2.6.- Bibliografa
2.1.1. El ADN
El ADN es un cido nucleico formado por nucletidos. Cada nucletido consta de tres
elementos:
a. un azcar: desoxirribosa en este caso (en el caso de ARN o cido ribonucleico,
el azcar que lo forma es una ribosa),
b. un grupo fosfato y
c. una base nitrogenada
Las bases nitrogenadas que constituyen parte del ADN forman puentes de hidrgeno
entre ellas, respetando una estricta complementariedad: A slo se aparea con T (y
viceversa) mediante 2 puentes de hidrgeno, y G slo con C (y viceversa) mediante 3
puentes de hidrgeno.
Los extremos de cada una de las hebras del ADN son denominados 5-P (fosfato) y 3
OH (hidroxilo) en la desoxirribosa. Las dos cadenas se alinean en forma paralela, pero
en direcciones inversas (una en sentido 5 3 y la complementaria en el sentido
inverso), pues la interaccin entre las dos cadenas est determinada por los puentes
de hidrgeno entre sus bases nitrogenadas. Se dice, entonces, que las cadenas
son antiparalelas.
La replicacin siempre se produce en sentido 5' 3', siendo el extremo 3'-OH libre el
punto a partir del cual se produce la elongacin del ADN. El ADN polimerasa slo
funciona en esta direccin, lo que plantea un problema, y es que una de las cadenas
debera ser sintetizada en direccin 3' 5'.
La cadena que se sintetiza en el mismo sentido que avanza la horquilla (5' 3') de
replicacin se denomina hebra adelantada y se sintetiza de forma continua por la ADN
polimerasa, mientras que la que se sintetiza en sentido contrario al avance se
denomina hebra retrasada, puesto que su sntesis se realiza de forma discontinua
teniendo que esperar a que la horquilla de replicacin avance para disponer de una
cierta longitud de ADN molde. Esto se debe a que la cadena debe avanzar en la
direccin 3' 5' y se sintetiza en tramos cortos, o fragmentos de Okazaki a partir de
los cuales el ADN polimerasa se encarga de continuar la sntesis de la cadena en
direccin 5' 3'. Estos fragmentos son formados gracias a cebadores de ARN
sintetizados por la ARN primasa. El ADN ligasa se encarga de unir los fragmentos de
Okazaki.
2.1.2.- El ARN
El cido ribonucleico es un cido nucleico formado por una cadena de ribonucletidos.
Est presente tanto en las clulas procariotas como en las eucariotas, y es el nico
material gentico de ciertos virus. El ARN celular es lineal y de hebra sencilla, pero en
el genoma de algunos virus es de doble hebra.
En los organismos celulares desempea diversas funciones. Es la molcula que dirige
las etapas intermedias de la sntesis proteica; el ADN no puede actuar solo, y se vale
del ARN para transferir esta informacin vital durante la sntesis de protenas. Varios
tipos
de
ARN
regulan
la expresin
gnica,
mientras
que
otros
tienen
Aunque el ARN suele formar cadenas simples, a veces puede plegarse como
resultado de la presencia de regiones cortas con apareamiento intramolecular de
bases que dan lugar a la estructura secundaria del ARN.
Otra caracterstica estructural del ARN que lo
distingue del ADN es la presencia de un grupo hidroxil
en la posicin 2 de la ribosa que hace que la hlice
las dobles hlices del ARN tengan una conformacin
distinta a la del ADN y adems, que en las zonas
donde no se forma la doble hlice haya una mayor
susceptibilidad a la hidrlisis qumica.
La estructura terciaria del ARN es el resultado del apilamiento de bases y de
los enlaces por puente de hidrgeno entre diferentes partes de la molcula.
Puesto que el ARN es muy verstil se encuentra una gran cantidad de tipos de ARN
cada uno con distintas funciones:
ARN reguladores
ARN de interferencia
Etc...
biosntesis
de
ARN
est
catalizada
normalmente
por
la enzima ARN
polimerasa que usa una hebra de ADN como molde, proceso conocido con el nombre
de transcripcin.
Por tanto,
todos
los
ARN celulares
provienen
de copias
La
transcripcin
comienza
con
el
continuacin,
la ARN
5'
(B),
molcula
sintetizando
complementaria
una
de
elongacin,
el
crecimiento de la molcula de
ARN se produce en sentido 5'
3'. La secuencia de nucletidos
del ADN determina tambin dnde
acaba la sntesis del ARN, gracias a
que posee secuencias caractersticas
que la ARN polimerasa reconoce como
seales de terminacin.
ARN-dependientes que
equivalente
letras
en
el
cdigo
en
el
ADN
y citosina (C)
en el ARN.
Debido a esto, el nmero de codones posibles es 64,
de los cuales 61 codifican aminocidos (siendo
adems uno de ellos el codn de inicio, AUG) y los
tres restantes son sitios de parada (UAA, llamado
ocre; UAG, llamado mbar; UGA, llamado palo).
del
ADN,
las
modificaciones
postraduccin
que
sufren
Estructura de un ribosoma
Iniciacin de la traduccin
ribosmica
mayor,
activo.
Todos
estos
el
AUG,
que
con
el
El complejo ribosomal posee dos sitios de unin o centros. El centro peptidil o centro
P, donde se sita el primer aminoacil-ARNt y el centro aceptor de nuevos aminoacilARNt o centro A. El carboxilo terminal (-COOH) del aminocido iniciado se une con el
amino terminal (-NH2) del aminocido siguiente mediante enlace peptdico. Esta unin
es catalizada por la enzima peptidil transferasa. El centro P queda pues ocupado por
un ARNt sin aminocido. El ARNt sin aminocido sale del ribosoma. Se produce
la translocacin ribosomal. El dipeptil-ARNt queda ahora en el centro P. Todo ello es
catalizado por los factores de elongacin (FE) y precisa GTP. Segn la terminacin del
tercer codn, aparece el tercer aminoacil-ARNt y ocupa el centro A. Luego se forma el
tripptido en A y posteriormente el ribosoma realiza su segunda translocacin. Estos
pasos se pueden repetir mltiples veces, hasta cientos de veces, segn el nmero de
aminocidos que contenga el polipptido. La traslocacin del ribosoma implica el
desplazamiento del ribosoma a lo largo de ARNm en sentido 5'-> 3'.
10
Los codones UAA, UAG y UGA son seales de paro que no especifican ningn
aminocido y se conocen como codones de terminacin; determinan el final de la
sntesis proteica. No existe ningn ARNt cuyo anticodn sea complementario de
dichos codones y, por lo tanto, la biosntesis del polipptido se interrumpe.
Una vez finalizada la sntesis de una protena, el ARN mensajero queda libre y puede
ser ledo de nuevo. De hecho, es muy frecuente que antes de que finalice una protena
ya est comenzando otra, con lo cual, una misma molcula de ARN mensajero, est
siendo utilizada por varios ribosomas simultneamente.
2.4.- Mutaciones
En Gentica se
denomina mutacin
gentica, mutacin
molecular o mutacin
puntual a los cambios que alteran la secuencia de nucletidos del ADN. Estas
mutaciones en la secuencia de ADN pueden llevar a la sustitucin de aminocidos en
las protenas resultantes. Un cambio en un solo aminocido puede no ser importante si
es conservativo y ocurre fuera del sitio activo de la protena. En otro caso puede tener
consecuencias severas en la funcionalidad de las protenas sintetizadas.
11
Espontneas
o
Radiaciones de fondo
Errores en la replicacin
Inducidas
o
Anlogos
de
bases
de
cidos
nucleicos
(bromouracilo,
alcaloides, drogas,...)
o
Virus
Bacterias
Etc.
Los elementos que permiten estas modificaciones son: las enzimas de restriccin, los
vectores y la capacidad de bacterias para aceptar ADN ajeno.
12
Enzimas
de
restriccin
endonucleasas.
Estas enzimas tienen la capacidad de
reconocer una secuencia determinada
de nucletidos y extraerla del resto de la
cadena. Esta secuencia puede volver a
colocarse con la ayuda de otra clase de
enzimas, las ligasas. Anlogamente, la
enzima de restriccin se convierte en
una "tijera de ADN", y la ligasa en el
"pegamento". Por lo tanto, es posible
quitar un gen de la cadena principal y en
su lugar colocar otro. Un ejemplo es la
escherichia coli.
de
transformacin
de
una
porcin
de
ADN
en
un
vector
se
denomina clonacin.
Clula husped
Debe ser una clula seleccionada para que sea capaz de mantener el vector de
clonacin con el material gentico externo de forma estable a lo largo de mltiples
generaciones,
proporcione
una
elevada
velocidad
de
crecimiento
bajos
requerimientos nutritivos.
13
ADN, que se integra en el genoma husped y se replica junto con el, generando
nuevos virus.
2.5.2.- Secuenciacin
molde
de
ADN
de
cadena
sencilla,
un cebador de
ADN,
una ADN
14
la
formacin
del enlace
fosfodister entre
dos
se
aaden
concentraciones
lo
al molde.
15
proceso
ms
comn
particular
segmento
de
o
un
un
cido
propiedades
electroactivas,
desarrollado
se
han
sistemas
electroqumicos
de
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2.6.- Bibliografa
Diapositivas de la asignatura
http://aportes.educ.ar/biologia/nucleo-teorico/estado-del-arte/el-libro-de-la-vida-eladn/estructura_del_adn.php
http://es.wikipedia.org/wiki/Replicaci%C3%B3n_de_ADN
http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_ribonucleico
http://es.wikipedia.org/wiki/Bios%C3%ADntesis_proteica
http://es.wikipedia.org/wiki/Mutaci%C3%B3n_gen%C3%A9tica
http://www.arrakis.es/~ibrabida/vigcorte.html
http://www.monografias.com/trabajos5/ingen/ingen.shtml
http://es.wikipedia.org/wiki/Ingenier%C3%ADa_gen%C3%A9tica
http://es.wikipedia.org/wiki/Transcriptasa_inversa
http://es.wikipedia.org/wiki/Secuenciaci%C3%B3n_de_ADN
http://www.dignabiotech.com/cas/r_d.DNA.asp
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