ESPERMATOGRAMA

Lic. TM CARLOS ORTEGA TUMAY

HNERM - EsSalud

OBJETIVO DEL ESTUDIO DEL SEMEN

Analizar el liquido seminal

Informa sobre la capacidad fecundante del esperma
Determinar la posible causa de la infertilidad

INFERTILIDAD
No fecundacin luego de 12 meses de
relaciones sexuales sin uso de mtodos de
anticoncepcin.
Tipos :
Primaria
Secundaria
Infertilidad no explicada
3

PARTES DEL APARATO REPRODUCTOR

MASCULINO

S
E
M
E
N
4

Anatoma del Testiculo

Regulacin Hormonal
Control de la espermatognesis a travs del Eje SNCHipotalamo-Hipofisis-Gonadal

GNRh

Testosterona
Inhibina

LH FSH

Espermatogenesis

SEMEN
Fludo biolgico de color gris opalescente,
constitudo por:
Fase lquida
Fase slida

Plasma seminal
(multiglandular)
Espermatozoides
(Tbulos seminferos)

Espermatograma

FUNDAMENTO:
La evaluacin del lquido seminal consta de varias
pruebas fsicas y qumicas y microscpicas.
Finalidad de determinar trastornos en las
caractersticas propias del semen que ocasionan
problemas de infertilidad.

10

PROCEDIMIENTO DE TRABAJO
Cita - Instructivos
Datos de filiacin
Coleccin de muestra
Ex. Fsico
Ex. Microscpico
Ex. Bioqumico

Pre-analticos
Analticos

Reporte

Post-analticos
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PROCEDIMIENTO DE TRABAJO FLUJOGRAMA

RECIBE PETITORIO
DE ESPERMATOGRAMA

PACIENTE ACUDE A
COLECCIN DE MUESTRA

LABORATORIO
CITA E INSTRUCTIVO

NO
NO
VALIDACION
MUESTRA

COLECCIN
DE MUESTRA

SI

VALIDACION
PREPARACION
PACIENTE

SI
PROCESAMIENTO
DE MUESTRA

12

RESULTADO

I.-PREANALITICO

Cita de Laboratorio
Entrega de instructivo
Abstinencia sexual
Datos de filiacin
Coleccin de la muestra :entrega del frasco pesado.

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INSTRUCTIVO
CONSIDERACIONES PARA LA RECOLECCION DE MUESTRA PARA

ESPERMATOGRAMA
1.- Abstinencia sexual de 2 -7 das antes del examen (no relaciones sexuales).
2.- Previa aseo acudir al Laboratorio del Hospital Rebagliati de 7:30 8:30 a.m.

3.- Responderverazmente las preguntas del Tecnlogo Mdico

4.- Rotular el frasco para la recoleccin de la muestra con su nombre.
5.- Obtener la muestra por masturbacin.
6.- Mantener el frasco destapado cerca suyo, durante todo el tiempo del

procedimiento.
7.- Tener cuidado de no perder ninguna fraccin de la muestra
8.- Entregar el frasco haciendo hincapi en la hora de obtencin de la muestra.

9.- El resultado estar en su historia el da de su cita.

De su colaboracin depende su resultado.

Laboratorio de Bioqumica-DPC / HNERM-EsSalud

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DATOS DE FILIACION

Nombre
Edad
Tiempo De Abstinencia
Tipo De Infertilidad
Tiempo De Infertilidad
Ocupacin
Breve Historia Clnica:
Enf. De Importancia clinica y paperas, orquitis
ETS
Traumatismos y /o cirugias
15

COLECCIN DE LA MUESTRA
Importancia del tiempo de abstinencia
2 7 dias.
Coleccin slo por masturbacin.
Usar ambiente adecuado.
Slo se procesarn muestras completas.

16

II.-ANALITICO

EXAMEN FISICO
EXAMEN MICROSCOPICO

EXAMEN BIOQUIMICO

17

1.-EXAMEN FISICO

Color
Coagulacin y Licuefaccin
Volmen
Viscosidad
pH

18

COLOR

19

COAGULACION Y LICUEFACCION
Coagulacin:
Despus de eyaculacin
Evalua: Vescula Seminal

Licuefaccin:
Luego de 60 minutos a T 37C (ideal para la movilizacin de spz:
activador del plasmingeno)

Evalua: -Prstata
-Glndula de Cowper

20

VOLUMEN
VN : 1.5 5.0 ML
Hipospermia
Hiperespermia

21

VISCOSIDAD

22

pH

V.N: 7.2 - 7.8

Aumento: prostatitis
Disminucin: vasculitis, inflamacin crnica,
disgenesia de conductos deferentes
Leer dentro de la 1 hora de recogida la muestra

23

EXAMEN MICROSCOPICO

24

Motilidad
Vitalidad
Recuento
Morfologa
Peroxidasa
Test hipoosmtico

VITALIDAD
Permite diferenciar a los espermatozoides vivos de
los muertos
Spz inmvil Spz no viable
Se fundamenta en el estudio de la integridad de la
membrana ya sea nuclear o citoplasmtica, de
acuerdo al mtodo usado
Control indirecto de motilidad

25

Procedimiento
1.-Homogenizar el eyaculado
2.-Colocar 10 ul de semen en un tubo limpio de vidrio
de 12 x 75 mm y agregar 1 gota de eosina al 0,5 %,
agitar levemente.
3.-Colocar 10 ul de la emulsin entre lamina y laminilla
4.-Leer dentro de los 30 segundos.
Se debe contar como mnimo 200 espermatozoides.
26

VITALIDAD

27

AGLUTINACION ESPERMATICA
Espermatozoides mviles y pegados entre ellos

28

AGLUTINACION ESPERMATICA

29

MOTILIDAD

30

MOTILIDAD

31

MOTILIDAD

Leer la motilidad evitando :

Los bordes de la laminilla
Acmulos de espermatozoides
Clulas

Leer por duplicado y validar resultado con cartilla OMS

32

MOTILIDAD

Diferencia entre porcentajes

15

N = 100
10
N = 200

N = 400

0
0

10

20
30
Porcentaje promedio

33

40

50

RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES
Dilucin 1/20 de semen.
NaCl o PBS ms
Formaldehido (100:1)
Contaje en cmara de
Newbauer: retculo de
glbulos rojos
Contaje en ambos lados
de la cmara
Validar resultado con la
cartilla OMS

Spz/
recuadro

Contaje/
recuadro

Resultado

<10

25

N Spz/5

10-40

10

N Spz/2

>40

N Spz

34

OTROS ELEMENTOS DEL SEMEN

35

RECUENTO DE
ESPERMATOZOIDES

36

37

Diferencia entre porcentajes

RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES
50

40

30

20

10

0
0

100

300

200

400

Suma de los dos contajes

38

500

600

RECUENTO DE ESPERMATOZOIDES
V.N: 20 - 250 x 106 spz/ml
Oligozoospermia: < 20 x 106 spz/ml
Azoospermia : Ausencia de spz
Polizoospermia : > 250 x 106 spz/ml

39

MORFOLOGIA
Relacin con capacidad fertilizante.
La observacin se realiza:
En fresco
Con tincin (Wright, Giemsa, PAP modif.)

Se informa Spz con alteraciones de: cabeza, cuello,

cola, inmaduros y cl. Germinales
Morfologia normal: Spz normales > 50%
Inmaduros
< 10%
Cel. Germinales < 5%

Teratozoospermia: < 50% spz normales

40

MORFOLOGIA

41

ALTERACIONES DE LA CABEZA
Externas:
Anucleada, macroceflica,
alargada, amorfa, biceflica.

Internas:
Redonda, triangular,
piriforme, alteraciones
acrosomales, protrusin del
ncleo al acrosoma,
irregularidades nucleares,
aplanamiento nuclear.
42

ALTERACIONES DEL CUELLO

Implantacin axial
anmala.
No implantado.
Irregular/encorvado
Adelgazamiento.
Engrosamiento.

43

ALTERACIONES DE LA COLA
Ausencia total o
parcial.
Enrrollamiento total.
Enrrollamiento
parcial.
Dobles o mltiples.
Angulaciones
44

CELULAS INMADURAS

45

CELULAS GERMINALES

46

PEROXIDASA
Presencia de una perxidasa en el
citoplasma de los granulocitos
Obj.: descartar infeccin.
PMN con tincin especial
(ortotoluidina-Agua oxigenada).
Contaje en cmara de Neubauer, en
retculo de rojos
V.N = < 1 x 106 PMN /ml.
Aumento se denomina
Leucocitospermia.

47

TEST HIPOOSMOTICO
Evaluar integridad de membrana.
Medio opcional para evaluar la vitalidad
Fisiologa
Membrana Selectiva
Condiciones Hipoosmticas
Se produce entrada de agua
Hinchamiento celular (cola)
Observacin microscpica
% de Spz con colas hinchadas
V.N. >60%
48

TEST HIPOOSMOTICO

49

EXAMEN BIOQUIMICO
Evala glndulas sexuales accesorias
Fructosa - (Vesculas Seminales)
VN : Fructosa
= 1.2-5.0 mg/ml
Fructosa Corregida= 2.5-8.0 mg/ml 106 Spz/ml
Zinc
( Prstata)
VN : > 2.4 umol/eyaculado

50

Alteracin de Glndulas Anexas

Vescula Seminal

Prstata

pH disminudo
Coagulacin pobre o
ausente
Espermaglutinacin
Leucocitospermia
Astenozoospermia
Fructosa corregida
disminuda

51

pH aumentado
Licuefaccin retardada
Consistencia aumentada
Leucocitospermia
Astenozoospermia
Marcadores bioqumicos
disminuidos

OTROS MARCADORES BIOQUIMICOS

52

POST ANALITICO
ESPERMATOGRAMA
I .- FILIACION
NOMBRE
:
CONYUGE
:
PROCEDENCIA
:
TIEMPO DE ABSTINENCIA :
FECHA
:

EDAD :
EDAD :
DIAS

II .- EXAMEN FISICO
COLOR
OLOR
VOLUMEN
CONSISTENCIA
LICUEFACCION
GRUMOS

AOS
AOS

VALORES REFERENCIALES
:
:
:
:
:
:

BLANQUECINO, BLANCO AMARILLENTO, BLANCO OPALESCENTE,PARDO

SUI GENERIS
ml
(
2 - 5 ml
)
NORMAL, AUMENTADA
COMPLETA, INCOMPLETA (1/2H - 2H)
1+, 2+, 3+

III .- EXAMEN MICROSCOPICO

1 .- MOTILIDAD
GRADO III
:
GRADO II
:
GRADO I
:
GRADO 0
:
2 .- MORFOLOGIA
NORMALES
:
ALTERACION DE CABEZA :
ALTERACION DE CUELLO :
ALTERACION DE COLA
:
CELULAS GERMINALES
:
3 .- CELULAS EPITELIALES:
4 .- LEUCOCITOS
:
5 .- HEMATIES
:
6 .-AGLUTINACION
:
7 .- OTROS
:
8 .- VITALIDAD
:
9 .- RECUENTO/ml
:
10.- RECUENTO/eyaculado:

II + III > 50% )

%
%
%
%
%
%
%
%
%
x campo
x campo
x campo
1+, 2+, 3+
GERMENES, LEVADURAS, CRISTALES DE ESPERMINA
%
(
x 106 espermatozoides / ml
x 106 espermatozoides

> DE 65 %

IV.- EXAMEN BIOQUIMICO

1.- pH
:
2.- ACIDO CITRICO
:
3.- FRUCTOSA
:
4.- FRUCTOSA CORREGIDA:
V .- CONCLUSIONES
1.2.3.-

(
7.2 - 8.0
)
mg / ml
( 1.5 - 15.0 mg / ml )
mg / ml
( 1.2 -5.0 mg / ml )
mg / ml x 106 Espermat/ml
( 2.5-8.0 mg/ml x 106 Espermat/ml )

53

CONSIDERAR LA CANTIDAD DE ESPERMATOZOIDES/mL y VOLUMEN DE EYACULADO

DE ACUERDO A LA MOTILIDAD DE GRADO III + GRADO II
DE ACUERDO AL PORCENTAJE DE NORMALIDAD ENCONTRADO EN LA MORFOLOGIA

R
E
P
O
R
T
E

INTERPRETACION DEL
ESPERMATOGRAMA

NORMOZOOSPERMIA :> 20 x 106 espermatozoides/ml.

OLIGOZOOSPERMIA : < 20 x 106 espermatozoides/ml.

ASTENOZOOSPERMIA: < 50% espermatozoides ( motilidad III+ II)

< 25% espermatozoides motilidad III

TERATOZOOSPERMIA: < 50% espermatozoides normales.

AZOOSPERMIA

ASPERMIA

HIPOSPERMIA

HIPERESPERMIA

: Mayor de 5 ml

HEMOSPERMIA

: Hemates en el semen

54
LEUCOCITOSPERMIA : > 1 x 106 leucocitos/ml.

: Ausencia de espermatozoides en el eyaculado.

: Ausencia de eyaculado externo.
: Menos de 1.5 ml

CONTROL DE CALIDAD
Esencial para deteccin y correccin de errores
sistemticos
Necesario desarrollar:
- Sistema de QC
- Estandarizacin de procedimientos e
interpretacin de la motilidad y
morfologa
55

CONTROL DE CALIDAD
Muestras representativas:
- Recuento 5 10 x106/ml
- Motilidad 10 40 %
Criopreservada o a 4C con formalina 10% (100uL/ml de semen)

- Morfologa < 20%

Lmina coloreada

Calibracin y control del equipo:

- Pipetas
- Bao mara
56

OMS

ESTADISTICA RECUENTO
JUL 01-JUN 12 HNERM
NORMALES
746

ANORMALES
248

TOTAL
994

25%
Normales
Anormales
75%

57

ESTADISTICA RECUENTO/MOTILIDAD
JUL 01-JUN 02 HNERM
NORMAL ANORMAL
397
597

TOTAL
994

40%
NORMAL
ANORMAL
60%

58

Muchas gracias
Labsmp.ves@hotmail.com

59