ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

INTRODUCCION

La motivacin para la realizacin de este estudio fue la importancia de la digestin

como uno de los procesos biolgicos ms importantes para un ser vivo. Porque los
seres humanos, al igual que todos los organismos unicelulares y pluricelulares
dependemos de este proceso para poder adquirir nutrientes, los cuales, siendo
sintetizados y asimilados, permiten al organismo realizar funciones vitales de
nuestro cuerpo y de cada clula que la constituye
El trabajo de una enzima puede verse afectado por diversos factores, desde el pH,
la temperatura, iones metlicos, y la concentracin del sustrato. En el laboratorio
se estudiaron todos estos diversos factores comprobando que una enzima se
comporta de una manera extraordinaria frente a los procesos de hidrlisis del
almidn.

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

MARCO TEORICO
Los biocatalizadores especficos sintetizados por el organismo, llamados enzimas son
protenas que intervienen en las reacciones biolgicas, acelerando la velocidad de
reaccin hasta alcanzar su punto de equilibrio. Las enzimas son sumamente especficas
en las reacciones que catalizan y en los compuestos (llamados sustratos) sobre los que
actan. La cintica enzimtica es el estudio del comportamiento de la velocidad en
reacciones catalizadas por enzimas. Las mediciones de la cintica proporcionan una
herramienta bioqumica muy til para calcular la concentracin de una enzima en una
muestra biolgica y comparar su actividad cataltica con la de otras enzimas. Adems, las
mediciones cinticas permiten describir de manera cuantitativa el efecto de un veneno o
medicamento sobre la actividad de una enzima. La velocidad a la que procede una
reaccin enzimtica est controlada en parte por las concentraciones de la enzima y el
sustrato. A medida que progresa la reaccin, aumenta la concentracin de los productos a
expensas de la desaparicin de los correspondientes sustratos, en tanto que la
concentracin de la enzima no se altere.
La actividad enzimtica puede expresarse: a) Por la desaparicin del sustrato (S). b) Por
la aparicin de productos (P). c) Por modificacin de cofactores (C).
El mecanismo de reaccin enzima-sustrato puede simbolizarse as:
[E] + [S]

[E] + [P]
C

C'

Diversos factores modifican la actividad enzimtica, tales como: 1) Concentracin de

sustrato [S] 2) Concentracin de la enzima [E] 3) pH del medio 4) Influencia de la
temperatura 5) Efecto de inhibidores y activadores
En la presente prctica estudiaremos el efecto de estos factores sobre la actividad
enzimtica de la amilasa salival sobre el almidn. La amilasa es una enzima que degrada
molculas hidrocarbonadas complejas en componentes ms pequeos, tiene un PM de
40,000 a 50,000 daltons. Es producida por el pncreas exocrino y las glndulas salivales
para ayudar a digerir el almidn. La amilasa humana se denomina alfa-amilasa por su
capacidad para romper los enlaces polisacridos alfa-1,4 al azar. Los enlaces alfa-1,6 de
los puntos de ramificacin no se alteran. El producto final de la accin de la alfa-amilasa
sobre el almidn es la formacin de dextrinas, maltosas y algunas molculas de glucosa.
El ph ptimo al cual acta es 6.9 a 7 y se requiere cloro para su activacin. En la prctica
la actividad enzimtica se medir por la desaparicin del sustrato (disminucin de la

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

turbidez en los tubos que contienen almidn), la cual se determinar en el

espectrofotmetro a 650 nm.

OBJETIVO

Determinar experimentalmente los factores que alteran la actividad enzimtica

como la temperatura , pH concentracin de sustrato , enzima e inhibidores o
activadores enzimticos

MATERIALES
Tubos de ensayo
Pipetas
Solucin de almidn
Buferr pH.6.6
Solucin salina NaCl 1%
Agua destilada
Solucin amilasa
Solucin yodada

PROCEDIMIENTO

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

CONCLUSIONES
Respecto al efecto del factor temperatura, cuando la enzima se halla en
temperaturas bajas, no puede realizar una catlisis rpida. Mientras menos sea
esta alteracin, la reaccin de la amilasa ser cada vez menor; la reaccin si se
da, solo que no se percibe con el ojo humano. La enzima conserva su estructura
proteica natural. Por otro lado, cuando la enzima est expuesta, a una temperatura
alta, la reaccin no se da, porque la enzima es desnaturalizada por la excesiva
alteracin molecular que provoca que los enlaces de la enzima se disgreguen.
Viendo esto, podemos afirmar que temperatura corporal (37C) es la idnea para
la catlisis eficiente de la alfa amilasa porque fue la temperatura con la cual la
reaccin fue rpida y efectiva. La hiptesis fue comprobada.
En cuanto al efecto del factor de la masa de NaCl, mientras ms sea la cantidad
de iones de cloro provenientes de NaCl, la actividad enzimtica ser mayor. Por
eso, a mayor cantidad de masa de cloruro de sodio, la actividad enzimtica de la
amilasa ser ms rpida. La hiptesis fue comprobada.

CUESTIONARIO

1.- Cul es la importancia del Km.

corresponde a la concentracin de sustrato con la cual la velocidad de reaccin
enzimtica alcanza un valor igual a la mitad de la velocidad mxima.
En medios con condiciones definidas de pH y temperatura, la constante tiene un valor fijo
para cada enzima y sirve para caracterizarla.
Describe la cintica enzimtica de muchas de ellas

2.- Qu efectos produce las altas temperaturas sobre las enzimas

.
En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones qumicas: por cada
10C de incremento, la velocidad de reaccin se duplica. Las reacciones catalizadas por
enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser protenas, a partir de cierta

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura a la cual la

actividad cataltica es mxima se llama temperatura ptima. Por encima de esta
temperatura, el aumento de velocidad de la reaccin debido a la temperatura es
contrarrestado por la prdida de actividad cataltica debida a la desnaturalizacin trmica,
y la actividad enzimtica decrece rpidamente hasta anularse.

3.- Como se clasifican las enzimas?

En funcin de su accin cataltica especfica, las enzimas se clasifican en 6 grandes
grupos o clases:
Clase 1: OXIDORREDUCTASAS
Clase 2: TRANSFERASAS
Clase 3: HIDROLASAS
Clase 4: LIASAS
Clase 5: ISOMERASAS
Clase 6: LIGASAS

4.- A que se llaman zimgenos e isoenzimas.

Un ZIMIGENO es el precursor inactivo de una enzima se puede transformar
irreversiblemente en una enzima activa por la ruptura de enlaces covalentes
Una ISOENZIMA son enzimas que difieren en la secuencia de aminocidos pero catalizan
la misma reaccin qumica

5.- Que son cofactores y mencione ejemplos.

Un cofactor es un componente no proteico, termoestable y de baja masa molecular,
necesario para la accin de una enzima. El cofactor se une a una estructura proteica,
denominada apoenzima, y el complejo apoenzima-cofactor recibe el nombre
de holoenzima.
Aquellos cofactores que estn covalentemente unidos a la apoenzima son
denominados grupos prostticos, ya sean orgnicos (coenzimas) o inorgnicos.
Los cofactores son bsicamente de dos tipos, iones metlicos y molculas orgnicas,
denominadas coenzimas.
Ejemplos tenemos al MAGNESIO, HIERRO, ZINC, FOSFORO,

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA

BIBLIOGRAFIA

Bioqumica - Horton, H. Robert; Moran, Laurence A; Ochs Raymond S;

Rawn, J. David; Scrimgeour K. Gray - Mxico, D.F: Prentice-Hall
Hispanoamericana, 1995

Qumica - Sienko, Michell J; Plane, Robert A - Madrid: Aguilar, 1967

Libro Biologa Editorial Mc Graw Hill II Medio

Libro Qumica Editorial Arrayn II Medio

ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
PRACTICA N. O3
JESUS MEJIA TORBISCO
CURSO BIOQUIMICA MEDICA