sumario

ORIGINAL

Evaluacin de la actividad antibacteriana

de la ciclopiroxolamina frente al
Propionibacterium acnes
C. GUILLN*, J. GUINEA*, M. D. RICART**, M. BORDA**, M. PLAZA**

*Departamento de Microbiologa. Facultad de Farmacia. Universidad de Barcelona. **Departamento de Investigacin y

Desarrollo. Laboratorios Dermofarm SA. Barcelona

Se ha procedido a la determinacin de la actividad

antibacteriana de la ciclopiroxolamina (6cyclohexyl-1-hydroxy-4-methyl-2 (1H)-pyridone, 2aminoethanol salt) mediante la aplicacin del
mtodo recomendado por el NCCLS (1) frente al
Propionibacterium acnes (2), principal
microorganismo implicado en la etiopatogenia del
acn, as como el poder inhibitorio de un gel
formulado con ciclopiroxolamina 1%. La
determinacin de la concentracin mnima
inhibitoria (CMI) se ha realizado en medio MuellerHinton, previa obtencin del inculo en placas TSA
(Trypticase Soy Agar). Para la visualizacin del poder
inhibitorio del gel formulado con ciclopiroxolamina
1% se ha realizado un ensayo de antibiosis en medio
TSA y agar sangre, respectivamente. La CMI de la
ciclopiroxolamina frente al Propionibacterium acnes
ha sido de 0,015 mg/ml (15 mg/L) y el ensayo de
antibiosis realizado con el gel ha producido un halo
de 30 mm de inhibicin.
Palabras clave: CMI (Concentracin Mnima Inhibitoria). Ciclopiroxolamina. Propionibacterium acnes.

An in vitro study was performed in order to

determine the anti-microbial activity of
ciclopiroxolamine (6-cyclohexyl-1-hydroxy-4methyl-2 (1H)-pyridone, 2-aminoethanol salt) on
Propionibacterium acnes according to the procedure
recommended by NCCLS (1). The inhibitory action
of a formulation lotion containing 1%
ciclopiroxolamine was also determined. The
minimum inhibitory concentration (MIC) was carried
out using Mueller-Hinton medium. The antimicrobial effect of the lotion was shown using TSA

medium and blood sheep Agar. It was found that the

MIC value of ciclopiroxolamine was 0.015 mg/ml
(15 mg/L) and the assay performed with the lotion
produced a 30 mm inhibitory halo.
Key words: MIC (Minimum Inhibitory Concentration).
Ciclopiroxolamine. Propionibacterium acnes.

Introduccin

Pityrosporum ovale y Propionibacterium acnes

son un hongo y una bacteria respectivamente, integrantes de la flora saprofita cutnea, cuyas lipasas
hidrolizan los triglicridos hasta cidos grasos libres
y glicerol, sustancias responsables de la reaccin inflamatoria que caracteriza a las lesiones de la dermatitis seborreica (3) y del acn (4).
La ciclopiroxolamina (6-cyclohexyl-1-hydroxy-4methyl-2 (1H)-pyridone, 2-aminoethanol salt) es un
antimictico con actividad frente a un amplio espectro de dermatofitos, levaduras, actinomicetos y otros
hongos (5, 6). Diversos estudios han demostrado que
a concentraciones de 12,5 mg/L, inhibe el crecimiento de Pityrosporum ovale y Pityrosporum orbicularis (Malassezia furfur) (7, 8), microorganismos
implicados en la etiopatogenia de la dermatitis seborreica.
Sin embargo, como muchos otros antifngicos, la
ciclopiroxolamina posee tambin propiedades antibacterianas frente a bacterias Gram negativas y
Gram positivas (9). En este sentido, tambin se ha
visto que concentraciones de 12,5 mg/L inhiben el
crecimiento de Propionibacterium acnes (7), principal microorganismo implicado en la etiopatogenia
del acn.

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En este trabajo se ha determinado el poder inhibitorio de la ciclopiroxolamina y la capacidad antimicrobiana de un gel limpiador formulado con ciclopiroxolamina 1% frente a Propionibacterium
acnes.

Materiales y mtodos

Muestras
Las muestras del anlisis fueron denominadas ciclopiroxolamina y gel de ciclopiroxolamina 1%. Tras
su llegada se almacenaron convenientemente a 4C
donde permanecieron durante todo el ensayo.

Microorganismos
El microorganismo utilizado ha sido Propionibacterium acnes ATCC 6919.

Medios de cultivo
Trypticase Soy Agar (TSA). Promidasa. Lote
906142.
Trypticase Soy Broth (TSB). Cultimed. Lote
413820.
Mueller-Hinton Broth. ADSA MICRO. Lote 5931.
Mueller-Hinton Agar. Scharlu. Lote 6894.
Ringer 1/4. OXOID. Lote 64199-002.
Columbia sheep blood. Bimclinic. Lote 23123.

Determinacin de la Concentracin Mnima

Inhibitoria (CMI) de la ciclopiroxolamina
Preparacin del inculo
Para poder obtener el inculo del microorganismo en la fase de crecimiento adecuada se sembr
la cepa bacteriana en placas TSA y se incub a
37C durante 72 horas en condiciones anaerobias,
debido a las caractersticas particulares de crecimiento de Propionibacterium acnes. Alcuotas de
esta poblacin se trasladaron a tubos TSB (Trypticase Soy Agar), que incubados a 37C durante 72
horas en anaerobiosis proporcionaron una suspensin aproximada de 10 7 UFC adecuada para el ensayo.
Mtodo del ensayo
La determinacin de la CMI (1) de la ciclopiroxolamina se realiz en medio Mueller-Hinton. Se parti
de una concentracin del 1% (solucin madre), ya
que el producto es soluble en agua destilada a esta
concentracin. La solucin madre se filtr a travs
de un filtro de 0,22 m y se realizaron una serie de

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diluciones a fin de obtener placas Mueller-Hinton

con las siguientes concentraciones: 0,5 mg/ml; 0,25
mg/ml; 0,125 mg/ml; 0,062 mg/ml; 0,031 mg/ml;
0,015 mg/ml; 0,007 mg/ml y 0,0035 mg/ml. Estas
placas se sembraron en estras con el cultivo de 72
horas de Propionibacterium acnes y se incubaron 72
horas en condiciones anaerbicas. Asimismo, se
sembraron placas control de Mueller-Hinton sin ciclopiroxolamina.
Independientemente, se llev a cabo un anlisis previo consistente en la determinacin de la
CMI mediante el procedimiento estndar de microtitulacin en placa utilizando caldo MuellerHinton. Sin embargo, este procedimiento se desech debido a la interaccin del producto ensayado
(ciclopiroxolamina) y el medio de cultivo, que
ocasionaba un precipitado que impeda la visualizacin de los resultados. Por ello, se emple un
procedimiento alternativo consistente en el ensayo
en medio slido.

Determinacin del poder inhibitorio del gel

formulado con ciclopiroxolamina 1%
Preparacin del inculo
Para obtener el inculo del microorganismo en la
fase de crecimiento adecuada, se sembr la cepa en
placas TSA y se incubaron a 37C durante 72 horas
en condiciones anaerbicas. Tras la incubacin, alcuotas de esta poblacin se trasladaron a tubos TSB,
que incubados a 37C durante 72 horas en anaerobiosis proporcionaron una suspensin aproximada
de 10 7 UFC adecuada para el ensayo. A continuacin, se realiz una dilucin 1/100 en 9,9 ml de
Ringer 1/4, obtenindose as una suspensin de
aproximadamente 105 UFC/ml.
Preparacin del producto
El gel de ciclopiroxolamina 1% fue ensayado en
condiciones normales de uso, en forma de un gel
limpiador facial formulado con ciclopiroxolamina
1%.
Mtodo del ensayo
Mediante un hisopo estril se sembr en crecimiento confluente la suspensin de 105 UFC/ml de
Propionibacterium acnes sobre placas de TSA y
Agar-Sangre. Seguidamente se coloc en el centro de
las placas un disco de antibiograma tipo Whatmann
de 6,5 mm de dimetro embebido en el gel de ciclopiroxolamina 1%. La siembra se efectu por duplicado. Una vez colocado el disco, se incubaron las placas a 37C durante 72 horas en condiciones de
anaerobiosis. Tras el perodo de incubacin, se procedi a la lectura de los resultados.

La ciclopiroxolamina frente al Propionibacterium acnes

Figura 1. Halo de inhibicin del crecimiento de Propionibacterium acnes en medio TSA producido por el gel de ciclopiroxolamina 1%.

Resultados

La CMI de la ciclopiroxolamina frente a Propionibacterium acnes obtenida ha sido de 0,015 mg/ml

(15 mg/L). Asimismo, podemos afirmar que el gel
formulado con ciclopiroxolamina 1%, inhibe el crecimiento de Propionibacterium acnes, produciendo
un halo de inhibicin de 30 mm de dimetro, tanto
en medio TSA (Figura 1) como en agar sangre (Figura
2).

Discusin

Los valores de la CMI hallados frente a Propionibacterium acnes 15 mg/L han sido ligeramente

Figura 2. Halo de inhibicin del crecimiento de Propionibacterium acnes en medio agar sangre producido por el gel de ciclopiroxolamina 1%.

superiores a los sealados por los autores (12,5

mg/L). Sin embargo, la diferencia no es significativa si se consideran los rangos admisibles entre la
valoracin de la CMI en caldo y agar respectivamente.
Los resultados obtenidos han mostrado que la ciclopiroxolamina no slo es un antifngico eficaz
frente a Pityrosporum ovale y Pityrosporum orbicularis (Malassezia furfur), sino tambin frente a Propionibacterium acnes.
La inhibicin del crecimiento bacteriano, evidenciada en el ensayo de antibiosis con el gel de ciclopiroxolamina 1%, permite la utilizacin de este producto, actualmente utilizado en el tratamiento de la
dermatitis seborreica, como una opcin en el tratamiento antibacteriano del acn.

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