OBTENCION DE GLUCOGENO A PARTIR DE HIGADO DE RATA

Comenzamos sacrificando una rata con ter de la

manera ms rpida posible para evitar que el
animal sufriera, ya que al comenzar a estresarse
genera adrenalina y esta provoca la
INTRODUCCION
El glucgeno es la forma principal de
almacenamiento
de
carbohidratos
en los
animales, es un polisacrido ramificado de la Dglucosa con enlaces alfa-1,4 y alfa-1,6. El
glucgeno es abundante en el hgado, puede
alcanzar hasta el 7% del peso hmedo, se le haya
en musculo esqueltico y en las clulas
hepticas. La funcin del glucgeno muscular es
actuar como una fuente de fcil disponibilidad de
unidades de hexosa para la glucolisis dentro del
propio musculo. El glucgeno heptico sirve de
gran parte para exportar unidades de hexosa
para la conservacin de la glucosa sangunea,
entre comidas. Despus de 12 a 16 hrs de ayuno,
el hgado casi agota su reserva de glucgeno. La
extraccin del glucgeno del hgado de esta
prctica implica un proceso de homogenizacin
del tejido y ruptura celular, as como la extraccin
y la eliminacin de las protenas (desproteinizar)
para evitar interferencias en los anlisis
posteriores.

OBJETIVO
o

Realizar el aislamiento y purificacin del

glucgeno a partir de hgado de rata.

RESULTADOS
Peso del hgado de rata 12.2g
Rendimiento terico de glucgeno
12.2g (7%) = 0.854g
100 %
Peso de glucgeno .65g
Rendimiento prctico
0.854g ---------------100%
0.65g------------------76.11%

activacin
de
la
glucgeno
fosforilasa,
estimulando la degradacin del glucgeno y por
lo tanto obtendramos menos glucgeno del
esperado, disminuyendo nuestro rendimiento.
Abrimos al animal para extraer el hgado, corazn
y muslo.
Se lav el hgado con agua para limpiar de sangre
lo mejor posible y posteriormente pesar.
Se corto el hgado en pedazos pequeos para
posteriormente en un mortero aadirle cido
tricloroactico (TCA) el cual es un agente
precipitante de protenas y ayuda a que no se
descomponga todo el tejido, tambin se aadi
un poco de arena lavada la cual ayudo a raspar el
hgado y as formar una pasta homognea, la cual
fue transferida a un tubo.
Se enjuago el mortero con ms TCA para limpiar
los restos de hgado que sobraban y de esta
manera aprovechar al mximo el tejido.
Centrifugamos el homogeneizado para separar la
arena, slidos y protenas
del
lquido
sobrenadante al cual le aadimos dos volmenes
de etanol, el cual afecta la constante dielctrica y
ayuda a formar el flculo, grumo de materia
orgnica formado por agregacin de slidos en
suspensin. Agregamos tambin NaCl slido y
colocamos en un bao mara a 37C, condiciones
que tambin favorecen que el glucgeno flocule.
Centrifugamos
nuevamente
y
esta
vez
desechamos el sobrenadante y el precipitado lo
resuspendimos
con
agua
destilada
para
posteriormente agregar dos volmenes de etanol
y volver a centrifugar, eliminando as las
impurezas y obteniendo nicamente glucgeno,
el cual se peso para poder calcular el rendimiento
obtenido.
CONCLUSIONES
El rendimiento obtenido para el glucgeno
contenido en el hgado de una rata fue de
76.11%, con respecto a que el hgado contiene
7% de glucgeno.

BIBLIOGRAFIA
ANALISIS DE LA TECNICA

1. Mary K. Campbell, Shawn O.Farrell.

BIOQUIMICA.
Ed.CENGAGE
Learning.
Octava edicin. Mxico D.F (2015), pp
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2. Donald Voet, Judith G. Voet.

Bioqumica.
Madrid:
Ed.
Panamericana. pp 671

(2006).
Mdica