem.
O companheirismo de todos vocs foi muito importante. Em especial ao meu
amigo Antonio Carlos da Silva Senra Filho por ter compartilhado todo o
seu aprendizado cientfico e pessoal. Agradeo e digo que no esquecerei da
repblica Moita.
Ao Prof. Dr. E. M. Haacke muito obrigado. Mesmo com toda a fama e
influncia me recebeu em seu laboratrio e na sua casa em Detroit nos Estados
iv
v
Unidos sem saber quem eu era. Cuidou de mim como um filho, muito obrigado
mesmo.
Ao professor Vitor Tmas e sua equipe do ambulatrio extra piramidal
do Hospital das Clnicas da Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto, muito
obrigado.
Sem a sua colaborao este trabalho no teria sentido para a
populao em geral.
A professora Slvia do Esprito Santo e o pessoal do seu laboratrio
LACCA, muito obrigado. Criamos uma grande amizade e muitas experincias
valiosas.
Aos funcionrios e tcnicos do Departamento de Fsica que sempre
estiveram presentes para resolver minhas dvidas e me ajudar at como
voluntrios da pesquisa.
Em especial, ao meu pai do cu. Agradeo Deus pela vida de cada
pessoa acima. Agradeo a sade que foi meu principal combustvel para a
concluso deste trabalho e de mais um sonho.
vi
Tentar no existe.
Faa.
Ou no faa.
Mestre Yoda
Resumo
BARBOSA, J. H. O. Quantificao da deposio de ferro no crebro
usando ressonncia magntica: um estudo em pacientes com doena
de Parkinson..
2013.
160 f.
Dissertao (Mestrado - Programa de
Ps-graduao em Fsica aplicada Medicina e Biologia) - Faculdade de

Filosofia, Cincias e Letras de Ribeiro Preto, Universidade de So Paulo,
Ribeiro Preto - SP, 2013.
A capacidade do ferro, presente no corpo humano, em aceitar e

doar eltrons o torna essencial para homeostase celular e vrias
reaes biolgicas. Contudo, o excesso deste metal no crebro pode
gerar efeitos deletrios atravs da produo de espcies reativas de
oxignio que causam o estresse oxidativo.
Este estresse aparece
como possvel causa de doenas neurodegenerativas, caracterizadas

por um aumento significativo da concentrao de ferro em certas
regies do crebro.
Detectar e quantificar a deposio de ferro in
vivo no crebro torna-se de extrema relevncia para entender diversas

doenas neurodegenerativas. Neste estudo avaliamos a sensibilidade
e a especificidade das principais tcnicas de Ressonncia Magntica
in vivo para estimar o contedo de ferro depositado no crebro.
Foram estudados um grupo de 16 sujeitos saudveis e outro de 14
Mapas de relaxometria (R2 e
R2*) e susceptibilidade (QSM) foram estimados a partir de imagens

adquiridas numa maquina de RM de 3.0T. Embora todos os mapas
vii
viii
tenham apresentado correlao linear (r2 = 0, 7) com o acumulo de
ferro reportado in vitro nas regies do ncleo da base, apenas os
mapas R2 e QSM apresentaram estatisticamente aumento significativo
(p<0,05) para certas regies do crebro parkinsoniano (substncia
negra, ncleo rubro e globo plido).
O mapa QSM apresentou
maior sensibilidade e especificidade para diferenciar pacientes com

a doena quando comparados a sujeitos saudveis por meio da
anlise da curva ROC. Conclumos que os mapas de relaxometria
e susceptibilidade magntica podem estimar de forma indireta o
contedo de ferro no crebro, apesar de apresentarem dependncias
diferentes com a concentrao deste metal.
Observamos tambm
que os valores de sususceptibilidade magntica obtidos com imagens

de baixa resoluo (1,0x1,0x2,0mm) no apresentaram mudanas
significativas em relao aos obtidos com imagens de alta resoluo
(0,5x0,5x2,0mm). Logo, sugerimos a aquisio de imagens com baixa
resoluo para o processamento do mapa QSM . A analise de mltiplos
valores de tempo de relaxao T2 determinou apenas um valor para
cada regio do ncleo da base para ambos grupos, este resultado foi
aparentemente afetado pela relao sinal rudo.
Palavras-chave:
1.
Ressonncia
3. Relaxometria. 4. Parkinson 5. Ferro.
Magntica.
2.
Suceptibilidade.
Abstract
BARBOSA, J. H. O. Quantification of iron deposition in the brain using
magnetic resonance: a study in patients with Parkinsons disease..
2013. 160 f. Dissertation (M.Sc. - Postgraduate program in Physics applied
to Medicine and Biology) - Faculty of Philosophy, Sciences and Literature,
University of So Paulo, Ribeiro Preto - SP, 2013.
The capacity of the iron present in the human body to accept and
donate electrons makes it essential for cellular homeostasis and
various biological reactions.
However, an excess of the metal in
the brain can produce deleterious effects through the production of

reactive oxygen species that cause oxidative stress. This stress can
be the possible cause of neurodegenerative diseases which present
a significant increase in iron concentration in certain brain regions.
To detect and quantify iron deposition in the brain in vivo has high
potential for understanding neurodegenerative diseases. In this study
we evaluated the sensitivity and specificity of the main Magnetic
Resonance technique in vivo to estimate the content of iron deposited
in the brain.
Were studied a group of 16 controls and 14 patient
with Parkinson disease. Relaxometry map (R2 and R2*) and magnetic
susceptibility map QSM were estimated by images obtained of scanner
of Magnetic Resonance of 3T. Although all maps have presented linear
correlation (r2 =0.7) with the accumulation of iron reported in vitro
regions of basal ganglia, only the R2 and QSM maps showed significant
ix
x
increase (p < 0.05) for certain regions of the parkinsonian brain
(substantia nigra, red nucleus, and globus pallidus). The QSM map
showed higher sensitivity and especificity for differentiate patients
with the disease when compared with controls by the analysis of
curve ROC. We conclude that magnetic susceptibility and relaxometry
maps may estimate indirect the content of brain iron, although having
different dependencies with the concentration of this metal. We also
observed that the values of magnetic sususceptibilidade obtained with
low resolution images (1,0 x1, 0x2, 0mm) showed no significant change
compared to those obtained with high-resolution images (0,5 x0, 5x2,
0mm). So, we suggest the acquisition of images with low resolution
to process QSM map.
The analyse of multiple relaxation time T2
determined just one value for basal ganlies in both groups, these
results were apparently affected by rate noise signal.
Key-words:
1. Magnetic Resonance.
4. Parkinsons Disease 5. Iron.
2. Suceptibility.
3. Relaxometry.
Lista de Figuras
1.1 Metaloprotenas envolvendo ferro e grupo heme . . . . . . . . . .
1.2 Representao da molcula de mioglolbina . . . . . . . . . . . . .
1.3 Representao
ilustrativa
de
protenas
envolvidas
no
armazenamento de ferro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.4 Imagem de microscopia eletrnica dos ncleos de ferritina e

hemossiderina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.5 Processo de transporte de ferro para o interior da clula partindo

da transferrina
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.6 Cortes transversais contendo os gnglios da base
. . . . . . . . . 11
1.7 Estresse oxidativo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

2.1 Mtodo histoqumico de Persl stain aplicado nos ncleos da base
de um cadver . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
2.2 Representao do efeito do on de ferro paramagntico na
distoro do campo magntico local. . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
2.3 Imagens axiais do crebro ponderadas em T2 . . . . . . . . . . . . 24
2.4 Mapas de relaxometria do crebro por ressonncia magntica
nuclear. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
2.5 Imagens ponderadas em SWI. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
2.6 Mapas de susceptibilidade magntica. . . . . . . . . . . . . . . . . 30
2.7 Acmulo de ferro com o avano da idade em regies anatmicas.
33
2.8 Dependncia do valor de R2* com o avano da idade. . . . . . . . 34

3.1 Espectro de susceptibilidade magntica. . . . . . . . . . . . . . . . 38
xi
xii
3.2 Susceptibilidade magntica do fgado de acordo com o acmulo
de ferro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41
3.3 Representao do problema para o clculo do campo magntico. . 43
3.4 Regies de descontinuidade da funo kernel inversa (F (k)1 ). . . 46
3.5 Representao das componentes de campo para uma imagem 2D.
48
3.6 Comparao do filtro SHARP com o filtro passa alta para uma
imagem in vivo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50
3.7 Resultados do processamento do filtro baseado em geometria. . . 53
3.8 Representao da funo F(k) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
3.9 Representao 3D das singularidades geradas pela aplicao de
filtros F (k).
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57
4.1 Exemplo de imagens de uma fatia da regio dos ncleos da base

adquiridas com uma sequencia Spin Eco mudando o tempo ao eco
de 12 em 12ms. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
4.2 Exemplo de imagens de uma fatia da regio dos ncleos da base
adquiridas com uma sequencia Gradiente Eco com mltiplos ecos
(4 ecos, TE=12,24,36,48ms).
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
4.3 Etapas para o processamento do mapa de susceptibilidade

magntica. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67
4.4 Tela principal do programa SMART (v1.1 2012) . . . . . . . . . . . 70
4.5 Exemplo de regies segmentadas sobre diferentes fatias do mapa
de susceptibilidade magntica. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
5.1 Anlise inter-observador . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77
5.2 Anlise intra-observador. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77
5.3 Correlao linear entre R2 e acmulo de ferro estimado
considerando o efeito idade. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 80
5.4 Correlao linear entre R2* e acmulo de ferro estimado
xiii
5.5 Correlao linear entre e acmulo de ferro estimado
5.6 Correlao linear entre R2 e nas diferentes regies avaliadas
neste estudo.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 83
5.7 Correlao linear entre R2* e nas diferentes regies avaliadas

neste estudo.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 83
5.8 Correlao linear entre R2 com R2* nas diferentes regies

avaliadas neste estudo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84
5.9 Exemplos de mapas de R2. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
5.10Exemplos de mapas de R2*. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86
5.11Exemplos de mapas de . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
5.12Valores mdios e desvio padro de R2 dos controles e pacientes
com doena de Parkinson. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88
5.13Valores mdios e desvio padro de R2* dos controles e pacientes
5.14Valores mdios e desvio padro de dos controles e pacientes
5.15Valores de R2 para a regio da SN (a) e RN (b) para controles e
pacientes em relao idade. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
5.16Valores de para a regio da SN (a) e GP (b) para controles e
pacientes em relao a idade. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93
5.17Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio da
substncia negra (SN). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 94
5.18Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio do ncleo
rubro (RN).
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 94
5.19Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio do globo

plido (GP). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
5.20Mapas de QSM obtidos de imagens com alta e baixa resoluo
para um controle e um paciente com doena de Parkinson. . . . . 97
xiv
5.21Correlao linear entre valores mdios de susceptibilidade
magntica dos ncleos da base por meio do processamento de
imagens com baixa e alta resoluo. . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
5.22Valores mdios e desvio padro dos valores de susceptibilidade
magntica. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98
5.23Anlise de mltiplos T2 para sujeito controle. . . . . . . . . . . . . 100
5.24Anlise de mltiplos T2 para pacientes com doena de Parkinson. 100
5.25Dependncia do clculo de mltiplos T2 para a determinao dois
valores de T2 simulados.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 101
A.1 Esboo da sequncia de Gradiente Eco. . . . . . . . . . . . . . . . 117

A.2 Diagrama da evoluo dos spins durante uma sequncia de
Gradiente Eco.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 117
A.3 Representao do sinal complexo.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . 118
A.4 Mscara de filtro espacial com coeficientes arbitrrios. . . . . . . 119

A.5 Imagem de 9x9 pixels. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 119
A.6 Aplicao de filtro espacial passa alta. . . . . . . . . . . . . . . . . 120
A.7 Representao pictrica do processo de gerao da mscara da
fase.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 122
A.8 Obteno da imagem SWI. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123

A.9 Imagem mIP das imagens de magnitude e SWI. . . . . . . . . . . . 123
A.10Diagrama das etapas do processamento da imagem de SWI. . . . 124
B.1 A convoluo de duas funes.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 125
C.1 Aceite do comit de tica da FFCLRP

D.1 Aceite do comit de tica do HC
. . . . . . . . . . . . . . . . 136
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 138
Lista de Tabelas
1.1 Distribuio de ferro em adultos saudveis. . . . . . . . . . . . . .
1.2 Contedo de ferro total por unidade de peso de tecido mido em

regies cerebrais de sujeitos saudveis. . . . . . . . . . . . . . . . 10
1.3 Contedo de ferritina por unidade de peso de tecido mido em
regies cerebrais. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
1.4 Regies cerebrais que apresentaram aumento significativo de
ferro em pacientes com doena de Parkinson, atravs de tcnicas
in vitro.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
1.5 Regies cerebrais que apresentaram aumento significativo das

taxas de relaxao R2 e R2* em pacientes com doena de Parkinson. 16
2.1 Resumos dos valores de R2 (s1 ) e R2* (s1 ). . . . . . . . . . . . . 32
3.1 Susceptibilidade magntica de alguns materiais fracamente
magnticos e tecidos biolgicos.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39
4.1 Principais informaes sobre os pacientes com doena de

Parkinson e os controles avaliados. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61
4.2 Principais informaes sobre os pacientes com doena de
Parkinson avaliados. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
5.1 Coeficientes de regresso linear obtidos e encontrados na
literatura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81
5.2 Resultado do teste t de Student para o gurpo controle e de
paciente com doena de Parkinson. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
xv
Lista de Abreviaturas
FFCLRP
Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto.
USP
Universidade de So Paulo.
T2
Tempo de relaxao transversal.
T2*
Tempo de relaxao transversal estrela.
R2
Taxa de relaxao transversal.
R2*
Taxa de relaxao transversal estrela.
SWI
Sigla em ingls de Susceptibility Weighted Imaging.
TfR
Receptores de transferrina.
DMT1
Transportador de metal divalente 1.
Apo-TF
Apotransferrina e receptores de transferrina.
RNA
Sigla em ingls de cido ribonucleco citoplasmtico.
IRPs
Regulador de protenas com ferro.
AAS
Sigla em ingls de espectroscopia por absoro atmica.
AS
Sigla em ingls de espectrofotometria por absoro atmica.
NAA
Sigla em ingls de anlise por ativao com nutrons.
ICP
Sigla em ingls de plasma indutivamente acoplado.
xvi
xvii
RMN
Ressonncia Mangtica Nuclear.
SHARP
Sigla em ingls Sophisticated Harmonic Artefact Reduction.
COSMOS
Sigla em ingls Calculation of Susceptibility Through Multiple

Orientation Sampling.
TE
Tempo ao eco.
TR
Tempo de repetio.
SN
Substncia Negra.
RN
Sigla em ingls de Ncelo Rubro
GP
Globo Plido
PUT
Putmen
CN
Sigla em ingls de Ncleo Caudado
THA
Sigla em ingls de Tlamo
WM
Sigla em ingls de Substncia Branca
GM
Sigla em ingls de Substncia Negra
Susceptibilidade magntica relativa
CCI
Coeficiente de Correlao intra-classe
ROC
Sigla em ingls Receiver Operating Characteristic
Lista de Smbolos
Vetor campo magntico externo aplicado.
Vetor campo magntico.
Magnetizao.
M0
Magnetizao inerente.
Tensor de susceptibilidade mangntica.
Susceptibilidade magntica.
Frao de oxigenao das clulas vermelhas.
Hct
Frao de eritrcitos presentes no sangue.
oxi
Susceptibilidade magntica da hemoglobina oxigenada.
deoxi
Susceptibilidade magntica da hemoglobina deoxigenada.
plasma
Susceptibilidade magntica do plasma.
sangue
Susceptibilidade magntica do sangue.
Variao do nvel de oxigenao do sangue.
Variao
de
susceptibilidade
magntica
do
sangue
susceptibilidade magntica relativa (Depende do contexto).
Permeabilidade magntica absoluta.
Razo giro-magntica.
xviii
ou
xix
B dz
Vetor variao de campo magntico
Valor de fase.
TF
Transformada de Fourier.
T F 1
Transformada Inversa de Fourier.
Operador Laplaciano.
Impulso unitrio .
Mdulo do momento de dipolo.
Limiar ou parmetro de regularizao (Depende do contexto).
Parmetro de regularizao.
Prefcio
Esta dissertao descreve os resultados obtidos no mestrado do aluno
Jeam Haroldo Oliveira Barbosa sobre orientao do Prof.
Dr.
Carlos
Ernesto Garrido Salmon na FFCLRP-USP. O tema principal abordado a

implementao e seleo da tcnica de Imagem por Ressonncia Magntica
mais adequada para quantificar a deposio de ferro no crebro humano. A
seguir maiores detalhes do contedo da dissertao.
De forma introdutria abordamos no captulo 1 detalhes sobre o
contedo e a distribuio de ferro no organismo humano, em especfico no
crebro humano. Posteriormente mostramos a relao do acmulo de ferro
com a doena neurodegenerativa de Parkinson.
No captulo 2 apresentamos as tcnicas de quantificao ou estimativa
da concentrao de ferro no crebro in vitro e in vivo.
Alm disso,
descrevemos algumas variveis associadas deposio de ferro no crebro

(idade, gnero e sexo).
Apresentamos no captulo 3 a definio de susceptibilidade magntica
e
classificao
Adicionalmente,
dos
tecidos
considerando
esta
propriedade
fsica.
descrevemos o mapa quantitativo de susceptibilidade
magntica (QSM ) recentemente proposto pela literatura cientfica (2008) e

ainda no descrito no Brasil.
O captulo 4 contm os principais aspectos metodolgicos usados nesta
pesquisa. Nele consideramos a casustica, as imagens adquiridas com seus
respectivos parmetros, o processamento dos mapas de R2, R2* e QSM, a
segmentao e anlise estatstica adotada.
No captulo 5 apresentamos os nossos resultados obtidos com os
xx
xxi
voluntrios saudveis e pacientes com doena de Parkinson e as respectivas
discusses.
Em resumo, este trabalho objetiva quantificar a concentrao de ferro
no crebro de controles e pacientes com doena de Parkinson atravs da
combinao de diferentes parmetros obtidos a partir de imagens de RMN
(R2, R2* e QSM ). Dentre o objetivo definimos os objetivos especficos:
Implementao das tcnicas Spin Eco, Gradiente Eco e do

processamento QSM na estimativa da concentrao de ferro para controles
e pacientes com doena de Parkinson.
Co-relacionar as medidas quantitativas das diferentes tcnicas de

imagem (R2, R2* e QSM ) com o acmulo de ferro.
Avaliao de sensibilidade e especificidade das tcnicas de imagem

(R2, R2* e QSM ) e sua combinao referente diferenciao entre pacientes
e controles.
Sumrio
Lista de Figuras
xi
Lista de Tabelas
xv
Lista de Abreviaturas
xvi
Lista de Smbolos
xviii
Prefacio
xx
1 Reviso da distribuio de ferro no organismo humano
1.1 Contedo de ferro no organismo humano . . . . . . . . . . . . . .
1.2 Distribuio de ferro no crebro
. . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3 Acmulo de ferro no crebro e doenas neurodegenerativas

(Doena de Parkinson) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
2 Metodologia de quantificao de ferro no crebro
20
2.1 Medidas in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

2.2 Medidas in vivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
2.2.1 Relaxometria R2 e R2* . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25
2.2.2 Imagem por susceptibilidade magntica . . . . . . . . . . . 28
2.3 Variveis associadas distribuio de ferro no crebro de
indivduos normais . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
3 Mapa de Susceptibilidade Magntica
36
3.1 Introduo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36
3.2 Susceptibilidade Magntica e classificaes . . . . . . . . . . . . . 37
xxii
xxiii
3.3 Mapa quantitativo de susceptibilidade magntica (QSM ) . . . . . 41
3.3.1 Relao terica
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42
3.3.2 Pr processamento da imagem de fase . . . . . . . . . . . . 47

3.3.3 Clculo do mapa de susceptibilidade magntica . . . . . . . 53
4 Materiais e Mtodos
59
4.1 Casustica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
4.2 Aquisio das imagens . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62
4.3 Processamento dos Mapas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
4.3.1 Mapa de Relaxometria
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
4.3.2 Mapa de Susceptibilidade Magntica . . . . . . . . . . . . . 66

4.4 Segmentao das regies de interesse . . . . . . . . . . . . . . . . 72
4.5 Anlises estatsticas
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73
5 Resultados e Discusses
76
5.1 Anlise estatstica da segmentao . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76

5.2 Correlao linear entre R2, R2* e QSM com o acmulo de ferro . 79
5.3 Correlao linear entre R2 com QSM, R2* com QSM, R2 com R2*
nos sujeitos controles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 83
5.4 Mapas de R2, R2* e QSM para controles e pacientes com doena
de Parkinson . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
5.5 Efeito da resoluo da imagem no mapa de QSM . . . . . . . . . . 96
5.6 Anlise de diferentes valores de T2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . 99
6 Concluses
102
Referncias Bibliogrficas
104
Apndice A - Processamento da imagem SWI
116
Apndice B - Teorema da Convoluo
125
Anexo A - Termo de consentimento livre e esclarecido para sujeito

controle
127
xxiv
Anexo B - Termo de consentimento livre e esclarecido para sujeito
paciente
131
Anexo C - Aceite do Comit de tica da FFCLRP
135
Anexo D - Aceite do Comit de tica do Hospital das Clnicas
137
Captulo
Reviso da distribuio de ferro

no organismo humano
A habilidade do ferro em aceitar e doar eltrons o torna imprescindvel
para homeostase celular e diversas reaes biolgicas.
componente
essencial para a formao da molcula heme e participa da formao de

diversas protenas como transferrina, ferritina e hemossiderina.
A sntese de heme controlada por mecanismos enzimticos e de
degradao, e esse controle tem que ser rigoroso, uma vez que o excesso
de ferro pode ter efeito deletrio, gerando espcies reativas de oxignio
que causam estresse oxidativo (reao de Fenton). A ao desses radicais
sobre protenas, lipdios e DNA causam graves leses celulares (ANDREWS,
1999; WIJAYANTI; KATZ; IMMENSCHUH, 2004; HENTZE; MUCKENTHALER;
ANDREWS, 2004).
Comunidades de pesquisa em geral acreditam que a habilidade de
detectar e quantificar regies cerebrais com acmulo de ferro apresenta um
elevado potencial no estudo de doenas neurodegenerativas possibilitando
entender a patognese e monitorar a progresso, seja em condies normais
ou ante um tratamento.
Haacke e colaboradores, em um trabalho de
reviso (HAACKE et al., 2005), exemplificam patologias com um comprovado

acmulo de ferro como: Hallervorden-Spatz, Hemocromatose, Talassemia,
Anemia, Infarto Cerebral, Hemorragia Crnica, Esclerose Mltipla, doena de
Alzheimer, Huntington, doena de Parkinson, AIDS e Sndrome de Down. Esta
1
1.1 - Contedo de ferro no organismo humano
diversidade de patologias associadas a este metal altamente dependente da

distribuio e funcionalidade do mesmo no corpo humano.
1.1
Contedo de ferro no organismo humano

O ferro o metal de transio mais abundante do nosso corpo. Homens
adultos saudveis tm cerca de 3000 a 4000mg de ferro distribudos no corpo

(Tabela 1.1).
Regio
Clula
Molcula
associada
Funo
fundamental
Quantidade (mg)
Quantidade
relativa (%)
Sangue
eritrcitos
hemoglobina
transporte O2
2680
66,0
Fgado
hepatcitos
ferritina
e
hemossiderina
armazenamento
1000
24,6
F e+3
Msculo
(geral)
clulas
musculares
mioglobina
transporte
e
reserva de O2
153
3,7
Medula ssea
eritroblastos
e mcrofagos
hemoglobina,
ferritina
e
hemossiderina
armazenamento
153
3,7
clulas
da
glia
neurnio
ferritina,L-ferritina,
ferro
e
transferrina
60a
1,5
transferncia
de
eltrons,
catalise
e
peroxidase
0,2
transporte
0,1
Crebro
Mltiplos
tecidos
mltiplos
tecidos
grupos
FeSS
enzimas
de
e
Plasma
plasma
transferrina
F e+3
F e+3
Intestino
Delgado
entercitos
DMT1
absoro
1-3
0,1
Pele,
trato
.........
gastrointestinal,
tero e outros
.........
descamao,
trauma menor,
menstruao,
gravidez
e
lactao
1-3
0,1
Valor total
.........
.........
4060
100
.........
Tabela 1.1: Distribuio de ferro em adultos saudveis. As quantidades de

ferro foram estimadas a partir dos dados de Andrews (1999), Kaushansky
et al. (2010), Connor, Boeshore e Benkovic (1992). a Valor obtido de dados
de volumetria por nosso grupo e de dados de concentrao de Hallgren e
Sourander (1958).
A homeostase do ferro mantida pela absoro alimentar, distribuio

no corpo e perda do ferro.
A perda do metal ocorre diariamente
devido transpirao, descamao da pele e ferimentos leves, e do trato

gastrointestinal. As mulheres possuem nveis de ferro inferiores aos homens,
principalmente devido perda do metal durante a menstruao, gravidez,
parto e lactao. Geralmente, perdas de ferro em homens adultos e mulheres
ps-menopausa so aproximadamente 1,0 mg e em mulheres com ciclo
menstrual regulado aproximadamente 1,5 mg (BOTHWELL et al., 1979). A
Tabela 1.1 resume a distribuio de ferro no organismo humano de acordo
com a regio, sub unidade, forma molecular, funo fundamental, quantidade
e quantidade relativa.
Uma classificao usual de ferro heme e ferro no heme. Ferro heme
possui a presena do agrupamento heme como em hemoglobinas, mioglobinas
e enzimas de peroxidase. J o ferro no heme no possui o agrupamento heme
e em geral serve para classificar todas as outras molculas que possuem ferro:
(i) complexos de baixo peso molecular, (ii) metaloprotenas como transferrina,
melanotransferrina e lactoferrina, (iii) protenas de armazenamento como
ferritina e hemossiderina e (iv) ferro inico.
Com intuito de resumir a reviso obtida de distribuio de ferro e da
sua importncia funcional no organismo classificamos-lo abaixo nos seguintes
tpicos: ferro funcional, armazenamento de ferro e transporte de ferro.
A)Ferro funcional
O ferro desempenha duas funes bsicas no organismo: transporte de
oxignio (hemoglobina e mioglobina) e eltrons (agrupamentos ferro-enxofre).
Dois teros da deposio normal de ferro no corpo humano esto
incorporados na hemoglobina na forma F e+2 em 4 grupos heme (Figura 1.1).
A hemoglobina uma metaloprotena presente nos eritrcitos com funo de
transporte de oxignio no sangue. Nesta funo o ferro desempenha o papel
fundamental, pois o oxignio liga-se a ele diretamente. O on de F e+2 quando
isolado e exposto ao oxignio oxidado de maneira irreversvel a F e+3 , que

no liga a O2 . A poro protica da hemoglobina impede essa oxidao e
torna possvel a ligao reversvel do O2 ao grupo heme (VOET; VOET; PRATT,
2000).
(a)
(b)
Figura 1.1:
Metaloprotenas envolvendo ferro e grupo heme:
(a)
representao da molcula de hemoglobina, onde as cores verde, azul escuro,
azul claro e amarelo representam as cadeias de aminocidos ou subunidades,
a cor vermelha indica um grupo heme e preto o tomo de Fe+2 (imagem
modificada de Matz E, 2013); (b) Grupo heme, onde o tomo central de
Fe+2 est ligado a quatro tomos de nitrognio de cada anel porfirnico
(marcados de A a D) no plano, a histidina e ao oxignio molecular num plano
perpendicular (VOET; VOET; PRATT, 2000).
De acordo com (ANDREWS, 1999) aproximadamente 10% do ferro do

organismo est distribudo na mioglobina(Mb) (Figura1.2).
Esta pequena
metaloprotena intracelular do msculo dos vertebrados, que contm somente

um agrupamento heme, capaz de se ligar reversivelmente ao oxignio
molecular e facilitar o transporte do mesmo dentro da clula muscular para as
mitocndrias durante perodos de aumento da atividade metablica. Tambm
pode atuar como reservatrio de oxignio em condies de anxia (ORDWAY;
GARRY, 2004).
Em menores quantidades no organismo, aproximadamente 8 mg,
existem protenas com agrupamentos de ferro-enxofre (Fe-S) (ROUAULT,
Figura 1.2: Representao da molcula de mioglobina. Figura adaptada de

Nelson e Cox (2000).
2001; LILL; MUHLENHOFF, 2006), com funes de transporte de eltrons

na mitocndria, enzimticas e regulatrias de protenas.
B) Armazenamento de ferro
A segunda maior deposio deste on metlico no organismo, aps
a hemoglobina, est nas protenas de armazenamento de ferro.
Elas so
encontradas sob duas formas: ferritina e hemossiderina (BARTON et al.,

2010). No nosso organismo, o fgado contm uma alta concentrao destas
protenas nos hepatcitos e macrfagos (incluindo clulas Kupffer) com
uma distribuio relativamente uniforme, j no crebro predomina-se em
oligondendrcitos e clulas da glia e na forma particular (H-ferrtina) em
neurnios.
A ferritina uma molcula protica, principalmente intracelular, que
captura Fe+2 e armazena como Fe+3 . Ela reduz o risco de dano intracelular
que pode ser causado pela formao de radicais oxigenados e est presente
principalmente no fgado, medula ssea e gnglios da base. A ferritina livre
sem estar combinada com o Fe+2 chamada de apoferritina (Figura 1.3(a)),
sendo um heteropolmero de 24 sub unidades que formam uma concha oca
com dimetro externo de 12-13 nm e dimetro interno de 7-8 nm, peso
molecular aproximadamente 500 kD, com capacidade de armazenar at 4500

tomos de F e+3 por molcula (HARRISON, 1996). Esta molcula composta
de canais ou sub unidades L(do ingls light ) e H(do ingls heavy). A sub
unidade L tem atividade ferroxidase que necessria para a entrada do
ferro na apoferritina.
A sub unidade H facilita a formao do ncleo de
ferro da ferritina (HARRISON, 1996). A ferritina com dois tomos de ferro

denominada holoferritina (Figura 1.3(b)).
(a)
(b)
Figura 1.3:
Representao ilustrativa de protenas envolvidas no
armazenamento de ferro: (a) Ferritina na forma de Apoferritina ilustrada com
protinas H e L. (b) Ferritina na forma de holoferritina, indicado o ncleo que
armazena o ferro como um complexo de hidrxido de xido de ferro. Figuras
adaptadas de Carneiro (2001).
Outra molcula que armazena ferro a hemossiderina.
Apesar de
ter sido identificada por Perl no sculo XIX (PERL, 1867), ainda pouco
explorada em termos de composio, estrutura, biossntese e metabolismo.
Ela uma molcula protica insolvel de massa molecular superior a 4000
kD (WARD et al., 2000).
De acordo com Weir, Gibson e Peters (1984)
a hemossiderina formada principalmente por ncleos de FeOOH com

uma incompleta superfcie protica e compostos bioqumicos de fosfato e
magnsio, e alguns possveis lipdios. O autor tambm sugere que os ncleos
de ferro presente na hemossiderina so derivados da digesto lisossomal de
agregados de molculas de ferritina, assim a hemossiderina pode ser uma

molcula derivada da ferritina.
Selden et al. (1980) reportaram que a concentrao de hemossiderina
aumenta cerca de 100 vezes em clulas do fgado em pacientes com
hemocromatose.
Tambm foi constatado aumento da concentrao de
hemossiderina em pacientes com siderose superficial do sistema nervoso

central (DURIEUX et al., 1999), angioma cavernoso cerebral (VYMAZAL;
URGOSK; BULTE, 2000) e em lisossomos (Figura 1.4) e siderossomos de
clulas da glia de pacientes com doena neurodegenerativa (QUINTANA;
COWLEY; MARHIC, 2004; QUINTANA et al., 2006).
Figura 1.4: Imagem de microscopia eletrnica dos ncleos de Ferritina (Ft) e

de Hemossiderina (Hm) no interior de um lisossomo de uma clula da glia do
hipocampo de um paciente com Alzheimer. Imagem reproduzida de Quintana
et al. (2006).
C) Transporte de ferro
O ferro circula no corpo, principalmente, atravs de uma glicoprotena
denominada transferrina que se liga ao Fe+3 e o transporta para todo o corpo
atravs do sistema sanguneo (TRINDER; MORGAN, 2001).
Esta protena
possui meia vida de oito dias e produzida por hepatcitos e em pequenas

quantidades por outros tipos de clulas (FINCH; HUEBERS, 1982). Porm ela
esta distribuda em todas as regies do organismo onde exista necessidade de
ferro.

Em mamferos,
a transferrina sem ferro (apotransferrina) tem
capacidade de se ligar a dois ons Fe+3 por molculas de forma dependente

do pH, quando est saturada chamada de holotransferrina. Maior parte do
ferro que circula no plasma ou no fludo extracelular ligado transferrina
(Tf), e isto previne danos que poderiam ser causados por produtos altamente
reativos gerados pela presena de ferro livre (VOET; VOET; PRATT, 2000).
Embora seja produzida mais transferrina em resposta deficincia de ferro, o
acmulo de ferro tem pouco efeito na sntese. Um nmero de outros fatores
afeta a produo de Tf, incluindo citocinas, hormnios e hipxia (PONKA;
BEAUMONT; RICHARDSON, 1998). Em geral o controle de Tf aparece ocorrer
no nvel de transcrio e possivelmente no nvel translacional (LOK; LOH,
1998).
A figura 1.5 resume o processo de transporte de ferro para o interior
da clula partindo da transferrina.
A transferrina carregada de ferro
(Fe2 -Tf) se liga aos receptores de transferrina (TfR) sobre a superfcie da

membrana. Formando complexos revestidos por clatrina pits, que invaginam
para formar endossomas (AISEN; WESSLING-RESNICK; LEIBOLD, 1999). A
bomba de prtons intracelular diminui o pH dentro dos endossomas, levando
a mudanas conformacionais em protenas que resultam na liberao de ferro
da transferrina. O transportador de metal divalente 1 (DMT1) movimenta o
ferro, atravs da membrana endossomal, para dentro do citoplasma. Enquanto
isso, apotransferrina e receptores de transferrina (Apo-Tf) so reciclados para
a superfcie celular. No citoplasma de clulas eritrides o ferro movimenta-se
mais para as mitocndrias, onde incorporado a protoporfirina para gerar o
grupo heme. J em clulas no eritrides, o ferro armazenado como ferritina
e hemossiderina (ANDREWS, 1999).
A quantidade de ferro levado para o interior das clulas muito
dependente da quantidade de receptores de transferrina na membrana, assim
cada TfR se liga a 2 molculas de transferrina. Estes receptores so regulados
pela concentrao de ferro celular e pelo cido ribonucleico citoplasmtico
1.2 - Distribuio de ferro no crebro
Figura 1.5: Processo de transporte de ferro para o interior da clula partindo

da transferrina. Figura obtida de Andrews (1999).
(RNA) regulador de protenas com ferro(IRPs) (ROUAULT, 2001).

A Tf tambm sintetizada localmente em rgos que apresentam
barreira fisiolgica ao movimento de protenas plasmticas, como a barreira
hemato-enceflica (ZAKIN, 1992).
1.2
Distribuio de ferro no crebro

O ferro possui uma distribuio caracterstica e heterognea no crebro
(Tabela 1.2), sendo o metal mais abundante neste rgo (BEARD; CONNOR;
JONES, 1993). Ele um essencial co-fator para algumas protenas que esto
envolvidas na funo normal do tecido neuronal, como a sntese de dopamina.
10
Regio
Anatmica
g de Fe total/g
de tecido mido
Mtodo
Bioqumico
Globo plido
213
Colorimetria
Hallgren e Sourander (1958)
Globo plido
176
AAS
Chen e Hardy (1993)
Globo plido
182
AAS
Chen e Hardy (1993)
Globo plido(lat.)
207
AS
Griffiths et al. (1999)
Globo plido
205,0
ICP
Langkammer et al. (2010)
Globo plido
175-213
Substncia negra
185
Colorimetria
Substncia negra
140
AS
Substncia negra
84
Colorimetria
Thomas et al. (1993)
Substncia negra
85-185
Substncia
ZC+ZR
negra
157
AS
Sofic et al. (1991)
Substncia
ZC
negra
63
AS
Sofic et al. (1991)
Substncia
ZR
negra
94
AS
Sofic et al. (1991)
Putmen
130
Colorimetria
Putmen
110
AAS
Chen e Hardy (1993)
Putmen
120
AS
Putmen
78
Colorimetria
Putmen
153
ICP
Putmen
78-130
Ncleo caudado
93
Colorimetria
Ncleo caudado
116
NAA
Brooks et al. (1989)
Ncleo caudado
92
AAS
Chen et al. (1989)
Ncleo caudado
117
ICP
Dexter et al. (1991)
Ncleo caudado
100
AS
Ncleo caudado
56
Colorimetria
Ncleo caudado
92
ICP
Ncleo caudado
56-117
Ncleo Rubro
195
Colorimetria
Referncia
Tabela 1.2: Contedo de ferro total por unidade de peso de tecido mido em
regies cerebrais de sujeitos saudveis. Tabela modificada de Haacke et al.
(2005). * Os mtodos bioqumicos esto descritos no tpico 2.1.
11
O ferro no crebro est concentrado principalmente nos gnglios da

base (Figura 1.6) e est nas forma de ferro inico, ferritina e transferritina, e
sua quantificao absoluta envolve uso de tcnicas in vitro.
(a)
(b)
Figura 1.6: Cortes transversais contendo os gnglios da base: (1) Ncleo

Caudado, (2) Putmen, (3) Globo Plido, (4) Tlamo, (5) Ncleo Rubro e (6)
Substncia Negra. Imagem adaptada de Mai, Paxinos e Voss (2008)
A distribuio regional de ferro foi primeiramente demonstrada pela

tcnica histoqumica Perls Stain. Um trabalho pioneiro com este marcador
em amostras in vitro mostrou uma intensa mancha de ferro frrico (Fe+3 )
em partes do sistema extrapiramidal, menos intensa no crtex cerebral e
nenhuma reao na substncia branca (SPATZ, 1922). Posteriormente, muitos
outros trabalhos utilizando diversas tcnicas tm demonstrado concentraes
relevantes do metal,
principalmente no Globo Plido,
Ncleo Rubro,
Substncia Negra e Putmen (HALLGREN; SOURANDER, 1958; BROOKS et

al., 1989; SOFIC et al., 1991; GRIFFITHS et al., 1999; LANGKAMMER et al.,
2010).
Alguns pesquisadores tm quantificado seletivamente a ferritina no
crebro, porm com variaes considerveis (Tabela 1.3). Os resultados de
12
Riederer et al. (1989) e Dexter et al. (1987) foram similares, porm entre 5
e 10 vezes menores que as concentraes obtidas posteriormente por Connor
et al. (1992), Connor et al. (1995). Algumas destas possveis discrepncias
podem ter sido resultado do uso de um anticorpo policlonal no especfico
de isoferritina nos trabalhos de Riederer et al. (1989) e Dexter et al. (1987),
que no possibilitou estimar a concentrao de ferritina correta (HAACKE et
al., 2005). O estudo individual de Connor, Boeshore e Benkovic (1992) indica
que a distribuio de ferritina no crebro se assemelha do ferro total, com
concentraes nos gnglios da base de aproximadamente duas ou trs vezes
maiores do que no crtex motor (Tabela 1.3). Connor et al. (1995) em um
estudo mais especfico de quantificao das isoformas H-ferritina e L-ferritina
observaram que H-ferritina a mais dominante no crebro e a concentrao
aumenta com a idade.
Regio Anatmica
g de ferretina
total/g de tecido
mido
Mtodo
Bioqumico
Referncia
Globo plido
1440
Sobrenadante
Connor et al. (1995)
Globo plido medial
262
Sobrenadante
Globo plido lateral
250
Sobrenadante
Substncia negra
1535
Sobrenadante
Substncia negra
292
Sobrenadante
Substncia negra ZC
218
Sobrenadante
Substncia negra
223
Incerto
Riederer et al. (1989)
Putmen
1125
Sobrenadante
Putmen
237
Sobrenadante
Putmen
240
Incerto
Riederer et al. (1989)
Ncleo caudado
1080
Sobrenadante
Ncleo caudado
116
Sobrenadante
Tabela 1.3: Contedo de ferritina por unidade de peso de tecido mido em

regies cerebrais. O peso da ferritina refere-se molcula toda. Tabela
modificada de Haacke et al. (2005).
13
A anlise quantitativa da distribuio regional de transferrina no

crebro foi avaliada por apenas alguns trabalhos (CONNOR et al., 1992;
CONNOR et al., 1995). No trabalho de Connor et al. (1992) constataram
que os nveis de transferrina so tipicamente entre 10 e 50 vezes menores
que a concentrao de ferritina por unidade de protena. A substncia branca
apresenta cerca de 2,5 a 3,5 vezes mais transferrina do que a corresponde
substncia cinzenta (CONNOR et al., 1992). No geral, a distribuio de ferro
oposta Tf, em reas que a concentrao de ferro alta (Globo Plido,
Substncia Negra, Ncleo Rubro, Giros Dentados, Tlamo e Putmen) tem
relativamente baixas concentraes de Tf. J altas concentraes de Tf so
encontradas no hipocampo e na regio cortical, onde existem baixos nveis
relativos de ferro (ZATTA, 2003).
Para o estudo de distribuio de ferro no crebro usando tcnicas
macroscpicas, como neuroimagens, a avaliao deve ser feita por regies
anatmicas como descrito anteriormente. Porm, para entender um pouco
melhor a gnese e evoluo de algumas doenas neurodegenerativas,
devemos olhar a um nvel microscpico, celular, como exposto na Tabela
1.1.
O trabalho pioneiro de Spatz (1922) tambm estudou a deposio
intracelular do ferro nas regies citadas acima,
onde constatou que
a deposio ocorre principalmente em clulas oligodendrcitas, clulas

endoteliais de capilares e neurnios gigantes piramidais do crtex motor
(clulas Betz). De acordo com Connor et al. (2001) clulas oligodendrcitas
ricas em ferro so comuns na substncia branca, clulas responsveis pela
produo de mielina, mas tambm so encontradas em gnglios da base.
A presena de ferritina, indicada por mtodos imuno-histoqumicos foi
observada principalmente em clulas oligodendrcitas, microglia no crtex
cerebral e astrcitos, particularmente nos gnglios da base (CONNOR et
al., 1990). Utilizando anticorpo monoclonal para cada isoforma da ferritina,
Connor, Boeshore e Benkovic (1992) encontraram H-ferritina em neurnios,
14
enquanto que L-ferritina foi predominante em clulas gliais.

Transferrina predominantemente associada com oligodendrcitos,
mas com a idade acumula-se em astrcitos, principalmente na substncia
branca (CONNOR et al.,
1990).
Embora a Tf sintetizada em
oligodendrcitos, ela no parece se secretada por oligodendrcitos j que ela

foi localizada no citosol e no no compartimento de secreo (De Arriba Zerpa
et al., 2000). Dessa forma os achados sugerem que Tf sintetizado no crebro
funcionalmente diferente da Tf de outros lugares do corpo e possui outra
funo do que transporte de Fe nos oligodendrcitos.
1.3 - Acmulo de ferro no crebro e doenas neurodegenerativas (Doena de Parkinson) 15
1.3
Acmulo de ferro no crebro e doenas

neurodegenerativas (Doena de Parkinson)
O acmulo de ferro no crebro tem sido relacionado a diferentes
doenas neurodegenerativas:
CONNOR et al.,
1995;
doena de Parkinson (SOFIC et al., 1988;
GTZ et al.,
2004;
MITTAL et al.,
2009),
Esclerose Mltipla (HAACKE et al., 2009a), Alzheimer(CONNOR et al., 1995;

QUINTANA et al., 2006; STANKIEWICZ et al., 2007) e Pantothenate Kinase
(BARTON et al., 2010). Os pacientes que sofrem destas patologias apresentam
geralmente idades acima de 45 anos.
Nesta faixa etria, mesmo em
indivduos saudveis, j existe uma deposio considervel de ferro no crebro

(HALLGREN; SOURANDER, 1958). Na maioria dos casos graves da doena
de Parkinson, alguns autores tm reportado um aumento na concentrao
de ferro no crebro em medidas in vitro (Tabela 1.4) e in vivo (Tabela 1.5),
mas nenhuma mudana nos casos intermedirios da doena (RIEDERER et
al., 1989; DEXTER et al., 1987; HIRSCH et al., 1991; GTZ et al., 2004).
Regio Anatmica
Substncia negra
Tcnica g de Fe total/g
utilizada de tecido mido
em controles
g de Fe total/g
Referncia
de tecido mido
em
pacientes
com doena de
Parkinson
AS
48(8)
85(11)
Sofic et al. (1991)
Substncia negra
ICP
122(14)
165(14)
Substncia negra
ICP
122(13)
164(13)
AS
140(13)
281(22)
AS
64(16)
86(18)
Sofic et al. (1991)
Substncia negra ZC
ICP
155(13)
202(13)
Globo plido medial
AS
207(10)
295(12)
Griffiths et al. (1999))
Globo plido lateral
AS
164(19)
114(10)
Substncia negra
Substncia negra ZC
Tabela 1.4: Regies cerebrais que apresentaram aumento significativo de

ferro em pacientes com doena de Parkinson, atravs de tcnicas in vitro.
*(p<0,05), ** (p<0,01).

A divergncia entre os valores absolutos de concentrao de ferro na
Tabela 1.4 explicada pelo uso de tecido cerebral em diferentes estgios
de neurodegenerao, to bem quanto diferentes disseces dos tecidos
manipulados (GTZ et al., 2004).
Regio Anatmica
Campo
magntico
B0 (T)
R2 mdio
(desvio)
R2*
mdio
(desvio)
Sujeitos (idade)
Referncia
Substncia negra
1,5
14,3(1,1)
21,2(2,6)
Controle(64)
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
14,5(1,3)
23,7(3,5)
Parkinson(61)
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
34,5(5,5)
Controle(57)
Peran et al. (2010)
38,0(9,0)
Parkinson(62)
Peran et al. (2010)
25,3(5,6)
Controle(62)
Baudrexel et al. (2010)
28,0(4,9)
Parkinson(62)
12,7(0,6)
Controle(64)
Kosta et al. (2006)
13,6(1,6)
Parkinson(64)
Kosta et al. (2006)
22,8(2,8)
Controle(56)
Martin,
(2008)
Wieler
Gee
26,9(2,8)
Parkinson(62)
Martin,
(2008)
Wieler
Gee
16,2(1,8)
24,9(5,6)
Controle(64)
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
14,9(1,5)
22,6(3,7)
Parkinson(61)
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
14,9(1,2)
Controle(64)
Kosta et al. (2006)
14,3(1,3)
Parkinson(64)
Kosta et al. (2006)
12,8(0,5)
Controle(19/90)
Chen e Hardy (1993)
13,7(0,7)
Parkinson(19/90)
Chen e Hardy (1993)
12,6(0,8)
Controle(64)
Kosta et al. (2006)
14,7(0,3)
Parkinson(64)
Kosta et al. (2006)
Substncia negra
Substncia negra
Substncia negra ZC
3,0
3,0
1,5
Substncia negra ZC
Globo plido
Globo plido externo
Putmen
Putmen
3,0
1,5
1,5
1,5
1,5
Tabela 1.5: Regies cerebrais que apresentaram aumento significativo

das taxas de relaxao R2 (s1 ) e R2*(s1 ) em pacientes com doena de
Parkinson. *(p<0,05).
A causa do acmulo de ferro na Substncia Negra em pacientes

com doena de Parkinson ainda desconhecida.
A alterao da barreira

hemato-enceflica por circunstncias inflamatrias e o aumento das protenas
transportadoras de ferro, como transferrina, so sugeridos como causa
do acmulo de ferro (ZATTA, 2003).
Os estudos tambm demonstram
que as protenas transportadoras de ferro como transferrina, lactoferrina

e melanotransferrina com seus respectivos receptores de membrana so
relatados estarem desregulados em neurnios sobreviventes na substncia
negra (MORRIS et al., 1994; FAUCHEUX et al., 1995; LEVEUGLE et al., 1996).
Embora a causa fisiolgica do acmulo de ferro no crebro seja
desconhecida em doenas neurodegenerativas, Moussa et al. (2010) sugerem
que o ferro no crebro pode induzir a progressiva degenerao dos neurnios
da substncia negra e do striatum (ncleo caudado, putmen e globo plido).
Este processo acontece por meio da formao de reativos intermedirios
biolgicos, incluindo espcies reativas de oxignio e a formao de agregados
de protenas citotxicos, causadores do estresse oxidativo (MOUSSA et al.,
2010).
O estresse oxidativo pode ser definido como o desequilbrio no balano
entre agentes antioxidantes e pr-oxidantes.
O on de Fe+2 um dos
agentes pr-oxidantes que geram radicais hidroxilas por meio da reao de

Fenton.
Durante esta reao, ons ferrosos (Fe+2 ) reagem com H2 O2 , em
presena de cido ascrbico, produzindo Fe+3 e os radicais hidroxilas (OH

e OH ). A formao em excesso destes radicais sobrecarrega a capacidade
de desintoxicao das clulas, que pela sua alta reatividade promovem a
destruio das protenas, das membranas e do material gentico com posterior
morte celular (Figura 1.7).
Figura 1.7: Esquema simplificado do estresse oxidativo: Adaptado de Berg

e Hochstrasser (2006).
Por outro lado, outros estudos sugerem que o aumento de ferro pode
ser um evento tardio ou secundrio no processo da doena de Parkinson. De
acordo com Riederer et al. (1989) a concentrao de ferro na Substncia
Negra no variou em casos intermedirios da doena de Parkinson. Dexter
et al. (1991) no reportaram mudana na concentrao de ferro em casos
incidentes de corpo de Lewy (possvel estgio pr-clnico da doena de
Parkinson). Desta forma, os dois trabalhos concluram que o aumento de ferro
somente ocorreu no estgio avanado da neurodegenerao.
De acordo com Hirsch (1988) e colaboradores e Jellinger (1991) a
degenerao dos neurnios localizados nos gnglios da base de fato mais
provvel devido a um processo secundrio relacionado a algum insulto txico
inicial envolvendo grupos heterogneos de clulas catecolaminrgicas no
crebro (HIRSCH; GRAYBIEL; AGID, 1988; JELLINGER, 1991). No entanto,
acredita-se que um excesso de ferro dentro da Substncia Negra tambm
contribui na progresso da doena atravs da sua participao na formao
continuada de radicais livres citotxicos (SENGSTOCK et al., 1992).
Na literatura consultada, no existe um consenso em quanto relao
causa e efeito e no est definido se uma vez estabelecida doena mudam os

padres de deposio devido a ela (FERNANDEZ; BARBOSA; Schroder, M. V.,
2007; CRICHTON; DEXTER; WARD, 2011). A quantificao da concentrao
de ferro in vivo permite acompanhar a relao de acmulo e causa de sintomas
clnicos.
Captulo
Metodologia de quantificao de
ferro no crebro
A distribuio de ferro inico, ferritina e transferrina no organismo,
descrito no captulo 1, vm sendo estimada in vitro a partir de medidas
fsicas, histoqumicas e bioqumicas desde a dcada de 20 do sculo passado.
As medidas in vitro permitem uma quantificao absoluta do ferro, porm
possuem suas limitaes quando comparadas com as tcnicas in vivo. Neste
captulo, faremos uma reviso das principais metodologias de quantificao
deste metal e das protenas associadas ao mesmo no crebro humano
considerando ambas as abordagens: in vitro e in vivo.
2.1
Medidas in vitro
O acmulo de ferro no crebro foi inicialmente demonstrado por
tcnicas histoqumicas no comeo da dcada de 1920-1930 usando Perls

Stain (SPATZ, 1922).
Posteriormente quantificou-se o contedo de ferro
de tecidos cerebrais post mortem atravs de tcnicas como a colorimetria

melhorada com outros corantes (HALLGREN; SOURANDER, 1958; DRAYER
et al., 1986; RIEDERER et al., 1989; SOFIC et al., 1991; THOMAS et
al., 1993), espectroscopia por absoro atmica (RIEDERER et al., 1989),
espectrofotometria de absoro (GRIFFITHS et al., 1999), anlise por
ativao com nutrons (BROOKS et al., 1989), plasma indutivamente acoplado
(DEXTER et al., 1989; LANGKAMMER et al., 2010).
20
2.1 - Medidas in vitro
21
A colorimetria melhorada uma tcnica de espectrofotometria de

absoro.
Constitui-se na leitura de absorbncia de uma mistura de um
quelante ou outra substncia marcadora com a amostra de interesse. Para

a quantificao de Fe+2 e Fe+3 Riederer et al. (1989) homogeneizaram as
amostras de crebro de cadver em cido hidro clordrico, misturaram no
quelante ferrozina e realizaram-se medidas de absorbncia.
A
espectroscopia
por
absoro
atmica
(AAS,
do
ingls)
fundamentada na observao das transies entre nveis eletrnicos para

caracterizar as amostras. O experimento basicamente constitudo por uma
fonte de radiao que ir incidir radiao eletromagntica sobre a amostra
atomizada.
Os tomos da amostra iro absorver e posteriormente emitir
energia, a qual ser detectada por um sistema de deteco, obtendo-se um

espectro caracterstico.
Espectrofotometria por absoro (AS, do ingls) tem um principio fsico
semelhante espectroscopia por absoro atmica, diferindo somente na
fonte de energia eletromagntica (desde o ultra-violeta at o infra vermelho)
e na forma como a amostra preparada.
A anlise por ativao com nutrons (NAA, do ingls) ocorre atravs
do bombardeamento de nutrons no material induzindo radioatividade. Neste
material so gerados radioistopos emissores de raios gama, posteriormente,
detectados na forma de um espectro.
Como cada ncleo ir produzir um
radioistopo com caractersticas prprias (energia, intensidade e meia vida)

possvel quantificar a concentrao de alguns dos ncleos contidos no material
de interesse.
Espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (ICP, do
ingls) utiliza como fonte de ionizao um plasma de argnio criado por uma
fonte de alta potncia (at 1.5 kW). A amostra sofre nebulizao e por um
sistema de aerossol inserida no plasma, resultando numa mistura de tomos,
ons, fragmentos moleculares no dissociados e partculas no volatilizadas.
Esta mistura direcionada ao espectrmetro de massa, o qual submete os ons
2.1 - Medidas in vitro
22
gerados a um campo magntico de onde emergem em trajetrias diferentes

em funo das diferenas na razo massa/carga.
Os resultados das medidas in vitro, reportados na literatura, permitem
concluir a existncia de uma distribuio heterognea deste metal no crebro
(Figura 2.1). Globo plido, ncleo rubro, substncia negra e putmen foram
indentificadas como estruturas com os valores mais elevados, acima de 180g
de ferro total por g de tecido mido (HALLGREN; SOURANDER, 1958;
DRAYER et al., 1986).
Figura 2.1: Mtodo histoqumico de Persl stain aplicado nos ncleos da

base de um cadver (homem saudvel de 44 anos). Maior intensidade
de azul representa maior concentrao de ferro.
A: Globo Plido(G),
Putmen(P), Ncleo Caudado(C), Capsula Interna(I), Substncia Branca
Frontal(F), Radiaes ticas(O), Fibra U Subcortical(seta). B: Ncleo Rubro
(R), Substncia Negra(N), Substncia Cinzenta, Periaqueductal(P). C: Ncleo
Dentado do Cerebelo(D). Imagem obtida de Drayer et al. (1986).
Existem variaes nos resultados in vitro de quantificao de ferro

reportados por alguns autores, mesmo utilizando a mesma tcnica, fato que
pode ser justificado pelo uso de diferentes mtodos de preparao do tecido
cerebral. Por exemplo, a imerso prolongada em formalina leva ferro para
fora do tecido e isso pode explicar os baixos resultados encontrados por
Thomas et al. (1993). J as tcnicas in vivo no so dependentes de mtodos
de preparao de amostras e permitem o acompanhamento longitudinal do
contedo de ferro no crebro.
2.2 - Medidas in vivo
2.2
23
Medidas in vivo
As medidas in vivo de quantificao de ferro no crebro so
principalmente realizadas atravs de mtodos no invasivos por imagem,

como ultrassom transcranial e ressonncia magntica nuclear (RMN).
Estudos com ultrassom transcranial tem encontrado uma correlao
positiva entre a rea de ecogenicidade da substncia negra e a concentrao
de ferro na mesma.
Apesar desta tcnica no gerar imagem de alta
resoluo espacial como a imagem de RMN, vem mostrando que pode ser uma
ferramenta valiosa no diagnstico de distrbios extrapiramidais relacionados
com o acmulo de ferro (BERG, 2006).
Porm, estes achados ainda so
incipientes e no tm sido reportados de forma reprodutvel. J as tcnicas

de RMN possuem alta resoluo espacial e tm sido abordadas por mais
pesquisadores em todo o mundo h mais de 25 anos.
As imagens de ressonncia magntica nuclear possuem resoluo
espacial suficiente para gerar imagens semelhantes aos atlas anatmicos e
capacidade de medir indiretamente nveis de ferro no tecido, atravs das
taxas de relaxao transversal (R2=1/T2 e R2*=1/T2*) e da susceptibilidade
magntica () (DRAYER et al., 1986; HAACKE et al., 2005).
O ferro como on paramagntico se apresenta na forma de Fe+2 e Fe+3 .
Sendo o on frrico (Fe+3 ) o mais forte on paramagntico com trs possveis
estados de spin eletrnico: 1/2, 3/2 e 5/2, que so facilmente identificados
por ressonncia paramagntica eletrnica (BAFFA, 1984).
Os eltrons
desemparelhados do tomo de ferro constituem centros paramagnticos que

geram campos magnticos locais intensos. Desta forma, a presena de ons
de ferro, livres ou ligados s molculas nos tecidos cerebrais distorce o campo
magntico a nvel molecular (Figura 2.2).
A interferncia do on de ferro produz inomogeneidade no campo
magntico local, que diminui a magnetizao resultante dos spins nucleares
e consequentemente reduz a intensidade do sinal e os tempos de relaxao
transversal (T2 e T2*). A intensidade do efeito de reduo dependente da
24
Figura 2.2: Representao do efeito do on de ferro paramagntico na

distoro do campo magntico local. Imagem adaptada de Tofts (2003).
concentrao e distribuio do ferro no tecido, o que possibilita estimar a

concentrao de ferro e o estado de ligao. Na figura 2.3 observado uma
hipointensidade do sinal na imagem ponderada de ressonncia ponderada em
T2 nas regies que apresentam acmulo de ferro.
Figura 2.3: Imagens axiais do crebro ponderadas em T2. Regio de sinal

hipointenso (setas indicadas) podem representar acmulo de ferro .
Uma regra mais ou menos geral sobre o efeito do ferro no contraste

da imagem sugerida por Schenck (2003) indicando que somente em regies
com concentraes de ons de ferro maiores que 0,1 mM (0,1mM = 5,58g
de ferro/g de tecido mido) so capazes de afetarem o contraste.
Os
depsitos de concentraes de ferro no tecido cerebral capazes de alterar o
25
contraste da imagem esto principalmente na forma mineralizada (ferridrita:

5Fe2O3-9H2O) associada ferritina ou hemossiderina.
A concentrao
nas restantes protenas que contm ferro (cadeia respiratria mitocndrial,

tirosina hidroxilase, ribonucleotdeo redutase e outras) e nas reservas de ferro
instveis possuem um valor muito baixo (1,5M) e podem ser desconsideradas
(SCHENCK, 2003).
A intensidade de sinal em imagens convencionais de RMN (Spin Eco e
Gradiente Eco) ponderadas em T2 e em T2* no um dado quantitativo. Visto
que as variaes na intensidade de sinal podem acontecer em equipamentos
diferentes.
Portanto a intensidade de sinal no pode ser usada como
parmetro reprodutvel e representa uma medida qualitativa.
2.2.1
Relaxometria R2 e R2*
As taxas de relaxometria (R2 e R2*) fornecem dados quantitativos, j
que representam grandezas fsicas associadas s propriedades intrnsecas de

relaxao do tecido e so relacionados com a concentrao de ferro no crebro
(Figura 2.4). No entanto, essas taxas podem ser influenciadas por fatores
extrnsecos, como a inomogeneidade do campo magntico esttico (B0 ).
Figura 2.4: Mapas de relaxometria do crebro por ressonncia magntica

nuclear: (a) Mapa de R2 e (b) mapa de R2*. Regio de hiperintensidade
representa acmulo de ferro.
26
As taxas de relaxometria R2 e R2* so obtidas atravs da aquisio de

imagens por meio de sequncias Spin Eco ou Eco de Spin e Gradiente Eco ou
Eco de Gradiente respectivamente. O processamento dos mapas de R2 e R2*
ser discutido na seo de Mtodos 4.3.1.
A sequncia Spin Eco possui a vantagem de ser menos sensvel a
inomogeneidade de B0 , que o principal problema da sequncia Gradiente
Eco (JENSEN, 2011).
Na sequncia Spin Eco, aplicado um pulso de
radiofrequncia de 90 e aps certo tempo, chamado de tempo de eco,

aplicado outro pulso de 180 para refocalizar a fase dos spins nucleares e obter
a coerncia de fase novamente, obtendo apenas a taxa de relaxao intrnseca
do tecido. No entanto, a sequncia Spin Eco necessita de um maior tempo de
aquisio de imagem do que a sequncia Gradiente Eco e deixa de ser sensvel
s pequenas variaes de inomogeneidades de campo magntico local. A taxa
de relaxao R2 medida pode ser influenciada pela escolha do tempo de eco e
pelo coeficiente de difuso da gua do tecido (GHUGRE et al., 2005).
A
sequncia
Gradiente
Eco
construda
com
um
pulso
de
radiofrequncia com certo ngulo, no necessariamente 90 , e com aplicao

de um gradiente de campo bipolar na direo da leitura que permite fazer a
codificao espacial e, ento, gerar a imagem. Diferentemente da sequncia
Spin Eco, o sinal obtido em sequncia Gradiente Eco muito dependente da
homogeneidade de B0 e de gradientes macroscpicos de campo magntico
gerado por interface de tecido e ar (WOOD; GHUGRE, 2008). Esses gradientes
podem gerar um decaimento de sinal no mono exponencial e resultar em
vrios valores de R2*.
O efeito pode ser reduzido com a diminuio do
tamanho do voxel. No entanto esta reduo pode causar diminuio da relao

sinal/rudo, e gerar menor acurcia no ajuste mono exponencial do decaimento
do sinal (JENSEN, 2011).
A aquisio em ambas as sequncias pode ser realizada em eco nico
ou mltiplos ecos. Na sequncia Spin Eco, a aquisio de eco nico mais
robusta com respeito a imperfeies do pulso de rdio frequncia, no entanto
27
a aquisio mltiplos ecos necessita de menos tempo. Caso seja usada esta
ltima, deve-se buscar minimizar o erro do ngulo de flip, atravs do aumento
da espessura do corte de refocalizao para trs vezes mais que a espessura
do corte de seleo (PELL et al., 2006).
A utilizao das taxas de relaxometria R2 e R2* para diagnosticar o
acmulo de ferro cerebral em pacientes com doenas neurodegenerativas
tem apresentado resultados controversos. Kosta et al. (2006) constataram
aumento significativo (p<0,05) para valores de R2 da substncia negra de
Graham, Paley e Grnewald (2000)
e Martin, Wieler e Gee (2008) tambm constataram aumento significativo

(p<0,05) para valores de R2* da substncia negra de paciente com doena
de Parkinson.
No entanto outros estudos similares (VYMAZAL et al.,
1999; GRAHAM; PALEY; GRNEWALD, 2000), no encontraram variao

significativa de valores de R2 na substncia negra de controles e de
pacientes. Devido ao possvel aumento de gua, gerado pela morte neuronal,
que consequentemente diminui a taxa de relaxao e, ento, tornou a
quantificao do contedo de ferro incorreta.
A taxa de relaxao diretamente proporcional ao acmulo de ferro
e inversamente ao acmulo de gua. (KAMMAN et al., 1988; GELMAN et
al., 1999; BARTZOKIS et al., 1999; HAACKE et al., 2005). Uma alternativa
para quantificar o contedo de ferro em tecidos que apresentam variao
do contedo de gua a quantificao da susceptibilidade magntica destes
depsitos de ferro, atravs da informao resultante da defasagem dos spins
nuclear (HAACKE et al., 2005; MCCREA et al., 2008).
Durante a aquisio da imagem de RMN so obtidos dados de
magnitude e de fase do vetor magnetizao em cada pixel.
As imagens
convencionalmente usadas na clnica e os mapas de relaxao citados acima

utilizam apenas os dados de magnitude. Os dados de fase de sequncias de
Gradiente Eco so capazes de gerar imagens ponderadas em susceptibilidade
magntica (SWI) que exploram as propriedades magnticas dos tecidos
28
(HAACKE et al., 2005; HAACKE et al., 2009a).
2.2.2
Imagem por susceptibilidade magntica

As imagens convencionais ponderadas em T1 e T2 realam o contraste
para os tecidos que possuem diferenas significantes de tempo de relaxao

longitudinal (T1) e transversal (T2), respectivamente.
Da mesma forma,
a imagem ponderada em susceptibilidade magntica reala o contraste da

imagem para tecidos com diferentes valores de susceptibilidade magntica.
Em geral, a imagem ponderada em SWI (Figura 2.5) tem contrastado regies
venosas e com acmulo de ferro (DUYN et al., 2007; MCCREA et al., 2008;
GUPTA et al., 2010; ROSSI et al., 2010).
Figura 2.5: Imagens ponderadas em SWI: Ilustra de (a) a (d) como o a

intensidade do sinal diminui na regio do ncleo rubro (seta). Imagem obtida
de Gupta et al. (2010).
Alm disso, SWI tem adicionado informaes clinicas complementares

s sequncias convencionais imagens de RMN. Incluindo vrios distrbios
neurolgicos: traumatismo crnio-enceflico, cogulos danosos; e distrbios
hemorrgicos:
mal formao vascular, infarto cerebral, neoplasias;
distrbios neurodegenerativos associadas com calcificao intracraniana ou

depsito de ferro.
A SWI utiliza tanto a informao de magnitude quanto a de fase.
A imagem de fase geralmente era descartada pela clinica devido ao
aparecimento de artefatos, causados pela inomogeneidade do campo esttico.
No entanto, alguns processamentos na imagem foram aplicados para reduzir
ou eliminar este artefato.
O grupo de Reichenbach J.R. liderado por
29
Haacke E.M. foi quem desenvolveu o processamento da imagem ponderada

em susceptibilidade magntica (patenteada nos Estados Unidos por Haacke
(2002)).
A imagem de SWI resultante da ponderao da imagem de fase
na imagem de magnitude adquirida em uma sequncia Gradiente Eco. No
entanto, a imagem SWI apenas qualitativa e, portanto, no muito sugerida
para quantificar deposio de ferro. Assim, nesta dissertao no utilizamos a
imagem SWI para estudar controles e pacientes. Mas foi realizado um estudo
detalhado e a descrio do processo de obteno da imagem SWI est no
Apndice A, visto que na literatura brasileira ainda no tem sido descrito.
Como dado quantitativo de susceptibilidade magntica, tem sido
calculado pela literatura mapas quantitativos de susceptibilidade magntica
(QSM, sigla em ingls de Quantitative Susceptibility Mapping) (ROCHEFORT
et al., 2008).
O mapa QSM obtido da imagem de fase de sequncia
Gradiente Eco por mtodos baseados em Transformada de Fourier (TF). O

leitor interessado neste mtodo pode ler em mais detalhes no captulo 3.
De acordo com Lotfipour et al. (2012) a susceptibilidade magntica
menos influenciada pelo ambiente microscpico em volta da deposio de
ferro no crebro quando comparada s taxas de relaxao R2 e R2* (Lotfipour
et al., 2012). Desta forma, o mapa de susceptibilidade torna-se uma tcnica
mais sensvel ao contedo de ferro em si, porem requer um processamento
mais elaborado e demorado.
Um exemplo da aplicao desta tcnica na
distino de pacientes com doena de Parkinson e controles pode ser visto

na Figura 2.6.
Portanto, de acordo com literatura revisada todas as tcnicas de RMN
citadas no so medidas especficas do contedo de ferro. Como consequncia
a maioria das tcnicas possuem uma limitao na validao do contedo
de ferro, dependendo de detalhes da sequncia utilizada e da calibrao
de parmetros especficos para o tecido. Assim a aplicao simultnea de
dois ou mais mtodos de quantificao de ferro por RMN visam aumentar a
Figura 2.6: Mapas de susceptibilidade magntica.

Lotfipour et al. (2012).
30
Imagem extrada de
sensibilidade e especificidade na deteco de alteraes do contedo de ferro

tecidual (JENSEN, 2011).
Como tm sido mostrado, nos ltimos 20 anos diferentes medidas
in vivo de controles saudveis e pacientes com acmulo de ferro tm sido
realizadas com diferentes tcnicas de aquisio de imagens de RMN, porm
poucos trabalhos abordam a comparao destas tcnicas.
Neste trabalho
sero abordadas vrias tcnicas de imagens de RMN a fim de expor numa

mesma amostra de indivduos as vantagens e desvantagens das mesmas na
quantificao de ferro cerebral.
2.3 - Variveis associadas distribuio de ferro no crebro de indivduos normais31
2.3
Variveis associadas distribuio de ferro

no crebro de indivduos normais
Usando as tcnicas comentadas no tpico anterior, tm sido reportados
valores de R2 e R2* em diversas regies do crebro de indivduos saudveis

sob diferentes condies experimentais (Tabela 2.1).
Regio Anatmica
Campo
magntico
B0 (T)
Substncia negra
1,5
Substncia negra
1,5
14,3(1,1)
Substncia negra
3,0
24,1(2,1)
Substncia negra
3,0
Substncia negra
3,0
Substncia negra ZC
1,5
Substncia negra ZC
1,5
Substncia negra ZC
3,0
Globo plido
1,5
13,1(2,0)
Globo plido
1,5
16,2(1,8)
Globo plido
1,5
Globo plido externo
1,5
Globo plido
3,0
Globo plido
3,0
Globo plido
3,0
Globo plido ant.
R2(desvio)
R2*(desvio)
Idade(anos) Referncia
30,8(1,7)
40
Aquino et al. (2009)
21,2(2,6)
66
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
19-42
Gelman et al. (1999)
34,5(5,5)
57
Peran et al. (2010)
25,3(5,6)
62
47-74
Vymazal et al. (1999)
12,7(0,6)
64
Kosta et al. (2006)
22,8(2,8)
56
Martin, Wieler e Gee

(2008)
19-90
Chen e Hardy (1993)
24,9(5,6)
64
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
22,8(1,3)
31
Yao et al. (2009)
14,9(1,2)
64
Kosta et al. (2006)
25,8(1,1)
19-42
39,5(1,4)
31
Yao et al. (2009)
72,0(10,0)
38-81
Langkammer
(2010)
3,0
41,7(5,3)
56
Martin, Wieler e Gee

(2008)
Globo plido
7,0
86,2(3,2)
31
Yao et al. (2009)
Putmen
0,5
12,6 (0,3)
21-30
Bartzokis et al. (1993)
Putmen
1,5
14,5 (0,5)
21-30
Bartzokis et al. (1993)
Putmen
1,5
12,9(0, 8)
47-74
Putmen
1,5
23.6(0.7)
40
Aquino et al. (2009)
Putmen
1,5
13,4(0,7)
64
Graham,
Paley
Grnewald (2000)
Putmen
3,0
19.4(0,8)
19-42
Putmen
3,0
25,2(0,9)
31
Yao et al. (2009)
Putmen
3,0
56,0(11,0)
38-81
Langkammer
(2010)
Putmen
7,0
50,7(2,0)
31
Yao et al. (2009)
11,7(0,6)
13,0(7,0)
15,0(1,0)
18,7(3,6)
Tabela 2.1: Resumos dos valores de R2 (s1 ) e R2* (s1 ) encontrados na

literatura por regio cerebral para indivduos saudveis. Tabela modificada
de Haacke et al. (2005).
et
et
al.
al.
Pode ser notada uma alta disperso nos valores de R2 e R2* que define
a variabilidade do controle normal. Esta variabilidade deve ser considerada
em qualquer estudo comparativo e possivelmente influenciada por outros
fatores no associados com doena como:
envelhecimento, dominncia
hemisfrica, gnero e funo cognitiva.

O envelhecimento a principal varivel associada com a distribuio
de ferro no crebro. O trabalho mais citado sobre o assunto observou por
anlise de colorimetria que o ferro no heme aumenta gradualmente nas duas
primeiras dcadas de vida e assume um patamar durante a vida adulta (Figura
2.7) (HALLGREN; SOURANDER, 1958).
(a)
(b)
Figura 2.7: Acmulo de ferro com o avano da idade em regies anatmicas.

a, Globo Plido. b, Putmen. O eixo das abscissas representa mg de ferro por
100g de tecido fresco e o eixo das ordernadas representa a idade em anos.
Grficos reproduzidos de Hallgren e Sourander (1958).
Medidas recentes de relaxometria, in vivo, tambm tm relatado

acmulo de ferro com o avano da idade em sujeitos normais (HEBBRECHT;
MAENHAUT; REUCK, 1999; XU; WANG; ZHANG, 2008; AQUINO et al.,
2009; HAACKE et al., 2010). Aquino et al. (2009) observaram um aumento
exponencial de R2* em funo da idade (Figura 2.8) em algumas regies dos
gnglios da base. Este aumento foi mais significativo no globo plido e na

substncia negra, atingindo um valor aproximadamente constante na idade
adulta, entre a terceira e quarta dcada de vida, semelhante aos resultados
de Hallgren e Sourander (1958) e Drayer et al. (1986).
(a)
(b)
Figura 2.8: Dependncia do valor de R2* com o avano da idade. a, Globo

Plido. b, Putmen. Grficos reproduzidos de Aquino et al. (2009).
Outra varivel que possivelmente interfere na distribuio de ferro

no crebro a dominncia hemisfrica que leva a uma assimetria nesta
distribuio.
Supprian et al. (1997) reportaram um menor valor de T2
na substncia branca do lobo frontal.
Mais recentemente, Xu, Wang e
Zhang (2008) detectaram maiores valores de mudana de fase no hemisfrio

esquerdo das seguintes regies: putmen, globo plido, substncia negra,
tlamos e substncia branca.
A possvel explicao destes autores est
relacionada com o nvel de dopamina.
Este nvel apresenta assimetria
esquerda nos gnglios da base (GLICK; ROSS; HOUGH, 1982; Jr. Wagner
et al., 1983; De la Fuente-Femeez et al., 2000) e pelo ferro ser um essencial
cofator para a sntese de dopamina (YOUDIM; M.B.H., 1988) sugestivo a
existncia de um maior contedo de ferro no hemisfrio esquerdo (XU; WANG;
ZHANG, 2008).
Mais uma varivel associada distribuio de ferro no crebro o
gnero, assunto abordado por Bartzokis et al. (2007) utilizando a dependncia
da taxa de relaxao com o campo magntico.
Estes pesquisadores
detectaram menores concentraes de ferro na ferritina para mulheres em

algumas regies: ncleo caudado, tlamo, lobo frontal, genu e splenium do

corpo caloso. Os achados foram justificados pelo fato das mulheres possuir
menores quantidades de ferro no organismo em relao ao homem (FLEMING
et al., 2001) e o fato do nvel de ferro no crebro ser sensvel ao contedo de
ferro no sangue (BORTEN et al., 2004). Porm, Xu, Wang e Zhang (2008) no
encontraram diferenas para as mesmas regies utilizando os valores da fase
do sinal de RMN. A discrepncia nestes achados poderia ser explicada pelo
uso de tcnicas diferentes de imagens de RMN, sendo necessrios mais dados
para elucidar o efeito do gnero na concentrao de ferro no crebro (XU;
WANG; ZHANG, 2008).
Alm disso, os resultados recentes de Penke et al. (2012) sugerem a
relao da varivel funo cognitiva associada com o acmulo de ferro no
crebro, o qual se associou inversamente com a capacidade cognitiva (PENKE
et al., 2012), porem estes resultados so muito isolados e preliminares.
Adicionalmente s variveis, anteriormente mencionadas, associadas
distribuio de ferro no crebro sadio, diversos trabalhos sobre patologias
cerebrais, principalmente de doenas neurodegenerativas, tm sugerido que o
acmulo de ferro esteja relacionado com processos oxidativos, como descrito
no tpico 1.3.
Por conseguinte, muitos estudos tem proposto a quantificao in vivo da
concentrao de ferro no crebro por ressonncia magntica para entender
a relao da deposio do metal e a progresso da doena. Mas todos os
trabalhos no reportaram alta sensibilidade para quantificar ferro e no
conhecido entre as tcnicas propostas a mais sensvel. Propomos o estudo da
identificao da melhor tcnica quantitativa de ressonncia magntica para
estimar ferro em controles e pacientes com doena de Parkinson, levando em
considerao os efeitos de idade e sexo.
Captulo
Mapa de Susceptibilidade
Magntica
3.1
Introduo
Tcnicas quantitativas de Imagem por Ressonncia Magntica, como
Imagem funcional por Ressonncia Magntica e Relaxometria, relacionam

de forma indireta a susceptibilidade magntica dos tecidos com a relaxao
dos spins nucleares.
Compostos abundantes no crebro sejam eles
paramagnticos (metalo-protenas com ons paramagnticos, por exemplo:

hemoglobina desoxigenada) ou diamagnticos (gua, sangue oxigenado)
alteram o campo magntico local e consequentemente os tempos de relaxao.
Em 2005 foi proposta a tcnica de mapeamento de susceptibilidade
magntica (HAACKE et al., 2005).
Nos ltimos anos esta tcnica tem-se
aperfeioado visando, uma anlise quantitativa mais precisa para avaliaes

clnicas (SHMUELI et al., 2009; LIU et al., 2009; WHARTON; SCHAFER;
BOWTELL, 2010; ROCHEFORT et al., 2008; SCHWESER et al., 2011).
Atualmente pode ser muito til para o diagnstico e o acompanhamento
de patologias que acumulam compostos com diferente susceptibilidade
magntica em relao ao tecido sadio (Doena de Parkinson: Lotfipour et al.
(2012); Esclerose Multipla: Langkammer et al. (2013)). Nesta dissertao
de especial interesse a doena de Parkinson que como descrito no capitulo 1
apresenta um acmulo significativo de ferro nos gnglios da base.
36
3.2 - Susceptibilidade Magntica e classificaes
37
Neste capitulo abordamos diferentes tcnicas de quantificao da

susceptibilidade magntica no crebro humano a partir de Imagens por
Ressonncia Magntica Nuclear. Partindo da definio de susceptibilidade e a
classificao de compostos comuns no corpo humano, descrevemos diferentes
modalidades da tcnica QSM seguindo uma ordem de complexidade.
3.2
Susceptibilidade Magntica e classificaes

Susceptibilidade magntica uma medida quantitativa da interao
entre um material e um campo magntico externo aplicado ( H ) (SCHENCK,

1996).
O valor da susceptibilidade magntica pode ser obtido atravs da
quantificao da magnetizao resultante da amostra, considerando o meio

linear:
M = M0 +
.H
(3.1)
Onde M 0 representa a magnetizao inerente, que est presente em

alguns materiais mesmo na ausncia de um campo magntico aplicado. O
termo
. H quantifica a magnetizao induzida pelo campo externo aplicado.
Sendo
o tensor de susceptibilidade magntica do material.
Os materiais em geral podem ser classificados levando em conta suas
propriedades magnticas como: Materiais magnticos duros (termo em ingls
hard magnetic), materiais magnticos moles (termo em ingls soft magnetic)
e materiais no magnticos (termo em ingls nonmagnetic) ou fracamente
magnticos.
Materiais magnticos duros apresentam um elevado valor de M 0

quando comparada a magnetizao induzida (Equao 3.1). Este valor pode
chegar at 106 A/m. A expresso dureza magntica refere-se habilidade
de se resistir a mudanas induzidas pelo campo e de manter uma alta
magnetizao remanescente.
Materiais magnticos moles possuem naturalmente valores muito
baixos de M 0 . Geralmente, esses materiais tm susceptibilidade magntica
38
muito alta. Resultando em foras e torques facilmente detectados na presena

de um forte campo magntico.
Materiais no magnticos ou fracamente magnticos apresentam
valores muito baixos de M 0 e de

(<0,01).
Foras e torques no so
normalmente aparentes quando so colocados em um campo aplicado, porm

a ressonncia magntica o suficientemente sensvel ao efeito destes.
maioria dos materiais, incluindo os tecidos animais, podem ser considerados

no magnticos (SCHENCK, 1996). Os materiais no magnticos so divididos
em paramagnticos e diamagnticos (Figura 3.1).
Figura 3.1: Espectro de susceptibilidade magntica. Adaptado de Schenck

(1996).
De acordo com Saini et al. (1988) materiais paramagnticos possuem

eltrons desemparelhados e apresentam momento de dipolo magntico na
presena de um campo magntico externo. O momento magntico resultante
de certa amostra paramagntica dependente da temperatura. O efeito da
agitao trmica no permite o alinhamento correto dos tomos individuais,
que podem se anularem. Fato que ocorre na ausncia de um campo magntico
externo. Exemplos de materiais paramagnticos so ilustrados na Tabela 3.1.
J os materiais diamagnticos possuem eltrons emparelhados em
todos os subnveis energticos, logo apresentam momentos de dipolo
39
Diamagnticos
(.106 )
Paramagnticos
(.106 )
Clulas
vermelhas
totalmente
desoxigenadas
6, 56c
Fgado (hemocromatose 6,6mg

de Fe por g)
0, 01a
Sangue
totalmente
desoxigenado
(assumindo Hct=0,45)
7, 9c
Tlamo
0, 04b
Fgado (normal 0,21mg

de Fe por g)
8, 74a
Ncleo Caudado
0, 09b
Hemoglobina
(oxigenada)
-9.91
Putmen
0, 10b
gua(37 )
-9,05
Ncleo Rubro
0, 14b
Cobre
-9,6
Substncia negra
0, 17b
Lipdeos
-10,0
Globo plido
0, 19b
Osso cortical
12, 82c
Hemoglobina (desoxigenada)
0,20
Ar (CNTP)
0,36
Ferritina
520
Tabela 3.1: Susceptibilidade magntica (, adimensional no SI) de alguns

materiais fracamente magnticos e tecidos biolgicos. Valores estimados a
partir de Schenck (1996).a Os valores foram calculados baseado na equao
de Schenck (1993).b Valores relativos a substncia branca de Wharton e
Bowtell (2010). c Valores obtidos de Haacke e Reichenbach (2011).
magntico lquido zero. Contudo se estes tomos so colocados em um campo

magntico externo, existe uma ligeira alterao assimtrica no movimento do
orbital dos eltrons e uma pequena magnetizao lquida pode ser detectada
em sentido contrrio ao campo aplicado (SAINI et al., 1988). Exemplos de
materiais diamagnticos so ilustrados na Tabela 3.1.
A molcula de hemoglobina apresenta comportamento paramagntico

e diamagntico quando desoxigenada e oxigenada, respectivamente.
deoxi-hemoglobina contem 4 tomos de ferro com 2 eltrons desemparelhados

(F e+2 ),
densidade
de
4,98x1019
partculas/cm3
possui,
37 C,
susceptibilidade paramagntica de 10,1x106 . Alm disso, a susceptibilidade

da matriz protica desta molcula de -9.91x106 , indicando que a molcula
desoxigenada ainda ligeiramente paramagntica =0,2x106 (SCHENCK,
40
1993).
O sangue considerado ser formado por dois compartimentos: plasma
e clulas vermelhas (eritrcitos). Os glbulos brancos so desconsiderados
por serem menos que 1% dos eritrcitos.
prxima do tecido vizinho.
A susceptibilidade do plasma
A susceptibilidade das clulas vermelhas
dependente do seu nvel de oxigenao: Y (frao de oxigenao das clulas

vermelhas). Nesta abordagem a susceptibilidade do sangue pode ser escrita
como (HAACKE et al., 1999):
sangue = Hct(Y oxi + (1 Y )deoxi ) + (1 Hct)plasma
(3.2)
Onde Hct corresponde frao de eritrcitos presente no sangue

(0,45 para homens), oxi a susceptibilidade da hemoglobina oxigenada,deoxi
a susceptibilidade da hemoglobina desoxigenada e plasma a susceptibilidade
do plasma.
Dado uma variao do nvel de oxigenao do sangue Y e a variao
de susceptibilidade resulta em:
sangue = Hct(oxi deoxi )
(3.3)
Alm disso, podemos assumir que oxi = plasma , logo:
sangue = oxi + (1 Y )Hct + (deoxi oxi )
(3.4)
Portanto pode ser estimado o valor absoluto de susceptibilidade

magntica do sangue a partir dos seus componentes. Pode ser observado
que para os valores fisiolgicos de nvel de oxigenao (Y) e a concentrao
de eritrcitos (Hct) a susceptibilidade do sangue ser menor que zero, isto ,
diamagntica como apresentado na Tabela 3.1.
O
Fgado
tambm
diamagntica e paramagntica.
apresenta
susceptibilidade
Embora seja um rgo rico em ferro, em
condies normais o valor de susceptibilidade magntica prximo da gua
3.3 - Mapa quantitativo de susceptibilidade magntica (QSM)
41
(diamagntico). Contudo o fgado com alta concentrao de ferro, pacientes

com Hemocromatose, torna-se paramagntico (Figura 3.2).
Figura 3.2: Susceptibilidade magntica do fgado de acordo com o acmulo

de ferro. Os pontos na curva representam diferentes tecidos com acmulo
de ferro: A, 0,14mg/g (mulher saudvel); B, 0,21mg/g (homem saudvel); C,
0,48mg/g (acima do limite normal para homens); D, 6,6mg/g (alto acmulo de
ferro, hemocromatose hereditria). Adaptado de Schenck (1993).
O crebro apresenta regies diamagnticas:
substncia branca; e
paramagnticas: gnglios da base e substncia cinzenta. Os gnglios da base

possuem acmulo de ferro como descrito no tpico 1.2 e so muito estudados
in vitro na doena de Parkinson (tpico 1.3). Portanto h necessidade de
tcnicas que estime in vivo a concentrao de ferro por meio da medida de
susceptibilidade magntica.
3.3
Mapa
quantitativo de susceptibilidade magntica
(QSM )
A imagem ponderada em susceptibilidade magntica (tpico 2.2.2)
apenas contrasta ou reala regies com diferente susceptibilidade magntica,

contudo no permite uma medida quantitativa.
Para quantificao
necessrio a construo do mapa quantitativo de susceptibilidade magntica.

Em geral, os algoritmos para elaborao deste mapa tm sido principalmente
propostos por grupos localizados em trs pases: Estados Unidos em Detroit
42
por E.M. Haacke (HAACKE et al., 2005) e em Nova York por Y. Wang
(ROCHEFORT et al., 2008); Inglaterra em Nottingham por R. Bowtell
(MARQUES; BOWTELL, 2005); Alemanh em Jena por J.R. Reichenbach
(SCHWESER et al., 2011).
Abaixo ser descrito a relao terica de
susceptibilidade e imagem de fase, o pr-processamento da imagem de fase e

o calculo do mapa de susceptibilidade.
3.3.1
Relao terica
Quando um campo magntico uniforme ( H ) aplicado a uma
substncia, em geral o campo dentro do material B resulta em:
B = 0 ( H + M )
(3.5)
Onde B medido em Tesla (T), H em Ampre por metro (A/m).
M a
magnetizao permanente ou induzida e 0 a permissividade absoluta do

vcuo (4 x107 ) com unidade de Tm/A. O campo fora do material assumido
ser B = 0 H .
Para a maioria dos materiais biolgicos a magnetizao definida pela
equao 3.1 e re-escrita na forma: M =

H . Logo, o campo B dentro destes
materiais resulta em:
B = 0 (1 +
)H
(3.6)
Alguns mtodos tm sido propostos para calcular a susceptibilidade

magntica atravs da medida de campo em um experimento de Ressonncia
Magntica (LIU et al., 2009; SHMUELI et al., 2009; WHARTON; SCHAFER;
BOWTELL, 2010; ROCHEFORT et al., 2010).
Todos levam em conta a
contribuio de todos os dipolos magnticos na amostra (volume V) para
estimar o vetor induo magntica em uma posio arbitraria

r (Figura 3.3 e
equao 3.7).
43
Figura 3.3: Representao do problema para o clculo do campo magntico
numa posio
r arbitraria a partir de uma amostra com distribuio de
magnetizao M (
r ) no interior de um campo de intensidade B 0 .
0
B (
r ) = B0 +
4
h 3
0
M ( r0 )(
r r0 )
M ( r0 ) i
dr
(r r )
V0
|
r r0 |5
|
r r0 |3
3 0
(3.7)
Logo a seguir descrevemos de forma mais detalhada a teoria sobre a

construo de mapas de susceptibilidade magntica a partir de uma reviso
recente de Haacke e Reichenbach (2011).
No caso da Ressonncia Magntica Nuclear, podemos considerar que
o campo magntico B0 possui apenas uma componente principal, assumida
como
z , pois ela vrias ordens de magnitude maior do que as outras
duas componentes.
Tambm considerado apenas a componente

z da
magnetizao induzida M (
r ) e a susceptibilidade magntica considerada
isotrpica, logo podemos escrever como:

(
r)
M z (
r)=
B0
0
(3.8)
Assim a equao 3.7 pode ser rescrita como:

0
B z (
r ) = B0 +
4

h 3
M z ( r0 )(
r r0 )
dr
(
r r0 )
V0
|
r r0 |5
3 0

M z ( r0 ) i
|
r r0 |3
(3.9)
44
Considerando a equao 3.8 e que B0 uma constante, a equao 3.9

pode ser escrita em termos da variao do campo magntico causada pela
magnetizao induzida no volume Bdz (

r ) = Bz (
r ) B0 :

B0
+
B dz (
r)=
4
h 3(
0
r )(z z 0 )2
( r0 ) i
dr
(r r )
V0
|
r r0 |5
|
r r0 |3
3 0
(3.10)
Tomando a susceptibilidade em evidncia:
0 3(z z 0 )2 |
r r0 |2 i
d r ( r ).
V0
|
r r0 |5
Definindo uma funo G(

r r 0 ):

B0
+
B dz (
r)=
4
3 0
(3.11)
0
3(z z 0 )2 |
r r0 |2
G( r r ) =
|
r r0 |5
(3.12)
A equao 3.11 passa a ser escrita como:

B dz (
r ) = B0
d3 r0 ( r0 ).G(
r r0 )
(3.13)
V0
A partir da definio de convoluo (Apndice B):
h(z) = f (z) g(z) =
f (x).g(z x)dx
(3.14)
A equao 3.13 pode ser expressa como a convoluo entre ( r 0 ) e a
funoG(
r r0 ):
B dz (
r ) = B0 [(
r ) G(
r )]
(3.15)
Aplica-se a TF na equao 3.15:
T F B dz (
r ) = B0 T F [(
r ) G(
r )]
(3.16)
Onde os smbolos matemticos descritos acima so legendados para

evitar dvidas: "*"representa convoluo e "."representa multiplicao.
45
A partir do teorema da convoluo (Apndice B), a transformada de

Fourier da convoluo de f(x) e g(x) pode ser escrita como o produto das
funes transformadas em Fourier e multiplicado por
T F [f (x) g(x)] =
2 :
T F [f (x)].T F [g(x)]
(3.17)
Logo, a equao 3.15 resulta em:
r )].T F [G(
r )]
T F [f (x) g(x)] = B0 2T F [(
(3.18)
Aplicando a transformada inversa de Fourier TF1 em ambos os lados

da equao temos:
B dz (
r ) = B0 T F 1 [(
r )].T F [G(
r )]
(3.19)
A funo G(
r ) conhecida como a funo de Green 3D Gc,3D (
r ) e sua
transformada de Fourier a seguinte (HAACKE; REICHENBACH, 2011):
1 k2
T F Gc,3D (
r ) = Gc,3D ( k ) = z2
3 k
Portanto,
substituindo-se a
equao 3.20
em 3.19
(3.20)
resulta na
perturbao de campo na componente

r:

1 k2
B dz (
r ) = B0 .T F 1 [T F ((
r )).( z2 )]
(3.21)
3 k
Na equao 3.21 temos como incgnita Bdz (

r ), como obter ela
experimentalmente?
A imagem de fase numa sequncia gradiente echo
fornece uma relao direta entre a evoluo da fase e a inomogeneidade do

campo magntico:
(
r ) = B dz (
r )T E
(3.22)
Onde a razo giromagntica e TE o tempo ao eco da imagem.
46
Substituindo a equao 3.21 em 3.22 temos:
1 k2
(
r ) = B0 T E.T F 1 [T F ((
r ))( z2 )]
3 k
(3.23)
O mapa de susceptibilidade magntica poderia assim ser gerado a

partir dos valores de fase (). Rearranjando os membros da equao 3.23,
temos:
1 k2
(
r)
= T F 1 [T F ((
r ))( z2 )]
B0 T E
3 k
(3.24)
Finalmente, aplicando a TF em ambos os lados, obtemos o mapa de

susceptibilidade magntica:
(
r)
1
).F (k)1 ]
( r ) = T F [T F (
B0 T E
(3.25)
Onde F(k) conhecida como funo kernel e sua inversa descrita como:
1 k2
F (k)1 = 1/( z2 )
3 k
(3.26)
importante ressaltar que o denominador da equao 3.26 tende a zero

quando o ngulo entre o vetor do espao k e a direo do campo igual a 54, 7
ou 125, 3 . Logo (
r ) tende a infinito nas duas superfcies cnicas do espao
k (Figura 3.4) e causa uma amplificao do rudo na regio adjacente a estas
superfcies (HAACKE et al., 2005).
Figura 3.4: Regies de descontinuidade da funo kernel inversa (F (k)1 ).

Imagem adaptada de Wharton, Schafer e Bowtell (2010)
Apresentamos no tpico 3.3.3 algumas estratgias para contornar este

problema, mas primeiramente abordaremos o pr-processamento da imagem
47
de fase.
3.3.2
Pr processamento da imagem de fase

O pr-processamento da imagem de fase consiste, primeiramente, em
aplicar o unwrapping (em ingls, desenrolar) na imagem de fase original. J

que a imagem de fase adquirida limitada ao intervalo de 2 , enquanto que
o sinal de fase original assume valores superiores a 2 . Para recuperar o
sinal original aplicado um algoritmo computacional. Por exemplo, a funo
prelude que faz parte do programa FSL (SMITH; JENKINSON; WOOLRICH,
2004).
Aps desenrolar a imagem de fase, obtido o mapa de campo por
meio da diviso da imagem de fase pela razo giromagntica e o tempo de
eco. Este mapa de campo contem campos gerados por fontes tanto externas
( B externo ): inomogeneidades do campo esttico do equipamento; quanto
internas ( B interno ): regies com elevada susceptibilidade (Ar e osso) ou baixa

susceptibilidade (tecido cerebral).
B = B externo + B interno
(3.27)
Onde B interno pode ser escrito em termos de duas componentes:
B = B externo + B interno(elevada) + B interno(baixa)
(3.28)
A etapa seguinte no pr-processamento consiste em eliminar os campos
B externo e B interno(elevada) do mapa de campo. Estes campos na literatura

so chamados de campo de fundo (do ingls background field ).
Inicialmente foi proposto o filtro passa alta para eliminar as
componentes de fundo como descrito no Apndice A (HAACKE et al., 2004).
Contudo, atualmente no o mais indicado para o mapa QSM, sugere-se o
uso de filtros mais robustos com menos perda da informao da evoluo da
fase. A seguir sero comentadas estas principais abordagens propostas na
literatura. Em mais detalhes descrevemos o filtro SHARP (SCHWESER et
48
al., 2011) por possuir maior acurcia, menos perda do sinal de fase e sem a
necessidade de um algoritmo iterativo ou com conhecimento a priori.
A) Filtro SHARP
O filtro SHARP (sigla em ingls de Sophisticated Harmonic Artifact
Reduction) baseado no fato que o campo magntico criado por fontes
externas ou campo de fundo ( B externo ) possui um comportamento harmnico

no volume de interesse da amostra (VOI), mas no o campo gerado por
fontes internas ao VOI ( B interno ). A figura 3.5 ilustra claramente este fato
mostrando que a fonte geradora interna no possui linhas entrando e saindo
do VOI.
Figura 3.5: Representao das componentes de campo para uma imagem

2D. Bint so fontes de campo interna ao VOI, Bext so fontes de campo externa
ao VOI, FOV o campo de viso (imagem total).
Desta forma, as linhas de campo satisfazem a equao de Laplace
2 B externo = 0 (LI; LEIGH, 2001). Logo, o uso do operador Laplaciano (2 )

sobre os dados de fase, considerando a relao linear entre a fase e o campo
magntico, com ambos os comportamentos: harmnico e no harmnico
49
resulta na equao abaixo.
2 B total = 2 B int
(3.29)
Para solucionar a equao acima Schweser et al. (2011) utilizou a

propriedade do valor mdio de funes harmnicas (ROY, 2008) e o teorema
do valor dos estados harmnicos mdio. O teorema afirma que uma funo
harmnica preservada sob uma transformada de convoluo de uma funo
no negativa, com simetria radial e normalizada para 1 ((

r )).
Assim,
proposto o uso da funo (

r ) para convoluir sobre B total :
B conv = (
r ) B total
(3.30)
O B total pode ser dividido em B int e B ext :
B total = B int + B ext
(3.31)
B conv = (
r ) B int + (
r ) B ext
(3.32)
Assim:
Para eliminar a informao de B ext feito a seguinte manipulao

matemtica:
B 0 = B total B conv = B int + B ext (

r ) B int (
r ) B ext
(3.33)
Pela propriedade do valor mdio de funes harmnicas B ext = (

r)
B ext :
B 0 = B int (
r ) B int
(3.34)
B 0 = ( (
r )) B int
(3.35)
Reescrevendo:
50
Onde impulso unitrio no centro da funo radial.
Finalmente possvel obtermos B int atravs da deconvoluo do kernel
( (
r )):
B int = ( (
r ))1 B 0
(3.36)
A figura 3.6 apresenta uma comparao das imagens de fase filtrada

com filtro passa alta e o filtro SHARP :
Figura 3.6: Comparao do filtro SHARP(C,F) com o filtro passa alta (B,E) a
partir das imagens desenroladas (A,D). Imagem retirada da apresentao de
Schweser (2010)
B) Filtro de dipolo
Wharton, Schafer e Bowtell (2010) propuseram o filtro de dipolo (do
ingls Dipole Filter). O mtodo proposto envolve a modelagem da variao
de campos no desejados usando uma ou mais fontes pontuais de dipolo
orientados paralelamente a B 0 e posicionado fora da regio de interesse (ROI,

sigla em ingls de Region of Interest ).
(

P
r
r d )
z
Bzdip (
r)=
3
|
r
r d |3
|
r
r d|
(3.37)
Onde
r d = xd
x + yd
y + zd
z e P: o modulo do momento do dipolo.
Nesta expresso a variao de campo na condio

r =
r d mal
definida, mas isso no um problema devido aos dipolos serem considerados
51
somente para
r >
r d.
Primeiramente realizado o ajuste de mnimos quadrados para a
posio e momento de um nico dipolo, localizado fora da ROI. Este ajuste
implementado pela variao iterativa de quatro parmetros P, xd, yd e zd at
atingir um erro mnimo entre o campo do dipolo estimado e o mapa de campo
gerado dos dados da fase.
Somente em alguns casos o primeiro estgio pode ser suficiente. Para
outros casos aparece uma variao de campo nos seios nasais que pode no
ser modelada suficientemente por um nico dipolo.
ser aplicados dentro do ajuste.
Mais dipolos devem
De forma prtica, os novos dipolos so
arranjados em posies fixas ao redor do dipolo original, novamente restringe

a localizao para fora da ROI. Fato que reduz o nmero de parmetros
que devem ser ajustados, sendo necessrio alterar apenas a fora do dipolo.
Posteriormente calculado o Bzdip (

r ) e subtrado da medida de Bz (
r ),
produzindo o mapa de campo filtrado Bzf ilt (

r ), o qual contem somente
variaes de campo devido distribuio de susceptibilidade magntica
dentro da ROI. Em casos onde as fontes externas de campo magntico no
so restritas em um especfico lugar, o ajuste pode ser estendido para uma
distribuio de dipolos mais uniformes ao redor da ROI.
C) Filtro polinomial
O filtro polinomial consiste no uso de funes polinomiais de at oitava
ordem para determinar a magnitude e a distribuio dos efeitos mais globais
da susceptibilidade magntica (DUYN et al., 2007). A distribuio de fase
"ajustada", que representa regies com variaes suaves de susceptibilidade,
subtrada da imagem de fase original. No entanto, o efeito nas regies com
alta diferena de susceptibilidade no totalmente removido, por exemplo, na
regio dos seios nasais onde existe uma grande diferena de susceptibilidade
entre o ar, o osso e o tecido. Fato que torna no muito recomendado para o
uso em processamento de mapas quantitativos de susceptibilidade magntica
na regio basal do crebro.
52
D) Filtro baseado em geometria

O filtro baseado em geometria foi proposto por Neelavalli et al. (2009),
o qual desejava reduzir os artefatos de aliasing (em ingls, dobramento) nas
imagens de fase de sequncia gradiente eco sem alterar os valores de fase
original. Os autores propuseram a subtrao da imagem de fase por uma
imagem simulada contendo apenas evoluo de fase para regies com alta
diferena de susceptibilidade magntica (exemplo seios nasais e maxilar).
Esta imagem simulada obtida a partir dos valores de susceptibilidade
magntica de diferentes estruturas com uma geometria especifica.
geometria destas estruturas obtida a partir de um limiar complexo aplicado

numa imagem 3D ponderada em T1. J os valores de susceptibilidade so
obtidos iterativamente usando a equao abaixo, a partir destas geometrias e
uma imagem formada pela diferena de duas imagens de fase com tempos ao
eco muito prximos.
h
1 k 2 i
z
(
r ) = T EB0 T F 1 T F (x1.g1 + x2.g2 + ... + xn.gn)
3 k2
(3.38)
Onde cada estrutura tem uma susceptibilidade espacial constante xi, e gi

a transformada de Fourier da geometria da i-sima estrutura.
Aqui TE
e (
r ) representam a diferena dos tempos ao eco e a imagem de fase,
respectivamente. Esta mesma equao utilizada para simular o efeito na
fase de regies com altas diferenas de susceptibilidade na nossa imagem de
interesse. A figura abaixo mostra o efeito deste filtro em uma imagem de fase.
53
Figura 3.7: Resultados do processamento do filtro baseado em geometria. a:

imagem de fase de sequncia gradiente eco. b: imagem de fase simulada com
o uso de geometria e susceptibilidade encontrada por algoritmo de iterao.
c: resultado da subtrao de (a-b). Imagem obtida de Neelavalli et al. (2009).
3.3.3
Clculo do mapa de susceptibilidade magntica

Uma vez pr-processada a imagem de fase, aplicado um algoritmo
para determinar o mapa de susceptibilidade magntica. Como descrito na

equao 3.26 o valor de susceptibilidade magntica no pode ser determinado
de forma direta. A literatura recente tem proposto trs abordagens diferentes
para este clculo: (A) Limiarizao, (B) Regularizao por conhecimento
prvio e (C) Mltiplas orientaes (COSMOS).
A) Limiarizao
Haacke et al. (2010) e colaboradores propuseram a seguinte
abordagem para eliminar as descontinuidades na funo F (k)1 (Figura 3.8b).
Primeiramente o modulo de F(k) restringido para ter um valor mnimo
(Figura 3.8c). Isto , para algum valor de k, onde |F (k)| < , F(k) substitudo
para ou dependendo do sinal de F(k). Este primeiro passo evita que os
valores de F (k)1 se tornem muito grandes e amplifiquem o rudo da fase nos
pontos no espao inverso perto das singularidades.
54
Figura 3.8: Representao da funo F(k).
Posteriormente a F (k)1 na regio da regularizao suavizada para

zero, tal que a descontinuidade seja totalmente removida. Esta suavizao
2
gerada pela multiplicao de F (k)1
regularizada por c(kz) (Figura 3.8d, linha
tracejada) onde c(kz) definido como:
(kz kz0 )
para |kz kz0 | < |kz kz0 |

|kz kz0 |
c(kz) =
l
para |kz kz0 | |kz kz0 |
Onde kz a componente z de cada ponto no espao k, kz0 o ponto em que a
funo F (k)1 torna-se indefinida e kza o ponto mximo ou minimo de k em
55
que a funo F (k)1 ser regularizada (Figura 3.8).

Esta abordagem est implementada no programa SMART (tpico 4.3.2)
B) Regularizao por conhecimento prvio
Outro mtodo para determinar o valor de susceptibilidade magntica
o uso do conhecimento prvio para regularizar a soluo do mapa de
susceptibilidade por mnimos quadrados.
De acordo com Rochefort et al.
(2010), o rudo do sinal de RM considerado de natureza gaussiana, logo

a melhor soluo probabilstica para o mapa de susceptibilidade pode ser
derivado da seguinte ponderao de minimizao quadrtica entre o mapa
de campo simulado (F ) e o mapa de campo obtido experimentalmente ( ):
min ||W (F )||22
(3.39)
Onde representa o vetor coluna com variao de campo normalizada
Bdz no espao real e a expresso F representa a convoluo da matriz de

susceptibilidade com a funo kernell F no espao real. W uma matriz
que pondera o efeito do rudo e ser diagonal se consideramos um sinal de
RM com rudo gaussiano no correlacionado. W contm o inverso do desvio
padro do sinal para cada ponto.
Alm disso, os autores sugerem a adio de termos de regularizao na
equao acima na forma de uma regularizao de Tikhonov. Estes termos
utilizam um conhecimento espacial prvio impondo condies similares a
condies de contorno. A expresso de minimizao para determinar fica
descrita como:
min ||W (F )||22 + 2 ||W0 ||22 + 2 ||W1 G||22
(3.40)
O primeiro termo o geral que garante a fidelidade aos dados

adquiridos, no sentido de mnimos quadrados.
No segundo termo a matriz W0 denota uma ponderao aplicada na
soluo, semelhante matriz de ponderao aplicada no primeiro termo.
56
Onde W0 uma mscara que assume a priori valores iguais a 1 em regies

de susceptibilidade homognea. Este termo representa a imposio de uma
condio de contorno na forma de condio de Dirichlet. A influncia relativa
deste termo controlada pelo parmetro . O resultado obtido pela imposio
deste termo uma suavizao das regies de susceptibilidade homognea.
O ultimo termo similarmente impe condio de contorno na forma de
uma condio de Neumann, isto , sobre o gradiente da soluo. A matriz G =
[Gx ; Gy ; Gz ] denota o operador gradiente nas trs direes e o parmetro

de regularizao. W1 similar a matriz de ponderao no primeiro termo,
W1 = [W1x W1y W1z ] em que cada submatriz a matriz diagonal ponderada.

Onde cada matriz de ponderao derivada da imagem de magnitude.
C) Mltiplas Orientaes (COSMOS )
Para determinar o valor de susceptibilidade sem aplicar correes na
equao 3.26, Liu et al. (2009) propuseram a aquisio da imagem com
diferentes ngulos de orientao da cabea em relao ao campo esttico. A
combinao de mais de duas orientaes elimina as singularidades na funo
kernel F (k)1 (Figura 3.9). A tcnica denominada COSMOS (sigla em ingls
Calculation of Susceptibility Through Multiple-Orientation Sampling).
De forma semelhante ao mtodo anterior utilizado o mtodo de
mnimos quadrados para determinar o valor de susceptibilidade (equao 35).
min
X
||Wi (T F 1 (F (k)i .(k)i ) I(r)i )||2
(3.41)
Onde I(r)i representa as imagens de campo magntico obtidas em i

orientaes diferentes, F (k)i so as funes kernel para cada orientao,
Wi uma matriz de regularizao para reduzir o efeito do rudo.
Nesta
aproximao Wi uma mascara obtida a partir da intensidade da imagem

de magnitude da orientao i, sendo 0 para voxels com intensidade menor que
10% da intensidade mxima e 1 para o restante.
A funo kernel rotacionada um ngulo i em relao ao eixo x passa a
57
Figura 3.9: Representao 3D das singularidades geradas pela aplicao

de filtros F (k). a, nica orientao (igual figura 3.4). b, combinao
de duas orientaes sobre o eixo x com = 40 . c, combinao de
trs orientaes sobre o eixo x com = 60 . d, combinao de trs
orientaes seguidas produzidas pela seguinte sequncia de rotao sobre
o eixo x e y tal que (, ) = (20 , 0 ), (10 , 17 )e(10 , 17 ). e-h, singularidades
que permaneceram aps a combinao das medidas feitas em diferentes
orientaes de a-d respectivamente. Imagem retirada de Wharton, Schafer
e Bowtell (2010).
ser descrita por:
F (k)i =
1 (kz cos i ky sin i )2
3
k2
(3.42)
A acurcia do valor de susceptibilidade demanda um valor alto para o

ngulo de rotao das orientaes. Desta forma a tcnica COSMOS no
muito prtica. Contudo, Wharton, Schafer e Bowtell (2010) propuseram fazer
a aquisio em mltiplos ngulos sobre mais de um eixo para diminuir o ngulo
de rotao tornando vivel este tipo de aquisio. Neste caso a funo kernel
passa ser descrita como:
F (k)i =
1 (kz cos i cos i ky sin i cos i + kx sin i )2
3
k2
(3.43)
Sendo que i um ngulo de rotao em torno do eixo y.

De forma geral, o mapa de susceptibilidade magntica muito recente
e ainda no tem sido descrito na comunidade cientfica brasileira. Propomos
a implementao do mapa de susceptibilidade magntica e avaliao da
sensibilidade na estimativa de ferro em sujeitos controles e pacientes com

doena de Parkinson.
58
Captulo
Materiais e Mtodos
Durante o desenvolvimento deste trabalho foi realizado o recrutamento
de indivduos (sujeitos controles e pacientes com doena de Parkinson); a
aquisio de imagens de RMN; a segmentao das regies de interesses;
estimativa da concentrao de ferro; o processamento dos valores de R2,
R2* e susceptibilidade magntica; mapa de susceptibilidade magntica com
diferentes resolues de imagem; mltiplos tempos de relaxao T2; anlise
estatstica.
4.1
Casustica
A pesquisa foi aceita no comit de tica da faculdade de Filosofia
Cincias e Letras de Ribeiro Preto da Universidade de So Paulo e em

concordncia com comit de tica do Hospital das Clnicas da Faculdade de
Medicina de Ribeiro Preto pertencente mesma universidade. Nos anexos
A e B esto os termos de consentimento livre e esclarecido para sujeitos
controles e pacientes. Nos anexos C e D esto as cpias dos termos de aceite
de ambos os comits de tica.
Sujeitos Controles
Os sujeitos controles foram recrutados por meio de pesquisa simples
no Departamento de Fsica da Faculdade de Filosofia Cincias e Letras e
indicao de amigos. Os critrios de incluso e excluso foram definidos de
59
4.1 - Casustica
60
acordo com a literatura e discutidos junto com o neuroradiologista Prof. Dr.

Antnio Carlos dos Santos. Buscamos sempre parear os sujeitos controles
com os pacientes (sexo e idade) para que outras variveis no interferissem
nos resultados. Como descrito no tpico 2.3 o ser humano acumula ferro
principalmente com o avano da idade nos ncleos da base.
Alm disso,
estudos apresentam resultados conflitantes em relao ao acmulo de ferro

em diferente gnero. Ressaltamos os pontos de incluso e excluso utilizados:
Incluso
Possuir idade acima de 50 anos.
Resultado normal de exame estrutural de Ressonncia Magntica
realizado previamente.
Excluso
Histrico de trauma craniano, derrame e doena neurolgica.
Sinais extrapiramidais, dficit senso motor e cognitivo avaliado de forma
simples na entrevista.
Claustrofbicos.
Achado de anormalidade enceflica aps laudo do exame de Ressonncia
Magntica.
Pacientes
Os sujeitos pacientes com doena de Parkinson foram recrutados por
meio de entrevista no Ambulatrio Extra Piramidal do Hospital das Clinicas de
Ribeiro Preto durante o perodo de 01/09/2012 at 01/04/2013. Os pacientes
foram diagnstico com doena de Parkinson segundo os critrios do United
Kingdom Brain Bank, sobre a coordenao do neurologista Prof. Dr. Vitor
Tumas e seus residentes. Os critrios de incluso e excluso tambm foram
selecionados da literatura e discutidos junto com os mdicos do ambulatrio:
4.1 - Casustica
61
Incluso
Possuir idade acima de 50 anos.
Diagnstico da doena de Parkinson segundo os critrios do United
Kingdom Brain Bank.
Incluso do estgio da doena na escala de incapacidade de Hohen e
Yahr.
Excluso
Histrico de outra doena neurolgica e psiquitrica.
Paciente com doena de Parkinson com evoluo da doena atpica.
Pacientes com secundria doena de Parkinson.
Claustrofbicos.
Foram recrutados 20 sujeitos controles, sendo dois sujeitos excludos
por movimento durante a realizao do exame de RMN, um por artefatos na
imagem de fase e um por apresentar anormalidade enceflica. Os sujeitos
pacientes foram 18, sendo um paciente excludo por interrupo do exame,
dois por artefatos na imagem de fase e um por no ter diagnstico conclusivo
da doena de Parkinson.
Em resumo, foram selecionados 16 controles
saudveis e 14 pacientes com doena de Parkinson (Tabela 4.1).
Grupo
Doena
Parkinson
Controles
de
Nmero de
Indivduos
Idade em anos
desvio padro
Homens (%)
Mulheres (%)
14
64,1 8,1
16
66,4 6,8
10
Tabela 4.1: Principais informaes sobre os pacientes com doena de

Parkinson e os controles avaliados.
4.2 - Aquisio das imagens

Os
sujeitos
62
controles
pacientes
no
apresentaram
significativa para os valores de idade (p=0,16).
diferena
A Tabela 4.2 apresenta
maiores informaes obtidas do pronturio clnico dos pacientes com doena

de Parkinson.
Gostaramos ressaltar que pela pequena quantidade de
pacientes no foi possvel fazer uma anlise de correlao entre os parmetros

quantitativos aqui estudados e o grau de gravidade da doena (por exemplo
usando a escala de H&Y).
Paciente Sexo
Idade
(anos)
Durao
da
doena
(anos)
Escala
da
doena
H&Y
72
64
72
66
73
11
77
10
65
63
59
10
50
11
69
12
63
13
66
14
71
15
Tabela 4.2: Principais informaes sobre os pacientes com doena de

Parkinson avaliados.
4.2
Aquisio das imagens

A aquisio das imagens de ressonncia magntica foi realizada
no equipamento 3.0 Tesla (Philips, Achieva) do Hospital das Clnicas da

Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto. Foi utilizada uma bobina padro
4.3 - Processamento dos Mapas
63
de cabea com 8 canais com capacidade para aplicar a tcnica SENSE. Os

cortes foram orientados paralelamente linha que vai da comissura anterior
posterior. Os seguintes parmetros foram usados:
Sequncia Turbo Spin Eco combinada com aquisio multiplanar GraSE
(definida pela Philips para reduzir o tempo de exame) foi adquirida para
a construo do mapa de R2. Com 12 ecos e 12ms de intervalo entre
os ecos, TE/TR igual a 12/3000ms, fator EPI igual a trs e resoluo
espacial de 0,5x0,5x2,0mm com FOV de 172x230x40mm.
Sequncia Gradiente Eco foi adquirida para a construo do mapa de
R2*.
Com 4 ecos de intervalo de 12ms, TE/TR igual a 7,7/100ms
e o ngulo de flip 15 , otimizado para a melhor relao sinal rudo.

Fator EPI igual a um, resoluo espacial de 0,5x0,5x2,0mm com FOV
de 172x230x40mm. Para o mapa de susceptibilidade magntica usou-se
a imagem de magnitude e de fase do segundo eco (19,7ms) da sequncia
Gradiente Eco.
4.3
Processamento dos Mapas

Todas as imagens adquiridas foram exportadas no formato do fabricante
PAR/REC e tambm convertidas para o formato Nifti atravs de rotina

no Matlab r2agui obtido do site http
: //r2agui.sourcef orge.net/.
As
imagens obtidas por sequncia Turbo Spin Eco e Gradiente Eco no foram
corregistradas, porque consideramos que o paciente no se movimentou no
perodo de aquisio destas imagens. Alm disso, a aquisio foi realizado
para o mesmo protocolo de posicionamento.
4.3.1
Mapa de Relaxometria
Uma rotina escrita em Matlab foi gerada para desenhar a regio de
interesse sobre uma imagem adquirida em determinado tempo ao eco e obter

o valor de intensidade do sinal para todos os tempos ao eco (Figura 4.1 e 4.2).
64
Figura 4.1: Exemplo de imagens de uma fatia da regio dos ncleos da base
adquiridas com uma sequencia Spin Eco mudando o tempo ao eco de 12 em
12ms. Imagem de voluntrio saudvel com idade de 65 anos.
Figura 4.2: Exemplo de imagens de uma fatia da regio dos ncleos da base
adquiridas com uma sequencia Gradiente Eco com mltiplos ecos (4 ecos,
TE=12,24,36,48ms).
Como
sinal
em
cada
pixel
da
exponencialmente com o tempo ao eco,
regio
de
interesse
decai
seguindo a equao 4.1,
possivel obter o parmetro de decaimento T2 ou T2* por ajuste mono

exponencialmente.
y = A1 exp(T E/t) + y0
(4.1)
Onde A1 uma constante relacionada com a densidade protnica, y0 um

parmetro constante, TE o tempo ao eco da imagem correspondente, t a
constante de decaimento exponencial e y a intensidade do sinal.
Para imagens de sequncia Turbo Spin Eco estimado a constante
de decaimento exponencial T2 e para a sequncia Gradiente Eco obtido
65
T2*. Os inversos de T2 e T2* resultam nas taxas de relaxao R2 e R2*,

respectivamente. Posteriormente, obtido o valor mdio e o desvio padro
de R2 ou de R2* da respectiva regio de interesse.
Os valores de T2 para as regies dos ncleos da base tambm foram
estudado em anlise multi exponencial. De acordo com Whittall e MacKay
(1989) o valor do sinal (yi ) considerado uma soma das contribuies de
diferentes valores de taxa de relaxao T2 presente na mesma amostra:
y(ti ) = S(T1 )e
ti T1
+ S(T2 )e
ti T2
ti Tm
+ ... + S(Tm )e
Z
=
S(T )eti T dT (4.2)
Onde S(T) indica a amplitude da componente espectral do tempo de

relaxao T. Caso a amostra tenha mais de um decaimento exponencial ir
resultar em diferentes valores de T : Tm . Os limites na integral so restritos a
valores de a e b que so pr-definidos para conter os valores de T esperado.
A equao 4.2 dever ser discretizada para proceder a implementao
computacional. Um mtodo simples e rpido assume que S(T) a soma de M
funes com rea desconhecida sj do tempo de relaxao conhecido Tj :
s(T ) =
M
X
sj (T Tj )
(4.3)
j=1
Substituindo a equao 4.3 em 4.2, temos:
yi =
M
X
sj eti Tj
(4.4)
j=1
Outra discretizao aplicada:
yi =
M
X
sj gij
(4.5)
j=1
Onde gij so dados analticos em termos de integral exponencial:

Tj+1
gij =
X
Tj
eti Tj dT
(4.6)
66
As equaes 4.4 e 4.5 so sistemas lineares de equaes cuja a forma

geral pode ser escrita como:
yi =
M
X
Aijsj ,
i = 1, 2, ..., N.
(4.7)
j=1
Por meio de algoritmo de soluo de mnimos quadrados no negativos

(NNLS, sigla em ingls de Nonnegative Least Square) e a transformao
estvel de Householder o mtodo computacional soluciona a equao 4.7 e
garante encontrar uma soluo em um finito nmero de operaes. De forma
resumida o NNLS encontra numericamente o valor de sj que minimiza o ajuste
de mnimos quadrados:
N X
M
2
X

Aij sj yi

i=1
(4.8)
j=1
Como resultado gerado o espectro com valores de amplitude sj para

cada valor de T2.
4.3.2
Mapa de Susceptibilidade Magntica

A Figura 4.3 contem as principais etapas do processamento do mapa de
susceptibilidade, elas so: unwrapping da imagem de fase, gerao de uma

mscara do crebro, uso do filtro SHARP e a tcnica de limiarizao para
solucionar a inverso do kernel unitrio de dipolo (equao 3.26). A seguir
so descritas estas etapas.
A)Desenrolar a imagem de fase (unwrapping)

Primeiramente, para gerar o mapa QSM necessrio aplicar na
imagem de fase o procedimento unwrapping (em ingls, desenrolar). Pode
ser utilizada a funo prelude que faz parte do programa FSL (SMITH;
JENKINSON; WOOLRICH, 2004) para desenrolar as imagens. O programa
FSL de livre acesso e funciona em sistema Linux ou em Windows por meio
de mquina virtual.
67
Figura 4.3: Etapas para o processamento do mapa de susceptibilidade

magntica (1 Jenkinson, Wilson e Jezzard (2004),2 Smith, Jenkinson e Woolrich
(2004), 3 Schweser et al. (2011), 4 Haacke et al. (2010)).
B)Filtragem das componentes de fundo (Filtro SHARP )

O filtro SHARP foi utilizado para remover as componentes de fundo
da imagem de fase. Este filtro foi apresentado teoricamente no tpico 3.3.2,
aqui descreveremos como pode ser implementado, por exemplo no programa
Matlab. Abaixo apresentamos as etapas para o processamento do filtro:
Primeiramente construda a funo (

r ), filtro (kernel) com ncleo
esfrico no negativo, simetria radial e normalizado (a soma de todos os
pixels da esfera deve ser igual a 1).
Este filtro gerado atravs do clculo do valor de "r"para cada

pixel, utilizando as coordenadas da imagem a ser filtrada (com uso da
funo MESHGRID em Matlab para todas as dimenses (X, Y, Z)).
A funo r convertida em uma funo binria, onde apresenta

dependncia:
r(x, y, z) =
1, para r 6 Raio do filtro esfrico
0, para r > Raio do filtro esfrico
68
Finalmente encontrado a funo (

r ) por meio da
normalizao da funo r(x,y,z), onde se divide cada pixel binrio de r(x,y,z)
pela soma do nmero total de pixels binrios.
Convolui-se (
r ) sobre a imagem de fase total (
r ).
Para realizar
esta convoluo utilizado o teorema da transformada da convoluo

(Apndice B):
conv (
r ) = (
r ) total (
r ) = T F 1 (T F ((r).T F (total (
r ))))
0conv (
r ) = conv (
r ) maskerode (
r)
(4.9)
(4.10)
O kernel (
r ) 0 = - (
r ) gerado pela subtrao do valor 1 do voxel
central da funo (
r ) e multiplicado posteriormente todos os valores
por -1.
Recuperando a fase interna int (

r ) atravs do teorema da transformada
da convoluo temos:
int (
r ) = (
r )01 0conv (
r ) = T F 1 (T F ((
r )01 ).T F (0conv (
r ))) (4.11)
Por ultimo, para reduzir os artefatos da deconvoluo na fase int (

r)
esta ultima imagem multiplicado a mscara erodida:
intsharp (
r ) = int (
r ).maskerode (
r)
C)Processamento
magntica
dos
mapas
de
(4.12)
susceptibilidade
Nesta dissertao os mapas de susceptibilidade magntica foram

calculados no progama SMART (verso v1.1a), por ser um programa j usado
pela comunidade cientfica (TANG et al., 2013).
O programa SMART foi
obtido do Laboratrio MRI Institute for Biomedical Research da universidade
69
Wayne State University (Detroit, MI, EUA) atravs da visita de colaborao

do aluno Jeam Haroldo Oliveira Barbosa durante o mestrado (24/09/2012 at
01/12/2012) em contato com o professor Eward Mark Haacke em 2012.

A Figura 4.4 ilustra a janela principal do programa SMART. O programa
SMART permite escolher diferentes filtros para remover campo de fundo
(filtro passa alta e SHARP ), gera como resultados a imagem filtrada, a
mscara de magnitude e o mapa de susceptibilidade.
70
Figura 4.4: Tela principal do programa SMART (v1.1 2012)
Para processar o mapa QSM via somente programa SMART.

necessrio selecionar no programa as funes BET para criao de uma
mscara de magnitude e Unwrapped Phase/PHUN para desenrolar a imagem
de fase.
Caso contrrio e mais indicado pela qualidade dos resultados,
utiliza-se o programa FSL com a ferramenta BET para gerar a mscara

de magnitude e com a ferramenta PRELUDE para desenrolar a imagem de
fase. Como o programa FSL resulta imagens em formato Nifti necessrio
converter para o formato Dicom ou Analyze para inserir no programa SMART.
Portanto neste trabalho foi adotado o seguinte processamento para o
mapa de susceptibilidade:
Remoo do crnio das imagens de magnitude e criao da mscara no
programa FSL/BET/flirt.
71
Desenrolar das imagens de fase com ponderao da mscara de

magnitude no programa FSL/PRELUDE.
Converso do formato Nifit das imagens de magnitude, mascara de
magnitude e fase desenrolada para o formato Analyze.
Insero das imagens anteriores no programa SMART (Figura 4.4), e dos
seus respectivos dados de tamanho da matriz, tamanho do voxel, TE e B.
Seleo do filtro de campo de fundo para SHARP, com tamanho do ncleo
(kernel size) igual a 6 e limiar (threshold ) igual a 0,05.
Destacamos que embora o valor de susceptibilidade magntica seja
absoluto o seu clculo ainda possui alguns erros.
Portanto, seguimos o
conceito da literatura de usar o valor relativo de susceptibilidade magntica
em relao a substncia branca (que possui prxima de zero)

(LOTFIPOUR et al., 2012; DEISTUNG et al., 2013).
Mapa de susceptibilidade em diferentes resolues de

imagem
A maioria dos artigos publicados sobre mapa de susceptibilidade
magntica dos ncleos da base tem utilizado imagens de alta resoluo
(0,5x0,5x2,0mm) (SHMUELI et al., 2009; WHARTON; SCHAFER; BOWTELL,
2010; LOTFIPOUR et al., 2012; LANGKAMMER et al., 2012). A aquisio
de imagens com alta resoluo necessita de maior tempo de exame:
consequentemente maior desconforto para o paciente e possvel gerao de
artefato devido a movimento. J a aquisio de imagens com baixa resoluo
(1,0x1,0x2,0mm) necessitam de menos tempo de exame (YAO et al., 2009) mas
apresenta uma perda de detalhes da imagem.
Neste trabalho, as imagens de alta resoluo foram transformadas em
baixa resoluo por meio da remoo das bordas do espao k da imagem
complexa de alta resoluo.
Posteriormente foram processados os mapas
de QSM e comparado os valores mdios obtidos para a regio dos ncleos
4.4 - Segmentao das regies de interesse

da base.
72
Os mapas de QSM com baixa resoluo foram ampliados por
interpolao no programa SPIN (http://www.mrc.wayne.edu/download.htm)

para o mesmo tamanho de matriz que os mapas com alta resoluo para
facilitar a comparao entre os mapas.
4.4
Segmentao das regies de interesse

A segmentao das regies foi realizada manualmente no corte mais
representativo da regio de interesse e no mapa de susceptibilidade por um

pesquisador treinado (Fsico Mdico e ps graduando Jeam Haroldo Oliveira
Barbosa). Foi utilizado o programa Matlab com a funo "roipoly"para realizar
a segmentao e obteno dos valores mdios e desvio padro de cada
regio. Alm disso, para avaliar o vis de erro causado pela segmentao
manual outros dois pesquisadores treinados (Fsico Mdico e ps graduando
Antnio Carlos Senra Filho e Biolgo e ps doutorando em Neuroscincia
Carlo Rondinoni) realizaram a segmentao e os resultados foram analisados
apenas para os valores dos mapas de susceptibilidade de todos os sujeitos.
Para anlise de intra observador foi realizado mais uma vez a segmentao
pelo pesquisador principal.
As regies segmentadas do crebro foram escolhidas de acordo com a
reviso da literatura sobre regies com acmulo de ferro significativo (Tpico
1.2): Substncia Negra (SN), Globo Plido (GP), Ncleo Rubro (RN), Putmen
(PUT), Tlamo (THA), Substncia Branca (WM), Substncia Cinzenta (GM) e
Ncleo Caudado (CN) (Figura 4.5) para ambos os lados. Foi utilizado como
base o atlas anatmico Atlas of the Human Brain dos autores MAI J.K. e
PAXINOS G.
4.5 - Anlises estatsticas
73
Figura 4.5: Exemplo de regies segmentadas sobre diferentes fatias do

mapa de susceptibilidade magntica (ppb). (a) Em azul escuro representada
a Substancia Negra direita, azul claro a Substancia Negra esquerda, verde
escuro e claro so o Ncleo Rubro direito e esquerdo, respectivamente. (b)
Em marrom escuro indica Globo Plido direito, laranja Globo Plido esquerdo,
em amarelo e bege indica Putmen esquerdo e direito, respectivamente. (c)
Em laranja indica Substncia Cinzenta e vermelho representa Substncia
Branca de ambos os lados. (d) Em azul escuro representa a Ncleo Caudado
e verde indica Tlamo
4.5
Anlises estatsticas
Atravs de rotina escrita em Matlab foi possvel utilizar a mesma ROI
para obter o valor de R2, R2* e . Desta forma geramos os trs resultados
para a mesma regio. Fato que possibilitou a comparao da sensibilidade das
tcnicas para diferenciao de sujeitos saudveis e pacientes com doena de
Parkinson.
A confiabilidade da segmentao inter observador e intra observador foi
avaliada por meio do coeficiente de correlao intra classe (CCI) no programa
IBM-SPSS. O coeficiente CCI muito usado para mensurar a homogeneidade
74
das medias e interpretado como uma descrio da variabilidade da medida

realizada. O valor de CCI varia de 0 at 1. Quanto mais prximo de 1 o valor
de CCI maior a confiabilidade da segmentao analisado inter observador e
intra observador.
Para avaliar o poder de diferenciao entre os pacientes e controles,
foram analisados os valores de cada varivel associada tcnica em ambos
os grupos em diferentes regies. Com estas populaes foi utilizado o teste
estatstico de Kolmogorov-Smirnov para analisar a normalidade das amostras
e, para comparar os grupos com resultado de distribuio normal utilizamos o
teste estatstico t de Student no pareado para amostras independentes. Um
valor de p<0,05 foi considerado estatisticamente significativo e os clculos
foram realizados no programa Origin.
Alm disso, comparamos valores de susceptibilidade magntica obtidos
com imagens de alta e baixa resoluo por meio da avaliao dos coeficientes
da regresso linear no programa Origin. Aplicamos tambm o teste estatstico
t de Student para os valores de de controles e pacientes com doena de
Parkinson obtidos com imagens de alta e baixa resoluo para avaliar se a
diferenciao entre os grupos se manteve.
De forma particular, foram comparados os valores de R2 com R2*,
os valores de R2 com susceptibilidade mangtica e os valores de R2* com
susceptibilidade mangtica atravs correlao linear no programa Origin.
Esta avaliao foi abordada para estabelecer a equivalncia entre os mtodos
de medida visando simplificar o procedimento a ser adotado na rotina clinica
caso seja necessria troca de um mtodo pelo outro.
O resultado dos mapas R2,
R2* e QSM para as regies que
apresentaram diferena significativa entre os controles e pacientes com

doena de Parkinson (SN, RN, GP) foram analisados por meio das curvas
ROC (do ingls receiver operating characteristic).
A curva ROC uma
representao direta da habilidade da varivel em classificar sujeitos em

grupos (controles e pacientes) e oferece ao seu usurio um conjunto de
75
diferentes regras de classificao, segundo os pontos de corte emprico que

compem a curva. Esta curva capaz de indicar a probabilidade de um teste
diagnstico produzir um resultado positivo, caso o indivduo seja portador da
doena, que chamada de sensibilidade do teste (eixo das ordenadas); e um
resultado negativo, caso o indivduo no porte a doena, que chamada de
especificidade (eixo das abscissas). A partir da rea estimada sob a curva
ROC, com o respectivo erro padro ou intervalo de confiana, possvel
comparar os mapas de R2, R2* e QSM e determinar a tcnica mais sensvel. A
rea sob a curva ROC pode ser interpretada como a probabilidade do paciente
ser diagnosticado como doente em relao a uma pessoa saudvel. Onde o
teste classificado como incapaz de diagnosticar a doena quando assumi
rea igual a 0,5 e perfeito quando igual a 1,0.
Captulo
Resultados e Discusses
Os resultados foram classificados em estudos especficos:
anlise
estatstica da segmentao; correlao linear entre R2, R2* e QSM com o

acmulo de ferro; correlao linear entre: R2 e QSM, R2* e QSM, R2 e R2*;
mapas de R2, R2* e QSM para controles e pacientes com doena de Parkinson;
diferena estatstica entre controles saudveis e pacientes com doena de
Parkinson; comparao entre baixa e alta resoluo para QSM ; anlise de
mltiplos valores de T2.
5.1
Anlise estatstica da segmentao

Os resultados da anlise de correlao linear para inter-observador
(3 sujeitos) e intra-observador (1 sujeito repetido) da segmentao 2D das

regies de interesse esto nas Figuras 5.1 e 5.2 respectivamente.
76
5.1 - Anlise estatstica da segmentao
77
(a)
(b)
Figura 5.1: Anlise inter-observador. Regresso linear para os valores de

obtidos da segmentao realizada por dois observadores: (a) Observadores 1
e 2. (b) Observadores 1 e 3.
Figura 5.2: Anlise intra-observador. Regresso linear para os valores de

obtidos da segmentao realizada pelo observador 1 duas vezes.
Os coeficientes da regresso linear para anlise inter-observador e

intra-observador apresentaram tima correlao, R2 prximo de 1, validando
o mtodo de segmentao manual abordado.
A
confiabilidade
da
segmentao
analisada
por
coeficiente
de
correlao inter classe para inter-observador (n=3) resultou em CCI igual a

0,970(0,964-0,975 com 95% de confiana) que representa alta confiabilidade.
Alm disso, o coeficiente CCI determinado pela a anlise intra-observador foi
igual a 0,994(0,985-0,990 com 95% de confiana), representando tambm
5.1 - Anlise estatstica da segmentao

alta confiabilidade.
78
Sugerindo que mesmo existindo poucos pontos no
correlacionados na Figura 5.1 e 5.2, a segmentao realizada pelos trs

pesquisadores e pelo pesquisador principal em duplicata apresentou pouca
variabilidade da medida realizada.
Em resumo, consideramos que a segmentao manual adotada neste
trabalho apresentou pouca variao dos resultados e pode ser usada para
calcular os valores de R2, R2* e .
5.2 - Correlao linear entre R2, R2* e QSM com o acmulo de ferro
5.2
79
Correlao linear entre R2, R2* e QSM com

o acmulo de ferro
A concentrao de ferro dos ncleos da base foi estimada de acordo
com as curvas de acmulo de ferro com o envelhecimento obtidas in vitro por

Hallgren e Sourander (1958) (Tpico 2.3). Este trabalho tem sido a referncia
padro para estimar a concentrao de ferro in vivo e correlacionar com
parmetros de tcnicas sensvel ao acumulo de ferro (BARTZOKIS et al., 1993;
XU; WANG; ZHANG, 2008; LANGKAMMER et al., 2010; LANGKAMMER et al.,
2013). Abaixo apresentamos as curvas utilizadas por Hallgren e Sourander
(1958) para estimar o contedo de ferro em certas regies do crebro:
Globo Plido
y = 21, 241 e(0,09x) + 0, 37
Putmen
y = 14, 621 e(0,04x) + 0, 46
Ncleo Caudado
y = 9, 661 e(0,05x) + 0, 33
Substncia Branca
y = 3, 951 e(0,10x) + 0, 31
Substncia Cinzenta
y = 21, 241 e(0,09x) + 0, 037
Onde "y "representa valores de mg de Fe no heme por 100g de peso

fresco de tecido e "x" a idade em anos.
Contudo,
para
algumas
regies
Hallgren
Sourander
(1958)
determinaram apenas o valor mdio de concentrao de ferro para

todas as idades: Substncia Negra 18,5(6,5)mgFe/100mg, Ncleo Rubro
19,5(6,9)mgFe/100mg e Tlamo 4,8(1,2)mgFe/100mg.
A Figura 5.3, 5.4 e 5.5 mostra a correlao linear encontrada para
os valores de R2, R2* e susceptibilidade magntica, respectivamente, com
o acmulo de ferro estimado para as regies dos ncleos da base (esquerdo e
direito) determinado para todos os sujeitos controles (n=16).
Figura 5.3: Correlao linear entre R2 e acmulo de ferro estimado

considerando o efeito idade (HALLGREN; SOURANDER, 1958).
Figura 5.4: Correlao linear entre R2* e acmulo de ferro estimado

Figura 5.5: Correlao linear entre e acmulo de ferro estimado

80
81
A Tabela 5.1 permite comparar os coeficientes de regresso linear

encontrados neste trabalho com vrios achados da literatura.
Em alguns
dos estudos especficas regies dos ncleos da base foram includas e

outras excludas.
Para comparao de nossos resultados, determinamos
os coeficientes de regresso com apenas regies abordadas no estudo

comparado.
Estudo
Referncia
Coef.
Angular
Coef.
Linear
r2
Regies
Campo
(T)
[Ferro]
R2
0,19
10,3
0,83
SN,RN,GP,PUT,
CN,THA,GM
1,5
HS
R2
Este trabalho
0,30
10,6
0,67
SN,RN,GP,PUT,
CN,THA,GM
3,0
HS
R2
0,40
8,5
0,67
GP,PUT,CN,THA,
GM
3,0
ICP
R2
Este trabalho
0,32
10,4
0,75
GP,PUT,CN,THA,
GM
3,0
HS
R2*
Martin,
(2008)
1,0*
17,5
0,81
SN,RN,GP,PUT,
CN,WM
3,0
HS
R2*
Este trabalho
1,2*
17,4
0,55
SN,RN,GP,PUT,
CN,WM
3,0
HS
R2*
Yao et al. (2009)
1,2*
14,2
0,87
GP,PUT,CN,THA
3,0
HS
R2*
Este trabalho
1,3*
16,6
0,63
GP,PUT,CN,THA
3,0
HS
R2*
2,7*
14,2
0,90
GP,PUT,CN,THA,
WM
3,0
ICP
R2*
Este trabalho
1,3*
16,3
0,69
GP,PUT,CN,THA,
WM
3,0
HS
Wharton e Bowtell (2010)
7,5*
0,96
SN,RN,GP,PUT,
CN,THA,GM
3,0
HS
Este trabalho
6,5*
0,67
SN,RN,GP,PUT,
CN,THA,GM
3,0
HS
8,9*
0,75
GP,PUT,CN,THA
3,0
ICP
Este trabalho
5,8*
0,70
GP,PUT,CN,THA
3,0
HS
Wieler
Gee
Tabela 5.1: Coeficientes de regresso linear obtidos e encontrados na

literatura. A unidade do coeficiente angular de ambos R2 and R2*
s1 /mgF e/100g e para ppb/mgF e/100g .*Os coeficientes angular e linear
foram estimados a partir do grfico.
O valor do coeficiente angular para a regresso linear de R2 e ferro
estimado encontrado neste estudo foi 0,30s1 /mgF e/100g .
82
Valor muito
maior quando comparado com o valor obtido por Vymazal et al. (1999)
(0,19s1 /mgF e/100g ). A justificativa devido a intensidade reduzida de campo
(1,5T) utilizada no experimento de Vymazal et al. (1999). Fato que resulta em
menores valores de R2 para todas as regies devido dependncia direta da
taxa de relaxao com a intensidade do campo. Quando nossos resultados so
comparados com de Langkammer et al. (2010) (Tabela 5.1) em estudoin vitro
da correlao linear dos valores de relaxometria e a concentrao de ferro via
espectroscopia de massa encontramos coeficientes de correlao linear muito
prximos.
Encontramos coeficientes da regresso linear de R2* e concentrao
de ferro muito prximos dos resultados encontrados por Martin, Wieler e Gee
(2008)e Yao et al. (2009) (Tabela 5.1). Diferentemente do estudo realizado
com crebros de cadver por Langkammer et al. (2010), onde o acmulo de
ferro foi determinado por meio de espectroscopia de massa.
O coeficiente angular da regresso linear entre e concentrao de
ferro foi muito prximo ao de Wharton e Bowtell (2010) (Tabela 5.1). No
estudo de Wharton e Bowtell (2010) foi utilizado a tcnica mais acurada
para quantificar susceptibilidade magntica: mltiplas orientaes. Excluindo
algumas regies e comparando com os resultados de Langkammer et al.
(2012) obtidos com cadveres no fixados obtivemos valores de coeficiente
angular muito prximos, onde a diferena pode ser justificada por nosso
experimento ser realizado in vivo.
Os
resultados
obtidos
neste
tpico
apresentados no principal congresso da rea:
(5.2)
foram
publicados
International Society for
Magnetic Resonance in Medicine 20-26 de Abril de 2013 (Salt Lake City EUA) (BARBOSA et al., 2013).
5.3 - Correlao linear entre R2 com QSM, R2* com QSM, R2 com R2* nos sujeitos controles83
5.3
Correlao linear entre R2 com QSM, R2*

com QSM, R2 com R2* nos sujeitos controles
A Figura 5.6 mostra a correlao linear encontrada para os valores de
R2 e para as regies dos ncleos da base (esquerdo e direito) determinado

para os sujeitos controles (n=16). Este estudo foi realizado apenas nos sujeitos
controles com intuito de avaliar a correlao entre a tcnica sem a implicao
de outras variveis.
Figura 5.6: Correlao linear entre R2 e nas diferentes regies avaliadas

neste estudo.
A Figura 5.7 mostra a correlao linear encontrada para os valores

de R2* e para as regies dos ncleos da base (esquerdo e direito)
determinadas para os sujeitos controles (n=16).
Figura 5.7: Correlao linear entre R2* e nas diferentes regies

avaliadas neste estudo.
Obtemos valores medianos de coeficientes de regresso linear r2 =0,63
5.3 - Correlao linear entre R2 com QSM, R2* com QSM, R2 com R2* nos sujeitos controles84
e r2 =0,54 respectivamente para a correlao de R2 com e de R2* com
. Esses coeficientes podem ser justificados pelo fato da relaxometria no

depender apenas da variao da susceptibilidade magntica do tecido, mas
tambm com outros fatores como o contedo de gua, o coeficiente de difuso
da gua e o tamanho mdio dos vasos (KENNAN; ZHONG; GORE, 1994;
WEISSKOFF et al., 1994; KISELEV; POSSE, 1999; TROPRS et al., 2001).
O sinal de RM decai com o efeito de difuso da gua, porque as imagens de
RM so adquiridas levando em conta o no movimento do spins nucleares.
Portanto a difuso da gua pode reduz o sinal e tornar baixa a dependncia
da relaxometria com a susceptibilidade. J o tamanho dos vaso influencia em
tecido muito vascularizado, visto que o sangue deoxigenado paramagntico
e, ento, reduz a taxa de relaxometria abruptamente.
Com intuito de analisar a inter dependncia das taxas de relaxometria
de R2 e de R2* foi obtido regresso linear entre os valores para as regies
dos ncleos da base (esquerdo e direito dos sujeitos controles (n=16)).
Figura 5.8: Correlao linear entre R2 com R2* nas diferentes regies
avaliadas neste estudo.
Foi observado maior coeficiente de regresso linear para a correlao

de R2 com R2* do que R2 com e R2* com . Indicando que os valores
de R2 e R2* possuem maior relao em comum do que com susceptibilidade
magntica.
5.4 - Mapas de R2, R2* e QSM para controles e pacientes com doena de Parkinson85
5.4
Mapas de R2, R2* e QSM para controles e

pacientes com doena de Parkinson
Em geral, todos os mapas de R2 de controles e de pacientes
apresentaram grande diferena de contraste para os ncleos da base em

relao ao tecido vizinho (Figura 5.9).
Figura 5.9: Exemplos de mapas de R2 para sujeito controle (mulher com

61 anos na parte superior) e para sujeito paciente com doena de Parkinson
(mulher com 60 anos na parte inferior). A unidade da escala dos mapas s1 .
No entanto, no houve diferena visvel nos ncleos da base para os

mapas de R2 dos controles e dos pacientes.
Desta forma, foi necessrio
obter por segmentao os valores de cada regio e calcular estatisticamente

a diferena significativa.
Todos os mapas de R2*, controles e pacientes, apresentaram grande
diferena de contraste para os ncleos da base em relao ao tecido ao redor
(Figura 5.10).
Figura 5.10: Exemplos de mapas de R2* para sujeito controle (mulher com
(mulher com 60 anos na parte inferior). A unidade da escala dos mapas s1 .
Da mesma forma que nos mapas de R2, no houve diferena visvel

nos ncleos da base para os mapas de R2* dos controles e dos pacientes,
necessitando tambm obter por segmentao os valores de cada regio e
calcular estatisticamente a diferena significativa. Alm disso, nos mapas de
R2* foram observados artefatos para a regio dos seios nasais que possuem
ar e tecido, fato justificado pela alta diferena de susceptibilidade magntica
nesta regio e, portanto aumento da taxa de relaxometria R2*.
Os mapas quantitativos de susceptibilidade magntica para um controle
e um paciente so mostrados na Figura 5.11.
Figura 5.11: Exemplos de mapas de para sujeito controle (mulher com

(mulher com 60 anos na parte inferior). A unidade da escala dos mapas ppb.
Embora no mapa quantitativo de susceptibilidade magntica tem sido

visualizado alguns artefatos ao redor de algumas veias e dos seios nasais, foi
observado um grande contraste entre os ncleos da base e o tecido ao redor.
De forma semelhante aos nossos resultados preliminares com mapa QSM
obtidos com filtro passa alta (BARBOSA; FILHO; SALMON, 2012). Porm,
a anlise visual no foi suficiente para diferenciar controles de pacientes,
necessitando tambm do estudo da diferena significativa dos valores mdios
para cada regio.
Em geral, os mapas de susceptibilidade magntica no apresentaram
algumas regies do crebro como a parte mais externa e algumas partes dos
seios nasais que foram excludos para evitar a propagao de artefatos nos
mapas de QSM. J que estas regies de interface (tecido e ar) possuem alta
diferena de susceptibilidade magntica, constituindo assim uma limitao
conhecida deste mtodo.
Por meio de anlise estatstica, observamos que os valores mdios de
R2, R2* e para todas as regies dos ncleos da base de todos os sujeitos
controles e pacientes apresentaram distribuio normal de populao por
meio do teste de Kolmogorov-Smirnov.
Portanto o grupo dos controles e
dos pacientes contendo os valores de R2, R2* e puderam ser avaliados

por meio do teste t de Student para determinar a existncia de diferena
significativa entre os grupos.
Primeiramente, avaliamos estatisticamente a influncia da idade
dos sujeitos nos valores quantitativos de relaxometria e susceptibilidade
magntica.
Os valores de R2, R2* e no apresentaram relao linear
com a idade, porque todos os indivduos tinham mais de 50 anos e o

aumento da concentrao de ferro quase constante para idosos (HALLGREN;
SOURANDER, 1958).
O valor mdio e o desvio padro de R2, R2* e para as regies dos
ncleos da base de todos os controles (n=16) e de todos os pacientes (n=14)
esto nas Figura 5.12, 5.13, 5.14 e a Tabela 5.2.
Figura 5.12: Valores mdios e desvio padro de R2 dos controles e pacientes

com doena de Parkinson. (p < 0, 01).
Figura 5.13: Valores mdios e desvio padro de R2* dos controles e

Figura 5.14: Valores mdios e desvio padro de dos controles e pacientes

com doena de Parkinson.(p < 0, 01) (p < 0, 001).
Mapa
Regio
Controles
Pacientes
Significncia estatstica
R2
Substncia negra*
16,6(1,3)
17,8(1,9)
p=0,007*
R2
Ncleo rubro*
15,7(1,8)
17,1(1,9)
p=0,007*
R2
Globo plido
17,1(1,4)
17,2(1,5)
p=0,77
R2
Putmen
15,4(1,5)
15,0(0,7)
p=0,17
R2
Ncelo caudado
12,9(1,3)
13,0(0,9)
p=0,75
R2
Tlamo
12,4(0,5)
12,3(0,7)
p=0,50
R2*
Substncia negra
42,1(6,0)
44,0(8,1)
p=0,12
R2*
Ncleo rubro
34,9(5,2)
34,7(5,5)
p=0,89
R2*
Globo plido
43,4(7,8)
42,6(6,3)
p=0,65
R2*
Putmen
37,2(6,3)
34,5(4,0)
p=0,057
R2*
Ncelo caudado
27,8(5,3)
27,3(5,9)
p=0,72
R2*
Tlamo
22,4(4,2)
21,4(2,5)
p=0,26
Substncia negra**
129,1(36,4)
175,8(39,7)
p<0,001**
Ncleo rubro
112,4(38,8)
108,0(36,6)
p=0,71
Globo plido*
113,4(23,0)
138(42,8)
p=0,007
Putmen
56,9(23,3)
54,0(21,1)
p=0,63
Ncelo caudado
38,2(17,8)
41,2(22,0)
p=0,55
Tlamo
15,7(20,1)
20,4(17,9)
p=0,35
Tabela 5.2: Resultado do teste t de Student para o grupo controle e de

pacientes com doena de Parkinson. A unidade de ambos R2 e R2* s1
e de ppb.
Dentre
todas
as
tcnicas
apenas
relaxometria
R2
QSM
encontraram diferenas significativas (p=0,007 e p<0,001 respectivamente)

entre controles e pacientes para substncia negra (Figura 5.12, 5.14 e a
Tabela 5.2). Estes resultados esto de acordo com outros estudos in vivo que
encontraram diferena significativa para a substncia negra compacta com
valores de R2 (RYVLIN et al., 1995; KOSTA et al., 2006) e com valores de
(LOTFIPOUR et al., 2012). Alm disso, nossos resultados tambm concordam
com estudos de crebros de cadver que diferenciaram o acmulo de ferro
para controles saudveis e para pacientes com doena de Parkinson na
substncia negra e substncia negra compacta (DEXTER et al., 1987; SOFIC
et al., 1988; DEXTER et al., 1989; GRIFFITHS et al., 1999). Estes estudos
destacam que a doena de Parkinson apresenta mudanas qumicas e fsicas
principalmente na substncia negra: morte dos neurnios dopaminrgicos e
acmulo de ferro.
Diferentemente de Vymazal et al. (1999)ns encontramos diferena
significativa (p=0,007) para os valores de R2 do ncleo rubro (Figura 5.12)
entre os grupos. A causa pode ser devido ao baixo campo usado por Vymazal
et al. (1999), porque o valor de R2 aumenta quanto maior for campo e
consequentemente a sensibilidade para diferenciar os grupos.
Pela literatura consultada acreditamos que por primeira vez est sendo
reportado os valores de susceptibilidade magntica para todos os ncleos da
base em ambos os grupos controles e pacientes com doena de Parkinson.
Alm da diferenciao entre os grupos atravs da SN, tambm encontramos
diferena significativa para a regio do globo plido (p=0,007) (Figura 5.14).
Este achado tambm concorda com estudos de crebros de cadver que
diferenciaram o acmulo de ferro para controles saudveis e para pacientes
com doena de Parkinson no globo plido (GRIFFITHS et al., 1999).
O mapa de relaxometria R2* para todas as regies dos ncleos da
base no apresentou diferena significativa entre os grupos (Tabela 5.2),
diferentemente de alguns trabalhos da literatura (GORELL et al., 1995;
GRAHAM; PALEY; GRNEWALD, 2000;
MARTIN; WIELER; GEE, 2008;
BAUDREXEL et al., 2010; PERAN et al., 2010; DU et al., 2011). O valor de R2*
pode ter sido influenciado pela a inomogeneidade do campo magntico no
relacionado com o acmulo de ferro (GROGER; BERG, 2012) e pelo efeito da
difuso dos spins neste campo inomognio (KENNAN; ZHONG; GORE, 1994).
Outro fator que pode ter influenciado no subdiviso da substncia negra,
que por exemplo, Martin, Wieler e Gee (2008) a dividiu em quatro regies: SN
compacta medial, SN compacta lateral, SN reticulada medial e SN reticulada
lateral.
De acordo com a reviso da literatura existem resultados de R2 e
R2* controversos para a diferenciao de grupo de pacientes com doena
de Parkinson e grupo controle. Apenas 4 de 8 trabalhos com medida de R2
(RYVLIN et al., 1995; GORELL et al., 1995; BARTZOKIS et al., 1999; KOSTA
et al., 2006; GRAHAM; PALEY; GRNEWALD, 2000; VYMAZAL et al., 1999;
MONDINO et al., 2002; ANTONINI et al., 1993) e 6 de 8 trabalhos com
medida de R2* (GORELL et al., 1995; GRAHAM; PALEY; GRNEWALD, 2000;
MARTIN; WIELER; GEE, 2008; BAUDREXEL et al., 2010; PERAN et al., 2010;
DU et al., 2011; BRAFFMAN et al., 1989; ORDIDGE et al., 1994) encontram
diferena significativa entre os grupos para a regio da substncia negra. A
inconsistncia dos resultados da literatura pode ser justificada pela seleo de
diferentes parmetros para aquisio das imagens: tamanho da resoluo da
imagem, espessura do corte; segmentao: definio da regio de interesse da
substncia negra e segmentao 2D ou 3D. Alm disso, ainda no conhecida
a influncia simultnea da perda celular e do acmulo de ferro nas taxas de
relaxao (GROGER; BERG, 2012).
Para mostrar o quanto a disperso dos resultados obtidos para as
regies determinadas com diferena significativa (R2: SN e RN; : SN e
GP), plotamos os valores de R2 e em relao idade (Figura 5.15 e 5.16).
(a)
(b)
Figura 5.15: Valores de R2 para a regio da SN (a) e RN (b) para controles

e pacientes em relao idade. A linha vermelha indica o valor mdio com o
respectivo desvio padro para pacientes e a linha preta indica o mesmo para
controles.
(a)
(b)
Figura 5.16: Valores de para a regio da SN (a) e GP (b) para controles

e pacientes em relao a idade. A linha vermelha indica o valor mdio com o
respectivo desvio padro para pacientes e a linha preta indica o mesmo para
controles.
Em resumo, a diferena significativa encontrada entre os grupos para

os valores de R2 e indica um possvel acmulo de ferro.
Contudo,
destacamos tambm que a mudana dos valores de R2 pode ser atribuda a

uma mudana na concentrao de gua e ou na distribuio das molculas de
gua livre. Quando gua livre se torna agua ligada o valor de R2 aumenta.
Mudanas nos valores de tambm podem ser devido ao acmulo de
outros ons paramagnticos (Cu+2 ) mudana de estados de oxidao dos ons
paramagnticos e o acoplamento entre eles (LOTFIPOUR et al., 2012). Porm
a forte correlao deste parmetro com a concentrao de ferro sugere que
este metal seja o fator dominante.
Com intuito de determinar a tcnica mais sensvel e especfica para a
classificao de sujeitos controles e pacientes geramos algumas curvas ROC
para os valores de R2, R2* e para as regies que apresentaram diferena
significativa entre os grupos controles e pacientes (figuras 5.17, 5.18 e 5.19).
Figura 5.17: Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio da
substncia negra (SN).
Figura 5.18: Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio do
ncleo rubro (RN).
Figura 5.19: Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio do globo
plido (GP).
A rea sob a curva ROC representa a probabilidade que tal tcnica

capaz de diferenciar um paciente com doena e um controle como saudvel.
Desta forma, podemos dizer que para a regio da SN o mapa QSM possui
maior probabilidade de classificar como doena de Parkinson (rea=0,79) do
que o mapa de R2 (rea=0,69) (Figura 5.17). Resultado concordante com a
diferena dos valores de p para o test t de Student entre os grupos usando o
mapa de QSM (P<0,001) e R2 (p=0,006).
O mapa de R2 apresentou rea sob a curva ROC acima de 0,5 na regio
do ncleo rubro (Figura 5.18) e tambm o mapa QSM na regio do globo
plido (Figura 5.19) porque foram as respectivas tcnicas que determinaram
diferena significativa entre os grupos.
Alm dos resultados acima sobre diferena significativa entre os grupos
controles e pacientes. Avaliamos tambm a assimetria dos valores de R2, R2*
e dos ncleo da base direito em relao ao esquerdo separadamente para
os controles e para os pacientes. No foi encontrado diferena significativa
(p<0,05) entre os valores de R2, R2* e do lado direito em relao ao lado
esquerdo para ambos os grupos. Resultado diferente de Xu, Wang e Zhang
(2008), que estudou o valor de fase e detectou maiores valores de mudana
de fase do hemisfrio esquerdo em certas regies: putmen, globo plido,
substncia negra, tlamos e substncia branca (tpico 2.3). A explicao da
convergnica de nossos resultados com Xu, Wang e Zhang (2008) se deve aos
5.5 - Efeito da resoluo da imagem no mapa de QSM
96
autores terem usado a informao de fase e no os valores de R2, R2* e . A

fase possui dependncia no local e pode ser influenciada por diversos fatores
de pr processamento (desenrolamento e filtragem).
Nossas concluses possuem algumas limitaes relacionadas com
detalhes do estudo.
Numero de controles (16) e pacientes (14) no
foi muito grande devido ao custo do exame.
Os pacientes foram
recrutados em ambulatrio clinico que apresentavam predominantemente

casos intermedirios da doena (escala 2 ou 3 de H&Yr).
Pacientes com
estgio da doena avanado (escala 4 ou 5 de H&Y) apresentam muitos

tremores, rigidez do corpo e debilitao fsica, fato que dificulta a aquisio
do exame. Logo, no podemos obter concluses para os casos mais avanados
e pela pequena quantidade de pacientes no foi possvel fazer uma analise
de correlao entre os parmetros quantitativos aqui estudados e o grau de
gravidade da doena (por exemplo usando a escala de H&Y). A segmentao
dos ncleos da base foi realizada apenas no corte mais representativo da
regio de interesse e no em toda extenso do volume da regio anatmica,
fato que pode influenciar o valor mdio de R2, R2* e .
Os
resultados
apresentao
no
obtidos
principal
neste
tpico
congresso
de
(5.4)
foram
aceitos
susceptibilidade
para
magntica:
2nd International Workshop on MRI Phase Contrast and Quantitative

Susceptibility Mapping (QSM) 25-27 de Julho de 2013. Ithaca, Nova York EUA (BARBOSA et al., 2013). O resumo expandido (4 pginas) foi indicado
pelo congresso para concorrer como melhor trabalho do evento, sendo o
prmio o financiamento da viagem para o congresso.
5.5
Efeito da resoluo da imagem no mapa de

QSM
A imagem com alta resoluo (0,5x0,5x2,0mm) foi adquirida em 2,8
minutos. A imagem de baixa resoluo foi gerada a partir da imagem de alta

resoluo (Tpico 4.3.2). Se fossemos adquirir a imagem de baixa resoluo
97
(1,0x1,0x2,0mm) seriam necessrios 0,9 minutos.

Os mapas de QSM processados a partir das imagens com diferentes
resolues no apresentaram qualitativamente muitas diferenas. Na figura
abaixo mostrado os mapas de QSM para um controle e um paciente gerados
a partir de imagens com diferentes resolues.
Figura 5.20: Mapas de QSM obtidos de imagens com alta e baixa resoluo
para um controle e um paciente com doena de Parkinson.
Os valores de obtidos das imagens com baixa resoluo para todas

as regies dos ncleos da base foram plotados em funo dos valores das
imagens com alta resoluo.
Gerando coeficientes de correlao linear e
angular prximo de 1, fato que indica muito pouca variao nos valores de
Figura 5.21: Correlao linear entre valores mdios de susceptibilidade

magntica dos ncleos da base por meio do processamento de imagens com
baixa e alta resoluo.
O resultado do teste t de Student entre valores de para controles e
98
pacientes se manteve o mesmo em alta e baixa resoluo (Figura 5.22).
Figura 5.22: Valores mdios e desvio padro dos valores de susceptibilidade

magntica. *(p<0,05).
Em resumo os mapas de QSM de alta resoluo apresentaram maiores

detalhes da anatomia como a presena de pequenos vasos, no entanto os
mapas de QSM de baixa resoluo apresentaram pouca mudana nos valores
de susceptibilidade magntica para as regies segmentadas. Os pequenos
vasos no influenciaram no valor mdio medido das regies, porque so
muito pequenos em relao ao tamanho da regio de interesse e o valor
de susceptibilidade magntica das regies so muito superiores ao valores
de susceptibilidade dos vasos.
Portanto sugerimos para a quantificao
da susceptibilidade magntica dos ncleos da base na aplicao clnica a

aquisio de imagens de baixa resoluo (1,0x1,0x2,0) por motivos de menor
tempo de aquisio.
Os resultados obtidos neste tpico (5.5) foram apresentados em ingls
e de forma oral no XXXVI Encontro Nacional de Fsica da Matria Condensada
nos dias 13 a 17 de Maio de 2013. guas de Lindia, So Paulo.(BARBOSA;
SALMON, 2013).
5.6 - Anlise de diferentes valores de T2
5.6
99
Anlise de diferentes valores de T2

A Figura 5.23 e 5.24 mostra os resultados da anlise de mltiplos T2
para um controle e um paciente.
100
Figura 5.23: Anlise de mltiplos T2 para sujeito controle (67 anos). Eixo
das ordenadas contem intensidade do sinal (u.a.) e ponderao (u.a.) no
grfico acim e abaixo respectivamente. Eixo das abscissas contem TE (ms) e
T2 (ms) respectivamente.
Figura 5.24: Anlise de mltiplos T2 para pacientes com doena de

Parkinson (60 anos). Eixo das ordenadas contem intensidade do sinal (u.a.)
e ponderao (u.a.) no grfico acim e abaixo respectivamente. Eixo das
abscissas contem TE (ms) e T2 (ms) respectivamente.
Em todos os sujeitos controles e pacientes com doena de Parkinson
101
foi observado apenas um valor de T2 para o estudo de relaxometria dos

ncleos da base.
Estes resultados no concordam com os reportados na
tese de doutorado de Silva (2013), que foi observado um comportamento bi

exponencial dos valores de T2 para os ncleos da base. Nossos resultados
poderiam ser justificados pela baixa acurcia da tcnica de ajuste construda.
As simulaes desta tcnica mostra uma grande dependncia com relao
sinal rudo para determinar os valores de T2.
Na Figura 5.25 apresenta
os resultados encontrados para dois valores de T2 simulados T2=20ms e

T2=100ms (S=50*exp(-TE/100)+50*exp(-TE/20) com valores de TE iguais 12,
24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132 e 144ms) e os respectivos valores de
rudo em porcentagem para o sinal de TE=12ms.
Figura 5.25: Dependncia do clculo de mltiplos T2 para de determinao

dois valores de T2 simulados. Eixo das ordenadas contem ponderao (u.a.).
Eixo das abscissas contem valores de T2 (ms) respectivamente.
Portanto com esta abordagem no foi possvel identificar a existncia

de mais de um valor de T2 tanto para controles quanto para pacientes.
Acreditamos que seja devido dependncia da tcnica com a relao sinal
rudo.
Captulo
Concluses
A alta correo linear entre as tcnicas R2, R2* e QSM com o acumulo
de ferro estimado nas regies dos ncleos da base sugere que elas podem
ser utilizadas como medidas indiretas da deposio de ferro no crebro.
Alm disso, os resultados de analise de intercorrelao entre as tcnicas:
R2&QSM (r2 = 0, 63), R2*&QSM (r2 = 0, 54) e R2&R2*(r2 = 0, 73) permitiu
concluir que apesar de uma depedncia razovel, cada tcnica responde
diferentemente com a deposio de ons paramagnticos em tecidos cerebrais.
Como sugerido pela literatura, os valores de relaxometria tambm podem
depender da inomogeneidade do campo esttico, da difuso do tecido e de
outros fatores relacionados a compartimentalizao de ons paramagnticos
(KENNAN; ZHONG; GORE, 1994; WEISSKOFF et al., 1994; KISELEV; POSSE,
1999; TROPRS et al., 2001).
Os valores de susceptibilidade magntica
tambm so sensveis ao acumulo de outras substncias paramagnticas ou

diamagnticas, mudana de estados de oxidao dos ons paramagnticos e
ao acoplamento entre eles (LOTFIPOUR et al., 2012).
Observamos que a relaxometria R2 e o mapa de susceptibilidade
magntica
apresentaram
sensibilidade
especificidade
razovel
para
diferenciar sujeitos controles de pacientes com doena de Parkinson

principalmente para a regio da substncia negra.
Devido doena
de Parkinson apresentar mudanas qumicas e fsicas principalmente na

substncia negra: morte dos neurnios dopaminrgicos e acmulo de ferro.
Com maior sensibilidade e especificidade para o mapa de suscepetibilidade
102
6 - Concluses
103
como descrito pela curva ROC.

Conclumos que o mapa QSM gerado com imagens de baixa resoluo
(1,0x1,0x2,0mm) apresenta valores de das regies dos ncleos da
base muito prximos dos mapas gerados com imagem de alta resoluo
(0,5x0,5x2,0mm). Como o tempo de aquisio de imagens com baixa resoluo
reduzido 70%, sugerimos a aquisio de imagens com baixa resoluo para
grandes estudos e na aplicao clinica.
O mtodo de analise de mltiplos T2 abordado neste estudo no
verificou comportamento multi exponencial.
No houve mais de um valor
de T2 para as regies dos ncleos da base tanto para controles quanto para
pacientes. Este resultado foi aparentemente afetado pela relao sinal rudo.
Como perspectivas futuras deste trabalho,
elaboramos algumas
perguntas que podem guiar estudos futuros: Qual o estado de ionizao do

ferro que estamos detectando com as tcnicas quantitativas de ressonncia
magntica in vivo?
Alm disso, quais so os outros ons paramagnticos
e molculas que contribuem ou competem com os valores de relaxometria

e susceptibilidade magntica?
De forma aplicada, o ferro causa ou
consequncia do acmulo de ferro na doena de Parkinson?

verificar in vivo o acmulo de ferro durante a doena?
possvel
Referncias Bibliogrficas
AISEN, P.; WESSLING-RESNICK, M.; LEIBOLD, E. A. Iron metabolism.
Current opinion in chemical biology, v. 3, n. 2, p. 2006, 1999.
ANDREWS, N. C. Disorders of iron metabolism. The New England journal of
medicine, v. 341, n. 26, p. 198695, 1999.
ANTONINI, A. et al. T2 relaxation time in patients with Parkinsons disease.
Neurology, v. 43, p. 697700, 1993.
AQUINO, D. et al. Age-related iron deposition in the basal ganglia:
quantitative analysis in healthy subjects. Radiology, v. 252, n. 1, p. 16572,
2009.
BAFFA, O. Estudos estruturais das mioglobinas de Aplysia Brasiliana e
Dermochelis Coriacea por tcnicas pticas e ressonncia paramagntica
eletrnica. Tese (Doutorado) University of Sao Paulo, 1984.
BARBOSA, J. H. O.; FILHO, A. C. S. S.; SALMON, C. E. G. Mapas de R2, R2*
e susceptibilidade magntica de depsitos de ferro nos gnglios da base.
In: Congresso Brasileiro em Engenharia Biomedica. Porto de Galinhas - PE:
[s.n.], 2012.
BARBOSA, J. H. O. et al. Correlation of R2 and R2* with Quantitative
Susceptibility Maps in Healthy Elderly Controls. In: ISMRM. Salt Lake City USA: [s.n.], 2013.
BARBOSA, J. H. O.; SALMON, C. E. G. Study about susceptibility mapping
with different images resolutions. In: XXXVI Encontro de Fsica da
Matria Condensada. guas de Lindia - SP: [s.n.], 2013. Disponvel em:
<http://www.sbf1.sbfisica.org.br/eventos/enfmc/xxxvi/sys/resumos/R0532-2.pdf>.
BARBOSA, J. H. O. et al. Are transverse relaxation rates and susceptibility
maps equivalent in detecting changes in iron content in Parkinsons disease?
In: 2nd International Workshop on MRI Phase Contrast and Quantitative
Susceptibility Mapping (QSM). Ithaca - USA: [s.n.], 2013. p. 4.
BARTON, J. C. et al. Handbook of Iron Overload Disorders. [S.l.]: Cambridge
University Press, 2010. 376 p.
104
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
105
BARTZOKIS, G. et al. Field dependent transverse relaxation rate increase may

be a specific measure of tissue iron stores. Magnetic resonance in medicine,
v. 29, n. 4, p. 45964, 1993.
BARTZOKIS, G. et al. MRI evaluation of brain iron in earlier and later onset
Parkinsons disease and normal subjects. Magnetic Resonance Imaging, v. 17,
n. 2, p. 213222, 1999.
BARTZOKIS, G. et al. Brain ferritin iron may influence age e gender related
risks of neurodegeneration. Neurobiol. Aging, v. 28, p. 414423, 2007.
BAUDREXEL, S. et al. Quantitative mapping of T1 and T2* discloses nigral
and brainstem pathology in early Parkinsons disease. Neuroimage, 2010.
BEARD, J. L.; CONNOR, J. R.; JONES, B. C. Iron in the Brain. Nutrition
Reviews, v. 51, n. 6, p. 157170, 1993.
BERG, D. In vivo detection of iron and neuromelanin by transcranial
sonography a new approach for early detection of substantia nigra damage.
Journal of neural transmission, 2006.
BERG, D.; HOCHSTRASSER, H. Iron metabolism in Parkinsonian syndromes.
Movement disorders, v. 21, n. 9, p. 1299310, 2006.
BORTEN, O. et al. Effects of dietary restriction and metal supplementation on
the accumulation of iron-laden glial inclusions in the aging rat hippocampus.
Biogerontology, v. 5, p. 8188, 2004.
BOTHWELL, T. H. et al. Iron metabolism in man. St. Louis: Blackwell
Scientific Publications., 1979. 576 p.
BRAFFMAN, B. H. et al. MR imaging of Parkinson disease with spin-echo
and gradient-echo sequences. American journal of roentgenology, v. 152, p.
15965, 1989.
BROOKS, D. J. et al. Does signal-attenuation on high-field T2-weighted MRI
of the brain reflect regional cerebral iron deposition? Observations on the
relationship between regional cerebral water proton T2 values and iron
levels. Journal of neurology, neurosurgery, and psychiatry, v. 52, n. 1, p.
10811, 1989.
CARNEIRO, A. A. O. Sistema para medidas da magnetizao remanente
intragstrica. 123 p. Tese (Doutorado) Universidade de Sao Paulo, 2001.
CHEN, J.; HARDY, P. MR of human postmortem brain tissue: correlative study
between T2 and assays of iron and ferritin in Parkinson and Huntington
disease. American journal Neuroradiol, v. 14, n. 2, p. 275281, 1993.
106
CHEN, J. C. et al. MR of human postmortem brain tissue: correlative study

between T2 and assays of iron and ferritin in Parkinson and Huntington
disease. American journal of neuroradiology, v. 14, n. 2, p. 27581, 1989.
CONNOR, J. R. et al. Iron and iron management proteins in neurobiology.
Pediatric neurology, v. 25, n. 2, p. 11829, 2001.
CONNOR, J. R. et al. Cellular distribution of transferrin, ferritin, and iron in
normal and aged human brains. Journal of neuroscience research, v. 27, n. 4,
p. 595611, 1990.
CONNOR, J. R. et al. A histochemical study of iron, transferrin, and ferritin in
Alzheimers diseased brains. Journal of neuroscience research, v. 31, n. 1, p.
7583, 1992.
CONNOR, J. R. et al. A quantitative analysis of isoferritins in select
regions of aged, parkinsonian, and Alzheimers diseased brains. Journal of
neurochemistry, v. 65, n. 2, p. 71724, ago. 1995.
CONNOR, J. R. et al. Regional distribution of iron and iron-regulatory proteins
in the brain in aging and Alzheimers disease. Journal of neuroscience
research, v. 31, n. 2, p. 32735, 1992.
CONNOR, R. J.; BOESHORE, K. L.; BENKOVIC, S. A. Isoforms of ferritin have
a distinct cellular distribuition in the brain. Mol Biol Cell, v. 3, p. 84A, 1992.
CRICHTON, R. R.; DEXTER, D. T.; WARD, R. J. Brain iron metabolism and its
perturbation in neurological diseases. Journal of neural transmission, v. 118,
n. 3, p. 30114, 2011.
De Arriba Zerpa, G. A. et al. Alternative splicing prevents transferrin
secretion during differentiation of a human oligodendrocyte cell line. Journal
of neuroscience research, v. 61, n. 4, p. 38895, 2000.
De la Fuente-Femeez, R. et al. Nigrostriatal dopamine system e motor
lateralization. Brain Res., v. 112, p. 6368, 2000.
DEISTUNG, A. et al. NeuroImage Toward in vivo histology : A comparison of
quantitative susceptibility mapping ( QSM ) imaging at ultra high magnetic
field strength with magnitude , phase, and R2*. v. 65, p. 299314, 2013.
DEXTER, D. et al. Alterations in the levels of iron, ferritin and other trace
metals in Parkinsons disease and other neurodegenerative diseases affecting
the basal ganglia. Brain : a journal of neurology, v. 114, p. 195375, 1991.
DEXTER, D. et al. Increased nigral iron content in postmortem parkinsonian
brain. Lancet, v. 2, n. 8569, p. 121920, 1987.
107
DEXTER, D. T. et al. Increased nigral iron content and alterations in

other metal ions occurring in brain in Parkinsons disease. Journal of
neurochemistry, v. 52, n. 6, p. 18306, 1989.
DRAYER, B. et al. MRI of brain iron. AJR. American journal of roentgenology,
v. 147, n. 1, p. 10310, 1986.
DU, G. et al. Combined R2* and diffusion tensor imaging changes in the
substantia nigra in Parkinsons disease. Movement disorders, v. 26, p.
162732, 2011.
DURIEUX, A. et al. Superficial siderosis of the central nervous system. Revue
neurologique, v. 155, n. 3, p. 2017, 1999.
DUYN, J. H. et al. High field MRI of brain cortical substructure based on
signal phase. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United
States of America, v. 104, n. 28, p. 11796801, 2007.
FAUCHEUX, B. A. et al. Autoradiographic localization and density of [125I]
ferrotransferrin binding sites in the basal ganglia of control subjects, patients
with Parkinsons disease and MPTP-lesioned monkeys. Brain research, v. 691,
n. 1-2, p. 11524, 1995.
FERNANDEZ, L.; BARBOSA, L. H. T.; Schroder, M. V., N. Ferro e
neurodegenerao. Scientia Medica, v. 17, n. 4, p. 218224, 2007.
FINCH, C. A.; HUEBERS, H. Perspectives in iron metabolism. The New
England journal of medicine, v. 306, n. 25, p. 15208, 1982.
FLEMING, D. et al. Aspirin intake and the use of serum ferritin as a measure
of iron status. Am J Clin Nutr, v. 74, p. 219226, 2001.
GELMAN, N. et al. MR imaging of human brain at 3.0 T: preliminary report on
transverse relaxation rates and relation to estimated iron content. Radiology,
v. 210, n. 3, p. 75967, 1999.
GHUGRE, N. R. et al. Mechanisms of tissue-iron relaxivity: nuclear magnetic
resonance studies of human liver biopsy specimens. Magnetic resonance in
medicine, v. 54, n. 5, p. 118593, 2005.
GLICK, S.; ROSS, D.; HOUGH, L. Lateral asymmetry of neurotransmitters in
human brain. Brain research, v. 234, p. 5363, 1982.
GORELL, J. M. et al. Increased iron-related MRI contrast in the substantia
nigra in Parkinsons disease. Neurology, v. 45, p. 113843, 1995.
GTZ, M. E. et al. The relevance of iron in the pathogenesis of Parkinsons
disease. Annals of the New York Academy of Sciences, v. 1012, p. 193208,
2004.
108
GRAHAM, J.; PALEY, M.; GRNEWALD, R. Brain iron deposition in Parkinsons

disease imaged using the PRIME magnetic resonance sequence. Brain
research, 2000.
GRIFFITHS, P. D. et al. Iron in the basal ganglia in Parkinsons disease. An in
vitro study using extended X ray absorption fine structure and cryo electron
microscopy. Brain : a journal of neurology, v. 122, p. 66773, 1999.
GROGER, A.; BERG, D. Does structural neuroimaging reveal a disturbance
of iron metabolism in Parkinsons disease? Implications from MRI and TCS
studies. Journal of neural transmission, v. 119, n. 12, p. 15238, 2012. ISSN
1435-1463.
GUPTA, D. et al. Utility of susceptibility weighted MRI in differentiating
Parkinsons disease and atypical parkinsonism. Neuroradiology, v. 52, n. 12,
p. 108794, 2010.
HAACKE, E. et al. Magnetic Resonance Imaging: Physical Principles and
Sequence Design. [S.l.]: Wiley, 1999.
HAACKE, E.; REICHENBACH, J. R. Susceptibility Weighted Imaging in MRI:
Basic Concepts and Clinical Applications. [S.l.]: John Wiley and Sons, 2011.
416 p.
HAACKE, E. M. Susceptibility weighted imaging. Patent.US 6,658,280 B1.
2002.
HAACKE, E. M. et al. Imaging iron stores in the brain using magnetic
resonance imaging. Magnetic resonance imaging, v. 23, n. 1, p. 125, 2005.
HAACKE, E. M. et al. Characterizing iron deposition in multiple sclerosis
lesions using susceptibility weighted imaging. Journal of magnetic resonance
imaging : JMRI, v. 29, n. 3, p. 537544, 2009.
HAACKE, E. M. et al. Susceptibility weighted imaging: technical aspects and
clinical applications, part 1. AJNR. American journal of neuroradiology, v. 30,
n. 1, p. 1930, 2009.
HAACKE, E. M. et al. Susceptibility mapping as a means to visualize veins
and quantify oxygen saturation. Journal of magnetic resonance imaging, v. 32,
n. 3, p. 66376, 2010.
HAACKE, E. M. et al. Susceptibility weighted imaging (SWI). Magnetic
resonance in medicine :, v. 52, n. 3, p. 6128, 2004.
HALLGREN, B.; SOURANDER, P. THE EFFECT OF AGE ON THE
NON-HAEMIN IRON IN THE HUMAN BRAIN. Journal of Neurochemistry,
v. 3, n. 1, p. 4151, 1958.
109
HARRISON, P. The ferritins: molecular properties, iron storage function and

cellular regulation. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics,
v. 1275, n. 3, p. 161203, 1996.
HEBBRECHT, G.; MAENHAUT, W.; REUCK, J. D. Brain trace elements and
aging. Nuclear Instruments and Methods in Physics Research Section B,
v. 150, n. 1-4, p. 208213, 1999.
HENTZE, M. W.; MUCKENTHALER, M. U.; ANDREWS, N. C. Balancing acts:
molecular control of mammalian iron metabolism. Cell, v. 117, n. 3, p. 28597,
2004.
HIRSCH, E. C. et al. Iron and aluminum increase in the substantia nigra
of patients with Parkinsons disease: an X-ray microanalysis. Journal of
neurochemistry, v. 56, n. 2, p. 44651, 1991.
HIRSCH, E. C.; GRAYBIEL, A. M.; AGID, Y. Melanised dopaminergic neurons
are differently susceptible to degeneration in Parkinsons disease. Nature,
v. 334, p. 345348, 1988.
JELLINGER, K. A. Pathology of Parkinsons disease. Changes other than the
nigrostriatal pathway. Molecular and chemical neuropathology / sponsored
by the International Society for Neurochemistry and the World Federation of
Neurology and research groups on neurochemistry and cerebrospinal fluid,
v. 14, n. 3, p. 15397, 1991.
JENKINSON, M.; WILSON, J. L.; JEZZARD, P. Perturbation method for
magnetic field calculations of nonconductive objects. Magnetic resonance in
medicine, v. 52, n. 3, p. 4717, 2004.
JENSEN, J. Tissue Iron Detection & Quantification with MRI. cds.ismrm.org,
2011.
Jr. Wagner, H. et al. Imaging dopamine receptors in the human brain by
positron emission tomography. Science, v. 221, p. 12641266, 1983.
KAMMAN, R. et al. Nuclear magnetic resonance relaxation in experimental
brain edema: effects of water concentration, protein concentration, and
temperature. Magnetic Resonance in Medicine, 1988.
KAUSHANSKY, K. et al. Williams Hematology, Eighth Edition. [S.l.]:
McGraw-Hill Education, 2010. 2460 p.
KENNAN, R. P.; ZHONG, J.; GORE, J. C. Intravascular susceptibility contrast
mechanisms in tissues. Magnetic resonance in medicine, v. 31, n. 1, p. 921,
1994.
110
KISELEV, V.; POSSE, S. Analytical Model of Susceptibility Induced MR

Signal Dephasing: Effect of Diffusion in a Microvascular Network. Magnetic
Resonance Imaging, v. 41, p. 499509, 1999.
KOSTA, P. et al. MRI evaluation of the basal ganglia size and iron content in
patients with Parkinsons disease. Journal of neurology, 2006.
LANGKAMMER, C. et al. Quantitative MR imaging of brain iron: a postmortem
validation study. Radiology, v. 257, n. 2, p. 45562, 2010.
LANGKAMMER, C. et al. Susceptibility induced gray white matter MRI
contrast in the human brain. NeuroImage, Elsevier Inc., v. 59, n. 2, p.
14131419, 2012.
LANGKAMMER, C. et al. Quantitative susceptibility mapping in multiple
sclerosis. Radiology, v. 267, n. 2, p. 5519, 2013.
LANGKAMMER, C. et al. Quantitative susceptibility mapping (QSM) as a
means to measure brain iron? A post mortem validation study. NeuroImage,
Elsevier Inc., v. 62, n. 3, p. 15931599, 2012.
LEVEUGLE, B. et al. Cellular distribution of the iron-binding protein
lactotransferrin in the mesencephalon of Parkinsons disease cases. Acta
neuropathologica, v. 91, n. 6, p. 56672, 1996.
LI, L.; LEIGH, J. S. High precision mapping of the magnetic field utilizing
the harmonic function mean value property. Journal of magnetic resonance,
v. 148, n. 2, p. 4428, 2001.
LILL, R.; MUHLENHOFF, U. Iron sulfur protein biogenesis in eukaryotes:
components and mechanisms. Annual review of cell and developmental
biology, v. 22, p. 45786, 2006.
LIU, T. et al. Calculation of susceptibility through multiple orientation
sampling (COSMOS): a method for conditioning the inverse problem from
measured magnetic field map to susceptibility source image in MRI. Magnetic
resonance in medicine, v. 61, n. 1, p. 196204, 2009.
LOK, C. N.; LOH, T. T. Regulation of transferrin function and expression:
review and update. Biological signals and receptors, v. 7, n. 3, p. 15778,
1998.
LOTFIPOUR, A. K. et al. High resolution magnetic susceptibility mapping of
the substantia nigra in Parkinsons disease. Journal of magnetic resonance
imaging, v. 35, n. 1, p. 4855, 2012.
MAI, J.; PAXINOS, G.; VOSS, T. Atlas of the human brain. [S.l.]: Academic
Press, 2008. (Academic Press).
111
MARQUES, J.; BOWTELL, R. Application of a Fourier based method for

rapid calculation of field inhomogeneity due to spatial variation of magnetic
susceptibility. Concepts in Magnetic Resonance Part B: Magnetic Resonance
Engineering, v. 25B, n. 1, p. 6578, 2005.
MARTIN, W. R. W.; WIELER, M.; GEE, M. Midbrain iron content in early
Parkinson disease: a potential biomarker of disease status. Neurology, v. 70,
n. 16 Pt 2, p. 14117, 2008.
MCCREA, R. P. E. et al. A comparison of rapid scanning X ray fluorescence
mapping and magnetic resonance imaging to localize brain iron distribution.
European journal of radiology, v. 68, n. 3 Suppl, p. S10913, 2008.
MITTAL, S. et al. Susceptibility-weighted imaging: technical aspects and
clinical applications, part 2. AJNR. American journal of neuroradiology, v. 30,
n. 2, p. 23252, 2009.
MONDINO, F. et al. Magnetic resonance relaxometry in Parkinsons disease.
Neurological sciences, v. 23(2), p. 878, 2002.
MORRIS, C. M. et al. Transferrin receptors in the parkinsonian midbrain.
Neuropathology and applied neurobiology, v. 20, n. 5, p. 46872, 1994.
MOUSSA, B. et al. Iron Deficiency and Overload. Totowa, NJ: Humana Press,
2010.
NEELAVALLI, J. et al. Removing background phase variations in
susceptibility-weighted imaging using a fast, forward-field calculation.
Journal of magnetic resonance imaging : JMRI, v. 29, n. 4, p. 93748, 2009.
NELSON, D. L.; COX, M. M. Lehninger Principles of Biochemistry, 3ed
Edition. [S.l.]: W. H. Freeman, 2000. 1200 p.
ORDIDGE, R. J. et al. Assessment of relative brain iron concentrations
using T2-weighted and T2*-weighted MRI at 3 Tesla. Magnetic resonance in
medicine, v. 32, p. 33541, 1994.
ORDWAY, G. A.; GARRY, D. J. Myoglobin: an essential hemoprotein in striated
muscle. The Journal of experimental biology, v. 207, p. 34416, 2004.
PELL, G. S. et al. Optimized clinical T2 relaxometry with a standard CPMG
sequence. Journal of magnetic resonance imaging, v. 23, n. 2, p. 24852,
2006.
PENKE, L. et al. Brain iron deposits are associated with general cognitive
ability and cognitive aging. Neurobiology of aging, v. 33, n. 3, p. 510517.e2,
2012.
112
PERAN, P. et al. Magnetic resonance imaging markers of Parkinsons disease

nigrostriatal signature. Brain research, v. 133, p. 342333, 2010.
PERL, M. No Title. Virchows Arch Pathol Anat., p. 39:42, 1867.
PONKA, P.; BEAUMONT, C.; RICHARDSON, D. R. Function and regulation of
transferrin and ferritin. Seminars in hematology, v. 35, n. 1, p. 3554, 1998.
QUINTANA, C. et al. Study of the localization of iron, ferritin, and
hemosiderin in Alzheimers disease hippocampus by analytical microscopy
at the subcellular level. Journal of structural biology, v. 153, n. 1, p. 4254,
2006.
QUINTANA, C.; COWLEY, J. M.; MARHIC, C. Electron nanodiffraction and
high-resolution electron microscopy studies of the structure and composition
of physiological and pathological ferritin. Journal of structural biology, v. 147,
n. 2, p. 16678, ago. 2004.
RIEDERER, P. et al. Transition metals, ferritin, glutathione, and ascorbic acid
in parkinsonian brains. Journal of neurochemistry, v. 52, n. 2, p. 51520,
1989.
RILEY, K.; HOBSON, M.; BENCE, S. Mathematical Methods for Physics and
Engineering. 3ed. ed. New York: Cambridge University Press, 2006.
ROCHEFORT, L. de et al. Quantitative MR susceptibility mapping using
piece wise constant regularized inversion of the magnetic field. Magnetic
resonance in medicine, v. 60, n. 4, p. 10031009, 2008.
ROCHEFORT, L. de et al. Quantitative susceptibility map reconstruction from
MR phase data using bayesian regularization: validation and application to
brain imaging. Magnetic resonance in medicine, v. 63, n. 1, p. 194206, 2010.
ROSSI, M. et al. Brain iron deposition and sequence characteristics in
Parkinsonism: comparison of SWI, T2star maps, T2 weighted, and FLAIR
SPACE. Investigative radiology, v. 45, n. 12, p. 795802, 2010.
ROUAULT, T. A. Systemic iron metabolism: a review and implications for
brain iron metabolism. Pediatric Neurology, v. 25, n. 2, p. 130137, 2001.
ROY, K. K. Potential Theory in Applied Geophysics. In: Potential Theory in
Applied Geophysics, by Kalyan Kumar Roy. Berlin: Springer, 2008. Berlin:
Springer, 2008. -1, cap. 10, p. 307328.
RYVLIN, P. et al. Magnetic resonance imaging evidence of decreased
putamenal iron content in idiopathic Parkinsons disease. Archives of
neurology, v. 52, n. 6, p. 5838, 1995.
113
SAINI, S. et al. Magnetism: a primer and review. AJR. American journal of

roentgenology, v. 150, n. 4, p. 73543, 1988.
SCHENCK, J. F. Health and Physiological Effects of Human Exposure to Whole
Body Four Tesla Magnetic Fields during MRI. Annals New York Academiy of
Sciences, v. 649, p. 285301, 1993.
SCHENCK, J. F. The role of magnetic susceptibility in magnetic resonance
imaging: MRI magnetic compatibility of the first and second kinds. Medical
Physics, v. 23, n. 6, p. 815850, 1996.
SCHENCK, J. F. Magnetic resonance imaging of brain iron. Journal of the
neurological sciences, v. 207, n. 1-2, p. 99102, 2003.
SCHWESER, F. A Novel Approach for Separation of Background Phase in
SWI Phase Data Utilizing the Harmonic Function Mean Value Property. In:
ISMRM meeting. Stockholm, Sweden: [s.n.], 2010.
SCHWESER, F. et al. Quantitative imaging of intrinsic magnetic tissue
properties using MRI signal phase : An approach to in vivo brain iron
metabolism? NeuroImage, Elsevier Inc., v. 54, n. 4, p. 27892807, 2011.
SELDEN, C. et al. Studies on the concentration and intracellular localization
of iron proteins in liver biopsy specimens from patients with iron overload
with special reference to their role in lysosomal disruption. British journal of
haematology, v. 44, n. 4, p. 593603, 1980.
SENGSTOCK, G. J. et al. Iron induces degeneration of nigrostriatal neurons.
Brain research bulletin, v. 28, n. 4, p. 6459, 1992.
SHMUELI, K. et al. Magnetic susceptibility mapping of brain tissue in vivo
using MRI phase data. Magnetic resonance in medicine, v. 62, n. 6, p.
15101522, 2009.
SILVA, M. Avaliao da utilidade da Ultrasonografia para o diagnstico da
doena de Parkinson e anlise da concordncia com a relaxometria por
Ressonncia Magntica. Tese (Doutorado) Universidade Sao Paulo, 2013.
SMITH, S.; JENKINSON, M.; WOOLRICH, M. Advances in functional and
structural MR image analysis and implementation as FSL. NeuroImage, v. 23,
p. 208219, 2004.
SOFIC, E. et al. Selective increase of iron in substantia nigra zona compacta
of parkinsonian brains. Journal of neurochemistry, v. 56, n. 3, p. 97882,
1991.
SOFIC, E. et al. Increased iron (III) and total iron content in post mortem
substantia nigra of parkinsonian brain. Journal of neural transmission, v. 74,
n. 3, p. 199205, 1988.
114
SPATZ, H. Uber Den Eisennachweis im Gehrin, besonders in Zentren des

extrapyrimidal-motorishcen systems. Z Ges Neuronal Psychiat Berl, p. 77:261,
1922.
STANKIEWICZ, J. et al. Iron in chronic brain disorders: imaging and
neurotherapeutic implications. Neurotherapeutics : the journal of the
American Society for Experimental NeuroTherapeutics, v. 4, n. 3, p. 37186,
2007.
SUPPRIAN, T. et al. MRI T2 relaxation times of brain regions in schizophrenic
patients e control subjects. Psychiatry Res., v. 75, p. 173182, 1997.
TANG, J. et al. Improving susceptibility mapping using a threshold based K
space image domain iterative reconstruction approach. Magnetic resonance
in medicine, v. 69, n. 5, p. 1396407, 2013.
THOMAS, L. O. et al. MR detection of brain iron. AJNR. American journal of
neuroradiology, v. 14, n. 5, p. 10438, 1993.
TOFTS, P. Quantitative MRI of the Brain. Chichester, UK: John Wiley Sons,
Ltd, 2003.
TRINDER, D.; MORGAN, E. Uptake of transferrin-bound iron by mammalian
cells In:. In: Molecular and Cellular Iron Transport. New York: Marcel Dekker,
2001. cap. 17, p. 427449.
TROPRS, I. et al. Vessel size imaging. Magnetic resonance in medicine :
official journal of the Society of Magnetic Resonance in Medicine / Society of
Magnetic Resonance in Medicine, v. 45, n. 3, p. 397408, 2001.
VOET, D.; VOET, J. G.; PRATT, C. W. Fundamentos de bioqumica. [S.l.]:
Artmed, 2000. 931 p.
VYMAZAL, J. et al. T1 and T2 in the brain of healthy subjects, patients with
Parkinson disease, and patients with multiple system atrophy: relation to iron
content. Radiology, v. 211, n. 2, p. 48995, 1999.
VYMAZAL, J.; URGOSK, D.; BULTE, J. W. Differentiation between
hemosiderin- and ferritin-bound brain iron using nuclear magnetic
resonance and magnetic resonance imaging. Cellular and molecular biology
(Noisy-le-Grand, France), v. 46, n. 4, p. 83542, 2000.
WARD, R. J. et al. Does the haemosiderin iron core determine its potential
for chelation and the development of iron-induced tissue damage? Journal of
inorganic biochemistry, v. 79, n. 1-4, p. 3117, 2000.
WEIR, M. P.; GIBSON, J. F.; PETERS, T. J. No Title. Cell Biochem, Funct. 2, p.
186194, 1984.
115
WEISSKOFF, R. M. et al. Microscopic susceptibility variation and transverse

relaxation: theory and experiment. Magnetic resonance in medicine, v. 31,
n. 6, p. 60110, 1994.
WHARTON, S.; BOWTELL, R. Whole brain susceptibility mapping at high
field: a comparison of multiple and single orientation methods. NeuroImage,
Elsevier Inc., v. 53, n. 2, p. 515525, 2010.
WHARTON, S.; SCHAFER, A.; BOWTELL, R. Susceptibility mapping in the
human brain using threshold based k space division. Magnetic resonance in
medicine, v. 63, n. 5, p. 1292304, 2010.
WHITTALL, K. P.; MACKAY, A. L. Quantitative interpretation of NMR
relaxation data. Journal of Magnetic Resonance, v. 84, n. 1, p. 134152, 1989.
WIJAYANTI, N.; KATZ, N.; IMMENSCHUH, S. Biology of heme in health and
disease. Current medicinal chemistry, v. 11, n. 8, p. 9816, 2004.
WOOD, J. C.; GHUGRE, N. Magnetic resonance imaging assessment of excess
iron in thalassemia, sickle cell disease and other iron overload diseases.
Hemoglobin, v. 32, n. 1-2, p. 8596, 2008.
XU, X.; WANG, Q.; ZHANG, M. Age, gender, and hemispheric differences in
iron deposition in the human brain: an in vivo MRI study. NeuroImage, v. 40,
n. 1, p. 3542, 2008.
YAO, B. et al. Neuro Image Susceptibility contrast in high field MRI of human
brain as a function of tissue iron content. NeuroImage, Elsevier B.V., v. 44,
n. 4, p. 12591266, 2009.
YOUDIM; M.B.H. Brain Iron: Neurochemical e Behavioral Aspects. 1. ed. Ney
York: Taylor e Francis, 1988. 2566 p.
ZAKIN, M. M. Regulation of transferrin gene expression. FASEB journal :
official publication of the Federation of American Societies for Experimental
Biology, v. 6, n. 14, p. 32538, 1992.
ZATTA, P. Metal Ions and Neurodegenerative Disorders. [S.l.]: World
Scientific, 2003. 511 p.
Apndice
Processamento da imagem SWI

Para se realizar o processamento da imagem SWI necessrio adquirir
a imagem de magnitude e de fase em uma sequencia Gradiente Eco com certo
tempo ao eco. Posteriormente processar a imagem de fase, criar a mscara de
fase e multiplic-la pela imagem de magnitude para gerar a imagem SWI.
Aquisio de imagem por sequncia Gradiente Echo
Para a aquisio SWI necessrio utilizar a sequncia Gradiente
Eco.
Esta sequncia visualizada na Figura A.1.
A magnetizao de
equilbrio, longitudinal (M0 ), transformada, parcialmente ou totalmente,

em magnetizao transversal atravs da aplicao de um pulso de rdio
frequncia especfico (rf). Posteriormente, ocorre relaxao da magnetizao
transversal, fato que intensificado pela defasagem dos spins nucleares. No
entanto, utiliza-se uma composio de gradientes na direo de leitura (Gr)
para refocalizar os spins nucleares (A.2) e recuperar um pouco a magnetizao
transversal e obter a leitura do sinal no tempo ao eco.
116
117
Figura A.1: Esboo da sequncia de Gradiente Eco. TE refere-se ao intervalo

de tempo ao eco, TR o tempo entre dois pulsos de rdio frequncia e as
letras A, B, C, D, E, F indicam o tempo para representao dos spins na Figura
A.2. Imagem adaptada de Haacke e Reichenbach (2011).
Figura A.2: Diagrama da evoluo dos spins durante uma sequncia de

Gradiente Eco. Imagem Adaptada de Tofts (2003).
O sinal adquirido no experimento de Ressonncia Magntica

complexo (Equao A.1 e Figura A.3). Apresenta parte real e imaginria, que
pode gerar tanto a imagem de fase quanto a de magnitude:
sinal = ei .(x)
(A.1)
As imagens de fase e magnitude so formadas pelo sinais e |M |
118
Figura A.3: Representao do sinal complexo.
respectivamente:
= tan1
Im(
sinal (x))
(A.2)
Re(sinal (x))
|M | = (Im(sinal (x)))2 + (Re(sinal (x)))2
(A.3)
A intensidade do sinal de magnitude denominado como uma funo

(m ()), que apresenta a seguintes dependncias quando obtido em um tempo
TE:
T E
T R
T
2
T
1
0 sin()e
(1 e
)
m () =
T R
T
1
)
(1 cos().e
(A.4)
Onde 0 a densidade de spin do tecido, TR o tempo de repetio de

cada aquisio de dados, T1 e T2 so o tempo de relaxao longitudinal
e transversal do tecido respectivamente, o ngulo formado entre
a magnetizao longitudinal antes do pulso de RF com a magnetizao
transversal aps o pulso de RF.
A intensidade do sinal de fase apresenta dependncia com as seguintes
variveis:
= gB0 T E
(A.5)
Onde a constante razo giromagntica, g fator geomtrico, diferena

de susceptibilidade magntica local do tecido e B0 a intensidade do campo
119
esttico.
Processamento da Imagem de fase
A
imagem
de
fase
adquirida
em
sequncia
Gradiente
Echo
possui alguns enrolamentos e artefatos causados por alta diferena de

susceptibilidade magntica e inomogeneidade do campo externo.
Para o
processamento da imagem de fase necessrio aplicar um filtro para remover

estes artefatos.
Haacke et al. (2004) sugerem a aplicao do filtro passa alta para
atenuar ou eliminar as componentes de baixa frequncia. Essas componentes
so responsveis pelas caractersticas que variam lentamente na imagem, tais
como o contraste total e a intensidade mdia. O efeito resultante da filtragem
passa alta uma aparente agudizao das bordas e outros detalhes finos.
De forma simplificada, iremos exemplificar o filtro espacial passa alta
sugerido por Haacke et al. (2004). Primeiramente aplicado um filtro passa
baixa (Figura A.4) em uma imagem de 9 x 9 (Figura A.5).
Sendo a mscara de filtro espacial genrica 3 x 3 pixels:
Figura A.4: Mscara de filtro espacial com coeficientes arbitrrios (pesos).
Figura A.5:
intensidade.
Imagem de 9x9 pixels, com os respectivos valores de
120
O centro da mscara do filtro (W5) posicionado sobre o pixel de
interesse da imagem e multiplicam-se os coeficientes das mscaras por todos
os pixels da imagem sobrepostos pela mscara. Ento se o centro da mscara
estiver em uma posio (i,j) na imagem, a intensidade da imagem em (i,j) ser
substitudo por R:
R = w1z1 + w2z2 + ... + w9z9
(A.6)
A mscara ento movida para a prxima posio de pixel na imagem e

o processo se repete. Isso continua at que todas as posies de pixels tenham
sido cobertas. Alm disso, comum criar uma nova imagem para armazenar
os valores de R (imagem de fase filtrada passa baixa), em vez de alterar os
valores dos pixels da imagem original.
A imagem de fase filtrada passa alta obitida pela diviso da imagem de
fase original (0 (x)) e pela imagem de fase filtrada passa baixa (passabaixa (x)):
passaalta (x) =
0 (x)
passabaixa (x)
(A.7)
O uso de filtro passa alta mostrado na Figura A.6. O valor real da fase
decresce de acordo com o tamanho da mscara usada (HAACKE et al., 2009b).
Figura A.6: Aplicao de filtro espacial passa alta. A, Imagem de fase

enrolada. B imagem filtrada passa alta com filtro 32x32. C, Imagem filtrada
passa alta com filtro 64x64. Imagem obtida de Haacke et al. (2009b).
121
Mscara de fase
Embora a imagem de fase filtrada por filtro passa alta (Figura A.6)
apresente diferentes contrastes de susceptibilidade magntica, a imagem de
fase filtrada passa alta pode gerar uma mscara multiplicativa sobre a imagem
de magnitude para aumentar o contraste de susceptibiliade mangtica
(HAACKE et al., 2009b). Quando no h caractersticas de fase que queremos
melhorar, os pixels da mscara de fase so definidos como 1. Caso contrrio,
a mscara de fase destina-se a suprimir a intensidade de sinal em reas onde
a fase assume determinados valores (Figura A.7). Por exemplo, se a fase de
interesse negativa, a mscara ser f(x):
f (x) = [ + (x)]/, para < (x) < 0
(A.8)
f (x) = 1, para(x) > 0
(A.9)
Uma vez que a mscara elevada quarta potncia, a veia que tem
uma fase de /2 e um valor de mscara de 0,5 ser 1/16 e, portanto, essa
veia ser suprimida.
122
Figura A.7: Representao pictrica do processo de gerao da mscara

da fase. A)Perfil de fase de uma imagem de fase filtrada. B) Perfil
correspondente da mscara criada a partir de A. GM indica que a substncia
cinzenta, WM a substncia branca, CSF o lquido encfalo raquidiano e vein
uma veia. Imagem obtida de Haacke et al. (2009b).
Casando-se imagens de magnitude e de fase

A mscara de fase pode ser aplicada qualquer nmero de vezes
imagem original de magnitude rhomag (x) para criar a imagem de SWI.
SW I(x) = f m mag (x)
(A.10)
O nmero m de multiplicaes da mscara de fase escolhido de

maneira a otimizar a relao contraste rudo da imagem SWI . A Figura A.8
apresenta a obteno da imagem SWI com o uso de uma mscara negativa m
igual 4.
123
Figura A.8: Obteno da imagem SWI. A, imagem de magnitude. B, imagem

de fase filtrada passa alta. C, imagem de SWI (m = 4). Imagem obtida de
Haacke et al. (2009b).
Finalmente, caso queira visualizar o sistema vascular pode-se fazer

a projeo de intensidade mnima (mIP). Consiste na escolha de um limiar
de intensidade de sinal para realizar a projeo de vrios cortes sobre um
resultante. Na Figura A.9 mostra os dados de projeo em relao a imagem
original de magnitude e as imagens processadas SWI.
Figura A.9: Imagem mIP das imagens de magnitude e SWI. mIP realizado ao
longo de 7 sees (14 milmetros). H uma perda da intensidade do sinal na
parte frontal do crebro, mas por outro lado a visibilidade das veias muito
melhor em B. Imagem obtida de Haacke et al. (2009b).
124
A Figura A.10 resume o processamento da imagem SWI :
Figura A.10: Diagrama das etapas do processamento da imagem de SWI.

Imagem modificada de Haacke e Reichenbach (2011).
Apndice
Teorema da Convoluo
Dada as funes f(x), g(y) e a respectiva convoluo h(z):
Figura B.1: A convoluo de duas funes f(x) e g(x).
A convoluo de f(x) e g(x) (f(x) * g(x)) pode ser escrita como a integral
abaixo:
f (x)g(z x)dx
h(z) =
(B.11)
A transformada de Fourier da convoluo f(x)*g(x), dada por h(k) (0 ):
1
h (k) =
(2)
1
h (k) =
(2)
dze
ikz
Z
f (x)g(z x)dx
g(z x)eikz dz
(B.12)
dxf (x)
Z
(B.13)
Tomando u = z - x na segunda integral, temos:
1
h (k) =
(2)
0
Z
dxf (x)
125
g(u)e
ik(u+x)

du
(B.14)
126
1
h (k) =
(2)
0
h0 (k) =
f (x)e
ikx
dx
g(u)eiku du
1
x (2)f 0 (k)x( 2)g 0 (k) = (2)f 0 (k)g 0 (k)
(2)
h0 (k) =
(B.15)
(2)f 0 (k)g 0 (k)
h0 (k) = T F [f (x)g(x)]
T F [f (x) g(x)] =
(2))f 0 (k)g 0 (k)
(B.16)
(B.17)
(B.18)
(B.19)
Portanto a transformada de Fourier da convoluo das funes

igual o produto das transformadas de Fourier das funes separadamente
e multiplicado por (2 )1/2, este resultado descrito como teorema da
convoluo. A forma inversa tambm pode ser provada, onde a transformada
de Fourier do produto das funes resulta no seguinte:
T F [f (x)g(x)] =
1
f 0 (k) g 0 (k)
(2)
(B.20)
Todo o texto acima foi construdo com base no livro de (RILEY;

HOBSON; BENCE, 2006).
Anexo
Termo de consentimento livre e

esclarecido para sujeito controle
TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO (PARA
SUJEITO SAUDVEL)
Este documento um termo de consentimento, no qual so abordadas todas as
informaes sobre o estudo abaixo. Sinta-se a vontade para fazer perguntas;
caso concorde em participar, por favor, assine.
Ttulo da Pesquisa: Quantificao de Deposio de Ferro no Crebro
usando Ressonncia Magntica
Fsico Mdico:
Jeam Haroldo Oliveira Barbosa.
Departamento
de Fsica, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto,

Universidade de So Paulo. Telefone: 16-3602-3721 Telefone do Comit de
tica em Pesquisa: 16-3602-4811
Antes de receber as informaes sobre o estudo, importante tomar
conhecimento das seguintes condies:
A sua participao completamente voluntria.

livre para decidir ou no participar do estudo quando quiser sem
perder o direito de receber os cuidados mdicos de rotina ou quaisquer outros
benefcios aos quais tenha direito na assistncia mdica regular na clnica
habitual qualquer que seja sua deciso.
Voc est sendo convidado a participar de uma pesquisa que tem como
objetivo determinar a tcnica de Imagem de Ressonncia Magntica mais
127
128
sensvel para quantificar acmulo de ferro no crebro.
Pesquisas cientficas comprovam que as pessoas acumulam ferro ao
longo da vida, alm disso, pacientes com Parkinson acumulam ferro em
maiores concentraes do que pessoas saudveis.
Como dito acima, esta
pesquisa ir determinar a tcnica de exame de Ressonncia Magntica mais

sensvel para acmulo de ferro no crebro e, portanto o seu perfil pertence
a um dos grupos a ser pesquisado: sujeitos saudveis ou de pacientes com
Parkinson, ambos com idade acima de 50 anos. No seu caso, voc pertence ao
grupo de sujeitos saudveis.
Caso decida participar do estudo, voc precisar comparecer ao
Hospital das Clnicas de Ribeiro Preto apenas uma vez, em um dia a
combinar, que depender principalmente da disponibilidade do tcnico que
far o exame e da mquina de Ressonncia Magntica do Hospital das Clnicas
para o estudo.
Realizar um exame de ressonncia magntica normal de durao total
de 20 minutos.
Este exame realizado por uma mquina de ressonncia
magntica, que produz um campo magntico que passa pelo corpo sem causar
efeitos. Durante o exame no se sente dor. O exame no traz nenhum prejuzo
para a sua sade.
Durante o estudo, voc dever permanecer imvel dentro da mquina
de Ressonncia Magntica Nuclear. Os desconfortos previstos so: eventuais
incmodos devido ao seu posicionamento e cansao devido ao barulho durante
a realizao do exame.
a qualquer momento.
Voc poder solicitar o encerramento do exame
Dependendo da roupa que voc estiver usando (se
ela possuir botes ou zper) dever trocar por um roupo do hospital para
garantir o seu conforto e no gerar nenhum artefato (falha) na aquisio das
imagens. Durante o exame, a mquina far um barulho relativamente alto.
Ser fornecido um protetor auricular a fim de reduzir esse barulho.
Voc no ter nenhum benefcio direto ao participar desta pesquisa
e no receber laudo mdico que traga qualquer informao sobre seu
129
estado de sade. O benefcio esperado com a realizao desta pesquisa a
produo de novos conhecimentos cientficos. Ambos os sujeitos, saudveis e
pacientes, tero acesso ao resultado final da pesquisa por meio de notificao
(e-mail, telefone, ou carta) da publicao em algum veculo de divulgao e
comunicao de acesso livre. Ressaltando que haver sigilo total dos dados
pessoais dos participantes.
Esses dados sero vistos e analisados apenas pelos pesquisadores
responsveis por este estudo. Os resultados podero ser comunicados a outros
pesquisadores, mas sua identidade ser mantida em sigilo. Nenhum dado que
possa revelar sua identidade estar disponvel para quaisquer pessoas ou em
quaisquer textos ou publicaes.
Os dados deste estudo so mantidos em um banco de dados do CENTRO
DE CINCIAS DAS IMAGENS DA FSICA MDICA, caso estes dados sejam
consultados para outros estudos o CEP ser consultado para ver a necessidade
de se assinar um novo termo de consentimento ou no.
Caso voc tenha perguntas, dvidas ou qualquer outra informao a
respeito deste estudo procurar o pesquisador Jeam Haroldo Oliveira Barbosa,
tel. 3602-3721. Sobre questes ticas procurar o Comit de tica em Pesquisa
tel. 3602-4811.
130
ASSINATURAS
Os detalhes deste estudo foram explicados e relato que tive a
oportunidade de fazer todas as perguntas aos pesquisadores. Li o Termo de
Consentimento Livre e Esclarecido e entendi as informaes nele contidas,
portanto concordo voluntariamente em participar deste estudo e assino
abaixo:
Nome do Sujeito Saudvel
Assinatura do Sujeito
Saudvel
(impresso ou em letra de forma)
Data:
Nome da Testemunha
Assinatura da Testemunha

Data:
Declarao do Pesquisador Principal

Declaro que revisei este estudo e o formulrio de consentimento com o
participante. Segundo meu entendimento, ele compreendeu os objetivos, os
procedimentos, riscos e benefcios do estudo.
Nome do Pesquisador Principal

Principal
Data:
Assinatura do Pesquisador
Anexo
Termo de consentimento livre e

esclarecido para sujeito paciente
TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO (PARA
SUJEITO PACIENTE)
Este documento um termo de consentimento, no qual so abordadas todas as
informaes sobre o estudo abaixo. Sinta-se a vontade para fazer perguntas;
caso concorde em participar, por favor, assine.
Ttulo da Pesquisa: Quantificao de Deposio de Ferro no Crebro
usando Ressonncia Magntica
Fsico Mdico:
Jeam Haroldo Oliveira Barbosa.
Departamento
de Fsica, Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto,

Universidade de So Paulo. Telefone: 16-3602-3721 Telefone do Comit de
tica em Pesquisa: 16-3602-4811
Antes de receber as informaes sobre o estudo, importante tomar
conhecimento das seguintes condies:
A sua participao completamente voluntria.

livre para decidir ou no participar do estudo quando quiser sem
perder o direito de receber os cuidados mdicos de rotina ou quaisquer outros
benefcios aos quais tenha direito na assistncia mdica regular na clnica
habitual qualquer que seja sua deciso.
Voc est sendo convidado a participar de uma pesquisa que tem como
objetivo determinar a tcnica de Imagem de Ressonncia Magntica mais
131
132
sensvel para quantificar acmulo de ferro no crebro.
Pesquisas cientficas comprovam que as pessoas acumulam ferro ao
longo da vida, alm disso, pacientes com Parkinson acumulam ferro em
maiores concentraes do que pessoas saudveis.
Como dito acima, esta
pesquisa ir determinar a tcnica de exame de Ressonncia Magntica mais

sensvel para acmulo de ferro no crebro e, portanto o seu perfil pertence
a um dos grupos a ser pesquisado: sujeitos saudveis ou de pacientes com
Parkinson, ambos com idade acima de 50 anos. No seu caso, voc pertence ao
grupo de pacientes com Parkinson.
Caso decida participar do estudo, voc precisar comparecer ao
Hospital das Clnicas de Ribeiro Preto apenas uma vez, em um dia a
combinar, que depender principalmente da disponibilidade do tcnico que
far o exame e da mquina de Ressonncia Magntica do Hospital das Clnicas
para o estudo.
Realizar um exame de ressonncia magntica normal de durao total
de 20 minutos.
Este exame realizado por uma mquina de ressonncia
magntica, que produz um campo magntico que passa pelo corpo sem causar
efeitos. Durante o exame no se sente dor. O exame no traz nenhum prejuzo
para a sua sade.
Durante o estudo, voc dever permanecer imvel dentro da mquina
de Ressonncia Magntica Nuclear. Os desconfortos previstos so: eventuais
incmodos devido ao seu posicionamento e cansao devido ao barulho durante
a realizao do exame.
a qualquer momento.
Voc poder solicitar o encerramento do exame
Dependendo da roupa que voc estiver usando (se
ela possuir botes ou zper) dever trocar por um roupo do hospital para
garantir o seu conforto e no gerar nenhum artefato (falha) na aquisio das
imagens. Durante o exame, a mquina far um barulho relativamente alto.
Ser fornecido um protetor auricular a fim de reduzir esse barulho.
Voc ter como benefcio a aquisio da imagem do exame de
Ressonncia Magntica Nuclear, porm no receber laudo, que poder ser
133
anexado ao meu pronturio do Hospital das Clnicas da FMRP, sendo um
dado a mais para o mdico considerar em seu diagnstico, tratamento e
prognstico.
Ambos os sujeitos, saudveis e pacientes, tero acesso ao
resultado final da pesquisa por meio de notificao (e-mail, telefone, ou carta)

da publicao em algum veculo de divulgao e comunicao de acesso livre.
Ressaltando que haver sigilo total dos dados pessoais dos participantes.
Esses dados sero vistos e analisados apenas pelos pesquisadores
responsveis por este estudo. Os resultados podero ser comunicados a outros
pesquisadores, mas sua identidade ser mantida em sigilo. Nenhum dado que
possa revelar sua identidade estar disponvel para quaisquer pessoas ou em
quaisquer textos ou publicaes.
Os dados deste estudo so mantidos em um banco de dados do CENTRO
DE CINCIAS DAS IMAGENS DA FSICA MDICA, caso estes dados sejam
consultados para outros estudos o CEP ser consultado para ver a necessidade
de se assinar um novo termo de consentimento ou no.
Caso voc tenha perguntas, dvidas ou qualquer outra informao a
respeito deste estudo procurar o pesquisador Jeam Haroldo Oliveira Barbosa,
tel. 3602-3721. Sobre questes ticas procurar o Comit de tica em Pesquisa
tel. 3602-4811.
134
ASSINATURAS
Os detalhes deste estudo foram explicados e relato que tive a
oportunidade de fazer todas as perguntas aos pesquisadores. Li o Termo de
Consentimento Livre e Esclarecido e entendi as informaes nele contidas,
portanto concordo voluntariamente em participar deste estudo e assino
abaixo:
Nome do Paciente
Assinatura do Paciente

Data:
Nome da Testemunha
Assinatura da Testemunha

Data:
Declarao do Pesquisador Principal

Declaro que revisei este estudo e o formulrio de consentimento com o
participante. Segundo meu entendimento, ele compreendeu os objetivos, os
procedimentos, riscos e benefcios do estudo.
Nome do Pesquisador Principal

Principal
Data:
Assinatura do Pesquisador
Anexo
Aceite do Comit de tica da

FFCLRP
135
136
Figura C.1: Aceite do comit de tica da FFCLRP
Anexo
Aceite do Comit de tica do

Hospital das Clnicas
137
138
Figura D.1: Aceite do comit de tica do HC

Quantificação Da Deposição de Ferro No Cérebro Usando Ressonância Magnética: Um Estudo em Pacientes Com Doença de Parkinson.

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Quantificação Da Deposição de Ferro No Cérebro Usando Ressonância Magnética: Um Estudo em Pacientes Com Doença de Parkinson.

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Universidade de So Paulo

FFCLRP - Departamento de Fsica

JEAM HAROLDO OLIVEIRA BARBOSA

Quantificao da deposio de ferro no crebro

Dissertao apresentada Faculdade de

JEAM HAROLDO OLIVEIRA BARBOSA

Quantificao da deposio de ferro no crebro

Dissertao apresentada Faculdade de

Nome: Barbosa, Jeam Haroldo Oliveira

da Universidade de So Paulo, como

parte das exigncias para a obteno do ttulo

Sem a sua colaborao este trabalho no teria sentido para a

Dissertao (Mestrado - Programa de

Ps-graduao em Fsica aplicada Medicina e Biologia) - Faculdade de

A capacidade do ferro, presente no corpo humano, em aceitar e

Este estresse aparece

como possvel causa de doenas neurodegenerativas, caracterizadas

Detectar e quantificar a deposio de ferro in

vivo no crebro torna-se de extrema relevncia para entender diversas

Mapas de relaxometria (R2 e

R2*) e susceptibilidade (QSM) foram estimados a partir de imagens

O mapa QSM apresentou

maior sensibilidade e especificidade para diferenciar pacientes com

que os valores de sususceptibilidade magntica obtidos com imagens

3. Relaxometria. 4. Parkinson 5. Ferro.

However, an excess of the metal in

the brain can produce deleterious effects through the production of

Were studied a group of 16 controls and 14 patient

The analyse of multiple relaxation time T2

4. Parkinsons Disease 5. Iron.

1.2 Representao da molcula de mioglolbina . . . . . . . . . . . . .

1.4 Imagem de microscopia eletrnica dos ncleos de ferritina e

1.5 Processo de transporte de ferro para o interior da clula partindo

1.6 Cortes transversais contendo os gnglios da base

1.7 Estresse oxidativo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

2.8 Dependncia do valor de R2* com o avano da idade. . . . . . . . 34

4.1 Exemplo de imagens de uma fatia da regio dos ncleos da base

4.3 Etapas para o processamento do mapa de susceptibilidade

5.7 Correlao linear entre R2* e nas diferentes regies avaliadas

5.8 Correlao linear entre R2 com R2* nas diferentes regies

5.19Curva ROC para os mapas de R2, R2* e QSM da regio do globo

A.1 Esboo da sequncia de Gradiente Eco. . . . . . . . . . . . . . . . 117

A.3 Representao do sinal complexo.

A.4 Mscara de filtro espacial com coeficientes arbitrrios. . . . . . . 119

A.8 Obteno da imagem SWI. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 123

C.1 Aceite do comit de tica da FFCLRP

1.2 Contedo de ferro total por unidade de peso de tecido mido em

1.5 Regies cerebrais que apresentaram aumento significativo das

4.1 Principais informaes sobre os pacientes com doena de

Faculdade de Filosofia Cincias e Letras de Ribeiro Preto.

Tempo de relaxao transversal.

Tempo de relaxao transversal estrela.

Taxa de relaxao transversal.

Taxa de relaxao transversal estrela.

Sigla em ingls de Susceptibility Weighted Imaging.

Transportador de metal divalente 1.

Apotransferrina e receptores de transferrina.

Sigla em ingls de cido ribonucleco citoplasmtico.

Regulador de protenas com ferro.

Sigla em ingls de espectroscopia por absoro atmica.

Sigla em ingls de espectrofotometria por absoro atmica.

Sigla em ingls de anlise por ativao com nutrons.

Sigla em ingls de plasma indutivamente acoplado.