Tujuan :

Uji kemurnian
Mengetahui metode uji kemurnian dengan KLT dua dimensi dan KLT

tiga kali pengembangan

Dapat melakukan uji kemurnian dengan metode KLT dua dimensi
dan KLT tiga kali pengembangan

Metode :

KLT 2 dimensi

Fase gerak :

Silika gel GF 254

Fase diam :

Kloroform : Metanol (9,5 : 0,5)

KLT dua dimensi :

Tidak ada bercak

Pembahasan
Prinsip KLT dua dimensi dan KLT tiga kali pengembangan adalah
adsorpsi dengan plat silika gel GF 254 sebagai fase diam dan beberapa
perbandingan eluen dengan tingkat kepolaran tertentu sebagai fase
geraknya.
Hasil pengamatan dari KLT dua dimensi dengan 2x pengembangan
eluen non polar-polar yakno pembantingan kloroform : metanol (9,5 : 0,5)
adalah bercak menyebar dengan sempurna. KLT dua arah atau KLT dua
dimensi

ini

bertujuan

untuk

meningkatkan

resolusi

sampel

ketika

komponen-komponen solut mempunyai karakteristik kimia yang hampir

sama. Kemampuan ini didukung karena fase gerak yang digunakan pada
KLT

dimensi

menggunakan

dua

pelarut

yang

berbeda

tingkat

polaritasnya. Perbedaan polaritas ini akan memisahkan analit yang

memiliki tingkat polaritas berbeda.

Identifikasi bercak dari KLT dua dimensi dilakukan dengan metode

spektrofotometri UV. Dikarenakan bercak pada KLT dua dimensi tidak
ditemukan, maka identifikasi isolat dengan spektrofotometri UV tidak
dilakukan. Faktor kesalahan yang mungkin dilakukan adalah karena
penotolan sampel pada plat tidak sampel jenuh atau sampai terlhat hitam
pada sinar UV 254. Ini dikarenakan sampel yang digunakan sangat encer.
Kesimpulan
Berdasarkan praktikum KLT dua dimensi yang dilakukan diketahui
isolat belum dapat ditentukan kemurniannya karena bercak KLT 2 dimensi
tidak timbul, sehingga identifikasi spektrofotometri UV tidak dilakukan.