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CIENCIAS DE LA VIDA Y AGROPECUARIA

INGENIERA EN BIOTECNOLOGA

INFORME DE BIOLOGA VEGETAL II

NIVEL: 3er NIVEL


CROMATOGRAFA EN PAPEL DE PIGMENTOS FOTOSINTTICOS

ABAD MIRIAM
ARMAS CHRISTIAN
CHUQUIRIMA RENATO
CRUZ NATHALY
EGAS MA.CRISTINA
TAPIA JENNIFFER
SIGUENZA SASHA

1. Antecedentes
La fotosntesis es un proceso que realizan los seres vivos que poseen en una clula pigmentos
fotosintticos. Estos seres son capaces de absorber la luz solar y transformarla en una energa
qumica, que posteriormente estos seres utilizaran para formar materia orgnica a partir de
inorgnica. Los principales grupos de pigmentos vegetales son las clorofilas que poseen un color
verde y los carotenoides que poseen colores del amarillo al naranja. Estos pigmentos los
encontramos en los tilacoides de los cloroplastos de las plantas superiores y de las algas verdes.
Las clorofilas a y b son muy similares estructuralmente. El grupo metilo de la clorofila a
hace que tenga mayor solubilidad en solventes no polares a comparacin de la clorofila
b. (vase Ilustracin 1)
Los carotenoides tienen 40 tomos de carbono y se dividen en carotenos, que solamente tienen
carbono e hidrogeno y las xantofilas que adems de poseer carbono e hidrogeno tambin poseen
tomos de oxgeno. El Oxigeno se encuentra se encuentra en los extremos de la molcula como
grupos hidroxilo que hacen que tengan ms afinidad por los solventes polares que los carotenos.
Por lo que el mtodo ms eficaz y ms utilizado para poder conocer la cantidad de pigmentos
fotosintticos es la cromatografa que se basa en la diferencia de afinidad que tienen los
componentes de una mezcla de tal manera que al introducir una tira de papel poroso en esa
mezcla el disolvente arrastra con distinta velocidad a los pigmentos segn la solubilidad que
tengan, permitiendo identificarlos perfectamente segn su color. Aparecern, por tanto, varias
bandas de diferentes colores, que poseern diferente grosor, dependiendo de la abundancia del
pigmento en la disolucin.

2. Objetivos
i. Objetivo general
Extraer los diferentes pigmentos fotosintticos de un extracto mediante cromatografa en papel.

ii. Objetivos especficos

Identificar los pigmentos fotosintticos que se encuentran en la mezcla.

Interpretar los resultados obtenidos comparndolos con bibliografa confiable.

Aplicar las normas de laboratorio adecuadas.

Calcular Rf utilizando las mediciones adquiridas en la prctica para cada hoja analizada.

5. Resultados
Se fotografo el cromatograma y compar con otros cromatogramas
reportados en libros o internet donde se haya usado un solvente
similar
Se calcul el valor Rf para cada banda distinguible dividiendo la
distancia desde la base del cromatograma hasta cada banda para la
distancia recorrida por el frente del solvente (8cm). (Vase Ilustracin
3)
Se registr el tiempo que le tom al solvente alcanzar la lnea a 8cm
de la muestra. Una vez que el solvente lleg a este punto, se retir la
tira de papel del vaso de precipitacin y evapor cualquier residuo de
solvente en la campana de extraccin
Se agreg acetona (o metanol) al vaso de precipitacin hasta un nivel donde
apenas toc el extremo cortado en punta de la tira de papel filtro.Se coloc la
tira de papel con la muestra en el vaso de precipitacin que contiene el
solvente, el solvente ascendi por el papel por capilaridad y empez a
separar la muestra. (Vase Ilustracin 2)

Se prepar las tiras de papel filtro, en la lnea que se marc 1cm


desde la punta y se coloco la muestra. Se adhiri la tira de papel filtro
a la caja Petri por el extremo recto. (Vase Ilustracin 1)

5
4
3
2
1

4. Metodologa
Reactivos
Acetona o
metanol

Material
vaso de
precipitacin
cajas petri
papel filtro
cronmetro

hojas de
diferentes
especies de
plantas.

Material
orgnico

Campana de
extraccin

Equipos

Materiales
3. Materiales

Concluir que tipo de pigmento es el que predomina en las hojas analizadas.

Pigmento
Fotosintt
Papel Filtro
ico
Carotenos
1
2
Xantofilia
3
4
Clorofila
5 a
6
Clorofila
7 b

Papel Papel
Papel Papel
Papel
Papel Papel
filtro
filtro 2 filtro
filtro 4 filtro 5 filtro filtro
1
6 Clculo
7
Distancia del 3
Distancia del

(cm)7,8
7,2 pigmento
7,6 cm
cm
6,5
cm
0
cm
0

7.2
7.6
7,1 cm
7.8
6.8
77.5
cm
6.8
6,8
6.8cm

cm

Fase
estaci
onara

Papel
Filtro

N de
Diluye
Mues
nte
tra
1
2
3
Aceto
4
na
5
6
7

cm
6,7
cm
6,4
cm
5.4
cm

Muestra
Escancel
Col lombarda
Limn
Croto amarillo
Lechero rojo
Remolacha
Rosa

solvente
0 cm (cm)7,5
7.5
cm
7.8
6,8 cm 6,2 cm
8
8
6 8
cm 0 cm
8
5,7
0 cm
7.5

6,8

0 cm

0.96
cm 0.974
6,5
6.8
0.975
cm 0.85
cm
6 cm
6,4
0.938
0.85cm
0 cm
0 cm
0.907

cm

Rf (Factor de reflexin)
Xantof Caroteno
A
B
ila
s
7.2 cm
6.5 cm
6, cm
7cm
7.1cm
7.6cm
5.4 cm 6.4cm 6.7cm
7.8cm
5.7 cm
6cm
6.8 cm
6.2 cm
7.5 cm
6cm
6.5cm
6.8cm
6.4 cm
6.8cm

Color
reflejado
Morado
Morado
Verde
Amarillo
Marrn
Verde Oscuro
Verde claro

6. Discusin
Los pigmentos fotosinteticos son una mezcla de sustancias , a las cuales podemos separar para su
respectiva identificacin , utilizando una tecnica quimica llamada cromatografia .Esta tcnica se
basa en el grado de solubilidad de cada pigmento, al ser absorvidos y distribuidos en el papel
filtro; con la ayuda de algn solvente.

La acetona es un solvente que permite la separacion de los pigmentos, esto se debe a que "lo
semejante disuelve a lo semejante"; es decir como los pigmentos son sustancias organicas, se
necesita usar un disolvente organico (acetona).
Segn (Campbell & Reece, 2007) nos menciona que siempre uno de los pigmentos es ms
abundante y enmascara a los dems que no se pueden observar.En nuestra practica se pudo
apreciar cuando se da la separacin de los pigmentos en la hoja de papel de filtro; puesto que se
empiezan a aparecer varias bandas coloreadas, que correspenderan a cada tipo de pigmento; esto
se deber al grado diferente de solubilidad, el cual permite su separacin ascendiendo por
capilaridad por la tira de papel de filtro ;los ms solubles se desplazaran a mayor velocidad, pues
acompaaran fcilmente al disolvente a medida que este va ascendiendo, mientras que las menos
solubles se desplazaran ms lentamente.
Al formarse las bandas de colores se logro determinar que tipo de pigmento y cuantos se
encontraban presentes en cada hoja.Encontramos que en nuestras muestras de hojas, todas tenian
presente el pigmento xantofila y tambin otros, que en orden de menor a mayor solubilidad en
acetona son: la clorofila b, clorofila a, xantofila y carotenos.
Segn (ArgenBio, 2007) el color que presenta un determinado tejido u rgano vegetal, depende
del predominio de un pigmento o de la combinacin de varios de ellos. A simple vista el color
verde es el mayoritario en las especies vegetales. Esta coloracin es debida a la presencia de dos
de los principales pigmentos vegetales, la clorofila a y la clorofila b, que se encuentran en
prcticamente todas las plantas con semillas, los helechos, musgos y algas. La sntesis de la
clorofila depende de la presencia de la luz. En la prctica se apreci los pigmentos: clorofila a y b
(col lombarda, croto amarillo, limn), debido a la formacin de una bandas de color verde
azulado y verde oliva respectivamente.

Segn (ArgenBio, 2007) Otros pigmentos tambin estn presentes en las plantas verdes, pero
enmascarados por la clorofila, ya que el tipo de pigmento y su concentracin en una planta
pueden ir variando segn factores externos como las condiciones climticas o al estrs originado
por el ataque de algn patgeno. Esto explica la variacin de color en especies forestales a lo
largo de las estaciones del ao. En el otoo cuando la energa lumnica se reduce, disminuye
tambin la produccin de clorofila, por lo cual se manifiestan los pigmentos naranja, morado y
amarillo que estaban enmascarados por la clorofila, ahora ausente. En nuestra practica se
apreciaron los pigmentos xantofila (en todas las muestras de hoja) con una banda de color
amarillo y carotenos (escancel, col lombarda, limos, lechero rojo, remolacha, rosa) banda de
color anaranjado; pero en nuestro caso los el color de estos pigmentos se deben a la exposicin de
luz en la que se encontraban las plantas, ya que en nuestro pas no tenemos la poca de otoo.
Asociados con la clorofila, existen tambin en los cloroplastos otra clase de pigmentos
denominados accesorios que forman parte del complejo antena de la fotosntesis, de color
amarillo y amarillo-anaranjado, denominados xantfilas y carotenoides, respectivamente. Estos
pigmentos se alojan adems en otros plstidos, dando el color caracterstico de las hojas, flores o
frutos.

7. Conclusiones

8. Bibliografa

Campbell, N. A., & Reece, J. B. (2007). Biologa. Ed. Mdica Panamericana.

Margarita, C. O. (2006). Manual de Practicas de Fotosintesis. UNAM.

Gonzalez, M. P., Caballero, M., Olivares, E., Santiesteban, A., & Serrano, M. P. (2003).
Practicas de Laboratorio y Aula . Madrid: NARCEA S.A.

Graca, R. R., & Ortega, M. C. (2006). Manual de practicas de Fotosintesntesis. Mxico:


Universidad Nacional Autonoma de Mexico.

Trabajos citados
ArgenBio. ( 2007). Los pigmentos en la naturales. Obtenido de
http://porquebiotecnologia.com.ar/index.php?action=cuaderno&opt=5&tipo=1&note=122

9. Anexos

Ilustracin 1 Esquema de la estructura qumica de las clorofilas a y b

Ilustracin 2 Papel fitro con la muestra de hoja adherido a la caja petri y tocando levemente el solvente
Ilustracin 3 Separacin de la muestra a causa del solvente

Ilustracin 4 Registro de tiempo y medicin de distancia desde la base y la distancia recorrida para el clculo de Rf